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导入β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因可育油菜及其抗菌核病的研究 被引量：67
1
作者 蓝海燕 王长海 +4 位作者 张丽华 刘桂珍 王岚兰 陈正华 田颖川 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期142-146,共5页
利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15... 利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15(Kan15mg/L)培养基上的绿苗中有30%为PCR阳性植株,而在K25(Kan10mg/L)培养基上的绿苗有53%的阳性率。对部分PCR阳性的转基因植株进行了点杂交分析,结果均表现出较强的杂交信号,这初步说明外源基因已整合到油菜基因组中。转基因植株的活体接种油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorium)试验表明,部分转基因植株比对照显示较强抗病性。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 转基因油菜 抗菌核病 农杆菌介导
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水稻生防菌株多粘类芽孢杆菌WY110抗菌蛋白的纯化及其基因克隆 被引量：62
2
作者 姚乌兰 王云山 +2 位作者 韩继刚 李潞滨 宋未 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期878-887,共10页
通过DEAE SephadexA 5 0离子交换层析和SephacrylS 2 0 0分子筛层析并采用抑菌活性和SDS PAGE跟踪检测 ,从多粘类芽孢杆菌 (Paenibacilluspolymyxa)WY110菌株中分离纯化到一种对稻瘟病菌具有拮抗活性的抗菌蛋白P2 (分子量约 2 6kD)。平... 通过DEAE SephadexA 5 0离子交换层析和SephacrylS 2 0 0分子筛层析并采用抑菌活性和SDS PAGE跟踪检测 ,从多粘类芽孢杆菌 (Paenibacilluspolymyxa)WY110菌株中分离纯化到一种对稻瘟病菌具有拮抗活性的抗菌蛋白P2 (分子量约 2 6kD)。平板抑菌试验表明 ,在PDA培养基上 1 5 μg纯化的P2 蛋白即可有效地抑制稻瘟病菌菌丝生长 ,并对所测试的稻瘟病菌不同菌株均表现出抑菌活性。对P2 蛋白的N 端测序结果表明 ,N 末端 2 4个氨基酸序列为H2 N Ala Asn Val Phe Trp Glu Pro Leu Ser Tyr Tyr Asn Pro Ser Thr Trp Gln Lys Ala Asp Gly Tyr Ser Asn 。以此为靶序列在网上用BlastP程序对蛋白质序列数据库进行了类似性检索 ,发现其与来源于芽孢杆菌的β 1,3 1,4 葡聚糖酶前体具有很高的同源性。进一步用此酶的特异底物地衣多糖进行了定性检测 ,验证了P2 蛋白具有 β 1,3 1,4 葡聚糖酶的活性。在此基础上 ,根据P2 蛋白N 末端氨基酸序列及此酶C 端保守性序列设计合成了两端引物 ,以WY110基因组DNA为模板 ,通过PCR高保真扩增获得了P2 蛋白编码基因的全序列 ,并克隆到pMD18 T载体上。核苷酸序列分析表明 ,其 5′端 72个核苷酸序列与蛋白N 端已知的 2 4个氨基酸序列完全吻合 ,序列全长为 6 36bp (GenBank登录号 :AF2 展开更多
关键词 多粘类芽孢杆菌 稻瘟病菌 抗菌蛋白 基因 克隆 纯化
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β-1,3-葡聚糖酶及其在植物抗真菌病基因工程中的应用 被引量：21
3
作者 蔡应繁 叶鹏盛 +1 位作者 张利 赖家业 《西南农业学报》 CSCD 2001年第2期78-81,共4页
