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人牙龈成纤维细胞系的建立及其生物学特性 被引量:8
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作者 刘斌 吴军正 +1 位作者 司徒镇强 陈建元 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1999年第1期34-36,共3页
目的:建立人牙龈成纤维细胞系并观察其生物学特性。方法:用组织块法培养细胞,用形态学、免疫组化染色、染色体分析等方法鉴定细胞,通过活细胞观察、生长曲线测定及MTT比色实验研究细胞体外生长特性。结果:20例原代培养,成活... 目的:建立人牙龈成纤维细胞系并观察其生物学特性。方法:用组织块法培养细胞,用形态学、免疫组化染色、染色体分析等方法鉴定细胞,通过活细胞观察、生长曲线测定及MTT比色实验研究细胞体外生长特性。结果:20例原代培养,成活率90%。培养细胞呈梭形,胞浆波形丝蛋白阳性,能合成Ⅰ型和Ⅲ型胶原及纤维粘连蛋白,具有正常二倍体核型,体外贴壁快,生长迅速,细胞寿命为(250.7±113.3)d。结论:本实验建立的细胞系符合人牙龈正常二倍体成纤维细胞系。 展开更多
关键词 牙龈 成纤维细胞 细胞培养 生物学特性
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人牙龈成纤维细胞的原代培养及鉴定 被引量:11
2
作者 崔娟 孙克勤 +1 位作者 李霞 张华屏 《中国医药导报》 CAS 2010年第3期26-27,共2页
目的:分离培养人牙龈成纤维细胞,为进一步研究细胞因子对牙龈成纤维细胞的调控作用提供实验条件。方法:用组织块法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。结果:牙龈成纤维细胞原代培养成功并稳定传代,细胞呈长梭形或星形,免... 目的:分离培养人牙龈成纤维细胞,为进一步研究细胞因子对牙龈成纤维细胞的调控作用提供实验条件。方法:用组织块法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。结果:牙龈成纤维细胞原代培养成功并稳定传代,细胞呈长梭形或星形,免疫学鉴定抗波形丝蛋白抗体阳性,抗角蛋白抗体阴性,为中胚层来源的成纤维细胞。结论:组织块法培养的细胞符合牙龈成纤维细胞的形态学和免疫学特征,可作为体外细胞模型,为研究细胞因子对其功能的调控作用奠定基础。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 细胞培养 鉴定
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放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞DNA合成和细胞周期的影响 被引量:6
3
作者 张亚庆 肖明振 +1 位作者 赵守亮 陈新梅 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2001年第4期231-233,共3页
目的 :观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞的DNA合成和细胞周期的影响。方法 :应用流式细胞仪技术。结果 :10 0mg/L组明显抑制细胞DNA合成 ,细胞增殖指数 (S +G2 M) %降低(P <0 .0 5 )。结论 :此物质不仅抑制细胞... 目的 :观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞的DNA合成和细胞周期的影响。方法 :应用流式细胞仪技术。结果 :10 0mg/L组明显抑制细胞DNA合成 ,细胞增殖指数 (S +G2 M) %降低(P <0 .0 5 )。结论 :此物质不仅抑制细胞的分裂、增殖 。 展开更多
关键词 放线共生放线杆菌 流式细胞仪技术 成纤维细胞 牙龈
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口腔黏膜创伤修复中生长因子对牙龈成纤维细胞的影响及调节机制 被引量:9
4
作者 陈盈哲 全知怎 +1 位作者 姜葳 陈维旭 《广西医科大学学报》 CAS 2018年第10期1335-1340,共6页
目的:观察口腔黏膜创伤修复中不同生长因子对牙龈成纤维细胞迁移和增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法:牙龈标本采集于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院口腔科牙拔除术或助萌手术的患者。无菌条件下,用酶消化法培养人牙龈成纤维细胞,通过... 目的:观察口腔黏膜创伤修复中不同生长因子对牙龈成纤维细胞迁移和增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法:牙龈标本采集于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院口腔科牙拔除术或助萌手术的患者。无菌条件下,用酶消化法培养人牙龈成纤维细胞,通过划痕实验、Transwell实验、CCK-8法和实时定量PCR等检测方法,比较表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-β3等不同生长因子对牙龈成纤维细胞在迁移、增殖及细胞外基质分子Ⅰ型及Ⅲ型胶胶原蛋白(CollagenⅠ及CollagenⅢ)、1型及13型基质金属蛋白酶(MMP-1及MMP-13)基因表达的差异。结果:划痕实验及Transwell实验的结果显示,EGF、bFGF、TGF-β1、TGF-β3均能够显著增加牙龈成纤维细胞的迁移(均P<0.05)。EGF在10~100ng/mL、TGF-β1仅在1ng/mL及TGF-β3在10~50ng/mL对牙龈成纤维细胞的增殖有明显的促进作用(P<0.05)。与对照组相比,EGF和bFGF显著上调了牙龈成纤维细胞CollagenⅢ、MMP-1及MMP-13基因的表达水平(P<0.05);TGF-β1,TGF-β3显著上调了牙龈成纤维细胞MMP-1及MMP-13基因的表达水平(P<0.05)。结论:EGF、bFGF、TGF-β1、TGF-β3对牙龈成纤维细胞迁移和增殖的促进作用可能是通过调控细胞外基质分子基因的表达来实现的。 展开更多
