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神经干细胞与NT-3基因修饰雪旺细胞联合移植促进全横断脊髓损伤大鼠功能修复的实验研究 被引量：15
1
作者 郭家松 曾园山 +4 位作者 李海标 黄文林 李晓君 刘甘泉 李晓滨 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期323-326,共4页
目的:探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法:将NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植,或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损... 目的:探讨神经干细胞(NSCs)与神经营养素-3(NT-3)基因修饰雪旺细胞(SCs)联合移植对全横断脊髓损伤大鼠的后肢运动及神经传导功能修复的作用。方法:将NSCs与NT-3基因修饰SCs或未基因修饰SCs联合移植,或NSCs单独移植到大鼠全横断性脊髓损伤处,60d后进行爬网格测验和BBB评分检测运动功能。第67d,进行皮质运动诱发电位(CMEP)和皮质感觉诱发电位(CSEP)检测脊髓的神经传导功能。结果:脊髓损伤大鼠后肢的运动功能及CMEP和CSEP的修复程度依次为NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植组,NSCs与未基因修饰SCs联合移植组,NSCs单独移植组和实验对照组。结论:NSCs与NT-3基因修饰SCs联合移植能够促进脊髓损伤后大鼠的后肢运动及神经传导功能的修复。 展开更多
关键词 NT-3基因修饰 全横断脊髓损伤 联合移植 神经干细胞 功能修复 雪旺细胞 大鼠 实验研究 全横断性脊髓损伤 神经传导功能 NSCs 感觉诱发电位 运动诱发电位 单独移植 运动功能 神经营养素 CSEP 后肢 BBB EP) 对照组 检测
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VEGF165基因修饰脂肪干细胞对糖尿病大鼠骨缺损的修复研究 被引量：4
2
作者 王洪君 蔡波 +4 位作者 赵星宇 李叔强 冯卫 刘建国 李冬松 《中国骨伤》 CAS 2017年第6期545-551,共7页
目的 :探讨采用基因转染大鼠脂肪干细胞构建血管化组织工程的方法对糖尿病骨质疏松性骨缺损的修复效果。方法:选取雄性Wistar大鼠78只,体重180~220 g,其中72只通过化学药物(STZ)诱导法建立糖尿病动物模型,成模大鼠血糖值均≥16.7 mmol/... 目的 :探讨采用基因转染大鼠脂肪干细胞构建血管化组织工程的方法对糖尿病骨质疏松性骨缺损的修复效果。方法:选取雄性Wistar大鼠78只,体重180~220 g,其中72只通过化学药物(STZ)诱导法建立糖尿病动物模型,成模大鼠血糖值均≥16.7 mmol/L。将实验动物随机分为5组,正常对照组6只,其他实验组各18只。正常对照组:在正常大鼠骨缺损内植入经VEGF165基因修饰的脂肪干细胞;糖尿病组:单纯糖尿病骨缺损大鼠;生长因子组:在糖尿病大鼠骨缺损内单纯植入VEGF生长因子;干细胞组:在糖尿病大鼠骨缺损内单纯植入脂肪干细胞;实验组:在糖尿病大鼠骨缺损内植入经VEGF165基因修饰的脂肪干细胞。将5×106个VEGF165-ADSCs细胞与凝胶海绵结合后,植入到糖尿病大鼠骨缺损模型中,在植入后第4周时,采用光学显微镜观察缺损修复组织大体形态;采用免疫组化SP法测定骨缺损区修复后局部微血管密度;应用美国IRIS IntrepidⅡXSP电感耦合等离子体发射光谱仪对修复骨痂内钙/磷含量和碱性磷酸酶(ALP)含量测定;统计分析上述测量结果验证VEGF165-ADSCs对糖尿病大鼠骨缺损的修复作用。结果:荧光染色结果显示,VEGF165表达定位于ADSCs的细胞浆,表达率在87﹪以上;大体组织学观察结果显示:实验组修复区内骨痂生成范围和质量接近正常组,糖尿病组、生长因子组、干细胞组修复效果欠佳。植入后第4周,实验组单位体积的修复组织钙、磷含量和ALP含量明显高于生长因子组、干细胞组(P<0.05),与正常对照组组比较差异无统计学意义(P>0.05);第4周时,实验组修复局部的血管密度低于正常对照组(P<0.05),而显著高于其他组(P<0.05)。结论 :VEGF165基因修饰的脂肪干细胞在糖尿病大鼠体内具有良好的成骨及成血管作用,有望成为修复糖尿病特定骨质条件下骨缺损的一种有效手段。 展开更多
关键词 糖尿病 动物 基因修饰 干细胞 大鼠
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转基因技术及骨髓间充质干细胞在骨缺损修复中的应用与展望 被引量：4
3
作者 陈佳滨 武成聪 +3 位作者 李强 茹嘉 宁寅宽 蔡伟良 《临床医学工程》 2013年第11期1457-1459,共3页
骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在骨髓内的非造血干细胞,具有较强的增殖功能及多向分化潜能。在一些细胞因子的诱导下可以向成骨系细胞、内皮细胞、成纤维系细胞、成软骨系细胞等方向分化,近年来已成为... 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在骨髓内的非造血干细胞,具有较强的增殖功能及多向分化潜能。在一些细胞因子的诱导下可以向成骨系细胞、内皮细胞、成纤维系细胞、成软骨系细胞等方向分化,近年来已成为生物学和医学的研究热点。而转基因技术是一项目前较为热门的生物科技技术。本文简要介绍了不同基因如骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、软骨源性形态发生蛋白1(cartilage-derived morphogenetic protein 1,CDMP-1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)等通过转染后对BMSCs增殖、分化的影响及其在骨缺损修复中的应用。 展开更多