β - 1,3-葡聚糖酶是植物抗真菌病的重要抗性物质之一 ,可由多种生物因子和非生物因子诱导产生。将外源 β - 1,3-葡聚糖酶基因导入植物 ,转基因植株显示出良好的抗真菌能力 ,是植物抗真菌病防治的有效新途径。研究表明 ,外源 β - 1,3... β - 1,3-葡聚糖酶是植物抗真菌病的重要抗性物质之一 ,可由多种生物因子和非生物因子诱导产生。将外源 β - 1,3-葡聚糖酶基因导入植物 ,转基因植株显示出良好的抗真菌能力 ,是植物抗真菌病防治的有效新途径。研究表明 ,外源 β - 1,3-葡聚糖酶与其它防卫蛋白具有协同作用。本文对 β - 1,3-葡聚糖酶的诱导 ,分类及其与病原真菌分泌物之间的相互作用 ,转基因研究及协同表达等进行了评述。 展开更多
关键词 β-1 3-葡聚糖酶 植物 抗真菌 基因工程
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木霉菌产生的葡聚糖酶和植物病害防治 被引量：15
4
作者 杨合同 郭勇 +1 位作者 李纪顺 陈凯 《山东科学》 CAS 2003年第4期1-7,共7页
木霉菌能够产生不同类型的葡聚糖酶,包括α 1,3 、β 1,3 、β 1,4 和β 1,6 葡聚糖酶,酶的产生受葡萄糖抑制,而为葡萄糖聚合体如真菌细胞壁所诱导。已经克隆了几个萄聚糖酶的编码基因。该酶是木霉菌产生的重要抑菌蛋白,能够与几丁质酶... 木霉菌能够产生不同类型的葡聚糖酶,包括α 1,3 、β 1,3 、β 1,4 和β 1,6 葡聚糖酶,酶的产生受葡萄糖抑制,而为葡萄糖聚合体如真菌细胞壁所诱导。已经克隆了几个萄聚糖酶的编码基因。该酶是木霉菌产生的重要抑菌蛋白,能够与几丁质酶或抗生素协同抗菌,用于改良植物病害生物防治菌和植物。 展开更多
关键词 木霉菌 葡聚糖酶 植物病害防治 基因 植物病原菌
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低温条件下相关关键酶活性对棉纤维比强度形成的影响 被引量：19
5
作者 卞海云 王友华 +2 位作者 陈兵林 束红梅 周治国 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期1235-1241,共7页
【目的】研究低温对纤维比强度形成的影响。【方法】通过设置大田分期播种试验,使相同果枝部位棉铃可以处于不同的温度条件下发育,研究低温对棉纤维发育关键酶活性及相关基因表达的影响。【结果】低温影响纤维素的累积速率并最终影响纤... 【目的】研究低温对纤维比强度形成的影响。【方法】通过设置大田分期播种试验,使相同果枝部位棉铃可以处于不同的温度条件下发育,研究低温对棉纤维发育关键酶活性及相关基因表达的影响。【结果】低温影响纤维素的累积速率并最终影响纤维比强度的形成,其原因是在不同水平上影响了纤维发育关键酶的活性。在生化水平上,低温(铃龄0～50d日均温<23.0℃,铃龄25～50d日均温<21.0℃)提高了纤维中β-1,3-葡聚糖酶的活性、降低了蔗糖合成酶的活性,且前者对温度更为敏感。在基因表达水平上,低温使Expansin、蔗糖合成酶基因的表达量增加,β-1,3-葡聚糖酶基因的表达与此相反,低温下Expansin到达表达峰值时间推后且维持高表达的时间延长,低温可导致15d铃龄纤维β-1,3-葡聚糖酶基因表达量显著降低,而蔗糖合成酶基因表达量显著升高。【结论】在纤维品质形成上,低温导致棉纤维伸长期及伸长高峰推后,低温下纤维素累积量、纤维比强度的变化特征与纤维蔗糖合成酶活性及β-1,3-葡聚糖酶基因表达的变化特征高度一致,与β-1,3-葡聚糖酶活性及蔗糖合成酶基因表达受低温影响的规律相反。 展开更多
关键词 低温 EXPANSIN β-1 3-葡聚糖酶 蔗糖合成酶 基因表达 纤维发育 纤维比强度
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贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis YB15β-葡聚糖酶的抑菌作用与基因克隆 被引量：20
6
作者 徐婷 朱天辉 +1 位作者 李姝江 谯天敏 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期276-281,共6页
本文在对峙法验证贝莱斯芽孢杆菌B.velezensis YB15具抑菌作用的基础上,用透明圈法、DNS法研究其产β-葡聚糖酶特性,利用对峙法验证该酶抑菌作用,通过PCR法获得目的基因,分析克隆序列并预测其蛋白质结构与功能。结果表明,该菌株对多种... 本文在对峙法验证贝莱斯芽孢杆菌B.velezensis YB15具抑菌作用的基础上,用透明圈法、DNS法研究其产β-葡聚糖酶特性,利用对峙法验证该酶抑菌作用,通过PCR法获得目的基因,分析克隆序列并预测其蛋白质结构与功能。结果表明,该菌株对多种病原真菌有拮抗作用,杨树紫纹羽病菌拮抗带达11.0 mm,该菌提取的葡聚糖酶粗酶液对杨树紫纹羽病菌抑菌带为10.6 mm,说明葡聚糖酶在菌株YB15抑菌中有重要作用。不同接种方法影响菌株YB15葡聚糖酶水解透明圈形成,点种法水解圈与菌落直径之比在72 h可达14.1,效果最好。克隆所得菌株YB15葡聚糖酶基因命名为Bglu1,该基因序列长732 bp,编码243个氨基酸,此酶蛋白氨基酸序列与解淀粉芽孢杆菌TB2β-1,3-1,4-葡聚糖酶同源性较高,属糖基水解酶16家族,N端疏水区存在信号肽并具跨膜区域,推测其为分泌蛋白。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 Β-葡聚糖酶 抑菌作用 基因克隆
