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不同染色组织切片及不同组织固定方法对检测STR基因座的影响 被引量:7
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作者 王坚 刘开会 +4 位作者 徐俊波 郭燕霞 邱宁 季安全 常彩琴 《刑事技术》 2003年第2期24-26,共3页
目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9... 目的探讨不同染色组织切片及不同组织固定方法对DNA检验的影响。方法采用Chelex100法及浓缩纯化方法提取DNA,PCR扩增后310型遗传分析仪检测。结果福尔马林固定4天以内或70%乙醇、无水乙醇分别固定1年及15年的HE染色切片可以检见Amel及9个STR基因座。PTAH等5种特殊染色未能检出相应基因座DNA谱带。结论70%乙醇或无水乙醇固定组织,石腊包埋组织及HE染色切片可以作为DNA?STR检验鉴定的样本材料。 展开更多
关键词 组织固定方法 染色组织切片 DNA—STR检验 福尔马林 法医学
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福尔马林固定白鱀豚标本DNA提取及其遗传多样性的初步研究 被引量:13
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作者 许黎美 万秋红 王丁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期272-278,共7页
福尔马林固定标本是宝贵的遗传资源,但是如何有效利用其中的遗传信息一直存在问题。本文尝试从标本预处理、消化、PCR扩增各方面综合考虑和优化改进,成功提取并扩增21头福尔马林固定白豚标本线粒体DNA控制区410bp片段。采用了3种预处... 福尔马林固定标本是宝贵的遗传资源,但是如何有效利用其中的遗传信息一直存在问题。本文尝试从标本预处理、消化、PCR扩增各方面综合考虑和优化改进,成功提取并扩增21头福尔马林固定白豚标本线粒体DNA控制区410bp片段。采用了3种预处理方法尽量去除固定标本中残存的甲醛,从试验结果来看,从酒精梯度+临界点干燥处理的标本中提取的DNA在扩增时具有明显优势。通过蛋白酶K消化过程中对于酶的浓度、温浴时间的比较试验,发现随着采用大幅提高酶浓度、延长消化时间等高强度的蛋白酶消化操作后,DNA的质量和产量均得到显著提高。针对标本DNA降解严重的特点,设计特异性好且长度合适的引物以及使用巢式引物扩增,均提高了标本DNA扩增的特异性和灵敏度。通过对所测得的21头白鱀豚线粒体DNA控制区部分序列的对比,发现全部个体在该片段上的序列完全一致,说明白豚遗传多样性极低。 展开更多
关键词 福尔马林固定标本 DNA提取 白暨豚 遗传多样性 极度濒危物种
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甲醛固定石蜡包埋组织中DNA的三种提取方法比较 被引量:6
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作者 田子强 刘俊峰 +4 位作者 张少为 李保庆 王福顺 曹富民 张月峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第3期335-338,共4页
为了寻找最佳的自普通 10 %甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法 ,取我院 2 0 0 0年手术切除的 10 %甲醛固定石蜡包埋的食管癌标本 10例 ,分别以蛋白酶K消化酚氯仿抽提法 ,蛋白酶K消化氯化钠盐析法和不同pH值下加热提取法提取其DNA ,... 为了寻找最佳的自普通 10 %甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法 ,取我院 2 0 0 0年手术切除的 10 %甲醛固定石蜡包埋的食管癌标本 10例 ,分别以蛋白酶K消化酚氯仿抽提法 ,蛋白酶K消化氯化钠盐析法和不同pH值下加热提取法提取其DNA ,然后进行电泳和PCR扩增分析。结果显示 ,蛋白酶K消化酚氯仿抽提法 ,蛋白酶K消化氯化钠盐析法所得DNA产量和质量均高于不同pH值下加热提取法。从而认为蛋白酶K消化氯化钠盐析法简便快捷 ,不用接触有毒的化学药品 ,是理想的DNA提纯方法。 展开更多
关键词 甲醛固定 石蜡包埋组织 DNA 提取方法 比较
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不同固定剂处理的对虾基因组DNA提取方法研究 被引量:4
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作者 闫晗 董君 +1 位作者 黄静 刘政 《应用化工》 CAS CSCD 2012年第3期548-551,553,共5页
为了从乙醇固定和福尔马林固定的对虾标本中获得高质量的基因组DNA,对标本的预处理方法以及DNA的提取方法进行了研究。结果表明,75%乙醇作为固定剂更适合用于提取对虾标本的基因组DNA。对乙醇固定的对虾标本采用PBS溶液和TE溶液进行预处... 为了从乙醇固定和福尔马林固定的对虾标本中获得高质量的基因组DNA,对标本的预处理方法以及DNA的提取方法进行了研究。结果表明,75%乙醇作为固定剂更适合用于提取对虾标本的基因组DNA。对乙醇固定的对虾标本采用PBS溶液和TE溶液进行预处理,获得的DNA得率较高,改进法、DTT法和CTAB法是较为理想的DNA提取方法。对于福尔马林固定的对虾标本来说,所选用的3种预处理方法均能为后期的DNA提取创造条件,而4种提取方法中的DTT法和CTAB法,则较为适宜提取福尔马林固定的对虾标本DNA,其中,GTE溶液预处理与DTT法相结合为最优组合方案。 展开更多
关键词 对虾 DNA提取 乙醇固定 福尔马林固定
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福尔马林固定组织SNP与STR检测的比较 被引量:2
