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替莫唑胺通过调控miR-216a/PRKCA抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭作用的研究 被引量:5
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作者 韩刚 杨扬 胡胜利 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第10期1713-1717,共5页
目的:探讨替莫唑胺抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的作用,推测其作用机制是通过微小RNA-216a(microRNA-216a,miR-216a)/蛋白激酶Cα(protein kinase C-alpha,PRKCA)进行调控。方法:体外培养胶质瘤细胞U251,用不同剂量替莫唑胺染毒48 h后... 目的:探讨替莫唑胺抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的作用,推测其作用机制是通过微小RNA-216a(microRNA-216a,miR-216a)/蛋白激酶Cα(protein kinase C-alpha,PRKCA)进行调控。方法:体外培养胶质瘤细胞U251,用不同剂量替莫唑胺染毒48 h后,构建野生型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体及检测荧光素酶活性,检测替莫唑胺对胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的影响及miR-216a和PRKCA表达的影响。结果:miR-216a mimics使野生型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体的活性下降了47.52%,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-216a mimics使突变型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体的活性下降不显著,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,低、中、高剂量组胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量均降低,miR-216a mRNA相对表达量均增高,差异具有统计学意义(P<0.05);随着替莫唑胺剂量的增加,胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量随之降低,miR-216a mRNA相对表达量随之增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:替莫唑胺可以通过促进miR-216a的表达而抑制PRKCA的表达,降低胶质瘤细胞U251增殖和侵袭。 展开更多
关键词 替莫唑胺 miR-216a PRKCA 胶质瘤细胞u251 增殖 侵袭
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腺病毒介导的IL-24基因对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα及Caspase-3表达的影响 被引量:2
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作者 韩硕 崔慧先 +3 位作者 李文玲 赵俊霞 曹翠丽 闫蕴力 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期48-52,共5页
目的探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响。方法应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用... 目的探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响。方法应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用;Hoechst33258荧光染色,以及流式细胞术测定细胞凋亡;应用免疫组织化学方法检测topoⅡα表达;免疫印迹法检测topoⅡα和Caspase-3蛋白质表达变化;Transwell实验观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞侵袭力的影响。结果与对照组相比,Ad5F35-hIL-24对胶质瘤细胞有明显抑制作用,能显著诱导细胞凋亡,且呈浓度依赖性;免疫组织化学法显示,Ad5F35-hIL-24能明显抑制topoⅡα表达;免疫印迹检测表明,topoⅡα表达明显降低,而Caspase-3蛋白的表达水平增加;Transwell实验表明,Ad5F35-hIL-24能明显降低U251细胞的侵袭能力。结论外源性IL-24基因能显著抑制胶质瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡;topoⅡα及Caspase-3是其重要的作用靶点。该结果对于IL-24基因用于临床治疗胶质瘤有一定参考意义。 展开更多
关键词 白细胞介素-24基因 拓扑异构酶Ⅱα CASPASE-3 胶质瘤 免疫印迹法 流式细胞术 人胶质瘤细胞系u251
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5-氮杂-2'-脱氧胞苷和曲古霉素A联合应用对胶质瘤细胞增殖和侵袭的作用
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作者 马爽 韩冬 郭阳 《解剖科学进展》 CAS 2013年第2期156-158,共3页
目的胶质瘤的化疗一直都是研究热点,近来有研究表明甲基化与胶质瘤的发生和发展关系密切,本研究的目的是探讨去甲基化试剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine)和曲古霉素A(TSA)联合应用对胶质瘤细胞系侵袭和转移的调节... 目的胶质瘤的化疗一直都是研究热点,近来有研究表明甲基化与胶质瘤的发生和发展关系密切,本研究的目的是探讨去甲基化试剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine)和曲古霉素A(TSA)联合应用对胶质瘤细胞系侵袭和转移的调节。方法分别将浓度为50μM的5-氮杂-2'-脱氧胞苷和300ng/ml的曲古霉素A加入胶质瘤细胞系U251细胞中,并将两者联合应用加入U251细胞系中,应用MTT法检测不同处理组细胞的增殖能力,Transwell细胞侵袭实验检测不同处理组和对照组中细胞的侵袭能力的变化。结果 5-氮杂-2'-脱氧胞苷和曲古霉素A单独处理后,U251细胞的增殖能力明显减弱(<0.05),两者联合应用时对U251细胞的增殖抑制更明显(<0.01)。Transwell细胞侵袭实验显示5-氮杂-2'-脱氧胞苷和曲古霉素A单独处理后,U251细胞的侵袭细胞数明显减少(<0.05),而两者联合应用时对U251细胞的侵袭能力抑制更为明显(P<0.01)。结论 5-氮杂-2'-脱氧胞苷和曲古霉素A都可以抑制胶质瘤细胞系的增殖和侵袭,两者具有协同作用。 展开更多
关键词 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 曲古霉素 胶质瘤细胞系u251细胞 增殖 侵袭
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多巴胺对胶质瘤细胞U251增殖、侵袭及VEGF表达影响
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作者 段然 王磊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期563-566,共4页