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转双价广谱抗病基因创造甘蓝型油菜抗菌核病新品种的研究 被引量：12
7
作者 陈雁 饶勇强 孟金陵 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第4期457-463,共7页
菌核病严重威胁着我国长江中下游地区甘蓝型油菜的生产 ,几乎每年都会导致甘蓝型油菜的大面积减产。来自于烟草的葡聚糖酶 (Glucanase)基因 ,其编码产物能降解真菌的细胞壁结构成分 -葡聚糖。来自于烟草的植物蛋白AP2 4 则属于细胞程序... 菌核病严重威胁着我国长江中下游地区甘蓝型油菜的生产 ,几乎每年都会导致甘蓝型油菜的大面积减产。来自于烟草的葡聚糖酶 (Glucanase)基因 ,其编码产物能降解真菌的细胞壁结构成分 -葡聚糖。来自于烟草的植物蛋白AP2 4 则属于细胞程序性死亡 (PCD)的诱导蛋白 ,对多种真菌具明显抑制作用。前期已成功地将这两个广谱抗病基因导入甘蓝型油菜 ,并且通过表型鉴定 ,在T0 和T1代检测到了核盘菌抗性。本实验对转基因T2 代和T3代甘蓝型油菜进行分子鉴定和田间抗病性鉴定。经过PCR分子鉴定 ,从 14个转基因T3代甘蓝型油菜株系中筛选到 4个外源基因已经纯合的株系。对株系GA0 2 - 2的RT PCR鉴定则进一步证明外源广谱抗病基因在RNA水平上的大量表达。田间抗性鉴定主要利用苗期离体叶接种和成株期茎杆插签接种这两种方法。结果表明 ,T2 代转基因株系中有 5个株系表现为抗病基因初步纯合 ,5个株系表现为隐性纯合 ,12个株系处于分离当中 ,其中株系GA0 2 - 2的抗病性鉴定结果与RT PCR鉴定的结果吻合。 18个T3代转基因甘蓝型油菜株系中有 7个株系表现为抗性纯合 ,3个株系表现为隐性纯合 ,其余 8个株系基本上仍在分离中 ,其中株系GA0 2 - 2 - 1的抗病性鉴定结果与前面的分子鉴定以及上代的抗病性鉴定完全吻合。综合分子鉴? 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 菌核病 抗病育种 转双价广谱抗病基因 葡聚糖酶基因 AP24基因
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转β-1,3-葡聚糖酶基因和几丁质酶基因棉花 被引量：4
8
作者 崔百明 祝建波 +4 位作者 肖璐 王爱英 朱新霞 乐锦华 陈正华 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第4期1-2,共2页
为了提高棉花的抗枯、黄萎病的能力 ,用花粉管通道法 ,将烟草 β - 1 ,3-葡聚糖酶基因和菜豆几丁质酶基因导入棉花 ,获得了抗卡那霉素的转化植株。经PCR、PCR -SouthernBlot检测 。
关键词 棉花 Β-1 3-葡聚糖酶 几丁质酶 转基因
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农杆菌介导西瓜转葡聚糖酶及几丁质酶双基因 被引量：13
9
作者 张明方 于天祥 +2 位作者 杨景华 毛碧增 何祖华 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期475-478,i0002,共5页
采用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将含有葡聚糖酶基因和几丁质酶基因表达载体遗传转化西瓜(Citrulluslanatus),遗传转化体系为以子叶为外植体经过组织培养获得再生植株。结果表明,Kan抗性芽的分化率随着共培养时间的延... 采用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将含有葡聚糖酶基因和几丁质酶基因表达载体遗传转化西瓜(Citrulluslanatus),遗传转化体系为以子叶为外植体经过组织培养获得再生植株。结果表明,Kan抗性芽的分化率随着共培养时间的延长先上升后下降,GUS阳性芽的百分率逐渐升高,共培养时间30h后,GUS阳性芽的百分率趋于平稳,同时,通过对候选转基因植株中GUS基因染色鉴定、卡那基因、葡聚糖酶基因及几丁质酶基因特异引物PCR检测,表明葡聚糖酶和几丁质酶基因已成功导入西瓜植株中,转基因植株的表现在进一步研究中。 展开更多