关键词 生长因子 牙龈成纤维细胞 迁移 机制
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环孢素A和肿瘤坏死因子α对人牙龈成纤维细胞增殖的影响 被引量:7
5
作者 韦艺 郭新程 +1 位作者 周嫣 李翠 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期38-42,共5页
目的研究环孢素A(cyclosporin A)和肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor—a,TNF—a)对体外培养人牙龈成纤维细胞增殖的影响,探讨牙龈炎症与药物性牙龈增生的关系及环孢素A所致牙龈增生的相关机制。方法用原代培养的方法获取5名... 目的研究环孢素A(cyclosporin A)和肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor—a,TNF—a)对体外培养人牙龈成纤维细胞增殖的影响,探讨牙龈炎症与药物性牙龈增生的关系及环孢素A所致牙龈增生的相关机制。方法用原代培养的方法获取5名健康人的牙龈成纤维细胞,体外培养、传代后取其中1个生长良好的组织块4~8代细胞用于实验。按以下条件进行实验分组:A组:空白对照组;B1组:10ug/L环孢素A,B2组:50ug/L环孢素A,B3组:250ug/L环孢素A,B4组:1250ug/L环孢素A;C组:5ug/L TNF—a;D1组:10ug/L环孢素A+5ug/L TNF—a,D2组:50ug/L环孢素A+5ug/L TNF—a,D3组:250ug/L环孢素A+5ug/L TNF—a,IM组:1250ug/L环孢素A+5ug/LTNF—a。将条件培养液分别作用于牙龈成纤维细胞,培养3、5、7d后用甲基噻唑基四唑法测定细胞的增殖情况。结果不同质量浓度的环孢素A作用于成纤维细胞后,细胞的增殖受到抑制,4值下降,其中B1、B2、B3组与A组相比差异无统计学意义,B4组与A组相比差异具有统计学意义(P=0.001);5ug/L的TNF—a作用于成纤维细胞可以刺激细胞的增殖,A值(0.542)与A组(0.441)相比显著升高(P〈0.01)。环孢素A和TNF-a共同作用于成纤维细胞后,D1、D2、D3组A值均较A组升高,但均较C组显著降低(P〈0.05)。D4组细胞增殖显著增加,与C组相比差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论环孢素A对成纤维细胞的增殖无促进作用,高浓度时可抑制细胞的增殖;TNF-a可以促进成纤维细胞的增殖;高浓度环孢素A与TNF-a共同作用于成纤维细胞可促进成纤维细胞增殖,提示在一定浓度下环孢素A可能放大了TNF—a刺激成纤维细胞增殖的效应。 展开更多
关键词 环孢菌素 肿瘤坏死因子A 牙龈增生 牙龈成纤维细胞
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人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力的比较研究 被引量:6
6
作者 李纾 汪说之 +3 位作者 樊明文 杨丕山 戚向敏 王燕 《临床口腔医学杂志》 2002年第5期340-342,共3页
目的 研究人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力的差异。方法 用组织块法培养同一患者的牙龈和牙周韧带成纤维细胞,取第4~8代细胞用矿化培养液长期培养,倒置显微镜下观察矿化情况,von Kos-sa染色显示钙盐沉积,生化法测定各组碱性磷... 目的 研究人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力的差异。方法 用组织块法培养同一患者的牙龈和牙周韧带成纤维细胞,取第4~8代细胞用矿化培养液长期培养,倒置显微镜下观察矿化情况,von Kos-sa染色显示钙盐沉积,生化法测定各组碱性磷酸酶活性,扫描电镜及X线能谱法分析矿化结节中钙磷比例。结果 倒置显微镜下观察牙周韧带成纤维细胞可呈复层生长,形成肉眼可见的白色结节,von Kossa染色显示结节内有钙盐沉积,碱性磷酸酶活性测定表明随着矿化培养时间的延长牙周韧带成纤维细胞组ALP活性比牙龈成纤维细胞组增高明显,扫描电镜下表明结节处电子反射增强,X射线能谱分析显示钙化结节内的钙磷比例与矿化组织相似;牙龈成纤维细胞及对照组体外不能形成钙化结节。结论 人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力不同。 展开更多
关键词 牙龈 牙周韧带 成纤维细胞 细胞培养 矿化 碱性磷酸酶活性 牙周病
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磁性附着体静磁场对人牙龈成纤维细胞形态的影响 被引量:6
7
作者 胥春 范震 +3 位作者 巢永烈 杜莉 刘伟才 张富强 《临床口腔医学杂志》 2007年第2期81-84,共4页
