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巢式聚合酶链反应快速检测贝氏柯克斯体的研究 被引量：7
1
作者 崔红 张雪颖 +2 位作者 宫占威 程聪 陈香蕊 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期74-76,共3页
目的　建立特异敏感的快速检测贝氏柯克斯体的分子生物学方法。方法　采用巢式聚合酶链反应 (PCR)方法 ,进行实验室模拟检测。结果　以贝氏柯克斯体com1基因 (编码 2 70 0 0蛋白 )为靶标设计了 2对引物 ;该引物特异性实验表明仅贝氏柯... 目的　建立特异敏感的快速检测贝氏柯克斯体的分子生物学方法。方法　采用巢式聚合酶链反应 (PCR)方法 ,进行实验室模拟检测。结果　以贝氏柯克斯体com1基因 (编码 2 70 0 0蛋白 )为靶标设计了 2对引物 ;该引物特异性实验表明仅贝氏柯克斯体特异性片段可以扩增出来 ,其余相关立克次体均扩不出 ;敏感性测试结果可检测出 1.5fg的贝氏柯克斯体DNA ,可检测出 0 .0 0 1个鸡胚半数致死量 (CELD50 )的立克次体 ;以 10 0 0 0个CELD50 立克次体感染小鼠时 ,可于 2 4h在脾脏中检测出贝氏柯克斯体 ,检出率为 83.3% ;对人工模拟的灭菌牛奶、小鼠脏器研磨液、蜱组织研磨液、小鼠血液标本检测发现该法在牛奶和血液标本中的检测敏感性下降 3～ 4个滴度。结论　巢式PCR是快速检验贝氏柯克斯体的敏感特异的方法 ,经过进一步推广应用 ,有望应用于临床检验。 展开更多
关键词 巢式聚合酶链反应 贝氏柯克斯体 检测
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细粒棘球蚴热休克蛋白70基因的克隆和序列分析 被引量：6
2
作者 丁淑琴 赵嘉庆 +2 位作者 王娅娜 王健 赵巍 《宁夏医学杂志》 CAS 2005年第8期507-509,共3页
目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)热休克蛋白(Heat Shock Protein70,HSP70)基因,进行DNA测序、序列特性分析及同源性分析,为研究包虫病重组疫苗候选基因奠定基础.方法从细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆... 目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)热休克蛋白(Heat Shock Protein70,HSP70)基因,进行DNA测序、序列特性分析及同源性分析,为研究包虫病重组疫苗候选基因奠定基础.方法从细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株HSP70基因,将其重组到pGEM-T载体后进行序列测定和分析.结果成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株HSP70基因,测序表明该片段由402bp组成,与已发表基因核苷酸序列相比,同源性为96%,推导编码氨基酸序列同源性为81%.结论经DNA测序证实,扩增出的片段确为HSP70,该片段阅读框完整,可作为重组抗原的候选基因. 展开更多
关键词 棘球蚴病 基因 结构 克隆 分子 序列分析
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我国河南汉族正常人群内皮型一氧化氮合酶基因4a/bVNTR多态性观察
3
作者 于辉 赵洛沙 +4 位作者 郑红 焦昆立 贺颖 齐华 连建华 《中原医刊》 2005年第23期1-3,共3页
目的探讨我国河南汉族人群内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因4 a/bVNTR突变的分布特点。方法应用聚合酶链反应(polym erase chain reaction,PCR),分析240名我国河南汉族正常人群eNOS基因4 a/bVNTR突变的分布情况。结果我国河南汉族正常人群e... 目的探讨我国河南汉族人群内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因4 a/bVNTR突变的分布特点。方法应用聚合酶链反应(polym erase chain reaction,PCR),分析240名我国河南汉族正常人群eNOS基因4 a/bVNTR突变的分布情况。结果我国河南汉族正常人群eNOS基因4 a/bVNTR的aa、ab、bb基因型频率分别为0.0080、0.1250、0.8670;与国外其他种族人群比较,我国河南汉族正常人群aa+ab基因型频率低于韩国人、意大利白种人(P均<0.05)。结论我国河南汉族正常人群eNOS基因4 a/bVNTR突变的基因型分布不同于国外其他种族,bb基因型分布频率较高,而aa+ab基因型均低于韩国人和意大利人。 展开更多
关键词 内皮型一氧化氮合酶 基因频率 多态性 中国汉族人群 PCR
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