关键词 西瓜 葡聚糖酶基因 几丁质酶基因 转基因
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几丁质酶和葡聚糖酶生物学特性及其编码基因的克隆和转化 被引量：6
10
作者 黄玉杰 杨合同 丁爱云 《山东科学》 CAS 2002年第1期28-34,共7页
几丁质酶和葡聚糖酶在植物病害生物防治作用中具有重要的作用。本文着重介绍了几丁质酶和葡聚糖酶的分子生物学方面的特性 ,以及几丁质酶和葡聚糖酶编码基因的克隆和转化研究概况。将编码几丁质酶和 /或葡聚糖酶的基因导入到植物中 ,能... 几丁质酶和葡聚糖酶在植物病害生物防治作用中具有重要的作用。本文着重介绍了几丁质酶和葡聚糖酶的分子生物学方面的特性 ,以及几丁质酶和葡聚糖酶编码基因的克隆和转化研究概况。将编码几丁质酶和 /或葡聚糖酶的基因导入到植物中 ,能够提高植物抗病能力 ,导入到植物病害生防真菌或细菌中 ,可以提高生物防治菌的效果。 展开更多
关键词 几丁质酶 葡聚糖酶 编码基因 克隆 转化 生物学特性 生物技术 植物病害防治
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转双价(Chi+Glu)基因抗病棉栽培地生存竞争能力研究 被引量：13
11
作者 张兴华 乔艳艳 李捷 《江西农业学报》 CAS 2010年第6期1-3,共3页
为研制和制定转基因抗病棉生存竞争能力检测技术和标准而进行田间试验,结果:转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)棉花吐絮期株高超过受体对照9.8 cm,差异极显著;平均单株籽棉增产约50.1 g,单株皮棉增产24.12g;种子的发芽势比... 为研制和制定转基因抗病棉生存竞争能力检测技术和标准而进行田间试验,结果:转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)棉花吐絮期株高超过受体对照9.8 cm,差异极显著;平均单株籽棉增产约50.1 g,单株皮棉增产24.12g;种子的发芽势比对照强8～10.75个百分点,差异显著;发芽率比对照高10～12.5个百分点,差异极显著,显示转入双价抗病基因后棉花在栽培地的生存竞争得到显著提高。 展开更多
关键词 棉花 转双价抗病基因 几丁质酶基因 葡聚糖酶基因 生存竞争能力
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含多种抗真菌病基因植物表达载体的构建 被引量：8
12
作者 李明 邱国华 +2 位作者 许新萍 许耀 李宝健 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期67-71,共5页
含有大麦核糖体失活蛋白（ＢＲＩＰ） 编码序列的质粒ｐＲＣ２４／ＢＲＩＰ改造后， 依次与含有水稻碱性几丁质酶基因ＲＣＨ１０ 和水稻酸性几丁质酶基因ＲＡＣ２２ 编码序列的质粒ｐＡＢＣ２ 以及含有苜蓿β１ ， ３葡聚糖酶... 含有大麦核糖体失活蛋白（ＢＲＩＰ） 编码序列的质粒ｐＲＣ２４／ＢＲＩＰ改造后， 依次与含有水稻碱性几丁质酶基因ＲＣＨ１０ 和水稻酸性几丁质酶基因ＲＡＣ２２ 编码序列的质粒ｐＡＢＣ２ 以及含有苜蓿β１ ， ３葡聚糖酶编码序列的质粒ｐＡＡＧ８９ 连接， 得到了中间载体ｐＲＡＳ１０ ．ｐＲＡＳ１０再与根癌农杆菌双元载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３００ 连接， 得到了适合水稻转化的双元载体ｐＲＡＳ１３００ ． 利用冻融法将此表达载体导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４ 中， 并准备将ｐＲＡＳ１３００ 转入水稻， 展开更多
关键词 真菌病 植物表达载体 构建 抗真菌病基因
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转几丁质酶和葡聚糖酶双价基因棉花株系对黄萎病的抗性 被引量：13
13