目的:研究牙科磁性附着体静磁场对人牙龈成纤维细胞形态的影响,为磁性附着体在人口腔中的临床应用提供指导。方法:采用细胞静磁场加载装置,分别模拟闭合磁路、开放磁路磁性附着体的静磁场,对体外培养的人牙龈成纤维细胞加载10mT、120mT... 目的:研究牙科磁性附着体静磁场对人牙龈成纤维细胞形态的影响,为磁性附着体在人口腔中的临床应用提供指导。方法:采用细胞静磁场加载装置,分别模拟闭合磁路、开放磁路磁性附着体的静磁场,对体外培养的人牙龈成纤维细胞加载10mT、120mT静磁场12~60h,倒置相差显微镜观察活细胞形态及分布,HE染色后光镜下观察细胞形态。结果:对人牙龈成纤维细胞加载10mT、120mT静磁场12~60h后,细胞形态大小和分布特征出现不同程度的改变。随静磁场加载时间延长,细胞胞体收缩变小,胞浆突起变短,磁场照射区细胞数量减少,出现细胞稀疏区。结论:磁性附着体静磁场在本实验条件下能使人牙龈成纤维细胞形态发生一定程度的改变。 展开更多
关键词 磁性附着体 静磁场 牙龈成纤维细胞 形态
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富血小板纤维蛋白提取液对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响 被引量:6
8
作者 何家林 徐燕 +2 位作者 谢贤哲 王腾飞 霍冬梅 《口腔疾病防治》 2019年第8期490-495,共6页
目的研究富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)及其释放的血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖活性的影响,为其应用于辅助促进牙龈... 目的研究富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)及其释放的血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖活性的影响,为其应用于辅助促进牙龈软组织增量提供实验依据。方法通过组织块培养法分离培养牙龈成纤维细胞,将收集的富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)转化为PRFe,电镜观察PRF三维结构并通过ELISA定量测定PRF中PDGF含量,并将PRFe配比为2.5%PRFe、5%PRFe、7.5%PRFe、10%PRFe、12.5%PRFe、15%PRFe,通过CCK8法检测不同浓度PRFe对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,确定最佳PRFe浓度后,流式细胞周期实验检测PRFe对细胞增殖周期的影响,并通过中和其释放的PDGF,观察PDGF对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响。结果PRF为三维网状结构,其间含有大量的生长因子,其中PDGF释放在第7天达到峰值;不同浓度PRFe对HGFs增殖活性结果显示,HGFs对PRFe呈浓度依赖性,但在5%PRFe浓度时效果最佳(P<0.05),其后浓度增加对HGFs增殖影响差异无统计学差异(P>0.05);流式细胞周期实验结果表明,5%PRFe可以刺激牙龈成纤维细胞S期分裂增殖;而PDGF中和实验结果表明,中和部分PDGF对牙龈成纤维细胞的增殖呈抑制作用。结论5%浓度的PRFe体外促进牙龈成纤维细胞的效果最佳,PRF所释放的PDGF在促进牙龈成纤维细胞的增殖中起着重要作用。 展开更多
关键词 富血小板纤维蛋白提取液 血小板衍生生长因子 牙龈成纤维细胞 细胞增殖 牙龈 软组织增量
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下调G蛋白偶联受体C家族5A表达抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应
9
作者 胡芋含 商玲玲 葛少华 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期344-353,共10页
目的探究下调G蛋白偶联受体C家族5A(GPRC5A)表达对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞(GFs)炎症反应的影响并探索其机制,为深入探讨G蛋白偶联受体(GPCR)在牙周炎中的调控作用及其机制奠定基础。方法于2022年12月至2023年2月在山东大学口腔医... 目的探究下调G蛋白偶联受体C家族5A(GPRC5A)表达对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞(GFs)炎症反应的影响并探索其机制,为深入探讨G蛋白偶联受体(GPCR)在牙周炎中的调控作用及其机制奠定基础。方法于2022年12月至2023年2月在山东大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科、牙周科收集3名牙周健康者(牙周健康组)和3例牙周炎患者(牙周炎组)的牙龈组织,采用免疫组化染色检测两组牙龈组织中GPRC5A的表达。收集健康牙龈组织提取GFs,健康牙龈组织来自2022年12月至2023年2月在山东大学齐鲁医学院口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科招募的6例16~20岁需拔除埋伏阻生齿的患者。应用胶原酶消化法提取并培养GFs,设置30、50和80μmol/L浓度转染GPRC5A小干扰RNA(siGPRC5A)的实验组和阴性对照小干扰RNA(siNC),利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测siGPRC5A的沉默效率;设置阴性对照、脂多糖、siGPRC5A+脂多糖和siGPRC5A 4个组,通过RT-qPCR和蛋白质印迹法分别验证应用siGPRC5A对1 mg/L脂多糖诱导的GFs炎症状态下GPRC5A在基因和蛋白水平的表达;下调GPRC5A表达后,RT-qPCR检测脂多糖诱导的GFs白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因的表达;通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色检测核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况。