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过量表达气囊蛋白强化茂原链霉菌合成胰蛋白酶
1
作者
苏莹莹
刘松
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第14期1-8,共8页
气囊蛋白(gas vesicle protein, Gvp)组成的气体囊泡存在于蓝藻、嗜盐古菌等微生物中,为细胞提供浮力或抗胁迫能力。尽管gvp基因簇广泛存在于链霉菌,但其功能尚不明确。在该研究中,分别在茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)DSM40587...
气囊蛋白(gas vesicle protein, Gvp)组成的气体囊泡存在于蓝藻、嗜盐古菌等微生物中,为细胞提供浮力或抗胁迫能力。尽管gvp基因簇广泛存在于链霉菌,但其功能尚不明确。在该研究中,分别在茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)DSM40587谷氨酰胺转氨酶基因缺失菌株(smY2019Δtg)中表达了内源的gvpA、gvpO以及完整基因簇gvpOAFGJLSK(gvp40587),考察其对胰蛋白酶合成和宿主生理状态的影响。酶活力分析显示,过量表达gvp40587和gvpA使胞外最高胰蛋白酶活力分别提高64.3%和17.0%;过量表达gvpO未明显影响胰蛋白酶活力。SDS-PAGE分析发现,gvp40587和gvpA过表达菌株胞外上清液中的胰蛋白酶条带(26 kDa)较对照菌株明显增粗。同时,过量表达完整基因簇的菌株中8个gvp基因的转录水平均较smY2019Δtg有不同程度的提高。与对照菌相比,gvp40587过表达菌株的胞内ATP含量和NADPH/NADP^(+)分别提高1.4倍和0.4倍。上述结果表明,过量表达内源gvp基因簇能促进S.mobaraensis合成胰蛋白酶,能量代谢和蛋白质前体合成的增强可能是其产量提高的主要原因。研究结果首次报道了S.mobaraensis中gvp基因簇对酶蛋白合成的重要影响,为链霉菌蛋白表达调控提供了新思路。
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关键词
气囊蛋白
基因簇
Streptomyces
mobaraensis
过量表达
胰蛋白酶
ATP
NADPH/NADP^(+)
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职称材料
极大节旋藻气囊蛋白基因gvpA克隆与序列分析
被引量：
1
2
作者
李先超
《北京联合大学学报》
CAS
2008年第1期22-26,共5页
为了研究极大节旋藻气囊蛋白的分子生物学特性,并为gvpA基因的研究提供基础材料,在对极大节旋藻GSS序列分析的基础上,采用PCR技术克隆了gvpA基因的全长序列,并进行了相关分析。结果表明极大节旋藻gvpA基因编码区的GC含量为42.92%,核苷...
为了研究极大节旋藻气囊蛋白的分子生物学特性,并为gvpA基因的研究提供基础材料,在对极大节旋藻GSS序列分析的基础上,采用PCR技术克隆了gvpA基因的全长序列,并进行了相关分析。结果表明极大节旋藻gvpA基因编码区的GC含量为42.92%,核苷酸序列和蛋白序列与Planktothrix agardhii的gvpA基因相似性最高(79.4%,97.2%),其次是Pseudanabaena sp.PCC6901(75.3%,94.4%)。系统发生分析表明极大节旋藻gvpA基因与Planktothrix agardhii的gvpA基因同源性最高(89%ML,85%MP,89%NJ)。
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关键词
极大节旋藻
气囊蛋白
gvpA基因
基因克隆
序列分析
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职称材料
铜绿微囊藻气囊结构蛋白GvpC的表达纯化与晶体生长研究
被引量：
1
3
作者
许柏英
张甜甜
《山东大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1-8,共8页
对GvpC进行了初步晶体学研究。首先对GvpC进行分子克隆,利用原核表达系统在体外进行异源表达;结合变复性和凝胶过滤层析的方法纯化GvpC;通过圆二色谱的方法鉴定GvpC的复性效果;运用坐滴蒸汽扩散法进行晶体初筛。结果表明:GvpC在大肠杆...