作者 朱荷琴 冯自力 +3 位作者 李志芳 赵丽红 师勇强 尹志新 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期58-63,共6页
采用人工病圃、重病田及苗期室内鉴定相结合的方法,研究了转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1对棉花黄萎病的抗性。结果表明,转基因棉花株系61217-1在人工病圃连续3年达抗病水平,病指极显著低于其受体中棉所24。2009年该转基因株系... 采用人工病圃、重病田及苗期室内鉴定相结合的方法,研究了转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1对棉花黄萎病的抗性。结果表明,转基因棉花株系61217-1在人工病圃连续3年达抗病水平,病指极显著低于其受体中棉所24。2009年该转基因株系在河南安阳、江苏大丰及新疆石河子棉花黄萎病重病田的病指分别为18.7、18.1和16.7,均极显著低于受体中棉所24的病指。该转基因株系对来自河北、湖北、新疆的3个强致病力落叶型菌株均达抗病水平,病指分别为16.4、16.8和15.6,也极显著低于受体中棉所24的病指。表明转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1具有优异稳定的抗黄萎病性。 展开更多
关键词 转基因棉花 黄萎病 几丁质酶基因 葡聚糖酶基因
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多粘芽孢杆菌β-葡聚糖酶特性及其基因克隆 被引量：10
14
作者 李卫芬 陆平 周绪霞 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期331-335,共5页
对多粘芽孢杆菌所产的β-葡聚糖酶特性进行了分析.结果表明:该酶的最适温度为50℃,在60℃以下酶相对稳定.通过PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长DNA序列,长度为734bp,其中开放阅读框架长714bp,编码238个氨基酸.经Blast分析,该序列与已... 对多粘芽孢杆菌所产的β-葡聚糖酶特性进行了分析.结果表明:该酶的最适温度为50℃,在60℃以下酶相对稳定.通过PCR方法扩增和克隆了该酶基因的全长DNA序列,长度为734bp,其中开放阅读框架长714bp,编码238个氨基酸.经Blast分析,该序列与已登陆的多粘芽孢杆菌和浸麻芽孢杆菌的同源性较高,分别为99%和82%. 展开更多
关键词 Β-葡聚糖酶 多粘芽孢杆茵 特性 基因克隆
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链格孢菌侵染采后甜瓜果实组织几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因表达分析 被引量：11
15
作者 白羽嘉 张培岭 +2 位作者 黄伟 冯作山 李梦 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期185-191,共7页
以伽师瓜(抗病性强)和86-1甜瓜(抗病性一般)果实为实验材料,研究链格孢菌(Alternaria alternata)侵染后几丁质酶(chitinase,CHT)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)基因表达规律。甜瓜果实接种A.alternata,7℃贮藏,测定病斑大小,... 以伽师瓜(抗病性强)和86-1甜瓜(抗病性一般)果实为实验材料,研究链格孢菌(Alternaria alternata)侵染后几丁质酶(chitinase,CHT)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)基因表达规律。甜瓜果实接种A.alternata,7℃贮藏,测定病斑大小,荧光定量聚合酶链式反应测定CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量。结果表明:伽师瓜和86-1甜瓜接种A.alternata,在侵染9 d时出现病斑,9~24 d病斑直径不断扩大,86-1甜瓜病斑直径大于伽师瓜,侵染24 d时86-1甜瓜病斑直径是伽师瓜的1.12倍,伽师瓜对A.alternata侵染的抵抗能力要强于86-1甜瓜。