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糖苷水解酶GH97家族成员PspAG97A的催化机制分析
被引量：
1
1
作者
张小敏
陈飞云
+2 位作者
张学成
何超
肖亚中
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期24-28,共5页
糖苷水解酶GH97家族是一个特殊的家族,同时拥有反转和保留两种催化类型成员,其两种催化类型如何分化目前还不清楚。对GH97家族成员PspAG97A的催化机制进行分析,通过高效液相色谱法检测水解产物异头物的构型,根据在不同酶反应时间所检测...
糖苷水解酶GH97家族是一个特殊的家族,同时拥有反转和保留两种催化类型成员,其两种催化类型如何分化目前还不清楚。对GH97家族成员PspAG97A的催化机制进行分析,通过高效液相色谱法检测水解产物异头物的构型,根据在不同酶反应时间所检测到的α-葡萄糖与β-葡萄糖的比例变化,证明PspAG97A执行反转催化机制。通过结构分析与定点突变等方法尝试对PspAG97A的催化类型进行改造,将PspAG97A与同一家族成员Bt GH97b(保留型)活性中心进行叠加比较,仿照保留类型的催化装置对相关位点G407、E377及E456进行单点突变和联合突变。结果显示突变酶活力相比野生型显著下降,并分析了相关位点的作用。研究加深了对PspAG97A催化机制的认识,为GH97家族两种催化类型进化关系的研究奠定基础。
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关键词
糖苷水解酶GH
97
家族
催化机制
定点突变
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职称材料
题名
糖苷水解酶GH97家族成员PspAG97A的催化机制分析
被引量：
1
1
作者
张小敏
陈飞云
张学成
何超
肖亚中
机构
安徽大学生命科学学院现代生物制造安徽省重点实验室安徽省微生物与生物催化工程技术研究中心
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期24-28,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31570064)。
文摘
糖苷水解酶GH97家族是一个特殊的家族,同时拥有反转和保留两种催化类型成员,其两种催化类型如何分化目前还不清楚。对GH97家族成员PspAG97A的催化机制进行分析,通过高效液相色谱法检测水解产物异头物的构型,根据在不同酶反应时间所检测到的α-葡萄糖与β-葡萄糖的比例变化,证明PspAG97A执行反转催化机制。通过结构分析与定点突变等方法尝试对PspAG97A的催化类型进行改造,将PspAG97A与同一家族成员Bt GH97b(保留型)活性中心进行叠加比较,仿照保留类型的催化装置对相关位点G407、E377及E456进行单点突变和联合突变。结果显示突变酶活力相比野生型显著下降,并分析了相关位点的作用。研究加深了对PspAG97A催化机制的认识,为GH97家族两种催化类型进化关系的研究奠定基础。
关键词
糖苷水解酶GH
97
家族
催化机制
定点突变
Keywords
glycoside hydrolase
family
97
catalytic
mechanism
site-directed
mutagenesis
分类号
Q556 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
糖苷水解酶GH97家族成员PspAG97A的催化机制分析
张小敏
陈飞云
张学成
何超
肖亚中
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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