山葡萄中类黄酮3’-羟化酶基因(F3’H)cDNA的克隆和分析 被引量：18

1

作者 刘海峰 杨成君 +2 位作者 赵权 李波 王军 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1186-1190,共5页

用RT-PCR和SMART RACE技术克隆了山葡萄F3’H基因的全长cDNA序列。其GenBank登陆号为FJ645766,F3’HcDNA全长1844bp,包括开放阅读框1530bp,编码509个氨基酸,该基因表达产物相对分子质量为56.14kDa,等电点为8.24,是不稳定蛋白。该基因属... 用RT-PCR和SMART RACE技术克隆了山葡萄F3’H基因的全长cDNA序列。其GenBank登陆号为FJ645766,F3’HcDNA全长1844bp,包括开放阅读框1530bp,编码509个氨基酸,该基因表达产物相对分子质量为56.14kDa,等电点为8.24,是不稳定蛋白。该基因属于P450超基因家族,不包含信号肽。氨基酸序列与欧亚种葡萄(AJ8803537)、矢车菊(FJ753550)、金鱼草(DQ272592)、大豆(AB061212)和玉米(EU966228)等植物的F3’H氨基酸序列的同源性系数分别为98%、77%、72%、74%和57%。 展开更多

关键词 山葡萄 CDNA克隆 类黄酮3’-羟化酶

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银杏类黄酮3’羟化酶基因的克隆与表达分析 被引量：15

2

作者 李琳玲 程华 +1 位作者 陈小玲 程水源 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期643-654,共12页

利用简并PCR和RACE技术从银杏叶片中分离到黄酮3’羟化酶基因Gb F3’H的c DNA全长序列(Gen Bank No.:KP056747)。其全长为2 144 bp,含有一个1 671 bp的开放式阅读框(ORF),编码556个氨基酸序列,预测氨基酸大小为63.47 k D,等电点为7.71... 利用简并PCR和RACE技术从银杏叶片中分离到黄酮3’羟化酶基因Gb F3’H的c DNA全长序列(Gen Bank No.:KP056747)。其全长为2 144 bp,含有一个1 671 bp的开放式阅读框(ORF),编码556个氨基酸序列,预测氨基酸大小为63.47 k D,等电点为7.71。蛋白质同源序列分析表明,Gb F3’H与其他物种F3’H同源性较低,而与菊苣(Cichorium intybus)同源性最高,为56.3%。同源建模分析显示Gb F3’H与P450家族蛋白的三维结构及活性位点高度相似,最终定位于微粒体膜上。进化树分析结果显示Gb F3’H与其他植物分化较早,序列差异较大。组织表达分析显示,Gb F3’H在银杏不同组织中都有表达,其中雄蕊表达水平最高,其次为成熟叶。诱导表达分析显示,Gb F3’H转录水平受UV-B、6-BA、SA、ABA和IAA影响诱导上调,而伤害处理对其表达量无明显影响。Gb F3’H诱导表达模式与调控银杏黄酮含量变化呈正相关,其上游调控序列存在与黄酮调控相关的顺式元件,意味着Gb F3’H可能参与了银杏黄酮类物质的合成代谢,并与黄酮类物质向花青素合成分流有关。 展开更多

关键词 银杏 类黄酮3’羟化酶 黄酮 表达调控

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橡胶树F3’H基因克隆及其功能分析 被引量：6

3

作者 范月婷 辛士超 +4 位作者 NAYCHI Koko 畅娇 黄天带 黄华孙 华玉伟 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2020年第9期1733-1740,共8页

