母体外周血中存在来源于胎儿的具有完整细胞核的红细胞,即胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBCs).FNRBCs在整个妊娠期内持续存在于母体血液循环之中,具有全套的胎儿遗传物质、细胞器、各类生物分子以及代谢物等,包含...母体外周血中存在来源于胎儿的具有完整细胞核的红细胞,即胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBCs).FNRBCs在整个妊娠期内持续存在于母体血液循环之中,具有全套的胎儿遗传物质、细胞器、各类生物分子以及代谢物等,包含丰富的胎儿生理信息,同时还表达多种特异性蛋白,是用于无创式产前检测/诊断的理想分析靶标.然而,孕妇外周血中存在数量巨大的红细胞(~10~9个/mL)和白细胞(~10~6个/mL),FNRBCs则十分稀少(<10^(3)个/mL).在完成母体静脉采血后,如何高效率高纯度分离富集血样中的FNRBCs、确定其胎儿源性并开展面向临床的生化分析极具挑战.本文从实施无创产前检测/诊断的重要意义出发,对母体外周血FNRBCs这一潜力巨大的无创产前检测/诊断标志物进行综述,在介绍FNRBCs来源及特征的基础上,总结FNRBCs分离富集与鉴定分析技术的发展现状,并阐述FNRBCs的临床应用、当前面临的挑战以及今后的发展方向,旨在为相关研究和临床转化提供参考.展开更多
目的建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效诊断模式。方法从98名孕妇中筛选出12名高度怀疑唐氏妊娠者,当日流式细胞术分选母血中的胎儿有核红细胞(Fetal nucleated red blood cells,FNRBCs),制备滴片后,次日进行多重引物原位杂交(mut...目的建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效诊断模式。方法从98名孕妇中筛选出12名高度怀疑唐氏妊娠者,当日流式细胞术分选母血中的胎儿有核红细胞(Fetal nucleated red blood cells,FNRBCs),制备滴片后,次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号、Y染色体。结果均可在两日内得到诊断结论 ,诊断10例正常胎儿和两例男性唐氏综合征胎儿,与实际胎儿核型完全一致。结论流式分选母血中胎儿有核红细胞后多重PRINS技术检测细胞染色体可作为快速无创性产前诊断的有效模式,并可为其他非整倍体异常和单基因病的快速无创性产前诊断提供有效参考。展开更多
从母血循环中分离、富集和提取胎儿有核红细胞，进行无创性产前基因诊断，是近年来医学界具有重大意义的研究课题。胎儿有核红细胞由于自身特点较其他胎儿细胞更适用于产前诊断。有多种方法可用于分离胎儿有核红细胞，现就胎儿有核红细...从母血循环中分离、富集和提取胎儿有核红细胞，进行无创性产前基因诊断，是近年来医学界具有重大意义的研究课题。胎儿有核红细胞由于自身特点较其他胎儿细胞更适用于产前诊断。有多种方法可用于分离胎儿有核红细胞，现就胎儿有核红细胞特异性标记进行综述。目前使用最多的阳性标记是CD71、CD36、GPA、血红蛋白等，同时使用CD45等阴性标记可以提高分选效率及纯化率。随着分子生物学、分子免疫学等学科的发展，会有更多的胎儿有核红细胞（nucleated red blood cells，NRBCs）特异性标记被发现，从而促进产前诊断的不断发展。展开更多
目的采用N-乙酰半乳糖(N-Acetyl-D-galactosamine,GalNAc)包被的玻片分离和富集胎儿有核红细胞(fetalnucleated red blood cells,FNRBCs)。方法用密度梯度离心法收集胎儿脐血中的FNRBCs,然后将其与不同浓度的大豆凝聚素(SBA)混合,所形...目的采用N-乙酰半乳糖(N-Acetyl-D-galactosamine,GalNAc)包被的玻片分离和富集胎儿有核红细胞(fetalnucleated red blood cells,FNRBCs)。方法用密度梯度离心法收集胎儿脐血中的FNRBCs,然后将其与不同浓度的大豆凝聚素(SBA)混合,所形成的“FNRBCs-SBA”复合物用GalNAc包被的玻片来分离和富集,分析SBA工作浓度对FNRBCs分离和富集效率的影响。结果当GalNAc包被玻片的浓度为100μg/ml时,20μg/ml的SBA浓度是分离和富集FNRBCs的最适浓度;此时WBC与有核红细胞的比值较低(27.7%),而FNRBCs与有核红细胞的比值最高(3.7%)。结论N-乙酰半乳糖特异性植物凝素可用于选择性地分离和富集FNRBCs,与传统方法相比较具有无需特殊仪器与设备,简便快速的优点。展开更多
