Hsp65与IL-2融合蛋白诱导小鼠细胞免疫应答及保护力 被引量：3

1

作者 师长宏 张海 +4 位作者 席丽 张廷芬 赵勇 王丽梅 徐志凯 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第10期24-28,共5页

目的研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和MPL联合免疫小鼠,连续免疫3次,每次间隔2周,最后一次免疫结束... 目的研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和MPL联合免疫小鼠,连续免疫3次,每次间隔2周,最后一次免疫结束后两周,分离5只小鼠脾淋巴细胞,测定淋巴细胞增殖指数,IFN-γ和IL-2水平,以及特异性淋巴细胞杀伤功能,其余5只免疫小鼠用于MTB毒株攻击实验。结果获得融合蛋白可分别与抗Hsp65和抗hIL-2的单抗发生特异性反应。融合蛋白免疫小鼠后,小鼠脾淋巴细胞被有效活化,诱导产生的-γIFN和IL-2的水平以及CTL杀伤功能均显著高于BCG和单纯Hsp65免疫组(P<0.05)。融合蛋白免疫组可有效抵抗MTB毒株攻击,脾脏细菌数显著减少(4.36±0.48),提供的保护力与BCG相当(4.30±0.53)。结论Hsp65与hIL-2的融合蛋白是一种有效的亚单位疫苗,可用于TB的预防。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 热休克蛋白65 人白细胞介素2 基因融合

下载PDF 职称材料

牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿亚基不同组合融合抗原对BALB/c小鼠免疫保护性实验

2

作者 布日额 王金良 +4 位作者 吴金花 锡林高娃 陈金龙 孙立杰 王华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1152-1156,共5页

为评价牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿亚基不同组合融合蛋白AP1-AP2、 AP1-BP、 BP-AP2、AP1-BP-AP2对BALB/c小鼠的免疫保护性,本研究取各融合蛋白与同体积的弗氏佐剂进行乳化,分别制备融合抗原免疫制剂,4种免疫制剂均以50μg/只对小鼠进行... 为评价牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿亚基不同组合融合蛋白AP1-AP2、 AP1-BP、 BP-AP2、AP1-BP-AP2对BALB/c小鼠的免疫保护性,本研究取各融合蛋白与同体积的弗氏佐剂进行乳化,分别制备融合抗原免疫制剂,4种免疫制剂均以50μg/只对小鼠进行4次免疫后均产生了较高滴度的抗体,其中AP1-BP-AP2融合抗原产生的抗体滴度水平最高,可达1∶25 600。在免疫后第50 d时利用104 cfu/mL乳腺炎无乳链球菌攻毒,每天观察记录小鼠的精神状态、食量变化等生理状态。攻毒试验结果显示,4种不同融合抗原均显示不同程度的免疫保护性,其中AP1-BP-AP2融合抗原对BALB/c小鼠的免疫保护性为最佳,其免疫保护指数PI达到80%。本研究首次创新性地开展牛乳腺炎无乳链球菌Ia亚型PI-2a菌毛岛屿AP1、AP2、BP亚单位不同组合抗原对BALB/c小鼠的免疫保护试验,获得了AP1-BP-AP2融合抗原的免疫保护效果为最佳的结论,为进一步开发无乳链球菌性乳腺炎防控的亚单位疫苗及其流行病学检测试剂盒提供了实验依据。 展开更多

关键词 菌毛岛屿 融合抗原 免疫保护

下载PDF 职称材料

表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗的免疫学特性

3

作者 师长宏 王晓武 +3 位作者 朱德生 徐志凯 柏银兰 薛莹 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期777-780,共4页