结果免疫组化结果显示,牙周炎组牙龈组织中GPRC5A表达(0.132±0.006)显著高于牙周健康组(0.036±0.019)(t=8.24,P=0.001)。RT-qPCR结果显示,在脂多糖作用2、6、12和24 h时,脂多糖组GPRC5A基因水平表达量(分别为0.026±0.002、0.042±0.005、0.004±0.000、0.016±0.000)均分别显著高于阴性对照组(分别为0.004±0.000、0.004±0.000、0.002±0.000、0.007±0.000)(均P<0.001),且6 h时达峰值。50μmol/L siGPRC5A(31.16±3.29)与siNC组(100.00±4.88)相比能有效沉默GFs中GPRC5A的表达(F=297.98,P<0.001)。RT-qPCR和蛋白质印 展开更多
关键词 牙周炎 G蛋白偶联受体 G蛋白偶联受体C家族5A 核因子ΚB 炎症因子 牙龈成纤维细胞
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金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎的体外抑菌抗炎作用研究 被引量:1
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作者 陈海鹰 汪龙凤 +2 位作者 林清凡 王伟德 付东杰 《中医药导报》 2023年第2期28-34,共7页
目的:探讨金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎常见致病菌牙龈卟啉单胞菌(Pg)、具核梭杆菌(Fn)的体外抑菌效果,观察金龙胆草醇提取物对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响。方法:以乙醇为提取剂,采用索式... 目的:探讨金龙胆草醇提取物对慢性牙周炎常见致病菌牙龈卟啉单胞菌(Pg)、具核梭杆菌(Fn)的体外抑菌效果,观察金龙胆草醇提取物对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响。方法:以乙醇为提取剂,采用索式提取法、热水浴浸提法和超声辅助提取法对金龙胆草进行提取,冷冻干燥后计算提取率;使用滤纸片扩散法观察提取物对Pg、Fn的抑菌效果;采用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测金龙胆草醇提取物和Pg-LPS、HGF共同培养24 h、48 h对细胞增殖的影响;通过酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))分泌水平;应用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测HGF炎症模型中核因子-кB(NF-кB)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)蛋白表达水平,分析金龙胆草醇提取物对NF-кB信号通路的抑制情况。结果:3种提取方式的金龙胆草提取率比较,超声辅助提取法显著高于索式提取法和热水浴浸提法(P<0.05)。金龙胆草醇提取物对Pg、Fn的最小抑菌浓度分别为20 mg/mL和40 mg/mL,索式提取法的抑菌效果优于超声辅助提取法和热水浴浸提法。干预24、48 h后,10、20、50μg/mL药液组HGF活性与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);100、200、500、1000μg/mL药液组HGF活性显著低于对照组(P<0.05)。干预12、24 h后,Pg-LPS组HGF培养液上清液中TNF-α、IL-1β、PGE_(2)水平均高于对照组(P<0.05);干预12、24 h后,Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组TNF-α水平均低于Pg-LPS组(P<0.05);干预12 h后,Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组IL-1β水平均明显低于Pg-LPS组(P<0.05);干预12、24 h后,Pg-LPS+10μg/mL药液组、Pg-LPS+20μg/mL药液组、Pg-LPS+50μg/mL药液组PGE_(2)水平均低于Pg-LPS组(P<0.05)。干预12、24 h后,Pg-LPS组HGF中NF-κB、MMP-1蛋白相对表达量均高于对照组(P 展开更多
关键词 慢性牙周炎 金龙胆草 醇提取物 牙龈卟啉单胞菌 体外抑菌 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 牙龈成纤维细胞 炎症 NF-кB
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Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙龈成纤维细胞和牙周韧带细胞中表达的比较研究 被引量:1
11
作者 王燕 汪说之 +2 位作者 樊明文 杨丕山 李纾 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2003年第3期183-186,共4页
