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钩藤碱对human ether-a-go-go相关基因通道的抑制作用(英文) 被引量:7
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作者 桂乐 李之望 +5 位作者 杜戎 袁国会 李伟 任法鑫 李婧 杨钧国 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期648-652,共5页
将human ether-a-go-go相关基因(HERG)cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,采用双电极电压钳技术,观察钩藤碱对 表达电流的影响。结果显示:(1)钩藤碱抑制HERG通道的表达是浓度依赖性的,IC50为(773.4±42.5)μmol/L。(2)钩藤碱抑 制HERG... 将human ether-a-go-go相关基因(HERG)cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,采用双电极电压钳技术,观察钩藤碱对 表达电流的影响。结果显示:(1)钩藤碱抑制HERG通道的表达是浓度依赖性的,IC50为(773.4±42.5)μmol/L。(2)钩藤碱抑 制HERG通道的表达是电压依赖性的,最大抑制率在-20 mV,为15%。上述结果提示,钩藤碱抑制HERG编码的钾通道, 导致心室复极时间延长,揭示了与钩藤碱相关的心肌钾通道的分子生物学基础。 展开更多
关键词 HUMAN ether-a-go-go相关基因 钩藤碱 卵母细胞 双电极电压钳
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ether-a-go-go相关基因通道在胰岛β-细胞中的作用
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作者 赵苗妙 元沙沙 +3 位作者 李奇 卢晶 黄海霞 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期40-44,共5页
目的探究ether-a-go-go相关基因(ether-a-go-go related gene,ERG)通道在胰岛β-细胞中的作用。方法提取野生型(wild type,WT)与ERG基因敲除型(knockout,KO)小鼠胰岛β-细胞,利用全细胞膜片钳技术记录钾离子电流与动作电位,分析敲除ERG... 目的探究ether-a-go-go相关基因(ether-a-go-go related gene,ERG)通道在胰岛β-细胞中的作用。方法提取野生型(wild type,WT)与ERG基因敲除型(knockout,KO)小鼠胰岛β-细胞,利用全细胞膜片钳技术记录钾离子电流与动作电位,分析敲除ERG基因后钾电流与动作电位的变化。对两组小鼠进行腹腔注射葡萄糖耐量实验,分析基因敲除后小鼠糖耐量的变化,探究ERG基因是否对体内血糖浓度有影响。结果在两组小鼠胰岛β-细胞中记录到的钾离子电流均呈现内向整流趋势,KO组钾离子电流明显减小,动作电位时程明显延长。动物实验中,KO组小鼠糖刺激2 h后血糖浓度较WT组显著降低。结论 ERG通道电流是胰岛β-细胞中钾离子电流的重要组成部分,可显著影响动作电位时程,进而影响体内血糖浓度。 展开更多
关键词 ether-a-go-go相关基因 胰岛Β-细胞 膜片钳 血糖
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热休克蛋白90对hERG-A561V通道蛋白转运及通道功能影响的研究
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作者 王英 叶佳纯 +2 位作者 黄晓燕 陈邦盛 廉姜芳 《心电与循环》 2024年第2期107-112,共6页
目的探讨热休克蛋白90(Hsp90)对人类ether-a-go-go相关基因(hERG)-A561V通道蛋白转运及通道功能影响的研究。方法构建野生型(WT)、突变型(A561V)、杂合型(WT/A561V)细胞模型,采用蛋白质印迹法检测各组细胞hERG及Hsp90蛋白表达差异。转... 目的探讨热休克蛋白90(Hsp90)对人类ether-a-go-go相关基因(hERG)-A561V通道蛋白转运及通道功能影响的研究。方法构建野生型(WT)、突变型(A561V)、杂合型(WT/A561V)细胞模型,采用蛋白质印迹法检测各组细胞hERG及Hsp90蛋白表达差异。转染减表达空载(Itf NC)、Hsp90减表达(Hsp90-)、过表达空载(Ovp NC)或Hsp90过表达(Hsp90+)质粒至各细胞模型(即Itf NC组、Hsp90-组、Ovp NC组、Hsp90+组),另设不加载体的对照(Ctl)组,采用蛋白质印迹法检测各组细胞调控Hsp90前后hERG及Hsp90蛋白表达差异。采用免疫荧光法检测Hsp90调控前后杂合型细胞模型hERG及Hsp90蛋白定位表达情况。采用全细胞膜片钳技术检测调控Hsp90前后杂合型细胞模型hERG通道激活电流及尾电流密度。结果突变型、杂合型细胞模型Hsp90及hERG(135 kDa)蛋白表达水平均较野生型明显升高(均P<0.05)。野生型细胞模型Hsp90+组hERG(135 kDa)、hERG(155 kDa)蛋白表达水平较Ctl组、Ovp NC组均明显升高(均P<0.05),突变型细胞模型Hsp90+组hERG(135 kDa)蛋白表达水平较Ctl组、Ovp NC组均明显升高(均P<0.05),杂合型细胞模型Hsp90+组hERG(155 kDa)蛋白表达水平较Ctl组、Ovp NC组均明显升高(均P<0.05)。融合Hsp90和hERG蛋白后,Ctl组hERG表达于细胞膜、细胞质,Hsp90-组细胞膜上hERG蛋白表达减少,Hsp90+组细胞膜上hERG蛋白表达增多。与Ctl组比较,Hsp90+组Ikr曲线左移14.709,斜率因子k值未见明显变化。杂合型细胞模型Ctl组、Hsp90-组、Hsp90+组激活电流及尾电流密度均在50 mV处达到最高;杂合型细胞模型Hsp90+组在20、30 mV处的激活电流密度均明显高于Ctl组、Hsp90-组(均P<0.05),在30、40 mV处的尾电流密度均明显高于Ctl组、Hsp90-组(均P<0.05)。结论Hsp90在hERG-A561V通道蛋白折叠转运中起作用,而上调Hsp90可促进WT/A561V hERG的折叠转运,进而影响通道功能。 展开更多