从橡胶树叶片转录组数据库中调取花青素合成途径中的关键酶类黄酮3’-羟化酶(F3’H)基因序列信息,通过RT-PCR扩增得到2个橡胶树F3’H基因,分别命名为HbF3’H1和HbF3’H2。通过荧光定量PCR分析发现,只有HbF3’H1基因在不同发育时期的橡... 从橡胶树叶片转录组数据库中调取花青素合成途径中的关键酶类黄酮3’-羟化酶(F3’H)基因序列信息,通过RT-PCR扩增得到2个橡胶树F3’H基因,分别命名为HbF3’H1和HbF3’H2。通过荧光定量PCR分析发现,只有HbF3’H1基因在不同发育时期的橡胶树叶片和嫩茎中的表达水平与花青素的合成积累趋势完全一致。HbF3’H1所编码的蛋白属于P450超家族,具有保守的F3’H结构域,而且HbF3’H1基因的启动子中包含多种环境效应元件,说明HbF3’H1基因的表达受环境因子调控。通过农杆菌转化烟草发现,过表达HbF3’H1基因的烟草花瓣大量累积花青素,其颜色较非转基因烟草显著加深,同时,荧光定量PCR发现HbF3’H1表达水平与转基因烟草花瓣颜色呈正相关,说明HbF3’H1基因表达促进花青素的累积。本研究为阐明橡胶树花青素代谢途径奠定基础。 展开更多

关键词 橡胶树 花青素 类黄酮3’-羟化酶 转基因烟草

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过量表达紫茎泽兰类黄酮3’-羟化酶基因对转基因烟草POD、PAL活性的影响 被引量：6

4

作者 张松焕 李春奇 +2 位作者 郭惠明 裴熙祥 程红梅 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第3期98-101,共4页

紫茎泽兰具有强烈的化感作用,可抑制周围其他植物生长。类黄酮3’-羟化酶(F3’H)属于细胞色素P450(CYP)单加氧酶,具有催化多种依赖NADPH或NADH的底物氧化反应的功能,在植物化感作用中行使一定的功能。利用转F3’H基因的烟草为实验材料,... 紫茎泽兰具有强烈的化感作用,可抑制周围其他植物生长。类黄酮3’-羟化酶(F3’H)属于细胞色素P450(CYP)单加氧酶,具有催化多种依赖NADPH或NADH的底物氧化反应的功能,在植物化感作用中行使一定的功能。利用转F3’H基因的烟草为实验材料,分别测定转F3’H基因植株、转pB I121空载体植株和野生型植株的过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,结果表明,转F3’H基因植株的POD活性分别是野生型植株和转空载体植株的3.8倍和2.0倍,而PAL活性则相应为4.0倍和2.0倍。由此推断F3’H基因在抵御伤害方面具有重要作用。 展开更多

关键词 类黄酮3’-羟化酶 过表达 POD PAL

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一个类黄酮3'-羟化酶参与多星韭花色素生物合成的功能解析

5

作者 孔德静 梁进丽 +4 位作者 宫秋玲 俞沙沙 梁琳 孙威 鞠志刚 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第4期581-587,共7页

类黄酮3'-羟化酶(F3'H)在花色素苷生物合成过程中起关键作用。明确多星韭F3'H在花色素苷生物合成中的功能,将为多星韭花色形成及改良研究提供基因资源。基于转录组数据从多星韭花朵中克隆获得AwF3'H,并对其进行生物信... 类黄酮3'-羟化酶(F3'H)在花色素苷生物合成过程中起关键作用。明确多星韭F3'H在花色素苷生物合成中的功能,将为多星韭花色形成及改良研究提供基因资源。基于转录组数据从多星韭花朵中克隆获得AwF3'H,并对其进行生物信息学分析,利用Real time PCR对AwF3'H1的表达模式进行分析,并利用蘸花法将AwF3'H转入拟南芥中,同时对转基因植株进行表型观察及花色素苷检测分析。结果表明,Aw F3'H的ORF全长为1545 bp,编码514个氨基酸,属于细胞色素P450家族成员,与洋葱AcF3'H的亲缘关系最近;在所检测组织均有表达,但在雄蕊中表达最高,根中表达最低;与野生型拟南芥相比,转AwF3'H拟南芥T2代幼苗子叶及下胚轴颜色明显加深,矢车菊素与天竺葵素类花色苷积累量显著增加。表明AwF3'H具有类黄酮3'-羟化酶的功能。 展开更多

