DNA芯片技术用于贝母的基因分型和种类鉴别(英文) 被引量：37

1

作者 蔡佩欣 胡学善 +4 位作者 黄文秀 陈士林 方宏勋 肖培根 杨梦苏 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期185-190,共6页

目的　通过对贝母几个种遗传多态性的研究来开发在分子水平上用于鉴别贝母基因型及不同种类的DNA芯片技术。方法　用PCR扩增法和DNA直接测序法确定核苷酸多态性 ,用DNA芯片进行基因检测。结果　首先提取来自多种贝母根茎的基因组DNA ,对... 目的　通过对贝母几个种遗传多态性的研究来开发在分子水平上用于鉴别贝母基因型及不同种类的DNA芯片技术。方法　用PCR扩增法和DNA直接测序法确定核苷酸多态性 ,用DNA芯片进行基因检测。结果　首先提取来自多种贝母根茎的基因组DNA ,对 2 6SrDNA基因D2与D3区的多态性片段进行扩增和测序 ,然后将不同种属多态性片段的特异性寡核苷探针点置于经多聚赖氨酸处理包被的芯片。用来自不同种贝母的荧光素标记的PCR产物与DNA芯片进行杂交 ,可在芯片特定位置检测到不同种贝母的荧光信号。结论　本研究显示DNA芯片技术可为植物种属的验证与质量控制提供一种快速。 展开更多

关键词 DNA芯片 基因型检测 贝母 种类鉴别

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市售酸奶中乳酸菌的鉴定与耐药性 被引量：26

2

作者 秦宇轩 李晶 +3 位作者 王秋涯 高可心 朱宝利 律娜 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期889-897,共9页

【目的】检测市售酸奶中乳酸菌的种类及其耐药情况。【方法】收集10种来自5个不同厂家的酸奶,通过细菌基因组重复基因外回文序列-PCR(repetitive extragenic palindromic-PCR,rep-PCR)结合16S rRNA同源性分析的方法对分离的乳酸菌进行... 【目的】检测市售酸奶中乳酸菌的种类及其耐药情况。【方法】收集10种来自5个不同厂家的酸奶,通过细菌基因组重复基因外回文序列-PCR(repetitive extragenic palindromic-PCR,rep-PCR)结合16S rRNA同源性分析的方法对分离的乳酸菌进行基因分型和菌种鉴定。利用药敏纸片扩散法(K-B法)对分离的乳酸菌进行针对7种抗生素的药敏实验,用PCR特异性扩增结合测序的方法检测每个样品中不同基因型菌株的耐药基因(包括红霉素耐药基因erm A、erm B和四环素耐药基因tet M、tet K、tet S、tet Q、tet O、tet L、tet W)。【结果】10种市售酸奶中分离到100株乳酸菌。其中,德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii ssp.bulgaricus)23株,干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)26株,嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)30株,嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)5株,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)6株,副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)10株。药敏实验发现所有100株乳酸菌均对链霉素和庆大霉素耐药,42株对万古霉素耐药,没有菌株对头孢氨苄,四环素,红霉素以及土霉素耐药。在28株经过16S rRNA测序的乳酸菌中检测到5种不同的耐药基因,在8株乳酸菌中检测到erm B基因,4株检测到tet K基因,2株菌检测到tet L基因,4株菌检测到tet M基因,2株菌检测到tet O基因,没有检测到erm A,tet S,tet Q,tet W基因。28株乳酸菌中有15株(53.57%)检测到耐药基因,其中有4株L.delbrueckii ssp.bulgaricus检测到2-3种不同的耐药基因。【结论】本研究在市售酸奶中除了检测到商品标签上标注的L.delbrueckii ssp.bulgaricus和S.thermophilus以外,还检测到商标上没有标注的乳酸菌;作为常用发酵剂的德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜热链球菌更容易检测到耐药基因;分离得到的乳酸菌均对红霉素和四环素敏感却检测到相应的耐药基因,再一次证明了没有耐药表型的菌株也可能携带耐药基因� 展开更多

