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一株降解PET单体对苯二甲酸的施氏假单胞菌的筛选和基因组分析 被引量:4
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作者 刘盼 张彤 +3 位作者 郑义 李庆宾 梁泉峰 祁庆生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期200-212,共13页
【目的】筛选和鉴定能够降解聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)单体的微生物,并分析代谢途径。【方法】从青岛小涧西固体废弃物综合处置厂采集样品,以PET单体对苯二甲酸为唯一碳源筛选获得能够代谢对苯二甲酸的菌株TPA3;16S rRNA序列分析确定T... 【目的】筛选和鉴定能够降解聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)单体的微生物,并分析代谢途径。【方法】从青岛小涧西固体废弃物综合处置厂采集样品,以PET单体对苯二甲酸为唯一碳源筛选获得能够代谢对苯二甲酸的菌株TPA3;16S rRNA序列分析确定TPA3菌株的分类地位;采用二代和三代高通量测序技术进行基因组de novo测序和分析;通过氨基酸序列比对分析TPA3菌株代谢对苯二甲酸和乙二醇的途径和基因;验证TPA3菌株的可遗传操作性。【结果】TPA3菌株被鉴定为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri);它能够在30℃、220 r/min培养条件下,在30 h内消耗10.60 g/L对苯二甲酸;经过驯化培养,也能够代谢乙二醇;其基因组由1条染色体和3个质粒组成,总大小约为4.55 Mb;推测该菌株具有经典的对苯二甲酸代谢途径以及与Pseudomonas putida KT2440相似的乙二醇代谢途径;采用假单胞菌遗传操作技术可对TPA3菌株进行遗传改造。【结论】TPA3菌株能够降解PET单体对苯二甲酸和乙二醇,并具有可遗传操作性,在PET废物生物处理技术中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 塑料污染 聚对苯二甲酸乙二醇酯 de novo测序 代谢途径 遗传操作技术
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重组新城疫病毒对肺癌荷瘤鼠的治疗效果研究 被引量:2
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作者 李德山 张旭 +4 位作者 刘云野 田贵游 孙田 安莹 陈睿 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1-8,17,共9页
新城疫病毒用于肿瘤治疗具有良好靶向性和安全性,在众多溶瘤制剂中有独特优势。试验通过反向遗传操作技术成功拯救3株重组新城疫病毒r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2。经RT-PCR鉴定,表明插入新城疫病毒基因组中IL2、P5... 新城疫病毒用于肿瘤治疗具有良好靶向性和安全性,在众多溶瘤制剂中有独特优势。试验通过反向遗传操作技术成功拯救3株重组新城疫病毒r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2。经RT-PCR鉴定,表明插入新城疫病毒基因组中IL2、P53基因和P53-IL2双基因均插入预期位置,未发生突变。重组新城疫病毒在DF-1细胞中生长曲线表明,其与原代毒株生长特征相同。重组病毒在鸡胚中增殖稳定性试验表明,外源基因插入未影响重组病毒在鸡胚中增殖能力。体外肿瘤细胞生长抑制试验表明,与空载体r Clone30相比,r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2对LLC肺肿瘤细胞生长抑制效果更显著(P<0.01),呈剂量依赖性。体内抑瘤试验结果表明,r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2与尿囊液相比对肿瘤抑制效果差异极显著(P<0.01)。r Clone30-P53-IL2与r Clone30-IL2和rClone30-P53相比,对肿瘤抑制效果差异显著(P<0.05)。小鼠生存率结果表明,经rClone30-P53-IL-2治疗小鼠存活率最高,与其他组相比差异极显著(P <0.01)。综上所述,联合P53和IL2重组新城疫病毒对肺肿瘤治疗效果优于单一抗肿瘤相关因子。研究为筛选先导病毒治疗肺癌奠定基础。 展开更多
关键词 重组新城疫病毒 反向遗传操作技术 肺肿瘤
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