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丹参对胆源性胰腺炎的防治作用 被引量:31
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作者 秦仁义 邹声泉 +1 位作者 吴在德 裘法祖 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期333-334,共2页
目的 探讨胆源性胰腺炎 (BP)的发病过程中 ,胰腺泡细胞内游离钙离子 [Ca2 + ]i浓度的变化机制及丹参对BP的防治作用。方法 采用流式细胞仪 (FCM )和细胞内 [Ca2 + ]i探针Fluo 3 AM检测胆胰管结扎组 (A组 )及其加丹参组 (B组 ,丹参注... 目的 探讨胆源性胰腺炎 (BP)的发病过程中 ,胰腺泡细胞内游离钙离子 [Ca2 + ]i浓度的变化机制及丹参对BP的防治作用。方法 采用流式细胞仪 (FCM )和细胞内 [Ca2 + ]i探针Fluo 3 AM检测胆胰管结扎组 (A组 )及其加丹参组 (B组 ,丹参注射剂量为 5g/kg)、CCK OP静脉输液组 (C组 )及其加丹参组 (D组 )和对照组 (E组 )SD大鼠胰腺泡细胞内 [Ca2 + ]i浓度 ,并检测血淀粉酶、血清钙离子浓度及胰腺病理变化。结果 A、B、C组胰腺泡细胞内 [Ca2 + ]i浓度分别为 8.95± 1.0 6、4.73± 1.0 3、5 .6 7± 0 .98、4.5 0± 0 .6 3,血浆淀粉酶含量分别为 (2 0 972 .1± 32 98.7)U/L、(12 330 .2±2 6 77.7)U/L、(1815 8.0± 3795 .6 )U/L、(112 36 .2± 2 136 .2 )U/L ,胰腺重量分别为 (6 0 9.6 0±71.96 )mg、(492 .70± 31.96 )mg、(5 2 8.70± 80 .0 5 )mg、(437.70± 46 .5 6 )mg及胰腺组织学炎症记分(14、10、12、9)均明显高于E组 3.31± 0 .70、(6 895 .7± 11913.9)U/L、(370 .6 0± 42 .6 7)mg、0 (P <0 .0 5 ) ;A、C组高于B、D组 (P <0 .0 5 )。A、B、C、D、E组血清钙离子浓度分别为 (2 .5 4± 0 .0 6 )mmol/L、(2 .71± 0 .13)mmol/L、(2 .5 6± 0 .13)mmol/L、(2 .90± 0 .0 9)mmol/L、(3.0 3± 0 .10 )mmol/ 展开更多
关键词 胆源性胰腺炎 胰腺泡细胞内钙离子 丹参
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低温处理对冬、春小麦细胞Ca^(2+)时空变化的影响 被引量:17
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作者 刘炜 孙德兰 +4 位作者 王红 简令成 尚忠林 王学臣 赵可夫 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2001年第12期1218-1223,共6页
用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,... 用Fluo 3/AM染色 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)方法 ,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦(TriticumaestivumL .)叶肉细胞原生质体 [Ca2 + ]cyt (thefreeCa2 + concentrationinthecytoplasm)的时空变化进行了比较。结果表明 ,静息态下小麦原生质体整体荧光强度基本不变 ,暗示 [Ca2 + ]cyt能维持在一稳定水平 ;同时 ,不同品种小麦间也显示了 [Ca2 + ]cyt水平荧光强度的不同。温度由 15℃连续降至约 2℃时 ,抗寒冬小麦 [Ca2 + ]cyt出现升高后的回复 ,2℃之后逐渐升高 ;冷敏感春小麦则无此回复过程 ,而是一直升高到最大值。推测这一不同的动态变化最终决定了植物在低温下产生冷适应的不同能力。这进一步为“Ca2 + 是低温下生理信号的传导者” 展开更多
关键词 fluo-3/am 小麦原生质体 静息态 CA^2+ 时空变化
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激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内游离钙的方法 被引量:14
3
作者 李楠 王俊玫 +3 位作者 杨军 丛玉隆 王黎明 刘成贵 《中国体视学与图像分析》 1997年第3期188-191,共4页
本文报道运用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的测定技术。用Fluo-3/AM进行染色,在37℃、5%CO2的孵育箱内孵育60分钟,用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光监测。药物最适应的pH值为74。此方法已成功地运用... 本文报道运用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的测定技术。用Fluo-3/AM进行染色,在37℃、5%CO2的孵育箱内孵育60分钟,用激光扫描共聚焦显微镜进行荧光监测。药物最适应的pH值为74。此方法已成功地运用于多种细胞内游离钙的测定研究上,大量实验结果表明,本方法灵敏、简单、快速,能实时监测细胞内游离钙的变化。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 细胞 游离钙
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西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用 被引量:12
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作者 绪广林 钱之玉 任萱 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期445-447,共3页