目的比较人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞在胶原基质合成方面的差别,并探讨其意义。方法采用组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞,利用免疫细胞化学技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原在两种细胞中的表达,通过图像分析探讨其表达的差异... 目的比较人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞在胶原基质合成方面的差别,并探讨其意义。方法采用组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞,利用免疫细胞化学技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原在两种细胞中的表达,通过图像分析探讨其表达的差异。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙周韧带细胞中表达阳性,在牙龈成纤维细胞中染色较弱。统计学分析显示,Ⅰ、Ⅲ型胶原在牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞的免疫细胞化学染色结果具有显著性差异(P<0.01)。结论牙龈成纤维细胞与牙周韧带细胞胶原基质的合成或分泌存在差异,这种差异可作为鉴别两种细胞的标志之一。 展开更多
关键词 牙周韧带细胞 牙龈成纤维细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性 被引量:1
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作者 石俊 关振群 +1 位作者 王训霞 张为新 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期365-370,共6页
目的 探讨牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。方法 选取阻生齿拔除患者10例,取其周围正常牙龈组织作为研究样本,分析牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。结果 人牙龈成纤维细胞有突起,胞体呈纺锤形或梭形,存在明显细胞轮廓... 目的 探讨牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。方法 选取阻生齿拔除患者10例,取其周围正常牙龈组织作为研究样本,分析牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性。结果 人牙龈成纤维细胞有突起,胞体呈纺锤形或梭形,存在明显细胞轮廓,核呈卵圆形,细胞体及细胞核均较大,有明显核仁,着色浅;人牙龈成纤维细胞经染色显示为vimentin表达阳性,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、人微管相关蛋白(MAP)-2表达阴性;神经样细胞呈三角形或星形,存在3个及以上突起,细胞核变圆,突起细长,出现轴突样和树突样结构,且互相连接,呈现网状结构;经染色显示神经样细胞为vimentin表达、GFAP表达、MAP-2表达均为阳性;诱导组乙酰胆碱及多巴胺含量均明显高于对照组(均P<0.05),诱导组乙酰胆碱及多巴胺浓度均明显高于对照组(均P<0.05)。结论 对牙龈成纤维细胞进行诱导处理可获得神经样细胞,诱导后细胞不仅具有神经细胞结构、形态,同样具有神经细胞的分泌功能,分泌大量的乙酰胆碱及多巴胺等神经递质。 展开更多
关键词 神经细胞 牙龈成纤维细胞 诱导分化 多巴胺 乙酰胆碱
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破骨细胞分化因子和破骨细胞生长抑制因子在牙周组织细胞中的表达 被引量:5
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作者 宋红 马秦 陈永进 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期710-714,共5页
目的:检测炎症前细胞因子IL-1β和骨成熟因子PGE2对人牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞破骨细胞分化因子(osteoclastdifferentiation factor,ODF)和破骨细胞生长抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF)表达的影响。方法:用RT-... 目的:检测炎症前细胞因子IL-1β和骨成熟因子PGE2对人牙周膜细胞和牙龈成纤维细胞破骨细胞分化因子(osteoclastdifferentiation factor,ODF)和破骨细胞生长抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF)表达的影响。方法:用RT-PCR和Southern-blot对该2种细胞在IL-1β或PGE2作用下细胞中ODF和OCIF mRNA的表达进行半定量。结果:上述2种细胞在IL-1β或PGE2作用下,ODF和OCIF的合成均有升高,各细胞合成ODF和OCIF的峰值随IL-1β或PGE2作用时间和浓度的不同而发生变化。结论:牙周组织中ODF和OCIF可能同时参与炎症反应,并受致炎因子IL-1β和骨代谢因子PGE2调节。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 牙龈细胞 破骨细胞分化因子 破骨细胞生长抑制因子
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表没食子儿茶素没食子酸酯对牙龈卟啉单胞菌细菌毒力抑制作用的体外研究 被引量:4
