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白木香AsERF1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析 被引量:3
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作者 李铁铮 郑一哲 +3 位作者 戎玉清 魏胜利 王晓晖 屠鹏飞 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1957-1964,共8页
乙烯响应因子(ethylene-response factor,ERF)是AP2/ERF家族中的亚家族,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异性引物,克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列,并进... 乙烯响应因子(ethylene-response factor,ERF)是AP2/ERF家族中的亚家族,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异性引物,克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、组织特异性分析、非生物胁迫诱导表达分析研究。白木香AsERF1基因的开放阅读框(ORF)长691 bp,编码229个氨基酸,其蛋白分子质量为25.36 kD。AsERF1蛋白含有1个保守的AP2区域,系统进化树分析表明AsERF1与毛果杨的ERF2蛋白亲缘性最高。利用本生烟瞬时表达系统研究表明AsERF1主要定位于植物细胞核中。构建原核表达载体pET28a-AsERF1,并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达AsERF1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。实时荧光定量PCR结果显示AsERF1在叶中的表达量最高,茎次之,根和茎尖最低。盐、干旱、低温和重金属胁迫能够诱导AsERF1的表达,其中干旱胁迫对AsERF1的表达水平影响最显著。本研究为揭示ERF基因在白木香防御反应和沉香形成过程中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 白木香 乙烯响应因子 原核表达 亚细胞定位 表达分析
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GsERF6基因过表达对水稻耐盐碱性的影响 被引量:2
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作者 才晓溪 胡冰霜 +5 位作者 沈阳 王研 陈悦 孙明哲 贾博为 孙晓丽 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期561-569,共9页
乙烯响应因子(ERF)是植物特有的一类转录因子,在响应非生物胁迫中具有重要作用。本研究通过生物信息学发现,野生大豆耐盐碱ERF转录因子GsERF6与水稻ERF同源蛋白的氨基酸序列相似性很高,均包含1个高度保守的AP2结构域。为探究GsERF6基因... 乙烯响应因子(ERF)是植物特有的一类转录因子,在响应非生物胁迫中具有重要作用。本研究通过生物信息学发现,野生大豆耐盐碱ERF转录因子GsERF6与水稻ERF同源蛋白的氨基酸序列相似性很高,均包含1个高度保守的AP2结构域。为探究GsERF6基因在水稻耐盐碱应答中的作用,通过遗传转化、PCR和半定量RT-PCR鉴定,获得了2个纯合的GsERF6过表达转基因水稻株系。表型鉴定表明,200 mmol L^(-1) NaHCO3处理下GsERF6转基因水稻的存活率、相对含水量、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性、可溶性糖和脯氨酸含量均显著高于对照,活性氧积累则反之。实时荧光定量PCR分析表明,40 mmol L^(-1) NaHCO3处理6 h后渗透调节基因OsP5CS2和OsLEA14在GsERF6转基因水稻中的表达量显著高于对照。本研究表明,水稻中GsERF6的过表达可通过提高ROS清除水平、渗透调节能力及胁迫应答基因的表达来提高其耐盐碱性。 展开更多
关键词 水稻 耐盐碱 乙烯响应因子 野生大豆 GsERF6
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多花水仙种球膨大期对乙烯的响应研究 被引量:1
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作者 姜琳 孙兴 +5 位作者 罗可欣 郭志雄 陈桂信 佘文琴 潘东明 潘腾飞 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1300-1306,共7页
为探讨乙烯在水仙鳞茎膨大过程中的作用以及种球对乙烯信号的响应,本试验以多花水仙种球膨大期的鳞片和内芽为供试材料,研究种球的生长与乙烯释放量和NtERFs基因表达之间的关系。结果表明,多花水仙种球在3—5月间种球重量持续增加,为种... 为探讨乙烯在水仙鳞茎膨大过程中的作用以及种球对乙烯信号的响应,本试验以多花水仙种球膨大期的鳞片和内芽为供试材料,研究种球的生长与乙烯释放量和NtERFs基因表达之间的关系。结果表明,多花水仙种球在3—5月间种球重量持续增加,为种球的膨大期。鳞片的乙烯释放量在5月中旬显著升高,内芽的乙烯释放量显著高于鳞片,在4月下旬出现释放高峰;内芽释放的乙烯可能与种球的膨大有关,且能够诱导鳞片中乙烯的释放,鳞片乙烯的释放可能会引起地上部叶片的黄化。实时荧光定量PCR结果表明,NtERF1、NtERF4和NtERF118的表达趋势与鳞片乙烯的释放量一致,可能参与了鳞片乙烯信号的响应,NtERF1可能是关键的响应因子。NtERF2、NtERF3、NtERF4和NtERF26基因则可能参与内芽乙烯信号的响应,NtERF2基因可能是内芽响应乙烯信号的主要因子,同时也参与了鳞片对内芽释放的乙烯信号的响应。本研究表明水仙种球在生长期能够响应乙烯信号,而乙烯的释放受到NtERFs的反馈调节。本研究结果为进一步研究水仙种球营养生长期乙烯的作用及其信号传导提供了研究基础。 展开更多
关键词 多花水仙 种球膨大期 乙烯响应因子 乙烯
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