目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺(5-HT)、组胺(His)、过氧化氢(H2O2)所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含... 目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺(5-HT)、组胺(His)、过氧化氢(H2O2)所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280%、320%、285%。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。 展开更多
关键词 西红花苷 fluo-3/am 激光共聚焦扫描显微镜 内皮细胞 细胞内钙 心血管病
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拟南芥叶细胞游离钙离子的测定 被引量:10
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作者 孙清鹏 王小菁 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期79-82,共4页
低温(4℃)条件下将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶细胞,利用激光共聚焦显微技术检测了胞内钙离子荧光强度的分布。实验证明,低温导入Fluo-3/AM法测定拟南芥叶细胞中钙离子荧光强度的变化切实可行。茉莉酸(JA)处理能够诱导胞内游... 低温(4℃)条件下将钙离子荧光探针Fluo-3/AM导入拟南芥叶细胞,利用激光共聚焦显微技术检测了胞内钙离子荧光强度的分布。实验证明,低温导入Fluo-3/AM法测定拟南芥叶细胞中钙离子荧光强度的变化切实可行。茉莉酸(JA)处理能够诱导胞内游离钙离子浓度的升高。 展开更多
关键词 拟南芥 fluo-3/am 钙离子 茉莉酸
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AngⅡ对人心房细胞内游离钙浓度的影响及大蒜素的拮抗作用 被引量:11
6
作者 王玉英 程何祥 +3 位作者 张殿新 张荣庆 王海昌 郭文怡 《心电学杂志》 2005年第2期84-86,共3页
目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人心房细胞[Ca2+]i的影响以及AngⅡ受体拮抗剂大蒜素的拮抗作用。方法急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组:对照组、AngⅡ组(加入终浓度为0.1μmol/L的AngⅡ)、大蒜素组(加入终浓度为50μmol/L的大蒜素)和... 目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人心房细胞[Ca2+]i的影响以及AngⅡ受体拮抗剂大蒜素的拮抗作用。方法急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组:对照组、AngⅡ组(加入终浓度为0.1μmol/L的AngⅡ)、大蒜素组(加入终浓度为50μmol/L的大蒜素)和AngⅡ+大蒜素组(大蒜素50μmol/L和AngⅡ0.1μmol同时加入)。以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入干预药物后即刻与15min检测[Ca2+]i变化。结果对照组和大蒜素组人心房肌细胞内荧光强度和光密度值较低。AngⅡ加入后即刻光密度值开始增加,15min后荧光强度和光密度值显著增高,差异有显著性意义(P<0.05)。而AngⅡ+大蒜素组光密度值低于AngⅡ组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论AngⅡ可引起人心房肌细胞内钙超载,大蒜素能显著减轻AngⅡ诱导的人心房肌细胞内Ca2+超载。 展开更多
关键词 大蒜素 拮抗作用 胞内游离钙浓度 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) [Ca^2+]i 激光共聚焦显微镜技术 AngⅡ受体拮抗剂 fluo-3/am 心房肌细胞内 mol/L CA^2+超载 光密度值 人心房肌细胞 细胞内钙超载 荧光强度 荧光指示剂 急性分离
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不同光动力剂量对C6胶质瘤细胞胞内游离钙的影响 被引量:7
7
作者 胡韶 杨宝峰 岳武 《中国激光医学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期76-79,共4页
目的研究不同剂量光动力作用后C6胶质瘤细胞内游离钙犤Ca2+犦i的变化,探讨钙超载在光动力诱导C6胶质瘤细胞坏死和凋亡过程中的作用。方法常规培养C6胶质瘤细胞,以不同光动力剂量处理对数生长期的实验组细胞后,应用Fluo-3/AM为细胞内钙... 目的研究不同剂量光动力作用后C6胶质瘤细胞内游离钙犤Ca2+犦i的变化,探讨钙超载在光动力诱导C6胶质瘤细胞坏死和凋亡过程中的作用。方法常规培养C6胶质瘤细胞,以不同光动力剂量处理对数生长期的实验组细胞后,应用Fluo-3/AM为细胞内钙离子荧光指示剂,激光共聚焦显微镜测定各组C6胶质瘤细胞内游离钙的变化;MTT法检测各组细胞的死亡率。结果光动力作用后C6胶质瘤细胞内游离钙明显升高,平均胞内钙离子浓度和细胞死亡率随着光动力剂量增加而增大。结论光动力作用后C6细胞钙超载在光动力诱导肿瘤细胞坏死和凋亡过程中起重要作用。 展开更多
关键词 C6胶质瘤细胞 胞内游离钙 光动力治疗法 fluo-3/am
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西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响(英文) 被引量:9
8
作者 何书英 钱之玉 唐富天 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期778-781,共4页
目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10~8,1×10~7,1... 目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10~8,1×10~7,1×10~6mol·L-1)均能明显抑制1×10~2mol·L-1H2O2引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%,57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷(1×10-8,1×10~7,1×10-6mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHCl3导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%,27.8%和50.0%(P<0.01)。结论 西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。 展开更多