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作者 齐霞 孔令雪 +3 位作者 李淑娟 马思婷 齐雅丽 赵蕾 《口腔疾病防治》 2021年第5期314-321,共8页
目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin⁃3⁃gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por⁃phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi⁃val fibroblasts,HGFs)表达基质... 目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin⁃3⁃gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por⁃phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi⁃val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用。方法采用微量稀释法分析EGCG对P.gingivalis浮游菌和生物膜的抑制作用。扫描电镜检测EGCG作用下P.gingivalis生物膜微观结构的变化。特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi⁃nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响。P.gingi⁃valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP⁃1和MMP⁃2的蛋白分泌水平,qRT⁃PCR检测MMP⁃1及MMP⁃2 mRNA的表达。结果EGCG对P.gingivalis浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL。EGCG可抑制P.gingivalis生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性。10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05)。此外,50μg/mL EGCG对P.gingivalis刺激HGFs表达及分泌MMP⁃1、MMP⁃2均有抑制作用(P<0.05)。结论EGCG对P.gingivalis有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 牙龈卟啉单胞菌 生物膜形成 生物膜清除 精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 抗菌 抗炎 牙龈成纤维细胞 基质金属蛋白酶
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不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对牙龈成纤维细胞表达白细胞介素-8的影响 被引量:3
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作者 赵蕾 吴亚菲 +2 位作者 杨禾 欧阳玉玲 孟姝 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期613-616,共4页
目的:研究不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对人牙龈成纤维细胞表达IL-8的影响,探讨fimA基因型与Pg致病力差异之间的关系。方法:PgATCC 33277(Ⅰ型),WCSP115(Ⅱ型),WCSP1.5(Ⅲ型),W83(Ⅳ型)分别... 目的:研究不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对人牙龈成纤维细胞表达IL-8的影响,探讨fimA基因型与Pg致病力差异之间的关系。方法:PgATCC 33277(Ⅰ型),WCSP115(Ⅱ型),WCSP1.5(Ⅲ型),W83(Ⅳ型)分别与牙龈成纤维细胞在标准条件下共同孵育,于孵育后1、3、6、12 h收集细胞和上清,应用实时荧光定量RT-PCR和ELISA法分别检测牙龈成纤维细胞IL-8 mRNA和蛋白的动态表达。结果:与对照组比较,各fimA型Pg对牙龈成纤维细胞IL-8mRNA和蛋白的表达均有明显的促进作用(P<0.01);其中ⅡfimA型组IL-8 mRNA和蛋白的表达量明显高于其它fimA型组,不同时间点IL-8 mRNA相对表达量分别为20.42±2.21~103.01±12.50,蛋白分泌水平为(137.46±4.97~323.24±13.74)pg/ml;而ⅢfimA型Pg组的表达水平弱于其它fimA型组,IL-8 mRNA相对表达量为3.61±0.39~12.88±1.56,蛋白分泌水平为(44.83±3.68~189.19±87.34)pg/ml,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:Pg可促进牙龈成纤维细胞IL-8mRNA和蛋白的表达,且各fimA型Pg的促进作用有所差异。提示:fimA基因型的不同可能是pg的致病力差异的基因基础。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 fimA基因 牙龈成纤维细胞 白细胞介素-8
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两种培养液对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响 被引量:4