目的探讨多巴胺对胶质瘤细胞U251增殖、侵袭及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法将人胶质瘤细胞株U251分为5组,分别加入多巴胺0(对照)、10、25、50、100μmol/L,分别于培养12、24、36、48h时,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法... 目的探讨多巴胺对胶质瘤细胞U251增殖、侵袭及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法将人胶质瘤细胞株U251分为5组,分别加入多巴胺0(对照)、10、25、50、100μmol/L,分别于培养12、24、36、48h时,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪和Transwell实验检测培养48h后细胞周期及侵袭能力变化,采用Westernblot检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK-4)、CDK-6及VEGF、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9表达。结果与对照组[(92.36±1.37)%]比较,多巴胺培养48h时,10、25、50和100μmol/L组U251细胞增殖百分比[(46.82±1.17)%、(41.96±1.06)%、(37.52±0.98)%、(30.57±1.11)%]明显下降(P<0.05),呈剂量依赖性(P<0.05);与对照组比较,多巴胺10、25、50和100μmol/L组U251细胞G0/G1期比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05),具有剂量依赖性;与对照组[(1099.82±33.57)个]比较,多巴胺10、25、50和100μmol/L组U251细胞侵袭数目[分别为(776.52±25.16)、(555.43±22.57)、(442.33±12.03)、(336.82±14.11)个]均明显减少(P<0.05),呈一定剂量依赖性(P<0.05);与对照组比较,多巴胺10、25、50和100μmol/L组U251细胞中cyclinD1、CDK4、CDK6及VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达量均明显降低(P<0.05)。 展开更多
关键词 胶质瘤细胞株u251 多巴胺 增殖 侵袭 血管内皮生长因子(VEGF)
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金雀异黄素对胶质瘤细胞株细胞生长周期影响 被引量:1
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作者 刘书哲 檀艳丽 +2 位作者 高伟敏 薛娟 杨永滨 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1277-1279,共3页
目的研究金雀异黄素(genistein)对人胶质瘤U251MG细胞生长和细胞周期的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度genistein在不同作用时间下对U251MG细胞生长的影响,用流式细胞仪分析细胞周期分布,蛋白免疫印迹(western blotting)... 目的研究金雀异黄素(genistein)对人胶质瘤U251MG细胞生长和细胞周期的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度genistein在不同作用时间下对U251MG细胞生长的影响,用流式细胞仪分析细胞周期分布,蛋白免疫印迹(western blotting)技术检测细胞周期素B1(cyclin B1)和细胞周期素依赖性蛋白激酶1(CDK1)蛋白表达。结果 Genistein对胶质瘤细胞生长有明显抑制作用,使细胞生长停滞于G2/M期,并使细胞cyclin B1、CDK1蛋白表达下降(均P<0.01),且呈剂量依赖性。结论 Genistein对U251MG细胞生长有明显抑制作用,诱导G2/M期阻滞可能与下调cyclinB1和CDK1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 金雀异黄素 胶质瘤细胞株u251MG 细胞周期 基因表达
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金雀异黄素对胶质瘤细胞株U251MG凋亡的影响 被引量:1
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作者 刘书哲 高伟敏 +2 位作者 檀艳丽 薛娟 刘嘉琳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期286-288,292,共4页
目的研究金雀异黄素(Genistein)对人胶质瘤U251MG细胞凋亡的影响及机制。方法碘化丙啶(propidium iodide,PI)和Annexin V-FITC双染色的流式细胞分析方法检测凋亡,并通过流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测Bcl-2、bax蛋白的表达。结果 Gen... 目的研究金雀异黄素(Genistein)对人胶质瘤U251MG细胞凋亡的影响及机制。方法碘化丙啶(propidium iodide,PI)和Annexin V-FITC双染色的流式细胞分析方法检测凋亡,并通过流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测Bcl-2、bax蛋白的表达。结果 Genistein在25μg/ml和50μg/ml作用48 h后,早期凋亡率均较对照组明显增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。Bcl-2蛋白表达较对照组明显下降(P<0.01),而bax蛋白则较对照组明显增加(P<0.01),呈剂量依赖性。结论 Genistein可诱导胶质瘤U251MG细胞凋亡,其机制可能与其上调bax蛋白以及下调Bcl-2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 金雀异黄素 胶质瘤细胞株u251MG 细胞凋亡 基因表达
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顺铂联合二硫碳吡咯烷醇治疗裸鼠胶质瘤实验观察 被引量:1
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作者 周伟 张建国 徐国本 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第1期62-64,共3页
   目的:探讨顺铂治疗裸鼠胶质瘤过程中核转录因子κB(NF- κB)活性的变化及抑制NF κB的活性对其治疗作用的影响。方法:U251胶质瘤裸鼠 15只,随机分为 3组,每组 5只。对照组不治疗,其余 2组分别用顺铂及顺铂联合二硫碳吡咯烷醇(PDTC...    目的:探讨顺铂治疗裸鼠胶质瘤过程中核转录因子κB(NF- κB)活性的变化及抑制NF κB的活性对其治疗作用的影响。方法:U251胶质瘤裸鼠 15只,随机分为 3组,每组 5只。对照组不治疗,其余 2组分别用顺铂及顺铂联合二硫碳吡咯烷醇(PDTC)治疗 8周。观察各组抑瘤率及细胞凋亡率,用免疫组织化学及RT- PCR方法检测P65、IκBα蛋白及mRNA的表达。结果:顺铂+PDTC治疗组抑瘤率及细胞凋亡率最高,其次为顺铂治疗组,顺铂治疗组细胞凋亡率高于对照组。顺铂治疗组p65蛋白阳性细胞百分数及mRNA表达量均高于其他 2组 (P<0. 05),IκBα蛋白阳性细胞百分数及mRNA表达量明显低于其他 2组(P<0. 05)。结论:抑制NF- κB的活性能增强顺铂对裸鼠U251胶质瘤的治疗作用。 展开更多
关键词 核转录因子ΚB 顺铂 二硫碳吡咯烷醇 胶质瘤 裸鼠
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