关键词 西红花苷 激光共聚焦显微镜 平滑肌细胞 fluo-3/am 钙离子
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单细胞内Ca^(2+)时空变化的激光共聚焦显微测定 被引量:5
9
作者 杨小毅 颜坤 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第5期442-445,共4页
应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/... 应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/6J小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获得良好的标记效果.相反,若探剂浓度太高或负载时间太长,胞内荧光强度太强,影响在共聚焦显微镜镜下分辨细胞内结构.因此用LSCM研究细胞内游离Ca2+变化时,荧光探剂的负载应以获得最适荧光信号而不是以最大荧光强度为标准.上述方法在其他如平滑肌细胞、卵母细胞中的测定亦获得满意的结果,这对进一步研究各种生理和病理条件下细胞内Ca2+信号的动态变化、与跨膜Ca2+梯差的关系及对活细胞功能活动的调节提供了一种可行的、直观的研究手段。 展开更多
关键词 细胞 钙离子 激光 共聚焦显微系统
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脑梗死病人急性期血小板密度、细胞内游离钙及其功能的变化 被引量:6
10
作者 白颖 曹凤林 李柏岩 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期521-523,共3页
目的 观察脑梗死病人急性期血小板密度、细胞内游离钙浓度及血小板聚集和释放的变化。方法 以梯度离心法制备血小板密度亚群 ,激光共聚焦显微镜法测定Fluo- 3/AM负载后血小板细胞内游离钙荧光强度的变化 ,以透光度法和介质中ATP的量... 目的 观察脑梗死病人急性期血小板密度、细胞内游离钙浓度及血小板聚集和释放的变化。方法 以梯度离心法制备血小板密度亚群 ,激光共聚焦显微镜法测定Fluo- 3/AM负载后血小板细胞内游离钙荧光强度的变化 ,以透光度法和介质中ATP的量评价血小板的凝集和释放反映。对照组和实验组血小板分别来自于正常志愿者和脑梗死病人急性期的静脉血。结果 ①Percoll梯度离心的结果表明 ,脑梗死病人急性期血液中高密度亚群 (比重 >1 0 6 2 )血小板的数量与对照组〔(2 4 6± 8 6 ) % ,n =5〕比较显著增多〔(5 2 1± 11 4) % ,n =6 ,P <0 0 0 1〕 ,上述结果与共聚焦显微镜直接观察的结果一致。②与对照组相比 3μΜADP介导的聚集反应增强〔(6 9 4± 19 8) % ,P <0 0 1〕 ,介质中ATP的含量为 1 2 6± 0 44 (P <0 0 1)。③对照组和实验组细胞内钙的静息水平无明显差异 ,加 10 μΜADP后 ,实验组细胞内钙的荧光强度增加明显 (86 2± 319,P <0 0 1)。结论 与对照组比较 ,脑梗死病人急性期 ,高密度亚群血小板的数量显著增加。血小板聚集和释放功能明显增强 ,这一结果可能与细胞游离钙增加有关。 展开更多
关键词 脑梗死 血小板急性期密度 游离钙
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钙超载大鼠肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变 被引量:7
11
作者 张晓春 徐晓蓉 文允镒 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期250-253,共4页
目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)胞内是否存在钙离子 (Ca2 + )稳态调节异常。方法 以 Fluo- 3/AM作为 Ca2 + 指示剂 ,应用激光扫描共聚焦显微镜技术 ,比较钙超载模型大鼠肠系膜 VSMC(Ca OMV)与正常 Wistar大鼠肠系膜 VS... 目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)胞内是否存在钙离子 (Ca2 + )稳态调节异常。方法 以 Fluo- 3/AM作为 Ca2 + 指示剂 ,应用激光扫描共聚焦显微镜技术 ,比较钙超载模型大鼠肠系膜 VSMC(Ca OMV)与正常 Wistar大鼠肠系膜 VSMC(WMV )静息态的胞浆与核内游离 Ca2 + 水平 ([Ca2 + ]i,[Ca2 + ]n) ,以及在多种药物刺激下 Ca2 +稳态调节的差异。结果 两种 VSMC静息态 [Ca2 + ]i及 [Ca2 + ]n 并无显著性差异 ,但在KCl、Bay- k86 44、Ang- 、IP3、CHCl3和 CPA等药物作用下 ,Ca OMV [Ca2 + ]i与 [Ca2 + ]n的升高幅度较 WMV显著增大 (P<0 .0 1)。结论  (1) Ca OMV对激动剂作用的敏感性增强 ,存在 Ca2 + 稳态调节异常 ,提示胞内钙超载与胞外钙超载同时共存 ,是血管硬化和老化机制的两个方面 ;(2 )血管钙超载时 ,VSMC无论质膜上的 Ca2 + 门控系统还是胞内钙池的释放与重储均有异常 ;(3)在 Ca OMV,胞浆与核内钙的调节均存在异常。 展开更多
关键词 钙超载 肠系膜血管平滑肌细胞 钙离子稳态调节
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用激光扫描共聚焦显微镜观察仙人掌提取物镇痛作用对小鼠脑细胞内钙离子的影响 被引量:5
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作者 韦国锋 程金生 +3 位作者 徐群清 黄祖良 莫少泽 何有成 《应用激光》 CSCD 北大核心 2006年第6期460-461,448,共3页