目的测定表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法50只BALB/c小鼠随机分为5组(每组10只),将表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF分别... 目的测定表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法50只BALB/c小鼠随机分为5组(每组10只),将表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的两种重组质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF分别免疫小鼠3次,每次间隔2周,同时设卡介苗(BCG)免疫组、空载体质粒免疫组和生理盐水对照组。最后一次免疫结束后,每组取5只小鼠血清,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测特异性抗体的滴度,并分离小鼠的脾淋巴细胞,并在体外用结核分枝杆菌(MTB)培养滤液蛋白(cu lture filtrate prote in,CFP)刺激,测定脾淋巴细胞增殖指数和γ干扰素(IFN-γ)水平。用1 m l含1×105克隆形成单位(CFU)的MTB毒株H37Rv经尾静脉感染其余每组5只BALB/c小鼠,4周后计数脾脏细菌负荷数。结果质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫小鼠血清的特异性抗体滴度分别为1∶1 000和1∶1 500。其脾淋巴细胞刺激指数分别为2.2和2.4,而生理盐水对照组和空载体质粒免疫组的刺激指数只有0.9和1.1;脾淋巴细胞悬液中诱发的IFN-γ分别为(5.48±0.38)ng/m l和(5.76±0.51)ng/m l,显著高于生理盐水对照组和空载体质粒免疫组(P<0.05),但与BCG免疫组的(5.55±0.31)ng/m l比较差异无统计学意义。结核毒株攻击后,与空载体质粒免疫组相比,质粒AZ-pcDNA3-EF和EZ-pcDNA3-AF免疫的BALB/c小鼠其抗MTB在脾脏中增殖有显著作用,3组脾脏细菌负荷对数值(lg,CFU/g)分别为6.08±0.25、4.63±0.11、4.50±0.32,但不及BCG免疫组的4.09±0.27。结论表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的基因疫苗在小鼠体内诱导的IFN-γ水平与BCG相当,其保护力有待进一步提高。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 疫苗 DNA 基因融合 抗原 细菌

原文传递

融合快速培养的树突细胞体外诱导特异性抗肝癌免疫反应

4

作者 关心 冷希圣 +3 位作者 彭吉润 魏玉华 王卉 袁兰 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第47期3332-3336,共5页

目的用培养健康志愿者外周血CD14+单核细胞获得的成熟树突细胞与肝癌细胞系HCCLM3细胞构建融合细胞,在体外观察和评价这类融合细胞的功能。方法从HLA-A2阳性的健康人外周血中分离出CD14+细胞,在树突细胞完全培养基中经过48h培养及促成... 目的用培养健康志愿者外周血CD14+单核细胞获得的成熟树突细胞与肝癌细胞系HCCLM3细胞构建融合细胞,在体外观察和评价这类融合细胞的功能。方法从HLA-A2阳性的健康人外周血中分离出CD14+细胞,在树突细胞完全培养基中经过48h培养及促成熟获得成熟的树突细胞(称之为FastDC)。以50%聚乙二醇和10%二甲基亚砜为融合剂融合树突细胞与肝癌细胞系HCCLM3细胞,细胞融合成功后进行融合细胞刺激自体T细胞增殖及CD8+T细胞特异性杀伤实验,并与树突细胞组、HCCLM3组及树突细胞和HCCLM3混合组进行比较。结果用48h培养获得的树突细胞与肝癌细胞系HCCLM3细胞所构建的融合细胞能有效刺激自体T细胞的增殖反应,所活化的CD8+T细胞分泌IFN-γ的水平(3d为400pg/ml±60pg/ml,5d为1030pg/ml±160pg/ml,7d为1260pg/L±180pg/L)高于其他组,而且能以MHC-Ⅰ类分子途径特异性杀伤HCCLM3细胞。结论从外周血CD14+细胞48h培养所获树突细胞与肝癌细胞系HCCLM3细胞构建的融合细胞体外能有效诱导特异性杀伤HCCLM3细胞的免疫反应。 展开更多