关键词 热休克蛋白90 遗传性长QT综合征 人类ether-a-go-go相关基因 A561V突变 蛋白转运
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胃肠动力药西沙比利对表达于HEK293细胞的人ether-a-go-go相关基因2通道的影响 被引量:2
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作者 元沙沙 黄海霞 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第6期760-764,共5页
目的:研究胃肠动力药西沙比利对于在 HEK293细胞异源性表达的人 ether-a-go-go 相关基因2(human ether-a-go-go related gene 2,hERG2)通道性质的影响。方法用 Lipofectamine 2000将 hERG2(AF311913)瞬时转染至 HEK293细胞,使其表... 目的:研究胃肠动力药西沙比利对于在 HEK293细胞异源性表达的人 ether-a-go-go 相关基因2(human ether-a-go-go related gene 2,hERG2)通道性质的影响。方法用 Lipofectamine 2000将 hERG2(AF311913)瞬时转染至 HEK293细胞,使其表达hERG2通道,利用全细胞膜片钳技术记录 hERG2电流。加入西沙比利(终浓度分别为0.001,0.01,0.1,1.0,10.0μmol/ L),分别记录加药前和加药后2~8 min 的 hERG2电流,分析西沙比利浓度和作用时间对此通道电流的影响。结果西沙比利各浓度实验组中,hERG2时间依赖性电流和尾电流幅度均下降。在去极化电压为+20 mV 时,随西沙比利浓度升高,电流抑制率逐渐增加。西沙比利的抑制作用随时间延长逐渐增强,西沙比利浓度为1μmol/ L 时,电流在8 min 内完全消失。结论西沙比利对HEK293细胞表达的 hERG2通道的时间依赖性电流和尾电流均有抑制作用,该抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性,即浓度越高,时间越长,抑制效果越明显,直至电流降低至稳态或消失。 展开更多
关键词 HEK293细胞 膜片钳 ether-a-go-go相关基因 延迟整流钾通道 西沙比利
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hERG钾通道通过降低氧化应激改善肝细胞糖代谢 被引量:2
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作者 卢晶 沈涵 +5 位作者 程呈 宋丽妮 张怡尘 谢荣荣 袁明霞 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期156-160,共5页
目的研究hERG钾通道(human ether-α-go-go related gene channels)在肝细胞中与糖代谢的关系。方法用hERG钾通道过表达载体转染人类肝癌细胞系(liver hepatocellular carcinoma,HepG2)细胞,通过荧光定量PCR(real-time PCR,RTPCR)和蛋... 目的研究hERG钾通道(human ether-α-go-go related gene channels)在肝细胞中与糖代谢的关系。方法用hERG钾通道过表达载体转染人类肝癌细胞系(liver hepatocellular carcinoma,HepG2)细胞,通过荧光定量PCR(real-time PCR,RTPCR)和蛋白印迹(Western blotting)法检测糖代谢、糖异生、氧化应激及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide 2'-phosphate,NADPH)相关亚基的表达。结果 hERG钾通道蛋白可在肝脏细胞中表达,将hERG钾通道过表达于HepG2细胞后,糖异生相关基因葡萄糖-6-磷酸激酶(glucose-6-phosphatase,G6Pase)表达显著降低,而磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)表达有降低。胰岛素表达相关基因葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter type 2,GLUT2)、胰岛素受体底物2(insulin receptor substrate,IRS-2)和腺苷酸活化蛋白激酶α亚基2[(adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase),AMPKα2]的表达水平均显著增高。NADPH4种亚基p22、p47、p67和p91表达均显著降低。结论 hERG钾通道可以通过降低氧化应激改善肝细胞内糖代谢。 展开更多