关键词 多星韭 基因功能验证 类黄酮3'-羟化酶 表达分析 花青素

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飞机草类黄酮3’-羟化酶基因(CoF3’H)的克隆及其在烟草中的表达 被引量：6

6

作者 何海旺 潘华清 +1 位作者 张铙丹 何龙飞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期479-486,共8页

利用RT-PCR和RACE技术从飞机草中克隆得到1628 bp的类黄酮3’-羟化酶c DNA的全长序列,命名为Co F3’H,Gen Bank登录号为HQ268505.1。Co F3’H基因的编码区长度为1524 bp,编码507个氨基酸。氨基酸序列含P450蛋白结构域和半胱氨酸亚铁血... 利用RT-PCR和RACE技术从飞机草中克隆得到1628 bp的类黄酮3’-羟化酶c DNA的全长序列,命名为Co F3’H,Gen Bank登录号为HQ268505.1。Co F3’H基因的编码区长度为1524 bp,编码507个氨基酸。氨基酸序列含P450蛋白结构域和半胱氨酸亚铁血红素结合域保守区(F××G×R×C×G),利用DNAMAN软件比对显示,Co F3’H与其他植物的F3’H蛋白的同源性很高。通过农杆菌介导成功地将Co F3’H基因导入烟草,T2代的转Co F3’H基因烟草植株的黄酮含量显著高于野生型。说明Co F3’H在黄酮的生物合成中起重要作用,为后续研究飞机草的化感作用及综合利用提供基础。 展开更多

关键词 飞机草 类黄酮3’-羟化酶 克隆 表达

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橄榄类黄酮3'-羟化酶CaF3'H基因的克隆及其表达特性分析 被引量：5

7

作者 黄敏杰 文志丰 +2 位作者 池毓斌 彭真汾 陈清西 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期839-847,共9页

以‘清榄一号’橄榄(Canarium album)果肉为材料,通过RACE技术克隆得到橄榄类黄酮3'-羟化酶(F3'H)cDNA序列全长,命名为CaF3'H(GenBank登录号KY189088.1)。CaF3'H全长为1 649 bp,包含一个1 554 bp开放阅读框(ORF),编码51... 以‘清榄一号’橄榄(Canarium album)果肉为材料,通过RACE技术克隆得到橄榄类黄酮3'-羟化酶(F3'H)cDNA序列全长,命名为CaF3'H(GenBank登录号KY189088.1)。CaF3'H全长为1 649 bp,包含一个1 554 bp开放阅读框(ORF),编码517个氨基酸,5'和3'非编码区(UTR)长度分别为40 bp和55 bp,编码的氨基酸序列含有P450结构域和半胱氨酸亚铁血红素结合域保守区。氨基酸多重比较分析表明:橄榄和芒果的氨基酸序列相似性为78.89%,较之于其他物种相对最高。蛋白结构预测结果显示,CaF3'H蛋白呈弱亲水性,存在跨膜结构域,没有信号肽。实时荧光定量PCR分析显示,CaF3'H在‘清榄一号’和‘檀香’2个橄榄栽培品种的表达量在花后50 d达到最大值,此后其表达量随果实的成熟呈现出波动,总体表达量比花后50 d都低,这与橄榄生长发育时期多酚含量的变化趋势相符,推测CaF3'H基因在调控果实多酚含量过程中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 橄榄 类黄酮3'-羟化酶(F3'H) 基因克隆 实时荧光定量PCR

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苦荞类黄酮3′-羟化酶基因的克隆及其冷胁迫下的组织表达 被引量：5

8

作者 李双江 朱冬寅 +3 位作者 秦东 李成磊 陈惠 吴琦 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1300-1306,共7页