根据荧光探针FLUO—3/AM能与活细胞内[C_a^(2+)]特异性结合后发出荧光的特性,将20只小白鼠随机分成给药组和对照组,给药组动物腹腔注射仙人掌(Opuntia Ailleii Haw)提取物使其产生镇痛作用,用FLUO—3/AM荧光探针对两组动物的脑细胞进行... 根据荧光探针FLUO—3/AM能与活细胞内[C_a^(2+)]特异性结合后发出荧光的特性,将20只小白鼠随机分成给药组和对照组,给药组动物腹腔注射仙人掌(Opuntia Ailleii Haw)提取物使其产生镇痛作用,用FLUO—3/AM荧光探针对两组动物的脑细胞进行染色,利用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)技术分别对两组小鼠的脑细胞内[C_a^(2+)]的变化进行了观察研究,并用图像分析技术进行处理,进一步探讨仙人掌提取物镇痛作用的机制,实验结果表明:仙人掌提取物镇痛作用时,小鼠脑细胞内[C_a^(2+)]的平均荧光像素明显低于对照组(p<0.001)。这说明仙人掌提取物能够降低小鼠脑细胞内[C_a^(2+)],证实了仙人掌提取物的镇痛机理与钙离子有关。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 仙人掌提取物 镇痛作用 fluo-3/am 脑细胞 钙离子
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芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响 被引量:4
13
作者 何玲 刘丽芳 +4 位作者 李海涛 郭胜伟 邱嘉斌 李富 蔡宝昌 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1679-1683,共5页
目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避... 目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育。细胞内游离钙([Ca2+]i)用VictorⅡ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示。结果:当有外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(1 188±163),75 mmol.L-1KCl和10 mmol.L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2+]i增高,FI峰值分别增至(4 270±982)和(3 096±402)。芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100μmol.L-1)对静息[Ca2+]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%,88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%。当无外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(813±112)。咖啡因(40 mmol.L-1)和CPA(30μmol.L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2+]i升高,FI值分别增至(2 944±371)和(1 844±332)。芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol.L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%,77.5%,88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%。结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强。此外,芥子碱对Caffeine-ryan-odine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强。这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂。 展开更多
关键词 芥子碱 细胞内游离钙 PCI2细胞 fluo-3/am 钙阻滞剂
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Effect of Lanthanum(Ⅲ) on Cytosolic Free Calcium in Isolated Rabbit Mature Osteoclasts 被引量:4
14
作者 张金超 张天蓝 +3 位作者 许善锦 王夔 于世凤 杨梦苏 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第5期580-583,共4页
The effect of lanthanum ( Ⅲ ) (La^3 + ) on cytosolic free calcium ( [ Ca^2 + ] i ) in isolated rabbit mature osteoclasts was studied with the employment of fluo-3/AM as an intracellular calcium-sensitive fluo... The effect of lanthanum ( Ⅲ ) (La^3 + ) on cytosolic free calcium ( [ Ca^2 + ] i ) in isolated rabbit mature osteoclasts was studied with the employment of fluo-3/AM as an intracellular calcium-sensitive fluorescent probe by using a confocal laser scanning microscope. La^3+ does not alter basal [Ca^2+ ]i levels and cell spread area at the concentration of 1.00 × 10^- 8 mol· L ^- 1. However, La^3 + at higher concentrations ( 1. 00 × 10^ - 5 and 1.00 × 10^- 7 mol· L^- 1 ) decreases [ Ca^2 + ] i levels and cell spread area, and greater decreases are observed for the higher concentrations of La^3 + . Since [Ca^2 + ]i affects cytoskeleton and the adhesion properties of osteoclasts, our results seem to suggest that La^3 + inhibit bone resorption by decreasing [Ca^2+]i in rabbit mature osteoclasts. 展开更多