对GvpC进行了初步晶体学研究。首先对GvpC进行分子克隆,利用原核表达系统在体外进行异源表达;结合变复性和凝胶过滤层析的方法纯化GvpC;通过圆二色谱的方法鉴定GvpC的复性效果;运用坐滴蒸汽扩散法进行晶体初筛。结果表明:GvpC在大肠杆菌表达系统中表达为包涵体;通过变复性和凝胶过滤层析能纯化出纯度较高的蛋白;圆二色谱证实复性后的GvpC形成了正确的二级结构,复性效果较佳;通过晶体初筛获得了GvpC的晶体,后续即可通过解析GvpC的晶体结构而获得其三维结构。
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关键词
铜绿微囊藻
气囊
GvpC
变复性
蛋白质晶体
原文传递
题名
过量表达气囊蛋白强化茂原链霉菌合成胰蛋白酶
1
作者
苏莹莹
刘松
机构
江南大学
江南大学
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第14期1-8,共8页
基金
国家重点研发计划项目(2019YFA0706900)
国家自然科学基金面上项目(32071474)。
文摘
气囊蛋白(gas vesicle protein, Gvp)组成的气体囊泡存在于蓝藻、嗜盐古菌等微生物中,为细胞提供浮力或抗胁迫能力。尽管gvp基因簇广泛存在于链霉菌,但其功能尚不明确。在该研究中,分别在茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)DSM40587谷氨酰胺转氨酶基因缺失菌株(smY2019Δtg)中表达了内源的gvpA、gvpO以及完整基因簇gvpOAFGJLSK(gvp40587),考察其对胰蛋白酶合成和宿主生理状态的影响。酶活力分析显示,过量表达gvp40587和gvpA使胞外最高胰蛋白酶活力分别提高64.3%和17.0%;过量表达gvpO未明显影响胰蛋白酶活力。SDS-PAGE分析发现,gvp40587和gvpA过表达菌株胞外上清液中的胰蛋白酶条带(26 kDa)较对照菌株明显增粗。同时,过量表达完整基因簇的菌株中8个gvp基因的转录水平均较smY2019Δtg有不同程度的提高。与对照菌相比,gvp40587过表达菌株的胞内ATP含量和NADPH/NADP^(+)分别提高1.4倍和0.4倍。上述结果表明,过量表达内源gvp基因簇能促进S.mobaraensis合成胰蛋白酶,能量代谢和蛋白质前体合成的增强可能是其产量提高的主要原因。研究结果首次报道了S.mobaraensis中gvp基因簇对酶蛋白合成的重要影响,为链霉菌蛋白表达调控提供了新思路。
关键词
气囊蛋白
基因簇
Streptomyces
mobaraensis
过量表达
胰蛋白酶
ATP
NADPH/NADP^(+)
Keywords
gas
vesicle
protein
gene
cluster
Streptomyces
mobaraensis
overexpression
trypsin
ATP
NADPH/NADP^(+)
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
极大节旋藻气囊蛋白基因gvpA克隆与序列分析
被引量：
1
2
作者
李先超
机构
中国海洋大学海洋生命学院
出处
《北京联合大学学报》
CAS
2008年第1期22-26,共5页
文摘
为了研究极大节旋藻气囊蛋白的分子生物学特性,并为gvpA基因的研究提供基础材料,在对极大节旋藻GSS序列分析的基础上,采用PCR技术克隆了gvpA基因的全长序列,并进行了相关分析。结果表明极大节旋藻gvpA基因编码区的GC含量为42.92%,核苷酸序列和蛋白序列与Planktothrix agardhii的gvpA基因相似性最高(79.4%,97.2%),其次是Pseudanabaena sp.PCC6901(75.3%,94.4%)。系统发生分析表明极大节旋藻gvpA基因与Planktothrix agardhii的gvpA基因同源性最高(89%ML,85%MP,89%NJ)。
关键词
极大节旋藻
气囊蛋白
gvpA基因
基因克隆
序列分析
Keywords
Arthrospira
maxima,
gas
vesicle
protein
,
gvpA
gene,
gene
clone,
sequence
analysis
分类号
Q753 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
铜绿微囊藻气囊结构蛋白GvpC的表达纯化与晶体生长研究
被引量：
1
3
作者
许柏英
张甜甜
机构
重庆师范大学生命科学学院
中国科学技术大学生命科学学院
出处
《山东大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1-8,共8页
基金
重庆市前沿与应用基础研究计划资助项目(cstc2015jcyjBX0142
cstc2016jcyjA0375)
文摘
对GvpC进行了初步晶体学研究。首先对GvpC进行分子克隆,利用原核表达系统在体外进行异源表达;结合变复性和凝胶过滤层析的方法纯化GvpC;通过圆二色谱的方法鉴定GvpC的复性效果;运用坐滴蒸汽扩散法进行晶体初筛。结果表明:GvpC在大肠杆菌表达系统中表达为包涵体;通过变复性和凝胶过滤层析能纯化出纯度较高的蛋白;圆二色谱证实复性后的GvpC形成了正确的二级结构,复性效果较佳;通过晶体初筛获得了GvpC的晶体,后续即可通过解析GvpC的晶体结构而获得其三维结构。
关键词
铜绿微囊藻
气囊
GvpC
变复性
蛋白质晶体
Keywords
Microcystis
aeruginosa
gas
vesicle
,
GvpC
denaturation
and
renaturation
protein
crystal
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
过量表达气囊蛋白强化茂原链霉菌合成胰蛋白酶
苏莹莹
刘松
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
极大节旋藻气囊蛋白基因gvpA克隆与序列分析
李先超
《北京联合大学学报》
CAS
2008
1
下载PDF
职称材料
3
铜绿微囊藻气囊结构蛋白GvpC的表达纯化与晶体生长研究
许柏英
张甜甜
《山东大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
原文传递
已选择
0
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