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题名抗EGF单克隆抗体表面电荷不均一性的分析
被引量:1
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作者
裴朝玉
詹秀环
陈亚红
文国选
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机构
周口师范学院化学系
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出处
《化学试剂》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期437-440,472,共5页
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基金
河南省教育厅自然科学研究指导项目(2011B-150041)
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文摘
优化了离子交换色谱法分析抗表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)单克隆抗体表面电荷不均一性的条件,分析糖基化对单克隆抗体表面电荷不均一性分布的影响。应用凝胶等电聚焦电泳方法测定单克隆抗体电荷不均一性组分等电点分布范围,再优化离子交换色谱法分析抗EGF单克隆抗体表面电荷不均一的条件,包括色谱柱、流动相pH、梯度及柱温,选择最佳的分析条件分析糖基化对单克隆抗体的电荷不均一性分布的影响。凝胶等电聚焦电泳方法分析抗EGF单克隆抗体电荷不均一性组分等电点分布范围在8.0~8.6范围内,离子交换色谱法分析表面电荷不均一性的最佳条件:TSK-gel CM-STAT离子交换色谱柱、流动相pH 6.0、合适的起始梯度及梯度陡度有利于电荷不均一性各组分的分离,柱温为40℃;去除糖基化的单克隆抗体分布在酸性区的表面电荷不均一组分相对含量增加。合适的分析条件能够使单克隆抗体表面电荷不均一性各组分在离子交换色谱柱上得到最佳分离及获得较高灵敏度,单克隆抗体的糖基化修饰使表面电荷不均一性向碱性区发生偏移。
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关键词
抗EGF单克隆抗体
凝胶等电聚焦电泳
离子交换色谱法
表面电荷不均一性
糖基化
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Keywords
anti-EGF monoclonal antibody
gel isoelectric fo-cusing electrophoresis
ion exchange chromatography
surfacecharge heterogeneity
glycosylation
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分类号
R917
[医药卫生—药物分析学]
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