目的克隆苦荞Fagopyrum tataricum类黄酮3′-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)基因全长cDNA序列,对该基因进行序列分析和原核表达,以及冷胁迫条件下该基因表达量和花青素定量测定。方法采用同源克隆和RACE技术从苦荞花蕾中克隆... 目的克隆苦荞Fagopyrum tataricum类黄酮3′-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)基因全长cDNA序列,对该基因进行序列分析和原核表达,以及冷胁迫条件下该基因表达量和花青素定量测定。方法采用同源克隆和RACE技术从苦荞花蕾中克隆苦荞F3′H(FtF3′H);构建FtF3′H原核表达载体pET-30b(+)-FtF3′H,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达;采用半定量RT-PCR分析FtF3′H基因在冷胁迫下芽期苦荞不同组织的表达量,并采用分光光度计法测量花青素量。结果苦荞FtF3′H基因含有一个1 470 bp的ORF,编码489个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450家族;SDS-PAGE分析表明,目的蛋白相对分子质量54 000;芽期苦荞冷胁迫处理前后子叶和胚轴中FtF3′H表达量以及花青素量的变化分析表明,冷胁迫显著增强了FtF3′H的表达和花青素的积累(P<0.05)。结论成功克隆FtF3′H基因,并实现了FtF3′H基因的异源表达;芽期苦荞在冷胁迫下,可能通过提高FtF3′H基因表达量进而促进花青素的合成,参与其抗逆生理过程。 展开更多

关键词 苦荞 类黄酮3’-羟化酶 基因克隆 原核表达 冷胁迫 花青素

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水芹类黄酮3＇-羟化酶基因的克隆与表达特性分析 被引量：4

9

作者 康美玲 冯凯 +3 位作者 段希 王柯文 王枫 熊爱生 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期282-290,共9页

类黄酮3'-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase,F3'H)属于细胞色素P450家族(cytochromeP450,CYP450),在植物主要成色物质花青素的合成中发挥重要作用。本实验以‘八卦洲水芹’以及紫色叶柄突变型水芹为实验材料,利用RT-PCR方法,... 类黄酮3'-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase,F3'H)属于细胞色素P450家族(cytochromeP450,CYP450),在植物主要成色物质花青素的合成中发挥重要作用。本实验以‘八卦洲水芹’以及紫色叶柄突变型水芹为实验材料,利用RT-PCR方法,从紫色叶柄突变型水芹的cDNA中克隆得到编码类黄酮3'-羟化酶的基因,命名为OjF3'H1。序列分析显示,OjF3'H1基因全长1575bp,共编码524个氨基酸。OjF3'H1蛋白相对分子质量为58292.59,理论等电点为6.77。系统进化分析显示,OjF3'H1蛋白具有高度保守性,与同属伞形科的胡萝卜F3'H1进化关系最近。OjF3'H1编码的蛋白属于疏水蛋白,无序化比例为5.53%,空间结构主要由α-螺旋和β-折叠组成。实时定量PCR分析显示,OjF3'H1在不同品种水芹茎中相对表达量有明显差异,紫色叶柄突变型水芹中OjF3'H1的表达量明显比‘八卦洲水芹’中高。 展开更多

关键词 水芹 类黄酮3'-羟化酶基因 克隆 叶柄 表达分析

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芡叶类黄酮-3'-羟化酶(F3'H)基因表达分析及功能验证 被引量：4

10

作者 景宗慧 尹梦娇 +4 位作者 王前 鲍锞 周佩娜 刘潺潺 吴啟南 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期4712-4720,共9页