关键词 lanthanum( OSTEOCLASTS cytosolic free calcium fluo-3/am rare earths
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Effect of melatonin on the spatial and temporal changes of [Ca^(2+) ]i in single living cells of cortical neurons by laser scanning confocal microscopy 被引量:5
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作者 张庆柱 张均田 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2000年第6期78-82,共5页
Objective To examine the effects of melatonin on the dynamic changes in the concentration of intracellular free Ca 2+ ([Ca 2+ ]i) in single intact cultured cortical neurons isolated from fetal rats, in order... Objective To examine the effects of melatonin on the dynamic changes in the concentration of intracellular free Ca 2+ ([Ca 2+ ]i) in single intact cultured cortical neurons isolated from fetal rats, in order to explore the possible antiaging mechanisms of melatonin (MT) Methods Using the highly fluorescent Ca 2+ sensitive indicator Fluo 3/AM, cortical neurons cultured in a 35?mm Tissue Culture Dish were in incubated for 45?min at room temperature with 5?μmol/L Fluo 3/AM, resulting in proper intracellular dye concentration to provide adequate signal strength for detection and excellent Laser Scanning Confocal Microscopy (LSCM) imaging of [Ca 2+ ]i while not disturbing normal intracellular physiology The changes in fluorescent intensity were monitored by LSCM Results Bay K8644 (10 6 ?mol/L), KCl (20 ?mmol/L), sodium L glutamate (Glu, 50?μmol/L) caused a rapid increase of [Ca 2+ ]i in cortical neurons, and this increase could be significantly attenuated by 10 6 and 10 7 mol/L MT Conclusions MT could antagonize the extracellular Ca 2+ influx, reduce Ca 2+ overload, and have a protective effect on neurons This may be one of the important antiaging mechanisms of MT 展开更多
关键词 MELATONIN CALCIUM laser scanning confocal microscopy fluo-3/am cerebral cortex NEURONS primary cell cultures AGING
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荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed测量单细胞中比率钙 被引量:6
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作者 马晓冬 朱晓亮 +5 位作者 赵清 张瑾 张飒 雷国华 黄行许 鲍永耀 《中国医学物理学杂志》 CSCD 1999年第3期180-182,共3页
应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜)和钙离子指示剂Fluo-3/AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo-3/AM浓度10μmol/L,... 应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜)和钙离子指示剂Fluo-3/AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo-3/AM浓度10μmol/L,FuraRed浓度10μmol/L的条件下,昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca^2+的动态变化,使Ca^2+的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响,提供了一种准确定性定量细胞内Ca^2+的实时、动态、原位变化的新方法。 展开更多
关键词 激光扫描 共聚焦显微镜 比率钙 荧光探针
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共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用 被引量:4
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作者 黄娅林 赵鹏 程介士 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期98-100,104,F003,共5页