关键词 单核细胞 树突细胞 细胞 融合 抗原 CD8

原文传递

鸡大肠杆菌异型外膜蛋白原生质体融合菌株的构建 被引量：5

5

作者 丁伯良 鄢明华 +6 位作者 王英珍 李秀丽 黄金海 白朋勋 王东 张健 赵向华 《动物科学与动物医学》 2004年第3期35-37,共3页

以鸡大肠杆菌Ww1株(O78,OMP-3,AmpR,KS)和WD2株(O2,OMP-1,AmpS,KR)作为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备原生质体,以PEG作为助溶剂,进行原生质体融合,得到4株双耐药融合菌株,融合菌株的形态、染色特性和生化特性均符合大肠杆菌的特性,且... 以鸡大肠杆菌Ww1株(O78,OMP-3,AmpR,KS)和WD2株(O2,OMP-1,AmpS,KR)作为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备原生质体,以PEG作为助溶剂,进行原生质体融合,得到4株双耐药融合菌株,融合菌株的形态、染色特性和生化特性均符合大肠杆菌的特性,且均能同时表达两个亲本菌株的外膜蛋白(OMP)抗原(OMP-3,OMP-1)和O抗原(O78,O2),表明两个亲本菌株发生了融合和染色体重组。经多次传代证明融合菌株是稳定的。 展开更多

关键词 鸡 大肠杆菌 外膜蛋白抗原 原生质体融合 O抗原 大肠杆菌病 OMP型

下载PDF 职称材料

基因佐剂结核杆菌HSP70增强HCA661基因疫苗免疫应答 被引量：5

6

作者 李树蕾 谭岩 +4 位作者 刘力华 段秀梅 方艳秋 许淑芬 车媛媛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期504-508,共5页

目的:评价结核分枝杆菌HSP70(Mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70,mtHSP70)羧基端作为基因佐剂对HCA661(Hepatocellular carcinoma associated antigens 661)基因疫苗免疫效果的影响。方法:将HCA661及与mtHSP70羧基端的... 目的:评价结核分枝杆菌HSP70(Mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70,mtHSP70)羧基端作为基因佐剂对HCA661(Hepatocellular carcinoma associated antigens 661)基因疫苗免疫效果的影响。方法:将HCA661及与mtHSP70羧基端的串联体分别克隆到pCI-neo中构建基因疫苗;将eGFP及与mtHSP70羧基端的串联体分别克隆到pCI-neo,体外转染φA细胞,根据eGFP的表达评价重组质粒中靶基因的转录表达效率。基因疫苗免疫BALB/c小鼠,SABC、Western blot检测免疫血清中特异性HCA661抗体;流式细胞术、ELISA法检测免疫血清中特异性HCA661抗体水平。结果:重组质粒构建成功;80%φA细胞转染eGFP后呈现绿色荧光;单基因和融合基因疫苗组动物均产生了针对HCA661的特异性抗体,融合疫苗组诱导的抗体水平较单基因疫苗组显著增高,融合基因疫苗组未产生针对mtHSP70的抗体。结论:mtHSP70羧基端作为基因佐剂增强机体对HCA661融合基因疫苗的特异性免疫应答。 展开更多

关键词 融合基因疫苗 癌/睾丸抗原 肝细胞癌相关抗原661 结核分枝杆菌热休克蛋白70 基因佐剂

下载PDF 职称材料

C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素细胞表达模型的构建及功能研究 被引量：3

7

作者 张宇 姚煦 +2 位作者 顾汉艳 王宝玺 刘军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期457-460,共4页

目的构建C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素（DC—SIGN）细胞表达模型，为后续进行DC—SIGN蛋白受体功能研究提供基础。方法PCR扩增获得DC—SIGN分子的cDNA，克隆入真核表达载体P巨细胞病毒启动子-绿色荧光蛋白... 目的构建C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素（DC—SIGN）细胞表达模型，为后续进行DC—SIGN蛋白受体功能研究提供基础。方法PCR扩增获得DC—SIGN分子的cDNA，克隆入真核表达载体P巨细胞病毒启动子-绿色荧光蛋白重组质粒（PCMV—EGFP），EGFP位于Dc—SIGNN末端，转染人胚肾细胞癌I-IEK293T细胞后，流式细胞仪检测DC—SIGN重组分子的表达，激光共聚焦显微镜检测DC—SIGN—EGFP融合蛋白的细胞定位情况，并进一步检测转染表达的DC—SIGN受体对过敏原抗原的识别和内吞过程。结果构建的荧光融合蛋白重组表达质粒，经PCR及Western印迹证明DC—SIGN表达成功；经流式细胞仪检测转染DC—SIGN融合质粒的HEK293T细胞的DC—SIGN受体表达量增多（约50％）。重组表达质粒转染293T细胞后，激光共聚焦显微镜检测显示，绿色荧光标记的DC—SIGN位于细胞膜上，可结合红色荧光素标记的过敏原抗原Derp2，并可将Derp2内吞人细胞内。结论构建的DC—SIGN—EGFP融合蛋白在293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布，可被DC—SIGN特异性抗体识别并具有摄取过敏原功能，是研究DC—SIGN分子功能的理想细胞模型。 展开更多