关键词 转基因技术、骨髓间充质干细胞 骨缺损 增殖 分化
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人肝细胞生长因子基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞系的构建 被引量：2
4
作者 林群 雷立华 +6 位作者 林财珠 林献忠 林健清 郑辉哲 蔡宏达 杨庆 高友光 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1126-1129,共4页
目的构建人肝细胞生长因子（hHGF）基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞系（MSCs）。方法采用脂质体法将hHGF基因慢病毒载体质粒（1enti—hHGF）转染至293FT细胞，收集病毒上清液感染大鼠MSCs细胞，经过G418筛选得到稳定分泌hHGF的MSCs细胞株... 目的构建人肝细胞生长因子（hHGF）基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞系（MSCs）。方法采用脂质体法将hHGF基因慢病毒载体质粒（1enti—hHGF）转染至293FT细胞，收集病毒上清液感染大鼠MSCs细胞，经过G418筛选得到稳定分泌hHGF的MSCs细胞株（hHGF-MSCs细胞）。以转染空载体细胞（eGFP-MSCs）、未转染慢病毒载体的MSCs细胞作为对照。采用免疫印迹法检测hHGF的表达。hHGF—MSCs细胞分别加入成骨诱导剂或成脂诱导剂培养，分别采用茜素红染色和油红O染色鉴定成骨细胞和脂肪细胞表型。结果与未转染慢病毒载体的MSCs细胞和eGFP-MSCs细胞比较，hH—GF—MSCs细胞hHGF表达上调（P〈0．01）。hHGF-MSCs细胞体外诱导培养后具有明显的成骨和成脂表型，可向成骨细胞和脂肪细胞分化。结论成功构建hHGF基因修饰大鼠MSCs。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 生物 基因修饰 干细胞 骨髓
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皮肤外伤愈合中的基因修饰干细胞疗法
5
作者 陈瑞 杨晓农 +4 位作者 朱子凤 文娟 荣茂伶 翟禹涵 曾婉秋 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1311-1316,共6页
皮肤外伤愈合的过程会受到多种因素的影响,导致伤口难以愈合。许多皮肤外伤治疗新技术的研究取得了较大进展,如重组生长因子、生物工程皮肤、干细胞生物学等。基因修饰干细胞疗法是干细胞和基因重组疗法的结合,其中干细胞有治疗和基因... 皮肤外伤愈合的过程会受到多种因素的影响,导致伤口难以愈合。许多皮肤外伤治疗新技术的研究取得了较大进展,如重组生长因子、生物工程皮肤、干细胞生物学等。基因修饰干细胞疗法是干细胞和基因重组疗法的结合,其中干细胞有治疗和基因传递载体两种作用,已经成为最有吸引力的组织再生策略,该文对此进行了综述。 展开更多
关键词 基因修饰干细胞 外伤愈合 干细胞疗法 基因疗法
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人前脑啡肽原基因修饰人骨髓间充质干细胞系的构建
6
作者 蔡少彦 孙怡 赵国栋 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期565-568,共4页
目的 构建人前脑啡肽原（PENK）基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系（hMSCs）.方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒（pBABE-PENK）转染至Phoenix-293T细胞,收集病毒上清液感染hMSCs细胞,经过嘌呤霉素... 目的 构建人前脑啡肽原（PENK）基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系（hMSCs）.方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒（pBABE-PENK）转染至Phoenix-293T细胞,收集病毒上清液感染hMSCs细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定表达PENK基因的hMSCs细胞株（hMSC-PENK细胞）.以转染空载体细胞作为对照,即hMSC-pBABE细胞.采用RT-PCR法检测PENK mRNA的表达,免疫荧光法测定亮氨酸脑啡肽（LEK）的表达,ELISA法测定细胞培养上清液LEK浓度.结果 与hMSCs细胞和hMSC-pBABE细胞比较,hMSC-PENK细胞PENK mRNA和LEK表达上调,细胞培养上清液中LEK浓度升高（P＜0.05或0.01）.结论 PENK基因修饰的hMSCs可表达PENK基因并分泌脑啡肽蛋白,成功构建了稳定分泌镇痛物质的细胞系. 展开更多