在侵染期间,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量显著提高,呈先升高后降低的变化趋势,伽师瓜和86-1甜瓜CmCht1、CmCht2和CmGlu相对表达量最高峰出现时间分别相差3、6、3 d,伽师瓜CmCht1、CmCht2相对表达量始终高于86-1甜瓜,CmGlu相对表达量在侵染12~24 d高于86-1甜瓜。在侵染期间CmCht1、CmCht2和CmGlu表达规律存在差异,侵染前期CmCht1、CmCht2相对表达量较高,侵染中期和后期CmGlu相对表达量较高;A.alternata侵染前期主要诱导了CHT基因的表达,中期和后期主要诱导了GLU的基因表达,CHT和GLU的基因协同表达,起到抗病性的作用。伽师瓜抗病性强于86-1甜瓜与CHT和GLU的基因的表达密切相关。 展开更多
关键词 甜瓜 链格孢菌 几丁质酶 β-1 3-葡聚糖酶 基因表达
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指天蕉β-1,3-葡聚糖酶基因全长cDNA的克隆及序列分析 被引量：8
16
作者 翟国会 阮小蕾 +2 位作者 吴丽婷 谭小勇 李华平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期3134-3141,共8页
【目的】克隆植物中主要的防卫基因β-1,3-葡聚糖酶基因,为该基因功能研究和有效利用提供理论依据。【方法】通过分析芭蕉科植物的β-1,3-葡聚糖酶基因,据其保守区域设计一对简并引物,通过RACE法从野生指天蕉中克隆得到一个β-1,3-葡聚... 【目的】克隆植物中主要的防卫基因β-1,3-葡聚糖酶基因,为该基因功能研究和有效利用提供理论依据。【方法】通过分析芭蕉科植物的β-1,3-葡聚糖酶基因,据其保守区域设计一对简并引物,通过RACE法从野生指天蕉中克隆得到一个β-1,3-葡聚糖酶基因的全长cDNA——glu。【结果】glu全长为1 114 bp,其推导的氨基酸序列与GenBank中其它来源的β-1,3-葡聚糖酶蛋白序列的相似性为54%—71%。其中,与芭蕉科植物Grand Nain的β-1,3-葡聚糖酶蛋白序列的相似性最高(71%)。【结论】在芭蕉类作物中克隆了一个新的β-1,3-葡聚糖酶基因,为进一步研究该基因的功能并应用于作物转基因抗病育种研究奠定了基础。 展开更多
关键词 指天蕉 Β-1 3-葡聚糖酶 基因克隆 序列分析
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转基因抗病棉花所转抗病基因(Chi+Glu)对棉花生物学特性的影响 被引量：6
17
作者 张兴华 田绍仁 +1 位作者 乔艳艳 李捷 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第3期116-123,共8页
此研究为国家转基因抗病棉环境安全评价技术的建立而设。以转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)的‘中棉所24’为试验观察品种,对应的受体‘中棉所24’和‘赣棉11号’非转抗病基因棉为两个对照品种,进行棉花生育性状、产量性... 此研究为国家转基因抗病棉环境安全评价技术的建立而设。以转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)的‘中棉所24’为试验观察品种,对应的受体‘中棉所24’和‘赣棉11号’非转抗病基因棉为两个对照品种,进行棉花生育性状、产量性状上生物学特性的表现对比,结果‘中棉所24’转入双价抗病基因后,生育期比受体对照延长11天,比非转基因的常规棉‘赣棉11号’延长3天;经LSD最小显著性差异测验,转双价抗病基因(Chi+Glu)对棉苗期株高生长变缓慢影响极显著,对蕾期株高生长缓慢影响显著,而花铃期时株高超速生长影响显著;对蕾花铃发育迟缓、第一果枝节位前移影响显著;对第一果枝高度降低、果枝节距拉大、籽棉和皮棉增产、发芽率提高效应(提高13个百分点)影响极显著;对棉花单铃重、单铃籽棉重、单铃皮棉重、衣分、籽指、衣指、单铃不孕籽粒数性状转好影响明显;对单铃壳重、单铃不孕籽重量变差也有明显影响;对棉花纤维上半部平均长度变短,整齐度指数增加,马克隆值升高,纤维伸长率下降,纤维纺纱均匀指数降低,纤维断裂比强度降低有明显影响。试验显示,所转双价抗病基因对棉花上述生物学特性有显著和极显著影响,尤其对产量性状变好影响极显著(增产籽棉1491.9kg/hm2)。 展开更多
关键词 棉花 转双价抗病基因 几丁质酶基因 葡聚糖酶基因 生物学特性
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转双价抗病基因棉花在荒地生存的竞争能力研究 被引量：6