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作者 钟泉 闫福华 李艳芬 《医学研究杂志》 2010年第8期42-45,142,共5页
目的探讨两种常见培养液:DMEM和RPMI1640对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用半消化+改良组织块法原代培养Beagle犬牙龈成纤维细胞,了解两种培养液下Beagle犬牙龈成纤维细胞游出成功率的差异;使用MTT、流式细胞仪检测... 目的探讨两种常见培养液:DMEM和RPMI1640对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用半消化+改良组织块法原代培养Beagle犬牙龈成纤维细胞,了解两种培养液下Beagle犬牙龈成纤维细胞游出成功率的差异;使用MTT、流式细胞仪检测两种培养液下细胞增生的情况;使用免疫细胞化学的方法检测两种培养液下Beagle犬牙龈成纤维细胞体外表达Ⅰ型胶原的差异。结果 DMEM和RPMI1640对Beagle犬牙龈成纤维细胞的游出成功率、增生以及Ⅰ型胶原的表达均无显著性差异。结论 DMEM和RPMI1640两种培养液均适合Beagle犬牙龈成纤维细胞的培养。 展开更多
关键词 DMEM RPMI 1640牙龈成纤维细胞 生物学活性
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碱性成纤维细胞生长因子基因修饰的组织工程化复合物促进牙龈组织再生实验研究 被引量:2
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作者 陈欣戬 钟泉 +2 位作者 赵欣 骆凯 闫福华 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2011年第10期602-605,共4页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的组织工程化复合物对牙龈组织缺损再生的影响。方法本研究于2007年7月至2009年1月在福建省高校口腔医学重点实验室进行。利用bFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的组织工程化复合物对牙龈组织缺损再生的影响。方法本研究于2007年7月至2009年1月在福建省高校口腔医学重点实验室进行。利用bFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过对治疗前后牙周指标测量分析,评价该组织工程化复合物对牙龈组织再生的影响。结果实验前后附着丧失差值测定显示GFs与ADM复合物组及转染bFGF基因的GFs复合物组之间无显著性差异,与空白对照组相比均有明显增加(P<0.05)。角化龈宽度差值,6周时转染基因组有明显增加,12周时两实验组均比空白对照组明显增加(P<0.05)。结论复合GFs的ADM可能有助于改善附着丧失的程度及角化龈宽度,而bFGF的作用并不肯定。组织工程技术能有效促进牙龈组织再生。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 牙龈成纤维细胞 脱细胞真皮基质 附着丧失 角化龈宽度
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姜黄素对环孢素A诱导激活的大鼠牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3通路的抑制作用 被引量:2
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作者 王震 孙扬 +1 位作者 陈佳露 龚逸明 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期359-364,共6页
目的:体外实验研究姜黄素(curcumin,Cur)对环孢素A(cyclosporine A,CsA)作用大鼠牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3通路的影响,为进一步探讨Cur抑制CsA所致药物性牙龈增生的发生机制提供理论依据。方法:使用CCK-8法观察0、5、10、20、30μmol... 目的:体外实验研究姜黄素(curcumin,Cur)对环孢素A(cyclosporine A,CsA)作用大鼠牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3通路的影响,为进一步探讨Cur抑制CsA所致药物性牙龈增生的发生机制提供理论依据。方法:使用CCK-8法观察0、5、10、20、30μmol/L Cur对大鼠牙龈成纤维细胞增殖的影响,20μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用对大鼠牙龈成纤维细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测20μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用下,牙龈成纤维细胞中转化生长因子TGF-β1、Smad3、平滑肌肌动蛋白α-SMA和I型胶原蛋白COL-I的mRNA表达变化;蛋白免疫印迹实验检测TGF-β1、Smad3、p-Smad3、α-SMA和COL-I的蛋白表达变化。细胞划痕实验观察20μmol/L Cur+200 ng/mL CsA对牙龈成纤维细胞迁移能力的影响。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计学分析。结果:大鼠牙龈成纤维细胞在20μmol/L Cur+200 ng/mL CsA共同作用下,细胞增殖和迁移能力明显降低;20μmol/L Cur显著下调了牙龈成纤维细胞中TGF-β1、α-SMA和COL-I的m RNA表达,蛋白免疫印迹实验提示,TGF-β1、p-Smad3、α-SMA和COL-I的表达同样显著下调。结论:Cur可能通过抑制CsA激活的牙龈成纤维细胞TGF-β1/Smad3信号通路,从而降低牙龈成纤维细胞增殖、迁移、平滑肌肌动蛋白和胶原分泌,改善牙龈增生。 展开更多