关键词 ether-α-go-go相关基因 胰岛素抵抗 氧化应激 糖代谢
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酮色林对人类ether-a-go-go相关基因钾通道的阻断作用(英文) 被引量:1
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作者 涂丹娜 邹安若 +3 位作者 廖玉华 杜以梅 王宪沛 李璐 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期525-534,共10页
采用双电极电压钳技术,研究酮色林对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的野生型和Y652突变型人类ether-a-go-go相关基因(human ether-a-go-go-related gene,HERG)钾通道的阻断效应,观测HERG通道的分子位点特性改变对其阻断效应的影响。结果显示... 采用双电极电压钳技术,研究酮色林对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的野生型和Y652突变型人类ether-a-go-go相关基因(human ether-a-go-go-related gene,HERG)钾通道的阻断效应,观测HERG通道的分子位点特性改变对其阻断效应的影响。结果显示,酮色林以电压依赖性和浓度依赖性的方式阻断野生型的HERG钾通道电流。尾电流包裹程序记录电流显示酮色林对HERG钾通道微小的张力性阻断。阻断特征符合对开放状态通道的阻断特征。酮色林也能调节失活状态的HERG钾通道。位于孔道S6区的氨基酸位点突变Y652A和Y652R可显著减弱酮色林对HERG通道的阻断作用。同野生型HERG钾通道的阻断相比,Y652A突变使阻断的IC50提高72倍,而Y652R突变使阻断的IC50提高53倍。Y652A和Y652R的阻断效应之间没有明显的差别。以上结果提示,酮色林优先阻断开放状态的HERG钾通道,而Y652是酮色林与通道结合的关键位点之一。 展开更多
关键词 人类ether-a-go-go相关基因 钾通道 酮色林 电压钳技术 突变
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HERG1在非小细胞肺癌中的表达及其对NF-κB信号通路的影响 被引量:1
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作者 刘荣 邵星星 耿新普 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2021年第2期52-58,共7页
目的探讨人类ether-a-go-go相关基因1(HERG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法用免疫组织化学染色法检测84例NSCLC患者癌组织及其配对癌旁组织标本中HERG1的表达,根据染色结果将患者分为高... 目的探讨人类ether-a-go-go相关基因1(HERG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法用免疫组织化学染色法检测84例NSCLC患者癌组织及其配对癌旁组织标本中HERG1的表达,根据染色结果将患者分为高表达组和低表达组,比较2组临床病理特征和生存预后。采用Western-blot检测人NSCLC细胞系H460、H1229、A549、H358和人支气管上皮细胞Beas-2b中HERG1的表达;采用HERG1 si-RNA(沉默组)和si-control(对照组)分别转染A549细胞,克隆形成实验和CCK8实验检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,Western-blot检测IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65蛋白表达。结果NSCLC癌组织HERG1高表达率为71.43%(60/84),明显高于癌旁组织的19.05%(16/84)(P<0.05)。高表达组TNM分期为Ⅲ—Ⅳ的比例和淋巴结转移率均显著高于低表达组(P<0.05),5年总体生存率和5年无进展生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。Beas-2b的HERG1蛋白相对表达量均显著低于H460、H1229、A549和H358(P<0.05)。沉默组细胞增殖力、侵袭力、迁移力及p-IκBα、p-NF-κB-p65蛋白相对表达量均显著低于对照组(P<0.05)。结论NSCLC患者癌组织中HERG1多呈高表达,且与生存预后有关,其机制可能与NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 人类ether-a-go-go相关基因1 非小细胞肺癌 转录因子κB 预后
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人ether-α-go-go钾通道减少肝脏的内质网应激和凋亡
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作者 卢晶 沈涵 +5 位作者 程呈 刘敬怡 朱晓蓉 谢荣荣 袁明霞 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期45-52,共8页