关键词 酸奶 乳酸菌 基因分型 分子鉴定 耐药基因

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肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

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作者 王语涵 许雅萍 +6 位作者 李南 陈婷婷 李玲 高萍萍 王华 魏伟 孙妩弋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期189-194,共6页

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/... 目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/fl))和Lrat-Cre工具鼠进行多次繁殖,建立肝星状细胞特异性Grk2基因敲除(Grk2^(ΔHSC))小鼠模型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况;通过PCR反应鉴定flox和Cre基因型;免疫荧光双染检测肝星状细胞中GRK2表达;Western blot检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏组织中GRK2蛋白表达;HE染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾脏组织学形态。结果成功鉴定Grk2^(ΔHSC)小鼠基因型;两组小鼠体质量、繁殖能力无明显差异;免疫荧光双染及Western blot结果表明,Grk2^(ΔHSC)小鼠的肝星状细胞中GRK2蛋白水平明显低于对照组小鼠,Grk2^(ΔHSC)小鼠肺、脾、肾脏和心脏组织中GRK2蛋白表达与对照组相比无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(ΔHSC)小鼠肝脏及主要组织结构与Grk2^(fl/fl)相比差异无显著性,可用于后续研究。结论本研究应用Cre-loxP技术成功构建了肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠,为进一步研究GRK2在肝脏中的作用提供了优良工具。 展开更多

关键词 G蛋白偶联受体激酶2 Cre-loxP重组酶系统 细胞特异性敲除 肝星状细胞 基因鉴定 繁育

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新疆南疆某规模肉牛场牛轮状病毒G6P[5]型基因型鉴定及分析 被引量：2

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作者 赵颖婕 张伟 +2 位作者 冷婧 王宏图 胡建军 《现代畜牧兽医》 2023年第5期1-4,共4页

研究旨在查明新疆南疆某规模肉牛场犊牛感染轮状病毒基因类型,掌握南疆地区犊牛轮状病毒分子流行病学特征。试验采集了该场犊牛腹泻粪便样本,以轮状病毒VP7、VP4特异性引物进行RT-PCR检测,选取阳性样本接种于MA104细胞,进行病毒分离和... 研究旨在查明新疆南疆某规模肉牛场犊牛感染轮状病毒基因类型,掌握南疆地区犊牛轮状病毒分子流行病学特征。试验采集了该场犊牛腹泻粪便样本,以轮状病毒VP7、VP4特异性引物进行RT-PCR检测,选取阳性样本接种于MA104细胞,进行病毒分离和鉴定。结果显示:选取阳性样品盲传5代后出现细胞病变;以细胞培养液样本提取的RNA产物作为模板,以VP7-F和VP7-R、VP4-F和VP4-R为引物进行RT-PCR检测均可得到对应片段;以PCR产物为模板,上游引物为VP7-F,下游引物为VP7-F/G6-R可扩增出500 bp大小的目的基因片段。经轮状病毒VP7、VP4基因特异性引物的RT-PCR鉴定并测序分析,表明该分离株为G6P[5]型轮状病毒。 展开更多

关键词 轮状病毒 基因分型 分离鉴定 RT-PCR

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直接扩增法用于重大灾难事故中软骨的个体识别 被引量：5

5

作者 王传海 徐程 +2 位作者 李湘秦 吴勇 杜舟 《法医学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期281-283,共3页