18
作者 张兴华 田绍仁 +2 位作者 乔艳艳 李捷 杨兆光 《江西棉花》 2011年第A01期42-50,共9页
以转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)的中棉所24为试验观察品种,以对应的受体中棉所24为第1对照品种(ck1),以非转抗病基因棉赣棉11号为第2对照品种(ck2),在荒地生态条件下(以荒地地表用不除草模式播种检测技术)进行出苗率、... 以转入几丁质酶和葡聚糖酶双价抗病基因(Chi+Glu)的中棉所24为试验观察品种,以对应的受体中棉所24为第1对照品种(ck1),以非转抗病基因棉赣棉11号为第2对照品种(ck2),在荒地生态条件下(以荒地地表用不除草模式播种检测技术)进行出苗率、株高、生育期、落粒性、自生苗竞争力等项目检测。结果表明:转入双价抗病基因棉花的出苗率平均低于第1对照0.6个百分点,低于第2对照3.8个百分点,无竞争优势;株高强于第1对照8.25 cm,弱于第2对照12.25 cm,总体无竞争优势;生育进展速度与两个对照基本相当;落粒性低于第1对照8.1百分点,低于第2对照5.9个百分点,且三者均无自生苗,也无竞争优势。说明棉花转入双价抗病基因后无变为杂草的可能性而安全。试验筛选结果表明,荒地检测转双价抗病基因棉的竞争能力,以4月下旬地表不除草两个播种方式为佳。 展开更多
关键词 荒地 棉花 转双价抗病基因 几丁质酶基因 葡聚糖酶基因 竞争能力
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甜菜褐斑病抗性基因的克隆 被引量：7
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作者 刘大丽 马龙彪 +3 位作者 纪岩 张革艳 刘丽萍 鲁振强 《中国糖料》 2017年第4期5-7,共3页
为了获得抗病的甜菜遗传材料,通过RT-PCR技术,分别对两类真菌抗性基因At Chitinase1(Gen Bank No.NM_100117)和At Glucanase2(Gen Bank No.NM_115586)的功能域进行了克隆;将所得的片段连接到载体pMD 18-T并鉴定。结果表明,At Chitinate... 为了获得抗病的甜菜遗传材料,通过RT-PCR技术,分别对两类真菌抗性基因At Chitinase1(Gen Bank No.NM_100117)和At Glucanase2(Gen Bank No.NM_115586)的功能域进行了克隆;将所得的片段连接到载体pMD 18-T并鉴定。结果表明,At Chitinate1基因的核苷酸长度为819 bp,编码272个氨基酸,At Glucanase2基因的核苷酸长度为1020 bp,编码339个氨基酸,确认获得两个抗病基因功能片段。 展开更多
关键词 甜菜 褐斑病 几丁质酶 葡聚糖酶 基因克隆
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β-1,3葡聚糖酶与糖体失活蛋白融合基因的制备及表达载体的构建 被引量：1
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作者 李文利 范琦 +2 位作者 高晓蓉 迟彦 安利佳 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第3期1-5,共5页
将大豆的 β - 1,3葡聚糖酶基因与玉米的核糖体失活蛋白基因通过一个 6个氨基酸的柔性短肽链连接起来 ,形成 1个融合蛋白。其中编码区基因长 1830bp ,共编码 60 9个氨基酸和 1个终止密码子。经过使用蛋白质分析软件Antheprot4 .3和Prosi... 将大豆的 β - 1,3葡聚糖酶基因与玉米的核糖体失活蛋白基因通过一个 6个氨基酸的柔性短肽链连接起来 ,形成 1个融合蛋白。其中编码区基因长 1830bp ,共编码 60 9个氨基酸和 1个终止密码子。经过使用蛋白质分析软件Antheprot4 .3和Prosis(v5.0 0 )对融合蛋白的二级结构、理化特性、潜在信号肽断裂位点等方面进行分析表明 :融合蛋白较好的保持了原来的两个蛋白的各项理化特性 ,维持了两种蛋白的二级结构。将此基因克隆到质粒PBI12 1上 ,构建成植物表达载体PBI/GR。 展开更多
关键词 β-1 3葡聚糖酶 核糖体失活蛋白 融合基因 表达载体 抗真菌基因 植物
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