目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3/ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像... 目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3/ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果 在 0.5 mmol/L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol/L谷氨酸与3 mmol/L牛磺酸共同 作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论 抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独 特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化 以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。 展开更多
关键词 钙超载 海马神经元 共聚焦激光扫描显微镜 牛磺酸 谷氨酸 CLSM 大鼠海马 荧光强度 活细胞 fluo-3/am
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增强UV-B辐射对小麦根尖细胞游离钙离子分布的影响 被引量:2
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作者 王亚妮 韩榕 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1622-1626,共5页
以小麦根尖为材料,利用低温装载法在根尖细胞中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,利用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦根尖细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对胞质内游离钙离子浓度进行了测定.结果表明:... 以小麦根尖为材料,利用低温装载法在根尖细胞中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,利用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦根尖细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对胞质内游离钙离子浓度进行了测定.结果表明:(1)对照组小麦根尖细胞内钙离子荧光主要分布于细胞胞质周缘;而经UV-B辐射处理后,细胞内钙离子荧光不仅分布在胞质周缘,且在细胞壁与胞间隙可观察到大量钙离子荧光.(2)对单个细胞内钙离子荧光强度进行测定,发现UV-B处理使细胞胞质内游离钙离子浓度明显升高. 展开更多
关键词 小麦 增强UV-B辐射 游离钙离子 fluo-3/am
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丹参悬浮培养细胞原生质体的制备和活力检测 被引量:4
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作者 朱楠 刘俊 +1 位作者 张馨宇 董娟娥 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1612-1621,共10页
对丹参悬浮培养细胞原生质体制备条件进行了研究,并利用FDA染色和钙离子荧光探针Fluo-3/AM装载对制备得到的原生质体的活力和功能进行了检测。丹参悬浮培养细胞原生质体的制备条件为:悬浮培养细胞酶解的适宜酶液组合为纤维素酶1.5%、果... 对丹参悬浮培养细胞原生质体制备条件进行了研究,并利用FDA染色和钙离子荧光探针Fluo-3/AM装载对制备得到的原生质体的活力和功能进行了检测。丹参悬浮培养细胞原生质体的制备条件为:悬浮培养细胞酶解的适宜酶液组合为纤维素酶1.5%、果胶酶0.3%和离析酶0.5%;适宜的甘露醇浓度为0.4 mol/L;酶解时间为12 h;在600 r/min转速下离心5 min收集,纯化得到原生质体,其产量为1.1×106/g FW,FDA检测显示其活力为95%以上,荧光探针Fluo-3/AM可成功装载到原生质体中。 展开更多
关键词 丹参 原生质体 激光共聚焦 FDA fluo-3/am
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电磁脉冲对海马神经元的损伤效应及其对[Ca^(2+)]_i的影响 被引量:3
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作者 李玉红 王德文 +4 位作者 高亚兵 王水明 胡文华 彭瑞云 李杨 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期193-196,共4页
目的 观察电磁脉冲(EMP)对海马神经元的损伤效应及其对[Ca2+ ]i的影响,以深入探讨EMP致脑损伤的机制。方法 EMP辐射条件为6×104V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率为2. 5脉冲/min,作用2min。原代培养的海马神经元经EMP辐射... 目的 观察电磁脉冲(EMP)对海马神经元的损伤效应及其对[Ca2+ ]i的影响,以深入探讨EMP致脑损伤的机制。方法 EMP辐射条件为6×104V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率为2. 5脉冲/min,作用2min。原代培养的海马神经元经EMP辐射后,采用MTT法对细胞活力进行测定;FACS法检测细胞凋亡和坏死;Fluo 3 AM荧光探针负载、激光共聚焦显微镜扫描测定神经元胞内游离钙离子浓度,即[Ca2+ ]i。结果 细胞被EMP辐射后0~6h活力明显下降(P<0. 05), 12h开始回升, 24h基本接近正常水平;EMP辐射后0~12h细胞凋亡率显著升高,坏死也有增加;EMP辐射后即刻引起神经元内的Ca2+荧光强度明显增加。结论 EMP致海马神经元活力下降、凋亡增加、胞内钙超载。 展开更多
关键词 [CA^2+]I 海马神经元 损伤效应 电磁脉冲 fluo-3-am 胞内游离钙离子浓度 激光共聚焦显微镜 EMP FACS法 细胞凋亡率 辐射条件 上升时间 原代培养 细胞活力 MTT法 荧光探针 荧光强度 脑损伤 min 24h 钙超载 测定 坏死 下降
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