芡叶中含有丰富的花青素,花青素合成是类黄酮合成路径重要分支之一,其中类黄酮-3'-羟化酶(F3'H)可参与生成花青素合成所需的重要的中间产物。该研究依据芡Euryale ferox叶转录组数据,克隆获得芡叶F3'H的cDNA序列,命名为EfF3... 芡叶中含有丰富的花青素,花青素合成是类黄酮合成路径重要分支之一,其中类黄酮-3'-羟化酶(F3'H)可参与生成花青素合成所需的重要的中间产物。该研究依据芡Euryale ferox叶转录组数据,克隆获得芡叶F3'H的cDNA序列,命名为EfF3'H。通过生物信息学与qRT-PCR技术检测EfF3'H在芡的不同栽培种及不同时期基因表达,进而分析该基因与黄酮类物质合成的相关性,并通过真核表达系统验证了EfF3'H的生物学功能。结果显示,EfF3'H包含长1566 bp开放阅读框,编码521个氨基酸,属亲水性跨膜蛋白,预测定位于细胞质膜,结合保守结构域预测分析,该蛋白属于细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)家族;qRT-PCR结果表明,EfF3'H表达在不同栽培种之间具有显著差异性,且其表达水平与芡叶中的相关类黄酮物质含量呈高度相关性。真核表达研究表明,EfF3'H蛋白具有将山柰酚转化为槲皮素的生物活性。该研究首次克隆了芡中EfF3'H的cDNA序列,并验证了其生物功能,为进一步开发芡叶资源提供科学依据,同时为进一步解析药用植物中黄酮类物质的生物合成途径奠定了基础。 展开更多

关键词 芡 类黄酮-3'-羟化酶 QRT-PCR 真核表达 槲皮素

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威氏绿绒蒿MwF3'H基因克隆与表达分析 被引量：2

11

作者 严朋飞 张莹欣 +2 位作者 贾维嘉 刘建 屈燕 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第19期6382-6387,共6页

为探究类黄酮3’-羟化酶(flavonoid 3’-hydroxylase,F3’H)基因在威氏绿绒蒿(Meconopsis wilsonii)花色形成过程中的表达规律。本研究以威氏绿绒蒿蓝紫色的花瓣为研究材料,使用RACE克隆技术克隆获得了威氏绿绒蒿花青素合成途径中的关... 为探究类黄酮3’-羟化酶(flavonoid 3’-hydroxylase,F3’H)基因在威氏绿绒蒿(Meconopsis wilsonii)花色形成过程中的表达规律。本研究以威氏绿绒蒿蓝紫色的花瓣为研究材料,使用RACE克隆技术克隆获得了威氏绿绒蒿花青素合成途径中的关键酶基因F3’H,命名为MwF3’H。分析发现其开放阅读框长度为1620 bp,编码了539个氨基酸,推测蛋白质分子量为59.7 kD,理论等电点(pI)为8.05,不稳定指数为33.02,属于稳定蛋白。序列比对和系统发育树分析显示,威氏绿绒蒿(M.wilsonii)与长果绿绒蒿(M.delavayi)的F3’H氨基酸序列一致性最高,相似度达到92.86%,聚为一个分支。实时荧光定量PCR结果显示,Mw F3’H基因在威氏绿绒蒿花发育不同的5个时期均有表达,在前期花青素积累时期表达最多,随着花的发育逐渐降低,但在盛花期表达量再次增长。推测其在威氏绿绒蒿花色的形成过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 威氏绿绒蒿 类黄酮3’-羟化酶 花色 表达分析

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大叶蛇葡萄类黄酮-3'-羟化酶基因(F3'H)的克隆及生物信息学分析 被引量：2

12

作者 李永华 蒲天珍 +3 位作者 周佩娜 方佳慧 张秀桥 龚玲 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第18期5984-5993,共10页

