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Cytotoxicity and binding profiles of activated CrylAc and Cry2Ab to three insect cell lines 被引量:3
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作者 Jizhen Wei Gemei Liang +4 位作者 Kongming Wu Shaohua Gu Yuyuan Guo Xinzhi Ni Xianchun Li 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期655-666,共12页
While CrylAc has been known to bind with larval midgut proteins cad- herin, APN (amino peptidase N), ALP (alkaline phosphatase) and ABCC2 (adenosine triphosphate-binding cassette transporter subfamily C2), littl... While CrylAc has been known to bind with larval midgut proteins cad- herin, APN (amino peptidase N), ALP (alkaline phosphatase) and ABCC2 (adenosine triphosphate-binding cassette transporter subfamily C2), little is known about the recep- tors of Cry2Ab. To provide a clue to the receptors of Cry2Ab, we tested the baseline cytotoxicity of activated Cry 1Ac and Cry2Ab against the midgut and fat body cell lines of Helicoverpa zea and the ovary cell line ofSpodopterafrugiperda (SFg). As expected, the descending order of cytotoxicity of CrylAc against the three cell lines in terms of 50% lethal concetration (LC50) was midgut (31.0μg/mL) 〉 fat body (59.0μg/mL) and SF9 cell (99.6μg/mL). By contrast, the fat body cell line (LC50 = 7.55μg/mL) was about twice more susceptible to Cry2Ab than the midgut cell line (16.0/xg/mL), the susceptibility of which was not significantly greater than that of SF9 cells (27.0μg/mL). Further, ligand blot showed the binding differences between CrylAc and Cry2Ab in the three cell lines. These results indicated that the receptors of Cry2Ab were enriched in fat body cells and thus largely different from the receptors of CrylAc, which were enriched in midgut cells. 展开更多
关键词 Bt cell toxicity RECEPTORS midgut cell fat body cell SF9 cell
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家蚕脂肪体细胞原代培养及其细胞分化的研究 被引量:3
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作者 潘敏慧 刘敏 +3 位作者 蔡秀娟 洪开丽 许湲 鲁成 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期403-408,共6页
取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有繁殖和再分化能力的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列,可在体外... 取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有繁殖和再分化能力的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列,可在体外培养条件下繁殖,分化成新的脂肪组织,形成的脂肪细胞分泌大量脂肪油滴后破裂死亡。研究结果可为进一步探讨家蚕脂肪体细胞的分化及脂类代谢调节机制提供实验条件。 展开更多
关键词 家蚕 脂肪体细胞 原代培养 分化
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家蚕脂肪体原代培养中各种形态细胞的观察 被引量:3
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作者 刘敏 潘敏慧 +1 位作者 吴克军 鲁成 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期247-250,共4页
取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。结果表明,家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有各种形态的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列等,... 取家蚕4~5龄幼虫背部脂肪体,采用胰蛋白酶消化和组织块贴壁法进行离体培养,观察脂肪体细胞在体外培养过程中的变化。结果表明,家蚕脂肪体细胞在原代培养过程中出现了一批具有各种形态的脂肪前体细胞,细胞间呈管道状或网状排列等,可在体外培养条件下繁殖。最后这些细胞充满油滴后陆续死亡。该观察结果可为进一步探讨家蚕脂肪体细胞的分化及脂类代谢调节机制提供实验条件。 展开更多
关键词 家蚕 脂肪体细胞 原代培养
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家蚕幼虫-蛹变态期前胸腺和脂肪体细胞解离和程序性细胞死亡的比较分析 被引量:2
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作者 龙诗慧 李瑜 +2 位作者 田铃 李胜 李康 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1239-1249,共11页
【目的】检测家蚕Bombyx mori变态期前胸腺细胞的解离、自噬与凋亡,并与脂肪体的进行对比,从而解析昆虫幼虫-蛹变态期过程中不同组织重塑的异同。【方法】以家蚕5龄期、游走期、预蛹期和蛹期前胸腺和脂肪体组织为材料,在光学显微镜下观... 【目的】检测家蚕Bombyx mori变态期前胸腺细胞的解离、自噬与凋亡,并与脂肪体的进行对比,从而解析昆虫幼虫-蛹变态期过程中不同组织重塑的异同。【方法】以家蚕5龄期、游走期、预蛹期和蛹期前胸腺和脂肪体组织为材料,在光学显微镜下观察前胸腺和脂肪体细胞解离情况;分别利用Lyso-Tracker和TUNEL染色,在荧光共聚焦显微镜下观察细胞自噬和细胞凋亡的发生情况;利用qRT-PCR检测家蚕前胸腺中自噬发生标志基因Atg8的表达水平;利用透射电镜观察前胸腺和脂肪体细胞自噬小体和前胸腺线粒体;利用Caspase3酶活性检测试剂盒测定Caspase3酶活性;利用qRT-PCR检测前胸腺中蜕皮酮(ecdysone)合成相关基因Spo,Phm,Dib和Sad的表达水平;利用酶免疫试验(enzyme-immunoassay,EIA)测定前胸腺中蜕皮酮的含量,进而检测合成蜕皮酮的活力。【结果】在家蚕幼虫到蛹的变态发育过程中,在化蛹第1天家蚕前胸腺和脂肪体细胞中同时开始出现细胞解离;脂肪体细胞自噬和凋亡分别在游走期和预蛹第1天开始出现并逐渐增强;而前胸腺一直到化蛹第2天都没有发生明显的细胞自噬和凋亡;此外,前胸腺中线粒体的形态变化和蜕皮酮合成相关基因的转录水平均与对应时期前胸腺合成蜕皮酮的活力一致。【结论】在变态发育时家蚕不同组织消亡发生的时间不同,虽然前胸腺和脂肪体在化蛹第1天同时出现细胞解离,但是前胸腺直到化蛹第2天都不发生细胞自噬和凋亡,可能与其持续合成蜕皮酮的功能有关。本研究为昆虫幼虫-蛹变态发育时期组织消亡的深入研究提供了理论依据与工作基础。 展开更多