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作者 邓佩佩 孙丽娟 +6 位作者 白梅 李淑瑾 王茜 张晓静 付光平 付丽红 丛斌 《中国法医学杂志》 CSCD 2017年第4期397-399,403,共4页
目的检测经长期福尔马林固定的组织降解情况,并比较组织中SNP与STR的检出率。方法本文对24例经福尔马林固定、-20℃保存5年的组织样本,采用Quantifiler?Trio DNA定量试剂盒检测样本DNA的降解系数及浓度,运用55-SNPs SNa Pshot复合分型... 目的检测经长期福尔马林固定的组织降解情况,并比较组织中SNP与STR的检出率。方法本文对24例经福尔马林固定、-20℃保存5年的组织样本,采用Quantifiler?Trio DNA定量试剂盒检测样本DNA的降解系数及浓度,运用55-SNPs SNa Pshot复合分型体系和Power Plex?21试剂盒分别进行SNP与STR检测。结果大部分样本降解系数在1~8,发生不同程度的降解。与未降解样本相比,SNP分型完全一致,检出率为100%;其中8例样本STR分型存在33个等位基因丢失,降解系数均大于2.6,且75.8%的等位基因片段长度大于300bp。当样本检测出16个STR基因座时,似然率与54个SNP相当。当样本检出大于17个STR时,似然率大于54个SNP。STR基因座片段长度与等位基因检出率之间呈负相关。除2例样本降解系数较小却发生等位基因丢失外,其余样本降解系数与等位基因检出率之间呈负相关。结论经福尔马林长期固定的组织DNA易降解,检测SNP明显优于STR,但需要更多的SNP以提高个体识别能力。 展开更多
关键词 法医物证学 SNP STR 福尔马林固定组织
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一种简便、快速从福尔马林固定石蜡包埋组织块提取HIV前病毒DNA的方法 被引量:1
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作者 张晨阳 邢辉 +3 位作者 范秀娟 郑立红 邵一鸣 刘德恭 《中国性病艾滋病防治》 1999年第6期267-268,272,共3页
把5μm厚福尔马林固定石蜡包埋的AIDS患者病理组织切片以蛋白酶K消化后加热,经乙醇沉淀后所产生的DNA直接用于PCR扩增HIV前病毒DNA,其产物经溴化乙锭染色后全部可以看到阳性条带。此技术快速、简单、实用,虽经减化抽提步骤,但并不影响对... 把5μm厚福尔马林固定石蜡包埋的AIDS患者病理组织切片以蛋白酶K消化后加热,经乙醇沉淀后所产生的DNA直接用于PCR扩增HIV前病毒DNA,其产物经溴化乙锭染色后全部可以看到阳性条带。此技术快速、简单、实用,虽经减化抽提步骤,但并不影响对HIV片段的扩增。 展开更多
关键词 PCR DNA提取 固定组织 艾滋病病毒
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一种简便的从石蜡包埋组织中提取RNA的方法 被引量:2
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作者 齐妍 常彬 +4 位作者 李洪安 王国亮 蒋金芳 梁伟华 李锋 《生物技术通讯》 CAS 2007年第1期98-100,共3页
目的:建立一种从石蜡包埋组织提取高质量RNA的简便、经济的方法。方法:运用TRIzol法和改进的AGPC(酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿)法等2种提取方法,从50例石蜡包埋组织中提取RNA,用紫外分光光度仪测定RNA的产率和纯度;用管家基因β-肌动蛋白做... 目的:建立一种从石蜡包埋组织提取高质量RNA的简便、经济的方法。方法:运用TRIzol法和改进的AGPC(酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿)法等2种提取方法,从50例石蜡包埋组织中提取RNA,用紫外分光光度仪测定RNA的产率和纯度;用管家基因β-肌动蛋白做RT-PCR,检测RNA的质量。结果:TRIzol法提取RNA的成功率为96%(48/50),AGPC法为94%(47/50),2种方法所得RNA的吸光度值及得率在统计学上均无明显差异。结论:AGPC法和TRIzol法的提取效率相似,且提取费用只有TRIzol法的一半左右,是一种简便、经济、适合大量提取石蜡包埋组织中的RNA的方法,可用于临床。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 RNA分离 TRIZOL法 AGPC法
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甲醛固定胚胎绒毛组织的STR分型
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作者 张勇果 侯伟光 《刑事技术》 2016年第3期257-258,共2页
输卵管妊娠切除组织经甲醛固定2月后送至本单位检验。取两份组织,一份消化液中加尿素、另一份不加尿素消化,以Maxwell?16自动仪提取DNA,Quantifiler定量试剂盒定量DNA浓度,经Power Plex21系统复合扩增,ABI3130xl遗传分析仪检测分型,通... 输卵管妊娠切除组织经甲醛固定2月后送至本单位检验。取两份组织,一份消化液中加尿素、另一份不加尿素消化,以Maxwell?16自动仪提取DNA,Quantifiler定量试剂盒定量DNA浓度,经Power Plex21系统复合扩增,ABI3130xl遗传分析仪检测分型,通过与嫌疑人的DNA比对,成功确认了胚胎的生物学父亲。根据本案例成功进行DNA提取与STR分型的经验,本文探讨了对甲醛固定的高度降解生物检材提取DNA和STR分型时应注意的事项。 展开更多
关键词 法医遗传学 甲醛固定组织 DNA提取 STR分型
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