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蛋白质的化学糖基化研究进展 被引量：6
1
作者 连高焱 俞飚 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1746-1759,共14页
细胞内超过50%的蛋白质为糖蛋白,糖基在很大程度上影响着蛋白质的折叠、稳定性、信号传导、生物活性、免疫原性及药代动力学等.化学糖基化是获得糖基结构和糖基化位置确定的糖蛋白的有效方法.本文以糖蛋白合成技术的发展和应用为导向,... 细胞内超过50%的蛋白质为糖蛋白,糖基在很大程度上影响着蛋白质的折叠、稳定性、信号传导、生物活性、免疫原性及药代动力学等.化学糖基化是获得糖基结构和糖基化位置确定的糖蛋白的有效方法.本文以糖蛋白合成技术的发展和应用为导向,围绕糖-肽键的形成,概述了蛋白的化学糖基化研究进展. 展开更多
关键词 蛋白质 糖蛋白 拟糖蛋白 糖基化 糖型
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基于纳升电喷雾-轨道阱超高分辨质谱对完整单克隆抗体药物进行分子量测定及糖型鉴定的条件探究 被引量：2
2
作者 代荣荣 马鑫 +2 位作者 邵心阳 柴胡玲潇 王冠博 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期122-127,共6页
整体分子量测定和糖型鉴定是抗体药物研发及生产中不可或缺的表征内容,而在完整蛋白层面进行测定可获得最为直接的测定结果。实现此类测定有赖于可提供较高分辨能力及质量精度的仪器;测定中涉及的相对复杂的参数设置可能受多种条件的干... 整体分子量测定和糖型鉴定是抗体药物研发及生产中不可或缺的表征内容,而在完整蛋白层面进行测定可获得最为直接的测定结果。实现此类测定有赖于可提供较高分辨能力及质量精度的仪器;测定中涉及的相对复杂的参数设置可能受多种条件的干扰而产生误导性结果。该研究考察了利用纳升电喷雾离子源-轨道阱质谱仪以非变性质谱方式测定完整单克隆抗体药时,仪器分辨率、源内裂解、碰撞诱导碎裂、溶液组成等条件对单克隆抗体药物分子量及糖型测定结果的影响,以期为此类质谱分析提供有益的借鉴。 展开更多
关键词 单克隆抗体 非变性质谱 完整蛋白 翻译后修饰 糖型
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蛋白质糖基化修饰:新一代肝病靶标的分子基础 被引量：1
3
作者 常路丝 乔雍 魏红山 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2011年第4期302-305,共4页
肝病糖生物学研究是新一代肝病分子诊断标志物及肝癌治疗分子靶点研究的热点领域。不同肝病过程中伴随着复杂的蛋白质N-糖基化和O-糖基化修饰,这些糖基化修饰的变化导致了一些蛋白质翻译后修饰的改变,因而有可能成为未来新的肝病诊断标... 肝病糖生物学研究是新一代肝病分子诊断标志物及肝癌治疗分子靶点研究的热点领域。不同肝病过程中伴随着复杂的蛋白质N-糖基化和O-糖基化修饰,这些糖基化修饰的变化导致了一些蛋白质翻译后修饰的改变,因而有可能成为未来新的肝病诊断标志物。这些修饰聚糖改变的基础在于肝细胞内部糖基转移酶和糖苷酶活性的变化,因而,对糖基转移酶和糖苷酶活性调控也有可能成为新一代抗癌药物研发的靶点。针对血清蛋白N-糖组分析也已经成为肝癌、肝硬化诊断的新方法。这些进展预示着肝病糖生物学研究将迎来一个新的时代。 展开更多
关键词 肝癌 糖基化 糖基转移酶 糖组 糖型 N-聚糖糖谱
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糖蛋白微观分布的毛细管电泳分离
4
作者 陈义 《抚顺石油学院学报》 1996年第3期68-69,共2页
糖蛋白广泛存在于动植物体中，在生物过程中有重要或关键的作用，并具有药用价值，不少糖蛋白已开始用生物技术进行大规模生产［１～４］，但是糖蛋白的生物功能研究及其生物技术产品质量控制因无有效的分析方法而受挫。糖蛋白中的糖链... 糖蛋白广泛存在于动植物体中，在生物过程中有重要或关键的作用，并具有药用价值，不少糖蛋白已开始用生物技术进行大规模生产［１～４］，但是糖蛋白的生物功能研究及其生物技术产品质量控制因无有效的分析方法而受挫。糖蛋白中的糖链及其与多肽链的连接是由酶控制合成的... 展开更多
关键词 糖蛋白 毛细管电泳分离 生物化学
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糖基化修饰在包膜病毒感染过程中的作用
5
作者 何玲玲 张成 +1 位作者 周蓉蓉 魏红山 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2021年第1期1-6,共6页
包膜病毒感染过程中,劫持宿主细胞的糖基化修饰系统对自身抗原进行修饰,籍此逃脱宿主的免疫监视,是病毒感染的重要机制。而且,包膜蛋白的糖基化修饰,一方面发挥抗原屏蔽效应,导致疫苗研发更为困难;另一方面,修饰的聚糖对抗原表位结构也... 包膜病毒感染过程中,劫持宿主细胞的糖基化修饰系统对自身抗原进行修饰,籍此逃脱宿主的免疫监视,是病毒感染的重要机制。而且,包膜蛋白的糖基化修饰,一方面发挥抗原屏蔽效应,导致疫苗研发更为困难;另一方面,修饰的聚糖对抗原表位结构也具有空间重构效应。因此,包膜病毒的中和抗体与修饰聚糖的结构有关。除此之外,抗原蛋白的糖基化修饰也与病毒识别、黏附,组织嗜性,病毒颗粒组装的质量控制以及毒性与侵袭力有关。本文对该领域的研究现状做一综述。 展开更多
关键词 病毒 抗原 糖基化修饰 糖型 聚糖屏蔽
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肺癌与肺良性疾病特异血清免疫炎性蛋白质N-糖基化修饰差异 被引量：4