关键词 家蚕 前胸腺 脂肪体 细胞解离 自噬 凋亡 程序性细胞死亡
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Differences in nutrient uptake between the fat body and embryonic primary cultures of silkworm (Bombyx mori)
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作者 LEILA MATINDOOST JALAL J. SENDI +1 位作者 HOORIEH SOLEIMAN JAHI KAYVAN ETEBARI 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2006年第1期19-24,共6页
Nutrition utilization and by-product formation in cultured insect cells has been investigated in several insect cells and has been of great interest to cell culturists and physiologists. In this research the biochemic... Nutrition utilization and by-product formation in cultured insect cells has been investigated in several insect cells and has been of great interest to cell culturists and physiologists. In this research the biochemical changes in embryonic and fat body primary cultures of silkworm, Bombyx mori, have been compared. TC-100 medium supplemented with 10% and 20% FBS was used in embryonic and fat body primary cultures, respectively. Medium was renewed every week and the amount of glucose, uric acid, urea, total protein and alkaline phosphatase were measured in the samples from medium of primary cultures using spectrophotometeric methods. All biochemical macromolecules except uric acid showed significant changes. Glucose decreased in embryonic tissues, while in fat body culture its amount increased. Urea accumulation in embryonic culture was higher than in the fat body cultures. Since urea is a by-product, this accumulation could be due to higher utilization of amino acids. Total protein showed considerable changes and was consumed by embryonic culture more than the fat body' s. Alkaline phosphatase showed stronger activity in embryonic cells. 展开更多
关键词 BIOCHEMICAL Bombyx mori EMBRYO fat body insect cell primary culture silkworm
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柞蚕蛹脂肪体细胞的原代培养及观察
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作者 孙誉轩 陈晨 李俊 《淮北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第4期52-56,共5页
脂肪体组织在柞蚕蛹滞育过程中发挥重要作用,但目前尚未有柞蚕脂肪体体外培养的研究报道.本研究采用组织块贴壁法对柞蚕蛹脂肪体进行体外培养及油红O染色分析,并通过转染昆虫表达载体,验证其转染能力.结果表明,离体培养的脂肪体细胞呈... 脂肪体组织在柞蚕蛹滞育过程中发挥重要作用,但目前尚未有柞蚕脂肪体体外培养的研究报道.本研究采用组织块贴壁法对柞蚕蛹脂肪体进行体外培养及油红O染色分析,并通过转染昆虫表达载体,验证其转染能力.结果表明,离体培养的脂肪体细胞呈现梭形、卵圆形、瘤状等多种细胞形态;脂肪含量较高,可被油红O染色;绿色荧光蛋白可转染并表达于脂肪体原代培养细胞中.在体外成功进行脂肪体的原代培养,可用于外源基因转染和表达. 展开更多
关键词 柞蚕 脂肪体细胞 原代培养
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包囊病毒的诊断、鉴定及其世界分布(英文)
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作者 成小文 黄国华 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期534-539,共6页
专性的昆虫包囊病毒ascoviruses包含一个大小为119-186kbp的环状DNA基因组。因包囊病毒感染昆虫无明显的可辨别症状,它们最近才被发现。广谱性化学农药的广泛应用降低了寄生蜂的自然种群,导致在野外依靠寄生蜂传播的包囊病毒在自然环境... 专性的昆虫包囊病毒ascoviruses包含一个大小为119-186kbp的环状DNA基因组。因包囊病毒感染昆虫无明显的可辨别症状,它们最近才被发现。广谱性化学农药的广泛应用降低了寄生蜂的自然种群,导致在野外依靠寄生蜂传播的包囊病毒在自然环境中尤为罕见。包囊病毒最初于20世纪80年代末在美国东南部和西部沿岸从夜蛾幼虫体内被发现。然而,在20世纪70年代,类包囊病毒颗粒ascovirus-like particles已被报道于火蚁(膜翅目)和苜蓿叶象甲(鞘翅目)体内;此外,在法国南部的美双缘姬蜂Diadromus pulchellus幼虫体内亦发现包囊病毒。这些数据表明,包囊病毒可能存在于鳞翅目,膜翅目和鞘翅目等不同目的昆虫体内;同时包囊病毒已报道于澳大利亚、印度尼西亚、法国、美国等国家,表明其分布是全球性的。有趣的是,在中国、印度、非洲等广大区域内没有包囊病毒记载。为确认其世界性的地理分布、与昆虫的协同进化,以及明确其在农业和自然环境中的生态意义,需要进一步努力从中国、印度、非洲大陆等国家和地区发现更多的包囊病毒。 展开更多
关键词 膜翅目昆虫包囊病毒 鞘翅目昆虫包囊病毒 血淋巴颜色 脂肪体细胞裂解 脂肪体液滴
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