目的探讨直接扩增法对软骨STR检验的有效性,以提高灾难受害者身源鉴定工作效率。方法采用Power Plex~21试剂盒对88份软骨进行直接扩增法检验,同步进行磁珠法比较分型结果。结果 88份软骨检材中,直接扩增法与磁珠法均成功检出84份检材... 目的探讨直接扩增法对软骨STR检验的有效性,以提高灾难受害者身源鉴定工作效率。方法采用Power Plex~21试剂盒对88份软骨进行直接扩增法检验,同步进行磁珠法比较分型结果。结果 88份软骨检材中,直接扩增法与磁珠法均成功检出84份检材的STR基因型,两者分型结果完全一致。结论Power Plex~21试剂盒直接扩增法可以应用于软骨STR分型检验,且操作简便、快速,在重大灾难事故身源鉴定中具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 法医遗传学 软骨 基因分型技术 直接扩增法 个体识别

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高原娟姗牛β-酪蛋白A2纯合基因型的筛选鉴定 被引量：1

6

作者 唐运萍 伏蓉 +6 位作者 李会民 孙蕊仙 司华新 王婧羽 杨发光 丁立 隋世燕 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第6期21-26,共6页

为了筛选出A2A2基因型娟姗牛,组建A2型奶牛育种核心群,为A2牛奶的开发应用奠定基础。从云南欧亚乳业公司鹤庆有机牧场核心群选取385头娟姗牛进行尾静脉采血,提取血液中基因组DNA,检测浓度和纯度后,将提取的DNA进行PCR扩增并送公司测序,... 为了筛选出A2A2基因型娟姗牛,组建A2型奶牛育种核心群,为A2牛奶的开发应用奠定基础。从云南欧亚乳业公司鹤庆有机牧场核心群选取385头娟姗牛进行尾静脉采血,提取血液中基因组DNA,检测浓度和纯度后,将提取的DNA进行PCR扩增并送公司测序,同时对血清中β-酪蛋白的含量进行检测。经不同公司各自使用不同引物进行检测,结果一致。在所有娟姗牛中,检测到3种基因型:A2A2基因型198头、A1A1基因型29头、A1A2基因型158头;3种基因型奶牛分别占51.43%、7.53%和41.04%,A2基因频率达71.95%。娟姗牛β-酪蛋白的平均含量为5.58μg/mL,A2A2型和A1A2型奶牛的β-酪蛋白含量均显著低于A1A1型奶牛(P<0.05),但是A2A2型和A1A2型奶牛之间则无统计学差异(P>0.05)。结果表明,通过DNA测序检测突变位点核苷酸能够鉴定出A2A2基因型娟姗牛,β-酪蛋白含量测定不能分辨出A2A2型和A1A2型娟姗牛。与ELISA蛋白检测方法相比,DNA测序法具有快速准确、成本较低等优点,可作为牛群分型的理想方法。 展开更多

关键词 高原娟姗牛 Β-酪蛋白 A2基因型 基因分型 鉴定

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禽肉中弯曲菌的分离、PFGE和DGGE分型 被引量：3

7

作者 孟赫诚 毕水莲 +1 位作者 闫鹤 石磊 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期149-154,共6页

随机选取某肉菜市场8份鸡肉和鸭肉样品中的弯曲菌(Campylobacter),分别采用Bolton和Preston肉汤增菌,然后以Skirrow、mCCDA选择分离培养和膜过滤的方法同时分离,运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和变性梯度凝胶电泳(DGGE)对分离出的菌株进行分... 随机选取某肉菜市场8份鸡肉和鸭肉样品中的弯曲菌(Campylobacter),分别采用Bolton和Preston肉汤增菌,然后以Skirrow、mCCDA选择分离培养和膜过滤的方法同时分离,运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和变性梯度凝胶电泳(DGGE)对分离出的菌株进行分子水平的分型和溯源.结果表明:共有6份样品污染了空肠弯曲菌(C.jejuni)或结肠弯曲菌(C.coli);Preston肉汤增菌、mCCDA选择分离培养法的分离效果最好;4份样品被同一种C.coli污染,2份样品分别污染了2种C.jejuni和3种C.coli;与PFGE相比,DGGE分型方法的灵敏度略低,但更快速、成本更低,且稳定、准确,可用于食品中弯曲菌的快速分型. 展开更多