目的设计微流控芯片分离全血中胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cell,fNRBCs),实现有核红细胞的快速便捷获取。方法利用有核细胞在血流作用下的边集效应以及细胞抗原抗体特异性黏附特点,设计微管流控芯片,分离全血中的fNRBCs...目的设计微流控芯片分离全血中胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cell,fNRBCs),实现有核红细胞的快速便捷获取。方法利用有核细胞在血流作用下的边集效应以及细胞抗原抗体特异性黏附特点,设计微管流控芯片,分离全血中的fNRBCs。以脐血全血为例,通过免疫荧光计数,分析不同剪切率对fNRBCs富集效果的影响。结果相较于简单静置黏附,增加剪切率可以增加直微管黏附有核红细胞的数量,细胞的富集效果随血流剪切率的增大先增大后减小。结论利用直微管能够实现fNRBCs的全血快速有效捕获。研究结果为无创产前诊断的发展以及胎儿细胞转移机制的探究提供实验参考。展开更多
文摘母体外周血中存在来源于胎儿的具有完整细胞核的红细胞,即胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBCs).FNRBCs在整个妊娠期内持续存在于母体血液循环之中,具有全套的胎儿遗传物质、细胞器、各类生物分子以及代谢物等,包含丰富的胎儿生理信息,同时还表达多种特异性蛋白,是用于无创式产前检测/诊断的理想分析靶标.然而,孕妇外周血中存在数量巨大的红细胞(~10~9个/mL)和白细胞(~10~6个/mL),FNRBCs则十分稀少(<10^(3)个/mL).在完成母体静脉采血后,如何高效率高纯度分离富集血样中的FNRBCs、确定其胎儿源性并开展面向临床的生化分析极具挑战.本文从实施无创产前检测/诊断的重要意义出发,对母体外周血FNRBCs这一潜力巨大的无创产前检测/诊断标志物进行综述,在介绍FNRBCs来源及特征的基础上,总结FNRBCs分离富集与鉴定分析技术的发展现状,并阐述FNRBCs的临床应用、当前面临的挑战以及今后的发展方向,旨在为相关研究和临床转化提供参考.
文摘目的建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效诊断模式。方法从98名孕妇中筛选出12名高度怀疑唐氏妊娠者,当日流式细胞术分选母血中的胎儿有核红细胞(Fetal nucleated red blood cells,FNRBCs),制备滴片后,次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号、Y染色体。结果均可在两日内得到诊断结论 ,诊断10例正常胎儿和两例男性唐氏综合征胎儿,与实际胎儿核型完全一致。结论流式分选母血中胎儿有核红细胞后多重PRINS技术检测细胞染色体可作为快速无创性产前诊断的有效模式,并可为其他非整倍体异常和单基因病的快速无创性产前诊断提供有效参考。
文摘从母血循环中分离、富集和提取胎儿有核红细胞，进行无创性产前基因诊断，是近年来医学界具有重大意义的研究课题。胎儿有核红细胞由于自身特点较其他胎儿细胞更适用于产前诊断。有多种方法可用于分离胎儿有核红细胞，现就胎儿有核红细胞特异性标记进行综述。目前使用最多的阳性标记是CD71、CD36、GPA、血红蛋白等，同时使用CD45等阴性标记可以提高分选效率及纯化率。随着分子生物学、分子免疫学等学科的发展，会有更多的胎儿有核红细胞（nucleated red blood cells，NRBCs）特异性标记被发现，从而促进产前诊断的不断发展。
文摘目的采用N-乙酰半乳糖(N-Acetyl-D-galactosamine,GalNAc)包被的玻片分离和富集胎儿有核红细胞(fetalnucleated red blood cells,FNRBCs)。方法用密度梯度离心法收集胎儿脐血中的FNRBCs,然后将其与不同浓度的大豆凝聚素(SBA)混合,所形成的“FNRBCs-SBA”复合物用GalNAc包被的玻片来分离和富集,分析SBA工作浓度对FNRBCs分离和富集效率的影响。结果当GalNAc包被玻片的浓度为100μg/ml时,20μg/ml的SBA浓度是分离和富集FNRBCs的最适浓度;此时WBC与有核红细胞的比值较低(27.7%),而FNRBCs与有核红细胞的比值最高(3.7%)。结论N-乙酰半乳糖特异性植物凝素可用于选择性地分离和富集FNRBCs,与传统方法相比较具有无需特殊仪器与设备,简便快速的优点。
文摘目的设计微流控芯片分离全血中胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cell,fNRBCs),实现有核红细胞的快速便捷获取。方法利用有核细胞在血流作用下的边集效应以及细胞抗原抗体特异性黏附特点,设计微管流控芯片,分离全血中的fNRBCs。以脐血全血为例,通过免疫荧光计数,分析不同剪切率对fNRBCs富集效果的影响。结果相较于简单静置黏附,增加剪切率可以增加直微管黏附有核红细胞的数量,细胞的富集效果随血流剪切率的增大先增大后减小。结论利用直微管能够实现fNRBCs的全血快速有效捕获。研究结果为无创产前诊断的发展以及胎儿细胞转移机制的探究提供实验参考。