关键词 受体 有丝分裂原 重组融合蛋白质类 抗原 尘螨属 细胞系 肿瘤

原文传递

重组人纤维连接片段联合抗CD3单抗包被对急性白血病CIK增殖和杀伤活性的影响 被引量：2

8

作者 李青 邓琦 +3 位作者 刘鹏江 白雪 穆娟 李玉明 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第7期632-635,共4页

目的探讨重组人纤维连接片段(RetroNectin)与抗CD3单抗(CD3Ab)联合包被培养对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖和杀伤活性的影响。方法取完全缓解期急性白血病(AL)患者外周血单个核细胞,采用RetroNectin包被(RN组)、CD3Ab包被(CD3Ab组)... 目的探讨重组人纤维连接片段(RetroNectin)与抗CD3单抗(CD3Ab)联合包被培养对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖和杀伤活性的影响。方法取完全缓解期急性白血病(AL)患者外周血单个核细胞,采用RetroNectin包被(RN组)、CD3Ab包被(CD3Ab组)及RetroNectin联合CD3Ab包被(RN+CD3Ab组)与传统方法培养(对照组)获得CIK细胞,比较各组增殖、表达及杀伤活性。结果 CIK扩增:各实验组CIK扩增倍数高于对照组,且RN+CD3Ab组高于RN组和CD3Ab组(P<0.05)。收获细胞CD25+表达:RN组和RN+CD3Ab组高于对照组和CD3Ab组(P<0.05)。各期细胞比例:RN组和RN+CD3Ab组的G1期细胞比例低于CD3Ab组和对照组,而S期细胞高于CD3Ab组和对照组(P<0.05)。CIK对自体AL细胞的杀伤活性:效靶比10∶1、20∶1和40∶1时,RN组和RN+CD3Ab组高于对照组和CD3Ab组(P<0.05)。收获细胞凋亡率:RN组和RN+CD3Ab组较CD3Ab组和对照组下降(P<0.05)。结论 RetroNectin联合CD3Ab包被用于CIK体外培养可获得增殖率和活性更高的免疫活性细胞,是一种值得推荐的方法。 展开更多

关键词 重组融合蛋白质类 纤连蛋白类 抗原 抗体单克隆 细胞因子类 杀伤细胞

下载PDF 职称材料

结核杆菌热休克蛋白70刺激表位在融合基因疫苗中的佐剂作用 被引量：2

9

作者 段秀梅 邹亚斌 +4 位作者 马洪喜 李树蕾 王银萍 王超 李玉琴 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期506-511,共6页