类黄酮-3’-羟化酶(F3’H)是黄酮化合物生物合成过程中的关键酶之一,本研究从大叶蛇葡萄转录组数据库中筛选出类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H),利用RT-PCR等技术克隆了其全长序列,并分析F3’H基因编码蛋白的理化性质和结构特征。结果表明... 类黄酮-3’-羟化酶(F3’H)是黄酮化合物生物合成过程中的关键酶之一,本研究从大叶蛇葡萄转录组数据库中筛选出类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H),利用RT-PCR等技术克隆了其全长序列,并分析F3’H基因编码蛋白的理化性质和结构特征。结果表明,该序列全长为1718 bp,开放阅读框(ORF)长度为1530 bp,相对分子质量为55.89 kD,编码509个氨基酸,等电点为7.3,分子式为C2(513)H3974N696O705S21,不稳定指数为38.26,为稳定蛋白;脂肪族指数为96.42,总平均疏水性为-0.004,为亲水性蛋白;具有多个磷酸化位点,有信号肽,存在一个跨膜区,亚细胞定位于内质网膜,二级结构以α-螺旋为主。系统进化分析和多重序列比对表明该序列与藤茶的亲缘关系最近。密码子偏性分析表明该基因以G/C结尾的密码子使用频率较高,最适合该基因的异源表达宿主是大肠杆菌。本研究结果为进一步研究大叶蛇葡萄F3’H蛋白功能,以及揭示该植物中具生物活性的黄酮类成分的生物合成机制提供了一定的基础。 展开更多

关键词 大叶蛇葡萄(Ampelopsis megalophylla) 类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H) 基因克隆 生物信息学分析

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桂花OfF3'H基因的克隆与表达分析

13

作者 鲜小林 潘远智 +1 位作者 陈睿 宋海岩 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2094-2100,共7页

类黄酮3'-羟化酶(F3'H)属于细胞色素P450单加氧酶家族,是苯丙烷类代谢途径关键成员,在植物色泽形成及类黄酮成分调控方面起重要作用。本研究以四季桂‘金玉台阁’为实验材料,采用cDNA末端快速扩增法(RACE)从盛花末期小花cDNA中... 类黄酮3'-羟化酶(F3'H)属于细胞色素P450单加氧酶家族,是苯丙烷类代谢途径关键成员,在植物色泽形成及类黄酮成分调控方面起重要作用。本研究以四季桂‘金玉台阁’为实验材料,采用cDNA末端快速扩增法(RACE)从盛花末期小花cDNA中克隆了桂花OfF3'H基因(GenBank编号:MH509392)。序列分析结果显示该基因全长为1 856 bp,其中5'端非翻译区长度为102 bp,3'端非翻译区长度为191 bp,开放阅读框长度为1 563 bp,编码由520个氨基酸残基组成的蛋白质。系统进化分析表明Of F3'H含有植物F3'H蛋白典型的保守结构域,且与猕猴桃的AcF3'H蛋白亲缘关系最近。桂花花期不同阶段生理与分子研究发现初花期OfF3'H基因表达量和总黄酮含量均为最低,而花谢期OfF3'H基因表达量和总黄酮含量达到最高。此外,Of F3'H存在10个潜在的磷酸化位点,其中第83位点的丝氨酸和第304位点的苏氨酸在不同植物间高度保守。本研究为深入研究桂花花色形成及植物类黄酮合成调控的分子机制提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 桂花 类黄酮3’-羟化酶 荧光定量PCR 总黄酮含量 磷酸化修饰

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植物类黄酮3’-羟化酶(F3’H)基因的研究进展 被引量：27

14

作者 侯杰 佟玲 +2 位作者 崔国新 许志茹 李玉花 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期641-647,共7页

本文介绍了植物F3’H基因的克隆、序列分析、表达分析、系统进化及转录调控的研究进展。

关键词 花青素 类黄酮3’.羟化酶基因 表达特性 转录调控

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芜菁的类黄酮3'羟化酶基因克隆和UV-A诱导表达特性 被引量：10

15

作者 许志茹 崔国新 +2 位作者 李春雷 孙燕 李玉花 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期931-935,共5页