关键词 弯曲菌 分离 分型 脉冲场凝胶电泳 变性梯度凝胶电泳

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奶牛A1/A2-β-酪蛋白等位基因型检测方法研究进展 被引量：1

8

作者 黄萌 李红宇 +9 位作者 刘文 姜兴刚 赵文江 郭春晖 李旭业 王德香 王树茂 邵广 阿晓辉 贾斌 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期34-42,共9页

奶牛A1/A2-β-酪蛋白等位基因型决定了其所产牛奶的类型。A2奶的成分因更接近母乳广受市场欢迎。A1/A2-β-酪蛋白等位基因分型检测在A2基因型奶牛分群饲养、选育及交易等过程中具有重要作用,对A2奶牛养殖具有重要意义。文章就目前已报... 奶牛A1/A2-β-酪蛋白等位基因型决定了其所产牛奶的类型。A2奶的成分因更接近母乳广受市场欢迎。A1/A2-β-酪蛋白等位基因分型检测在A2基因型奶牛分群饲养、选育及交易等过程中具有重要作用,对A2奶牛养殖具有重要意义。文章就目前已报道的用于鉴别奶牛A1/A2等位基因型的聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCR-RFLP)、等位基因特异性PCR(AS-PCR)、TaqMan探针法、rhAmp法和高分辨率熔解曲线分析法(HRM分析法)进行总结,分析各种方法的优劣势及适用性,旨在为奶牛A1/A2等位基因型鉴别方法的选择和新方法的研发提供科学依据和理论参考。 展开更多

关键词 奶牛 Β-酪蛋白 等位基因 基因型检测 鉴别方法

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血浆游离DNA的STR分型检测研究 被引量：2

9

作者 陈阳 胡利平 +2 位作者 马波 马立宇 聂胜洁 《昆明医科大学学报》 CAS 2014年第1期140-143,共4页

目的探讨利用血浆中游离DNA进行短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型检测,解决法医学个体识别和亲权鉴定问题的可行性.方法采集36例无关健康个体EDTA-Na2抗凝血样,分离血浆,采用经典酚-氯仿法分别处理血浆和血细胞,对提取的DN... 目的探讨利用血浆中游离DNA进行短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型检测,解决法医学个体识别和亲权鉴定问题的可行性.方法采集36例无关健康个体EDTA-Na2抗凝血样,分离血浆,采用经典酚-氯仿法分别处理血浆和血细胞,对提取的DNA进行15个STR基因座常规PCR扩增和荧光标记复合扩增,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳检测2种STR分型方法进行检测.结果常规PCR扩增银染检测和荧光标记复合扩增毛细管电泳检测两种STR分型方法的结果表明,同一个体的血浆游离DNA和血细胞DNA STR分型一致,且分型效果接近.结论血浆游离DNA可作为一种有效的生物学样本进行STR分型检测,应用于法医个体识别和亲权鉴定. 展开更多

关键词 血浆 STR分型 个体识别 亲权鉴定

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应用Cre-loxP系统构建肝组织特异性ATF5基因敲除小鼠模型 被引量：1

10

作者 白思益 陈会 +3 位作者 帕梅拉·帕尔哈提 邓晴 朱建伟 袁运生 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1609-1614,共6页