目的:探讨结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)的刺激表位在肝细胞癌相关抗原661(HCA661)融合基因疫苗pCI-HCA661-mtHSP70中的佐剂作用,为提高基因疫苗的免疫效果提供依据。方法:18只BALB/c小鼠随机分为pCI-neo组、pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组... 目的:探讨结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)的刺激表位在肝细胞癌相关抗原661(HCA661)融合基因疫苗pCI-HCA661-mtHSP70中的佐剂作用,为提高基因疫苗的免疫效果提供依据。方法:18只BALB/c小鼠随机分为pCI-neo组、pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组和pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组,每组6只,分别肌肉注射100μg空质粒pCI-neo、重组质粒pCI-HCA661-mtHSP70C和pCI-HCA661-mtHSP70E,流式细胞术分析小鼠脾T细胞亚群变化;ELISA法检测体外培养脾细胞上清中干扰素γ(IFNγ)的含量及免疫小鼠血清中HCA661特异性抗体的滴度;体外特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤试验观察融合基因疫苗对肿瘤细胞的抑制作用。结果:pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组和pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组的CD3+、CD4+T淋巴细胞的百分比和CD4+/CD8+比值与pCI-neo组比较差异有统计学意义(P<0.05);pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组的CD3+、CD4+百分比和CD4+/CD8+比值均高于pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组,差异有统计学意义(P<0.05);在抗原肽刺激下,pCI-HCA661-HSP70E免疫组小鼠脾细胞培养上清中IFNγ含量较pCI-mtHCA661-HSP70C免疫组明显提高(P<0.05);pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组和pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组IFNγ含量均高于pCI-neo组(P<0.05)。pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组诱导的HCA661特异性抗体水平较pCI-HCA661-mtHSP70C免疫组显著增高(P<0.05);pCI-HCA661-mtHSP70E免疫组可以产生更强的CTL抗肿瘤效应。结论:mtHSP70刺激表位可以诱导机体对HCA661融合基因疫苗的特异性免疫应答,发挥更强的佐剂作用。 展开更多

关键词 融合基因疫苗 肝细胞癌相关抗原661 结核分枝杆菌热休克蛋白70 基因佐剂

下载PDF 职称材料

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-CFP21融合蛋白克隆表达及全血IFN-γ的检测 被引量：1

10

作者 周舟 丁元生 +3 位作者 刘忠华 毛翎 桂徐蔚 胡忠义 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第4期211-216,F0003,共7页

目的构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值。方法通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表... 目的构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值。方法通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表达载体pET21a(+)中,获得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重组质粒;经表达纯化和复性后,去除内毒素,利用酶联免疫吸附试验检测48例结核病患者、30例非结核肺部疾病患者及32例健康对照者全血中IFN-γ的释放量。结果CE21经SDS-PAGE分析后相对分子质量为45,与预期大小一致。CE21融合蛋白全血标本IFN-γ的检测,结核组阳性率为72.9%,非结核疾病对照组和健康对照组阳性率分别为3.3%和3.1%。结论成功获得CE21融合蛋白,IFN-γ的检测证明该融合抗原具有良好的结核病检测价值。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 重组融合蛋白质类 抗原 细菌 干扰素Ⅱ型

下载PDF 职称材料

多表位融合抗原检测结核分枝杆菌抗体的应用价值 被引量：1

11

作者 王瑛 乐军 +1 位作者 王洪秀 杨景卉 《临床肺科杂志》 2011年第7期1058-1060,共3页

目的应用由基因重组表达的结核分枝杆菌多表位融合抗原检测血清或血浆中的结核抗体,评价其在结核病快速诊断中的价值。方法用酶免法分别对361例结核病人和288例非结核病人的血清标本进行检测。结果肺结核患者结核抗体的阳性率显著高于... 目的应用由基因重组表达的结核分枝杆菌多表位融合抗原检测血清或血浆中的结核抗体,评价其在结核病快速诊断中的价值。方法用酶免法分别对361例结核病人和288例非结核病人的血清标本进行检测。结果肺结核患者结核抗体的阳性率显著高于非结核患者。结论本试剂盒的敏感性为70.4%,特异性为84.9%。即血清结核抗体的检测对结核病的诊断和鉴别具有一定的临床价值。 展开更多

关键词 结核抗体 结核病 多表位融合抗原

下载PDF 职称材料

肿瘤内皮细胞标志物1在卵巢癌诊疗中作用的研究进展

12

作者 鲍会静 徐晨(审校) 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2020年第4期349-352,共4页