关键词 姜黄素 环孢素A 牙龈成纤维细胞 TGF-Β1 SMAD3 牙龈增生
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浓缩生长因子纤维蛋白治疗牙龈退缩疗效评价及对牙龈成纤维细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 李敏慧 江烨 杨雪超 《中国美容医学》 CAS 2020年第12期106-108,共3页
目的:探讨浓缩生长因子纤维蛋白(Concentrated growth factor fibrin,CGF)治疗牙龈退缩的效果及对牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblast,HGF)增殖的影响。方法:选择2018年6月-2019年6月笔者医院收治的30例牙龈退缩患者为研究对象,... 目的:探讨浓缩生长因子纤维蛋白(Concentrated growth factor fibrin,CGF)治疗牙龈退缩的效果及对牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblast,HGF)增殖的影响。方法:选择2018年6月-2019年6月笔者医院收治的30例牙龈退缩患者为研究对象,采集患者静脉血制备CGF膜,将CGF膜固定于术区进行治疗,观察术前及术后6个月的牙周袋深度(Pocket depth,PD)、退缩高度(Heigh of recession,HR)、角化龈宽度(Keratinized mucosa width,KMW)、红色美学评分(Pink aesthetic score,PES)和白色美学评分(White aesthetics score,WES)。取正常牙龈组织,采用贴壁法传代培养成HGF,在电镜下观察CGF膜上HGF的黏附情况,采用CCK-8法检测HGF的增殖情况。结果:与术前比较,术后6个月患者的PD[(2.89±0.57)mm vs(2.58±0.36)mm]、KMW[(3.99±0.68)mm vs(3.55±0.64)mm]、PES[(7.42±1.63)分vs(2.80±0.59)分]、WES[(7.90±1.74)分vs(2.77±0.55)分]均明显增高(P<0.05),HR[(1.95±0.56)mm vs(2.97±0.48)mm]明显降低(P<0.05)。通过电镜能够清晰看到HGF呈层层黏附于CGF膜上;HGF的增殖检测结果显示,培养1d、4d、7d时,CGF组的OD值[(0.54±0.08)vs(0.34±0.07)]、[(0.85±0.12)vs(0.55±0.14)]、[(1.13±0.30)vs(0.66±0.18)]均明显高于对照组(P<0.05)。结论:CGF治疗牙龈退缩的临床效果及美学效果均显著,能够明显促进HGF的黏附、生长和增殖。 展开更多
关键词 牙龈退缩 浓缩生长因子纤维蛋白 美学 牙龈成纤维细胞 增殖
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大黄素对内毒素诱导的牙龈成纤维细胞ROS/MAPK/AP-1通路及炎性因子表达的影响 被引量:2
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作者 杨桂梅 孙玉梅 +1 位作者 颜淑云 郭玮 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期359-363,共5页
目的:探讨大黄素对内毒素(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞HGF-1炎性因子及活性氧/丝裂原活化蛋白激酶/活化蛋白1(ROS/MAPK/AP-1)通路的影响。方法:将HGF-1细胞分为对照组、LPS组(800μg/L)、大黄素组(60μmol/L)、ROS诱导剂组(ROS诱导剂)... 目的:探讨大黄素对内毒素(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞HGF-1炎性因子及活性氧/丝裂原活化蛋白激酶/活化蛋白1(ROS/MAPK/AP-1)通路的影响。方法:将HGF-1细胞分为对照组、LPS组(800μg/L)、大黄素组(60μmol/L)、ROS诱导剂组(ROS诱导剂)、大黄素+ROS诱导剂组。细胞经相应分组处理后,检测细胞活力、炎性因子及RPS/MAPK/AP-1通路蛋白表达水平。结果:与对照组相比,LPS组HGF-1细胞活力降低,炎症因子、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)表达水平、ROS含量、ROS/MAPK/AP-1通路相关蛋白表达水平升高,超氧化物歧化酶(SOD)表达水平降低;与LPS组相比,大黄素组HGF-1细胞活力升高,炎症因子、MDA、LDH表达水平、ROS含量、ROS/MAPK/AP-1通路相关蛋白表达水平降低,SOD表达水平显著升高。结论:大黄素可抑制LPS诱导的牙龈成纤维细胞炎性反应可能是通过抑制ROS/MAPK/AP-1通路实现的。 展开更多
关键词 大黄素 内毒素 牙龈成纤维细胞 炎性 活性氧/丝裂原活化蛋白激酶/活化蛋白1
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