应用Cre-loxP重组酶系统构建肝组织特异性ATF5基因敲除小鼠(ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-))模型。采用Alb-Cre工具鼠,用带有Cre-loxP系统的ATF5 Flox纯合子小鼠(ATF5^(Flox/Flox))和带有Alb-Cre杂合子(Alb-Cre^(+/-))的转基因小鼠进... 应用Cre-loxP重组酶系统构建肝组织特异性ATF5基因敲除小鼠(ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-))模型。采用Alb-Cre工具鼠,用带有Cre-loxP系统的ATF5 Flox纯合子小鼠(ATF5^(Flox/Flox))和带有Alb-Cre杂合子(Alb-Cre^(+/-))的转基因小鼠进行杂交,对产生的子代利用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)进行基因型鉴定。筛选出子代ATF5^(Flox/-)-Alb-Cre^(+/-)小鼠,其与ATF5^(Flox/Flox)小鼠进一步交配可获得ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-)小鼠,该基因型小鼠的肝细胞基因组中ATF5的外显子缺失。选取雌性、7~8周龄的ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(+/-)和ATF5^(Flox/Flox)-Alb-Cre^(-/-)小鼠各3只,采用实时荧光定量PCR测定ATF5在肝、肾、心和脑组织中的表达量,并采用常规苏木精-伊红(HE)染色,观察2种小鼠各脏器的组织形态。结果表明,该系统可实现ATF5在肝脏中的特异性敲除,敲除效率可达到97%。此外,2种小鼠的肝、肾、肺、心和脑组织形态无明显改变,可为研究ATF5在肝脏中的生物学功能提供体内模型参考。 展开更多

关键词 转录激活因子5 Cre-loxP重组酶系统 组织特异性敲除 基因型鉴定

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血管紧张素Ⅱ2型受体基因敲除小鼠的构建、繁育和基因型鉴定

11

作者 蒋吉 胡姗姗 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1236-1240,共5页

目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠... 目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)对鼠尾基因型进行鉴定。F1代Agtr2^(-/-)小鼠由F0代Agtr2^(-/-)小鼠性成熟后与同窝野生型小鼠交配而得。PCR鉴定结果的可靠性则通过Western blot从蛋白水平上加以验证。结果利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠并对所获小鼠进行繁育和基因型鉴定,得到了Agtr2+/+、Agtr2+/-、Agtr2^(-/-)3种基因型稳定的Agtr2基因小鼠。Western blot检测结果证实Agtr2^(-/-)小鼠心脏、脾脏、胸腺、肝脏及肾脏组织中几乎不表达Agtr2蛋白。结论成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠模型,并通过可靠的鉴定方法和合适的繁育手段得到纯合Agtr2^(-/-)小鼠。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ2型受体 CRISPR/Cas9 基因敲除 聚合酶链式反应 琼脂糖凝胶电泳 基因型鉴定

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KASP标记技术在主要农作物中的应用及展望 被引量：22

12

作者 杨青青 唐家琪 +2 位作者 张昌泉 高继平 刘巧泉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期58-71,共14页

随着基因测序技术的发展,植物基因组数据越来越丰富,其中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)数据由于具有高密度、高通量和易于自动化分析等特点而被广泛用于分子标记的开发和应用。竞争性等位基因特异性PCR(kompeti... 随着基因测序技术的发展,植物基因组数据越来越丰富,其中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)数据由于具有高密度、高通量和易于自动化分析等特点而被广泛用于分子标记的开发和应用。竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele-specific PCR,KASP)技术是近些年来发展起来的一种主要基于SNP的高通量基因分型技术。该技术由于其高通量、低成本和可操作性强等优点而在农作物性状改良等领域具有很大的应用潜力。本文介绍了KASP技术的发展、原理和方法步骤,综述了该技术在主要农作物的种质资源鉴定、分子标记辅助育种、基因定位和种子纯度鉴定等遗传育种中的应用,并讨论了该技术的优缺点,以期为今后农作物育种研究提供参考依据。 展开更多

关键词 KASP 高通量基因分型 遗传鉴定 分子育种 农艺性状改良

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基因分型技术在肿瘤患者ABO疑难血型鉴定中的应用 被引量：12