卵巢癌是一种常见的妇科恶性肿瘤,具有发病率高、致死率高的特点。由于其发病隐蔽且缺乏有效检测手段,确诊时一般已处于中晚期,因此提高卵巢癌早期诊断率可有效提高患者的预后及生存率。肿瘤内皮细胞标志物1(tumor endothelial marker 1... 卵巢癌是一种常见的妇科恶性肿瘤,具有发病率高、致死率高的特点。由于其发病隐蔽且缺乏有效检测手段,确诊时一般已处于中晚期,因此提高卵巢癌早期诊断率可有效提高患者的预后及生存率。肿瘤内皮细胞标志物1(tumor endothelial marker 1,TEM1)是一种新近发现的卵巢癌特异性肿瘤标志物,其表达于卵巢癌细胞表面,而在正常组织中不表达或仅极低表达。该特点使TEM1成为极具潜能的卵巢癌诊断和治疗的新靶点。应用TEM1的特异性抗体结合影像学、基因工程学等技术,无论在卵巢癌影像以及治疗方面都显示出了极好的抗肿瘤效果。同时大量基于靶向TEM1的临床试验正在进行中。本文综述TEM1的发现、结构、组织表达以及其在卵巢癌诊断及治疗中的研究进展,以期为卵巢癌的治疗提供新思路。 展开更多

关键词 肿瘤内皮细胞标志物1 重组融合蛋白质类 抗原 肿瘤 卵巢肿瘤 诊断 治疗

下载PDF 职称材料

抗胃癌MG7单链抗体与重组超抗原SEB融合蛋白在体内外对胃癌细胞的杀伤作用研究

13

作者 童强 刘科 +3 位作者 舒晓刚 卢晓明 陶凯雄 王国斌 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第4期296-299,共4页

目的研究SEB-scFv融合蛋白对胃癌的抑制作用。方法在体外通过MTT法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用；DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响；在电子显微镜下观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化；流式细胞... 目的研究SEB-scFv融合蛋白对胃癌的抑制作用。方法在体外通过MTT法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用；DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响；在电子显微镜下观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化；流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率。采用胃癌动物模型观察治疗后肿瘤重量和存活时间。结果胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大，且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应；1．0μg／ml和10μg/ml高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带；在电子显微镜下可观察到被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化；融合蛋白0．1μg／ml、1．0μg／ml、10μg／ml组细胞G0／G1期前有明显的凋亡峰出现，三者的凋亡率分别达到51．62％、54．21％和61．55％，而生理盐水组凋亡率仅为1．44％，差异具有统计学意义（P〈0．05）。融合蛋白治疗组大鼠移植瘤的瘤重明显低于其他各组（P〈0．05），抑瘤率高达61．3％，其生存时间为（31．7±2．1）d，存活时间延长达54．6％。结论SEB-scFv融合蛋白作为一种新的抗肿瘤生物制剂有明显的抑癌效应。 展开更多

关键词 胃肿瘤 细胞凋亡 重组融合蛋白质类 抗原

原文传递

基于结核分枝杆菌多表位抗原的诊断试剂研制及临床评价

14

作者 陈堃 冯晓燕 +6 位作者 杨锡琴 宋晓国 王国华 朱翠侠 邓敏 许辛 张贺秋 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第10期2379-2380,共2页

目的:基于结核分枝杆菌多表位抗原研制的新型结核免疫诊断试剂进行临床评价,评价其灵敏度和特异性,探讨其应用价值。方法:采用建立的间接ELISA方法,分别检测结核病和肺部其他疾病及健康人群血清样品。结果:508份肺结核患者样品中,检出阳... 目的:基于结核分枝杆菌多表位抗原研制的新型结核免疫诊断试剂进行临床评价,评价其灵敏度和特异性,探讨其应用价值。方法:采用建立的间接ELISA方法,分别检测结核病和肺部其他疾病及健康人群血清样品。结果:508份肺结核患者样品中,检出阳性433份,灵敏度85.23%(433/508),健康人523份中,检出阳性49份,特异性90.63%(49/523)。结论:研制的新型的结核抗体免疫诊断试剂灵敏度高,特异性强,可用于结核感染的大规模筛查试验。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 表位抗原 酶联免疫法

原文传递