6
作者 杜钰莹 王悦 +2 位作者 赖治臻 田志新 李智立 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第8期1096-1102,共7页
目的探索肺癌与肺良性疾病特异血清免疫炎性蛋白质N-糖基化修饰差异。方法应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)从肺腺癌和慢性肺炎患者血清中分离得到一组疾病特异的血清免疫炎性蛋白质复合物(IIRPCs),经胶内酶解、石墨相氮化碳... 目的探索肺癌与肺良性疾病特异血清免疫炎性蛋白质N-糖基化修饰差异。方法应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)从肺腺癌和慢性肺炎患者血清中分离得到一组疾病特异的血清免疫炎性蛋白质复合物(IIRPCs),经胶内酶解、石墨相氮化碳富集分离得到完整糖肽。应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,结合GPSeeker数据库检索软件进行糖肽鉴定。结果共鉴定了来自12种蛋白质的89种糖肽,其中21种仅与肺良性疾病相关,38种仅与肺癌相关。89种糖肽中包括63种糖型,其中10种为肺良性疾病特有糖型,21种为肺癌特有糖型。两种疾病的特有糖型在其结构和连接位点上均存在差异。结论发现了两种疾病血清特异免疫炎性蛋白质N-糖基化修饰的差异,为糖基化修饰在慢性疾病的诊断、预后评估和分子机制等方面的研究提供了新视角。 展开更多
关键词 疾病特异蛋白质 疾病特异糖肽 疾病特异糖型 肺疾病
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质谱法定量测定高密度脂蛋白结合蛋白的糖基化水平 被引量：3
7
作者 魏王慧 储艳秋 +2 位作者 陈鹰 高艳秋 丁传凡 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1141-1149,共9页
采用质谱法对4种高密度脂蛋白(HDL)的结合蛋白重组人载脂蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)、α1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α2-人体血清糖蛋白(A2HSG)和A载脂蛋白C3(Apo C3)从蛋白质含量(蛋白的绝对定量)、位点特异性糖基化(糖肽的相对定量)及聚糖位... 采用质谱法对4种高密度脂蛋白(HDL)的结合蛋白重组人载脂蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)、α1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α2-人体血清糖蛋白(A2HSG)和A载脂蛋白C3(Apo C3)从蛋白质含量(蛋白的绝对定量)、位点特异性糖基化(糖肽的相对定量)及聚糖位点占有率等方面进行了研究.利用四极杆-飞行时间质谱仪(Q-TOF)测量糖蛋白标样酶解产物的二级质谱碎片离子,用Byonic软件发现了新的糖基化位点信息,即增加了原位点处聚糖糖型的种类.对于A2HSG,新增了N-糖基化156位点上的4种糖型, N -糖基化176位点上的6种糖型, O-糖基化319位点的4种O-聚糖和 O-糖基化346位点上的1种糖型.对于Apo C3,只有O-糖基化 94一个位点,在此位点上新增了9种糖型.同时,调整了用于定量蛋白的多肽,使得定量更加准确.采用三重四极杆串级质谱仪(UPLC-ESI-QQQ)研究了4种结合蛋白中多肽和糖肽的多反应监测(MRM)行为,并重新计算了每种聚糖的位点占有率,优化了现有的定量方法. 展开更多
关键词 质谱法 高密度脂蛋白的结合蛋白 定点糖基化 新糖型 多反应监测
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液质联用技术分析可溶性CD95-Fc融合蛋白N-糖组成 被引量：1
8
作者 于雷 陶磊 +2 位作者 李响 郭莹 饶春明 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期1496-1501,共6页
目的:分析鉴定可溶性CD95-Fc融合蛋白的N-糖组成。方法:采用Glyco Works Rapi Fluor-MS N-糖分析试剂盒酶解并标记、纯化N-糖基,糖基纯化产物经Waters BEH Glycan糖蛋白分析柱分离后,依次进入荧光检测器和飞行时间质谱仪检测。结果:结... 目的:分析鉴定可溶性CD95-Fc融合蛋白的N-糖组成。方法:采用Glyco Works Rapi Fluor-MS N-糖分析试剂盒酶解并标记、纯化N-糖基,糖基纯化产物经Waters BEH Glycan糖蛋白分析柱分离后,依次进入荧光检测器和飞行时间质谱仪检测。结果:结合荧光和质谱检测结果,鉴定出15种糖型:G0-GN,G0FGN,G0,G0F,Man5,G1F,G1F,G2F,G2F+SA,G2F+SA,G3F,G2F+2SA,G3F+SA,G3F+2SA和G3F+3SA;各糖型组分实测单同位素分子量与理论值差异均不足0.1Da;所占比例最高的糖型依次为G0F(30%),G1F(25%),G2F+SA(14%)和G2F(13%);不同批次相同糖基组分保留时间的RSD均低于0.2%,峰面积百分比的RSD均低于15%。结论:本研究成功鉴定出可溶性CD95-Fc融合蛋白的15种主要糖型,不同批次的糖型荧光图谱基本一致,可作为UPLC法对可溶性CD95-Fc融合蛋白N-糖定性定量的标准参考图谱。 展开更多
关键词 可溶性CD95-Fc N-糖分析 超高效液相/质谱 荧光糖谱 糖型鉴定
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