13

作者 胡俊华 李喜莹 +4 位作者 张芃 刘燕明 赵学彬 田胜辰 宫济武 《中国输血杂志》 CAS 2019年第4期342-346,共5页

目的探讨基因分型技术辅助肿瘤患者ABO疑难血型的鉴定以有效避免疾病干扰。方法采用血清学方法与序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)法、基因测序技术,对于20例ABO血型正反定型不符的肿瘤患者(其中10名为血液系统恶性肿瘤患者)疑... 目的探讨基因分型技术辅助肿瘤患者ABO疑难血型的鉴定以有效避免疾病干扰。方法采用血清学方法与序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)法、基因测序技术,对于20例ABO血型正反定型不符的肿瘤患者(其中10名为血液系统恶性肿瘤患者)疑难标本做鉴定;同时对这些患者的输血效果做回顾性分析。结果本组肿瘤患者的疑难血型标本中,25%(5/20)为A和(或)B抗原减弱,原发病分别为2例MDS、1例前列腺癌,2例AL;45%(9/20)A或B抗体减弱,分别为4例原发病为MM、1例WM、1例AGL、1例肝癌、1例右半结肠癌、1例食管癌;30%(6/20)为ABO亚型:1例Bel09/O02、1例B(A)04/O2、1例B(A)02/B、2例Bel03/O;1例为新的A亚型等位基因:测序结果为797位置发生突变,根据其他位点的突变判断具有A102/O01特点。基因型和血清学表型结果一致率75%(15/20)。60%(12/20)患者接受过输血治疗,均未发生溶血性输血反应,75%(9/12)患者达到了预期输血疗效。结论基因分型技术结合血清学方法应用于肿瘤患者ABO疑难血型鉴定结果准确,且可正确区分血型抗原抗体减弱或亚型。疾病导致ABO抗原抗体减弱的患者输血时可同型输血。 展开更多

关键词 ABO血型 基因分型 疑难血型鉴定 基因测序 肿瘤患者 抗原抗体减弱 ABO亚型

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42例疑难ABO血型的血清学与基因分型 被引量：9

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作者 马晓莉 刘丹 +3 位作者 金新莉 耿明璐 王丽萍 刘佳璇 《中国输血杂志》 CAS 2020年第12期1245-1247,共3页

目的探讨疑难ABO标本的血清学及分子生物学机制。方法用血清学的分析鉴定ABO疑难标本,同时做基因测序分析鉴定血型。结果 42例疑难标本中,A亚型5例、B亚型3例、AB亚型2例、cisAB 6例、B(A)7例、A抗原性减弱9例、B抗原性减弱8例、AB抗原... 目的探讨疑难ABO标本的血清学及分子生物学机制。方法用血清学的分析鉴定ABO疑难标本,同时做基因测序分析鉴定血型。结果 42例疑难标本中,A亚型5例、B亚型3例、AB亚型2例、cisAB 6例、B(A)7例、A抗原性减弱9例、B抗原性减弱8例、AB抗原性减弱2例,其中亚型种类为A2、A3、Ael、Bel、AxB和ABw。结论血清学方法对疑难ABO血型的鉴定存在局限性,结合基因分型技术可以准确定型血型,确保输血安全。 展开更多

关键词 基因分型 疑难血型 血型血清学 血型鉴定

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15例ABO疑难血型基因检测分析 被引量：7

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作者 胡俊华 聂志扬 +3 位作者 张芃 赵学彬 李喜莹 宫济武 《北京医学》 CAS 2019年第2期146-150,共5页

目的利用ABO血型基因分型技术辅助疑难血型的鉴定。方法收集2016年4月至2018年6月北京医院15例血型正反定型不符患者的外周静脉血样,应用血型血清学方法结合聚合酶链反应-特异性序列引物(polymerasechain reaction-sequence specific pr... 目的利用ABO血型基因分型技术辅助疑难血型的鉴定。方法收集2016年4月至2018年6月北京医院15例血型正反定型不符患者的外周静脉血样,应用血型血清学方法结合聚合酶链反应-特异性序列引物(polymerasechain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP)法进行ABO基因分型,并对其中7例做基因测序确定基因型。结果15例疑难血型的ABO基因分布为1例A/B、1例A/O2、3例B1/O01、1例Bel09/O02、1例CisAB01/O2、1例Bw12/O01、1例A102/Bw12、1例B(A)04/O2、1例B(A)02/B、2例Bel03/O、1例Ael05/O;1例为新基因,测序结果为797位置发生突变,根据其他位点的突变具有A102/O01特点。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于疑难血型的准确定型。 展开更多

