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gTME构建共发酵木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母 被引量：10
1
作者 刘红梅 许琳 +2 位作者 严明 来灿钢 欧阳平凯 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1010-1015,共6页
利用全转录工程(gTME)方法将全局转录因子spt15随机突变并克隆表达,构建突变库。将突变基因连接到表达载体pYX212上,醋酸锂法转化入不利用木糖的酿酒酵母YPH499中,经特定的培养基初筛获得高效利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖的酿酒酵母重... 利用全转录工程(gTME)方法将全局转录因子spt15随机突变并克隆表达,构建突变库。将突变基因连接到表达载体pYX212上,醋酸锂法转化入不利用木糖的酿酒酵母YPH499中,经特定的培养基初筛获得高效利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌株。对获得的重组菌株进行了初步研究,该菌株能够很好的利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖。在30oC,200r/min,发酵96h时,50g/L木糖和葡萄糖的利用率为94.0%和98.9%,乙醇产率为32.4%和31.6%,原始菌株乙醇产率为44.3%;当木糖和葡萄糖以质量比1:1混合发酵时,木糖和葡萄糖利用率分别为91.7%和85.9%,乙醇产率为26%。木糖醇的含量极低。 展开更多
关键词 全转录工程(gtme) 重组酵母菌 木糖 共发酵
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全局转录工程法构建产S-腺苷蛋氨酸重组酿酒酵母的研究 被引量：5
2
作者 曹喜涛 陈凯 +4 位作者 李扬 窦洁 王慧 周长林 奚涛 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第5期386-391,共6页
利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶II中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体。并用醋酸... 利用全局转录工程(global transcription machinery engineering,gTME)方法对酿酒酵母RNA聚合酶II中的转录因子SPT15和TAF25编码的基因进行克隆并结合易错PCR随机突变,将SPT15和TAF25的易错PCR产物连接改造的pYES2.0表达载体。并用醋酸锂转化的方法转化酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2846中,研究了SPT15和TAF25的定向进化对酿酒酵母产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)的影响。经过筛选分别获得了重组酿酒酵母菌株spt15-81和taf25-36。对其发酵性状分别进行了初步研究,在28℃、200 r/min条件下,250 mL摇瓶(50 mL O-medium)发酵48 h时,SAM的产量分别比对照菌株提高了2.0倍和1.8倍。由此表明。 展开更多
关键词 酿酒酵母 全转录工程(gtme) SPT15 TAF25 易错PCR S-腺苷甲硫氨酸
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gTME改造野生酿酒酵母利用木糖产乙醇的初步研究
3
作者 裴建新 韦宇拓 +3 位作者 杜丽琴 杨登峰 曹博 黄日波 《工业微生物》 CAS CSCD 2010年第4期18-22,共5页
利用全转录工程(Global transcription machinery engineering,gTME)方法对野生型酿酒酵母(Saccharomyces scerevisiae)GX7菌株进行了改造。通过PCR方法克隆获得酿酒酵母转录因子spt15基因,与表达载体pYX418连接,构建了重组子pYX418-spt... 利用全转录工程(Global transcription machinery engineering,gTME)方法对野生型酿酒酵母(Saccharomyces scerevisiae)GX7菌株进行了改造。通过PCR方法克隆获得酿酒酵母转录因子spt15基因,与表达载体pYX418连接,构建了重组子pYX418-spt15,并对SPT15蛋白的177、195和217位点进行了定点突变,然后醋酸锂转化入酿酒酵母GX7中,利用不同浓度的G418抗性筛选得到重组突变酿酒酵母菌株GX7-1,经初步研究表明:重组菌株细胞表型发生了变化,生长速度加快,并可以发酵木糖生成木糖醇和乙醇。为构建新型工业酿酒酵母奠定了理论基础。 展开更多
关键词 全局转录工程 重组酿酒酵母 生物乙醇 定点突变
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应用通用转录器工程获得优良农艺性状的转基因水稻
4
作者 彭颖 陈香嵩 赵毓 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-7,共7页
为得到农艺性状或抗逆性优良的转基因水稻材料,克隆了粳稻品种中花11(ZH11)的通用转录因子TATA框结合蛋白TBP(TATA binding protein)基因,通过随机诱变PCR的方法,获得104个突变子;利用农杆菌介导的方法将这些突变的TBP基因分别转化到中... 为得到农艺性状或抗逆性优良的转基因水稻材料,克隆了粳稻品种中花11(ZH11)的通用转录因子TATA框结合蛋白TBP(TATA binding protein)基因,通过随机诱变PCR的方法,获得104个突变子;利用农杆菌介导的方法将这些突变的TBP基因分别转化到中花11中,获得了水稻TBP基因不同突变的转基因水稻。将其移入大田,收获种子并在T1、T2代进行农艺性状的考察,对产量性状改善的转基因材料进行百草枯、甘露醇、氯化钠的胁迫处理,观察并记录表型变化。最终获得了1个具有较高产量同时具有一定非生物逆境抗性的突变体材料。 展开更多
关键词 通用转录器工程 TATA框结合蛋白(TBP) 水稻 非生物逆境胁迫 农艺性状 转基因
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