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斑马鱼红系造血缺陷突变体的正向遗传学筛选 被引量：2
1
作者 霍中军 温宗华 +16 位作者 刘靖 王鹍 黄志斌 戴朝霞 马宁 颜广 陈英华 陈小辉 刘伟 马品芸 罗伟豪 赵颖 樊淑 赵嘉佳 黄红辉 温子龙 张文清 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期931-935,共5页
目的化学遗传学方法大规模筛选并初步鉴定所获得具有不同红系造血缺陷表型的斑马鱼突变体。方法乙基亚硝基脲(ENU)诱导雄性斑马鱼突变(founder),将其与野生型AB雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同来源的founder的F1代杂交产生F2家族。在F... 目的化学遗传学方法大规模筛选并初步鉴定所获得具有不同红系造血缺陷表型的斑马鱼突变体。方法乙基亚硝基脲(ENU)诱导雄性斑马鱼突变(founder),将其与野生型AB雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同来源的founder的F1代杂交产生F2家族。在F2代同家族内自交所产生的F3代胚胎中,用以βe1为探针,实施整体原位杂交实验,进行红系造血缺陷突变体筛选,并针对所筛选到的突变体在不同造血过程缺陷表型进行分类研究。结果和结论筛选得到4个βe1基因表达缺失突变体,其中2个为红系特异性造血缺陷突变体,另外2个突变体同时存在红系和淋系造血缺陷。 展开更多
关键词 斑马鱼 红系造血 正向遗传学筛选 βe1-globin
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秀丽隐杆线虫抗铜突变体的筛选及SNP定位
2
作者 宋少娟 郭亚平 +2 位作者 张学尧 张建珍 马恩波 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1261-1268,共8页
铜在有机体代谢过程中发挥着重要作用,但过量可产生毒害效应。文章以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为模式生物,寻找多细胞生物中铜代谢调节的关键基因。采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变秀丽隐杆线虫,通过100 000个杂合基因组的筛选... 铜在有机体代谢过程中发挥着重要作用,但过量可产生毒害效应。文章以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为模式生物,寻找多细胞生物中铜代谢调节的关键基因。采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变秀丽隐杆线虫,通过100 000个杂合基因组的筛选得到两个抗铜突变体ms1和ms2。在筛选培养基上野生型停止发育,而抗铜突变体则可发育到成虫,且抗铜性状能稳定遗传。与N2的回交实验表明,ms1的抗铜表型可能由单基因隐性突变导致,ms2的抗铜表型消失,可能是由多基因突变引起。以CB4856和ms1作为亲本,构建了F2群,经SNP定位,确定ms1突变位点位于染色体II(LGII)上,进一步对LGII染色体上的8个SNP标记进行分析,将ms1的突变位点定位在LGII:-6附近。秀丽隐杆线虫抗铜突变体ms1的筛选和定位可为深入研究线虫铜代谢及调控的分子机制提供实验依据。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 正向遗传筛选 抗铜 突变体 SNP定位
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斑马鱼髓系造血细胞缺陷突变体的大规模遗传筛选
3
作者 戴朝霞 颜广 +15 位作者 陈英华 刘伟 霍中军 温宗华 刘靖 王鹍 黄志斌 马宁 陈小辉 马品芸 罗伟豪 赵颖 樊淑 黄红辉 温子龙 张文清 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1230-1233,共4页
目的通过大规模化学遗传学方法筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体。方法利用化学诱变剂乙基亚硝基脲(ENU)将雄鱼精原母细胞诱变,通过与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder(F0)的F1代同胞之间交配产生F2家族,F3代来F2家族同胞... 目的通过大规模化学遗传学方法筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体。方法利用化学诱变剂乙基亚硝基脲(ENU)将雄鱼精原母细胞诱变,通过与AB野生型雌性斑马鱼交配产生F1代,源自不同founder(F0)的F1代同胞之间交配产生F2家族,F3代来F2家族同胞内交配,并分别以中性红和苏丹黑B染色筛选巨噬细胞和粒细胞缺陷突变体。结果我们筛选了350个F2家族,共1424对鱼。初步筛选到6个斑马鱼髓系造血系统的突变体,其中3个突变体为中性红染色异常,另3个突变体为苏丹黑染色异常,表明以上突变体可能存在巨噬细胞或粒细胞的发育障碍。结论 ENU化学诱变和中性红及苏丹黑B染色筛选斑马鱼髓系造血缺陷突变体是简单、价廉、有效的化学遗传学方法。通过保留突变体对后代进行进一步的研究分析,有望鉴定和克隆影响斑马鱼髓系造血新的基因或已知基因的新的调控途径。 展开更多
关键词 斑马鱼 髓系造血 正向遗传学筛选 苏丹黑 中性红
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