关键词 基因分型 ABO亚型 疑难血型 血型鉴定

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SNP分子标记及其在作物品种鉴定中的应用

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作者 田海燕 张海娜 +2 位作者 王永强 周永萍 张莹璐 《中国农学通报》 2024年第6期115-121,共7页

作物品种鉴定是优良品种选育和推广的重要保障,而合适的检测方法是对品种进行准确鉴定的关键。随着分子标记技术的发展,第3代分子标记SNP逐渐应用到品种鉴定领域。本研究概述了SNP分子标记的特点,分析了高分辨率熔解曲线、竞争性等位基... 作物品种鉴定是优良品种选育和推广的重要保障,而合适的检测方法是对品种进行准确鉴定的关键。随着分子标记技术的发展,第3代分子标记SNP逐渐应用到品种鉴定领域。本研究概述了SNP分子标记的特点,分析了高分辨率熔解曲线、竞争性等位基因特异性PCR、基因芯片、测序法、靶向测序基因型检测等5种作物研究中常用的高通量检测方法的特点及适用性,梳理总结了SNP标记在品种真实性鉴定、纯度检测和亲缘关系分析与分类等方面的研究与应用情况,以期为后续利用SNP分子标记进行品种鉴定提供技术参考。 展开更多

关键词 SNP标记 高通量基因分型 真实性鉴定 纯度检测 亲缘关系分析

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基因分型结合血清学方法鉴定ABO血型亚型 被引量：6

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作者 马晓莉 马宏伟 +3 位作者 金新莉 陈赞 耿明璐 张伯伟 《中国输血杂志》 CAS 2018年第2期151-153,共3页

目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%（8/12）;其余不相符的... 目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%（8/12）;其余不相符的4例：2例为B（A）,1例为Cis AB,1例为新基因（新基因血型血清学结果不确定,PCR-SSP结果为A1/O02,测序结果为A102/O02型）。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于ABO亚型鉴定及ABO血型的正确定型。 展开更多

关键词 基因分型 ABO亚型 ABO血型基因 血型鉴定 血型血清学

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川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒的分子流行病学调查及病毒分离鉴定 被引量：1

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作者 王勤 何博 +2 位作者 刘小可 欧云文 刘俐君 《家畜生态学报》 北大核心 2023年第6期60-64,91,共6页

为了掌握川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况和主要流行基因型及亚型,采用RT-PCR方法对采集于川东北地区临床腹泻牛粪便样品进行了病原学检测。根据5'-UTR基因序列进行遗传变异分析和基因分型鉴定,并对RT-PCR阳... 为了掌握川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况和主要流行基因型及亚型,采用RT-PCR方法对采集于川东北地区临床腹泻牛粪便样品进行了病原学检测。根据5'-UTR基因序列进行遗传变异分析和基因分型鉴定,并对RT-PCR阳性样品进行了病毒的分离鉴定。结果显示:97份腹泻样品中BVDV平均阳性感染率为9.28%,达州市的阳性率最高(13.04%)、巴中市的阳性率最低(5.26%)。在5'-UTR基因系统进化树中9份阳性样品均为BVDV-1型,包括BVDV-1a(n=2)和BVDV-1b(n=7),经细胞培养、RT-PCR检测、间接免疫荧光检测共分离鉴定出2株致细胞病变型BVDV。表明川东北地区腹泻牛群中均存在BVDV感染,流行的优势基因亚型为BVDV-1b,丰富了BVDV的分子流行病学资料,为川东北地区BVDV的综合防控提供了理论基础。 展开更多