用UV-A处理‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁块根24h后提取总RNA,以RT-PCR方法分别克隆到BrF3'H1和BrF3'H2基因。BrF3'H1和BrF3'H2的开放读码框为1536bp,均编码511个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrF3'H1和BrF3'H2与... 用UV-A处理‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁块根24h后提取总RNA,以RT-PCR方法分别克隆到BrF3'H1和BrF3'H2基因。BrF3'H1和BrF3'H2的开放读码框为1536bp,均编码511个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrF3'H1和BrF3'H2与甘蓝型油菜F3'H的同源性达99%,在第45～476的肽段含有细胞色素P450家族基因的结构域。BrF3'H1和BrF3'H2基因有高度同源性,核苷酸序列的17个位点处有差异,推导的氨基酸序列在5个位点处有差异。Northern杂交结果显示,UV-A可以诱导BrF3'H1表达,基因的表达量与UV-A处理时间呈相关,UV-A不能诱导BrF3'H2基因表达。 展开更多

关键词 芜菁 类黄酮3’羟化酶基因 基因克隆 序列分析 基因表达

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梅花南京红须F3′H全长基于gDNA的TAIL-PCR法克隆(英文) 被引量：3

16

作者 赵昶灵 郭维明 +1 位作者 杨清 陈俊愉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2378-2385,共8页

根据从基因组DNA扩增到的梅花‘南京红须’类黄酮3'-羟化酶基因片段(469 bp)没计3条嵌套的特异性引物，与6条短的随机简并引物组成的引物库分别用热不对称交错PCR法从‘南京红须’基因组DNA扩增该片段的5'和3'旁侧序列。获... 根据从基因组DNA扩增到的梅花‘南京红须’类黄酮3'-羟化酶基因片段(469 bp)没计3条嵌套的特异性引物，与6条短的随机简并引物组成的引物库分别用热不对称交错PCR法从‘南京红须’基因组DNA扩增该片段的5'和3'旁侧序列。获得的5'和3'旁侧序列分别长1443 bp和1200 bp。将两个旁侧序列在469 bp片段的基础上拼接得到‘南京红须’全长为2 144 bp的类黄酮3'-羟化酶基因，被命名为pmhxF3'H。序列分析表明：该基因与11条正式发表的、已递交到GenBank的类黄酮3'-羟化酶基因的cDNA序列在总体上有52．21％的一致性．具有3个内含子，其启动子含有1个“AGGA盒”、1个“GC盒”和3个“TATA盒”。这是首次用热不对称交错PCR法从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3'-羟化酶基因。本研究将为梅花花色的分子生物学机理探索、花色的基因工程改良提供参考。 展开更多

关键词 梅花 '南京红须’ 类黄酬3’羟化酶基因 全长 基因组DNA TAIL-PCR 克隆

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芸薹属类黄酮3′-羟化酶基因家族RNA干扰载体的构建 被引量：4

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作者 陈倩 闫楠 +1 位作者 马丽娟 柴友荣 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期8-11,共4页

目的:构建芸薹属类黄酮3′羟化酶(F3′H)基因家族的RNAi载体。方法:采用PCR克隆了607bp的芸薹属F3’H基因家族的RNAi片段,将其反义片段、正义片段分别采用NcoⅠ+AatⅡ、BamHⅠ+XbaⅠ插入到改进型植物RNAi基础载体pF-GC5941M的启动子与... 目的:构建芸薹属类黄酮3′羟化酶(F3′H)基因家族的RNAi载体。方法:采用PCR克隆了607bp的芸薹属F3’H基因家族的RNAi片段,将其反义片段、正义片段分别采用NcoⅠ+AatⅡ、BamHⅠ+XbaⅠ插入到改进型植物RNAi基础载体pF-GC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成11366bp的重组载体pFGC5941M-BF3′HI(简称为pBF3′HI),复合PCR鉴定后转化根癌农杆菌,获得工程菌株。结果:载体构建成功。结论:构建了RNAi载体pBF3′HI,可用于芸薹属植物花色、种皮色泽、茎叶色彩等性状的机理研究和遗传修饰。 展开更多