关键词 脑啡肽类 生物 基因修饰 干细胞 骨髓
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β地中海贫血基因治疗药物临床试验设计探讨
7
作者 黄云虹 刘晓 +3 位作者 赵晨阳 鲁爽 高晨燕 马军 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2022年第11期697-700,共4页
β地中海贫血为单基因遗传病,患者因β珠蛋白基因突变致红细胞无法形成正常成年人血红蛋白,而发生溶血性贫血。目前的主要治疗方法为异基因造血干细胞移植或对症定期输血并使用祛铁剂减轻铁负荷。重型患者预后很差,如不经治疗可危及生... β地中海贫血为单基因遗传病,患者因β珠蛋白基因突变致红细胞无法形成正常成年人血红蛋白,而发生溶血性贫血。目前的主要治疗方法为异基因造血干细胞移植或对症定期输血并使用祛铁剂减轻铁负荷。重型患者预后很差,如不经治疗可危及生命。通过基因修饰自体造血干细胞为β地中海贫血患者提供了新的治疗选择,可能通过单次给药即实现长期、稳定提升血红蛋白水平,使一次性治愈β地中海贫血成为可能。文章从有效性评价终点、临床试验设计、入组人群、受试者监测等方面,对基因治疗β地中海贫血的临床试验设计关键要素进行探讨,以期为加快企业研发该类药物提供参考。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 生物 基因修饰 临床试验 干细胞
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基因修饰神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后神经营养素养-3表达及神经细胞凋亡的影响 被引量：4
8
作者 孔令胜 姚维成 +2 位作者 栗世方 贺昭忠 成磊 《济宁医学院学报》 2014年第6期393-398,402,共7页
目的探讨基因修饰神经干细胞(NSCs)移植大鼠损伤脊髓后对神经营养素-3(NT-3)表达及神经细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠80只随机分为假手术组(Normal组)、单纯损伤组(SCI组)、NSCs移植组(NSC组)、NT-3基因修饰NSCs移植组(NT-NSC组)。采用... 目的探讨基因修饰神经干细胞(NSCs)移植大鼠损伤脊髓后对神经营养素-3(NT-3)表达及神经细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠80只随机分为假手术组(Normal组)、单纯损伤组(SCI组)、NSCs移植组(NSC组)、NT-3基因修饰NSCs移植组(NT-NSC组)。采用电控脊髓损伤打击装置致大鼠SCI模型,25g/cm(10g×2.5cm)力致伤T13脊髓。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,SCI后即刻进行NSCs及基因修饰NSCs移植,分1、3、7、14、28d5个时间点运用免疫组织化学的方法检测NT-3、BrdU的表达,采用原位末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸生物素缺口末端标记技术(TUNEL法)标记凋亡细胞,改良Rivlin法(斜板试验)观察大鼠后肢运动功能的恢复情况。结果 NT-NSC组与NSC组在脊髓损伤区域内均可检测到Brdu阳性细胞,移植后7、14、28dBrdU阳性NSCs数与NSC组相比明显增多,差异有统计学意义(t=9.439、8.918、4.185,P均<0.05)。NT-NSC组NT-3表达高峰延迟,在14d达到最高值,其平均OD值与其他实验组各时间点相比均增高,差异有统计学意义(P<0.05);移植后7、14、28d凋亡细胞数比NSC组明显减少(P<0.05),斜板试验评分比NSC组明显提高(P<0.05)。结论 NT-3基因修饰NSCs移植较单纯NSCs移植更容易在脊髓损伤区域存活,并能通过增强NT-3的表达来抑制神经细胞的凋亡,从而促进大鼠损伤脊髓的功能恢复。 展开更多
关键词 基因修饰神经干细胞 脊髓损伤 神经营养素-3 细胞凋亡
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基因修饰猪模型应用于人类健康的相关研究进展 被引量：1
9
作者 颜泉梅 赖良学 《中国基础科学》 2015年第5期20-27,F0002,F0003,共10页
猪在解剖结构及生理功能上比啮齿类动物更接近于人类,与非人灵长类动物相比,具有来源方便,伦理问题少等优点。因此,猪模型在人类健康相关研究上具有非常广泛的应用前景。本文主要介绍猪在模拟人类疾病模型上以及在作为异种器官移植供体... 猪在解剖结构及生理功能上比啮齿类动物更接近于人类,与非人灵长类动物相比,具有来源方便,伦理问题少等优点。因此,猪模型在人类健康相关研究上具有非常广泛的应用前景。本文主要介绍猪在模拟人类疾病模型上以及在作为异种器官移植供体研究上近年来的研究进展;同时也介绍了我们在国家重大科学研究计划"生殖与发育相关猪模型的建立"项目中取得的一些成果。 展开更多
关键词 基因修饰猪 人类健康 动物疾病模型 异种器官移植 干细胞
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