关键词 川东北地区 腹泻牛群 牛病毒性腹泻病毒 流行病学调查 基因分型 病毒分离鉴定

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新乡地区HPA基因分型供者库在免疫性血小板输注无效中的应用研究 被引量：2

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作者 庞桂芝 张趁利 +5 位作者 别立莉 孙学兰 娄白敏 高吴双 申家辉 赵凤莲 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期675-679,共5页

目的建立新乡地区已知HPA-1-18基因型的无偿机采血小板供者库,为临床血小板输注无效(PRT)患者提供HPA相合的血小板,方法建立PCR-SSP检测HPA-1-18基因型检测方法;采用固相凝集法对52名PRT患者,做血小板同种抗体筛查;应用HLA抗体特异性试... 目的建立新乡地区已知HPA-1-18基因型的无偿机采血小板供者库,为临床血小板输注无效(PRT)患者提供HPA相合的血小板,方法建立PCR-SSP检测HPA-1-18基因型检测方法;采用固相凝集法对52名PRT患者,做血小板同种抗体筛查;应用HLA抗体特异性试剂盒检测患者血清群体反应性抗体;对血小板同种抗体筛查阳性患者,采用已知HPA基因型的标准谱血小板做抗体鉴定,并对其进行HPA基因分型;采取HPA抗体无对应抗原的供者血小板进行输注。结果成功检测出150名无偿血小板捐献者HPA-1-18基因型。在52例PRT病例中,检出血小板同种抗体23例(阳性率44%),其中5例鉴定为抗-HPA(21.7%),分别为HPA-3a 2例;HPA-15b 3例;其余HLA抗体阳性18例。结论对PRT患者采用HPA基因型相合的方法进行输注取得临床效果。 展开更多

关键词 HPA基因分型 血小板输注无效 HPA配型 HPA抗体筛查 血小板供者资料库

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12例CisAB亚型表型与基因分型分析 被引量：1

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作者 马晓莉 耿明璐 +4 位作者 李建斌 杨贺才 王丽萍 曹轶 刘佳璇 《中国输血杂志》 CAS 2022年第12期1204-1207,共4页

目的 分析和掌握所发现的CisAB亚型标本的血清学与基因特征及其家系遗传背景。方法 对本中心2018年1月~2022年1月发现的郑州市无偿献血者及医院送检的ABO正反定型不符标本,采用微柱凝胶卡和试管法等血清学试验做表型分类,并利用PCR仪做... 目的 分析和掌握所发现的CisAB亚型标本的血清学与基因特征及其家系遗传背景。方法 对本中心2018年1月~2022年1月发现的郑州市无偿献血者及医院送检的ABO正反定型不符标本,采用微柱凝胶卡和试管法等血清学试验做表型分类,并利用PCR仪做AB0基因第6、7外显子的扩增、扩增产物测序做相应分子生物学分析;对同一家系中同为CisAB亚型、血清学特征不同的个体做家系分析。结果 经血清学检测,12例标本正定型均为AB型,且11例血清中出现针对较弱抗原的意外抗体,其中A抗原强有9例,B抗原强为2例,1例正反相符。经基因测序确认:11例为CisAB01亚型,1例CisAB05亚型,其中7例基因型为CisAB01/O、血清学表型均为A2B3,2例CisAB01/B、表型均为A2B,2例CisAB01/A,表型分别为A1Bx和A1B3,1例CisAB05/O表型为AxB。在同一CisAB01家系中,检出1例表型为A2B3的CisAB01/O,1例表型为A2B的CisAB01/B。1个CisAB05的家系分析:检出2例CisAB05/O01,1例CisAB05/O02。结论 同一CisAB01家系中的不同个体在与不同ABO等位基因配对时,血清学表型可以有不同;宜结合分子生物学方法精准确定CisAB亚型基因,以确保输血安全。 展开更多

关键词 基因分型 CisAB 血型血清学 ABO血型鉴定 家系调查 输血安全

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