关键词 芸薹属 类黄酮3′-羟化酶(F3′H) RNAI 载体

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大豆F3’H基因植物表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 被引量：2

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作者 马键 宋雯雯 +3 位作者 张颖 韩雪 田俊 王继安 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期58-62,共5页

通过RT-PCR方法扩增了大豆F3’H基因并构建含大豆荚皮绒毛色基因的重组质粒pBI121/F3’H的植物表达载体,转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株,通过根癌农杆菌介导的方法转化拟南芥。为进一步研究大豆荚皮绒毛色基因(F3’H)作为... 通过RT-PCR方法扩增了大豆F3’H基因并构建含大豆荚皮绒毛色基因的重组质粒pBI121/F3’H的植物表达载体,转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株,通过根癌农杆菌介导的方法转化拟南芥。为进一步研究大豆荚皮绒毛色基因(F3’H)作为植物基因工程的报告基因的可能性奠定基础。 展开更多

关键词 大豆 根癌农杆菌 F3’H基因 植物表达载体

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石榴花类黄酮3′羟化酶基因的克隆及序列分析 被引量：3

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作者 陶吉寒 招雪晴 +2 位作者 苑兆和 尹燕雷 冯立娟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第4期121-124,共4页

为研究花色苷生物合成途径中类黄酮3′羟化酶基因(F3′H)的序列信息,以泰山红石榴花瓣为试材,提取总RNA后反转录为cDNA,根据GenBank中登录的相关物种F3′H基因的保守序列设计兼并引物,对反转录后的cDNA进行PCR扩增并测序。结果表明:在... 为研究花色苷生物合成途径中类黄酮3′羟化酶基因(F3′H)的序列信息,以泰山红石榴花瓣为试材,提取总RNA后反转录为cDNA,根据GenBank中登录的相关物种F3′H基因的保守序列设计兼并引物,对反转录后的cDNA进行PCR扩增并测序。结果表明:在石榴中克隆到了长度为996bp的F3′H基因cDNA片段,该基因编码331个氨基酸,含有细胞色素P450保守域,属于CYP75B亚家族。该序列在GenBank中的登录号为KC430328。 展开更多

关键词 石榴 类黄酮3’羟化酶基因 基因克隆 序列分析

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菊花CgF3′H基因克隆及表达特性分析 被引量：2

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作者 陈素梅 吕国胜 +5 位作者 朱喜荣 刘兆磊 管志勇 章镇 陈发棣 王丽君 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第5期623-628,共6页

根据菊花花器官表达序列标签序列设计引物,采用PCR和5'-RACE技术对类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因进行全长cDNA克隆。克隆获得F3'HcDNA全长为1760bp,其开放阅读框(ORF)为1524bp,编码一条包含508个氨基酸残基的多肽,GenBank... 根据菊花花器官表达序列标签序列设计引物,采用PCR和5'-RACE技术对类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因进行全长cDNA克隆。克隆获得F3'HcDNA全长为1760bp,其开放阅读框(ORF)为1524bp,编码一条包含508个氨基酸残基的多肽,GenBank登录号为AB523844。预测该基因编码的蛋白分子式为C2535H4022N684O707S18,分子量为55.97kD,理论等电点pI为7.23。其氨基酸序列与蓝眼菊属(ABB29899.1)、紫茎泽兰(ABM46853.1)、欧亚种葡萄(ACN38268.1)和高粱(ABG54320.1)等植物的F3'H氨基酸序列的同源性分别为83.27%、80.51%、75.05%和59.96%。系统进化分析表明其与蓝眼菊属的亲缘关系最近。荧光定量PCR分析发现F3'H基因在切花菊‘H5’各个器官中均有表达,花托中表达量最高,而叶片中表达量最低。 展开更多

关键词 菊花 类黄酮3'-羟化酶(F3'H) 克隆 表达

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