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题名一株产G418单组分工程菌的构建
被引量：1
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作者
阙新桥
林艺辉
胡育龙
肖剑萍
洪文荣
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期307-314,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(No.31070093)
国家"重大新药创制"科技重大专项项目(No.2012ZX09201101-008)
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文摘
【目的】定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌。【方法】以温敏型穿梭质粒p KC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒p QB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌,利用TLC和MS分析其代谢产物组分。【结果】获得一株genQ*缺失工程菌Micromonospora purpurea GQ175,其代谢产物为G418单组分,生物效价达828 mg/L,与出发菌G1008的产抗能力相当。【结论】工程菌GQ175产G418单组分,具有很好的工业开发价值。同时,证明绛红小单孢菌G1008中,庆大霉素C-6′脱氢酶基因为genQ*,且无其他同功酶基因。
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关键词
绛红小单孢菌
G418
基因敲除
genq+
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Keywords
Micromonospora purpurea, G418, Gene knock-out, genq＊
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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