目的研究人ether-α-go-go(human ether-α-go-go related gene,h ERG)钾通道在肝细胞中与内质网应激和凋亡的关系。方法选取雄性20周龄h ERG基因敲除(knockout,KO)及同窝野生(wild type,WT)小鼠,测量体质量、摄食量;肝脏石蜡切片HE染色... 目的研究人ether-α-go-go(human ether-α-go-go related gene,h ERG)钾通道在肝细胞中与内质网应激和凋亡的关系。方法选取雄性20周龄h ERG基因敲除(knockout,KO)及同窝野生(wild type,WT)小鼠,测量体质量、摄食量;肝脏石蜡切片HE染色; Western blotting法检测糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)在肝脏的表达水平; Western blotting和荧光定量PCR方法检测肝脏凋亡相关基因活化的半胱天冬酶半胱天冬酶3(cleaved-cysteine aspartyl protease 3,cleaved-caspase 3),B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(Bcl2 associated X protein,Bax)表达水平;同时检测内质网应激相关基因磷酸化真核细胞翻译起始因子2(phosphorylated-eukaryotic translation initiation factor 2α,p-eIF2α)、激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)等基因的表达。经尾静脉给KO小鼠注射hERG慢病毒(lentivirus,LV)后,Western blotting法检测胰岛及肝脏内质网应激和凋亡相关指标。结果与WT小鼠相比,KO小鼠体质量及摄食量差异无统计学意义,肝细胞轻度肿胀,肝脏糖代谢G6Pase表达水平无明显变化,而PEPCK表达上调提示hERG敲除引起肝脏糖代谢异常。KO小鼠肝脏的内质网应激及凋亡相关指标均上调,提示KO小鼠体内存在内质网应激和凋亡。KO小鼠体内过表达h ERG后,改善了小鼠的肝脏内质网应激及凋亡。结论 hERG钾通道可以通过减少肝脏内质网应激和凋亡改善肝细胞内糖代谢。 展开更多
关键词 ether-α-go-go相关基因 内质网应激 凋亡 肝脏
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人类ether-à-go-go相关基因通道的动力学分析和分析机制
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作者 王宪沛 李璐 +2 位作者 邹安若 涂丹娜 廖玉华 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1068-1073,共6页
探讨在电生理记录的过程中,由人类ether-à-go-go相关基因(HERG)编码的通道应分析的通道动力学参数及机制。使用双电极电压钳技术,记录表达于爪蟾卵母细胞的HERG通道,编制不同的刺激脉冲分析各动力学参数。结果显示:(1)HERG通道在... 探讨在电生理记录的过程中,由人类ether-à-go-go相关基因(HERG)编码的通道应分析的通道动力学参数及机制。使用双电极电压钳技术,记录表达于爪蟾卵母细胞的HERG通道,编制不同的刺激脉冲分析各动力学参数。结果显示:(1)HERG通道在去极化脉冲下由于存在快失活而呈内向整流性。激活曲线可通过拟合去极化脉冲及随之的尾电流峰值而得到。激活的时间依赖性可通过拟合去极化不同时程与相应的尾电流峰值而得到。(2)HERG的去激活的I-V(电流-电压)关系曲线仍呈明显的内向整流性,尾电流的衰减路径用双指数方程拟合可得到快和慢两个时间常数。(3)HERG通道的失活呈电压依赖性,分别用两个不同的三脉冲程序,可得到通道的失活曲线以及去除失活后近乎线性的I-V关系。因此虽然HERG通道动力学复杂,仍可设计不同脉冲程序对其通道动力学间接进行分析,为HERG的分子位点作用研究提供基础。 展开更多
关键词 人类ether-a-go-go相关基因(HERG) 钾通道 动力学 爪蟾卵母细胞
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E-4031对遗传性长QT综合征hERG通道功能影响的研究
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作者 黄晓燕 王英 廉姜芳 《心电与循环》 2021年第1期35-39,共5页
目的探讨E-4031对遗传性长QT综合征人类ether-a-go-go相关基因(h ERG)通道功能的影响。方法构建杂合型WT/G572R-h ERG细胞株,根据E-4031是否干预分为观察组和对照组。Western blot检测两组h ERG通道蛋白表达,全细胞膜片钳技术检测两组h ... 目的探讨E-4031对遗传性长QT综合征人类ether-a-go-go相关基因(h ERG)通道功能的影响。方法构建杂合型WT/G572R-h ERG细胞株,根据E-4031是否干预分为观察组和对照组。Western blot检测两组h ERG通道蛋白表达,全细胞膜片钳技术检测两组h ERG通道激活电流、尾电流、稳态失活电流和失活恢复电流的变化。结果观察组155-k Da蛋白质条带明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组h ERG通道激活电流和尾电流的最大电流幅度[(416.32±90.37)、(897.25±92.05)p A]均高于对照组[(219.34±28.98)、(566.61±121.60)p A],差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组和对照组h ERG通道稳态失活电流半失活最大电压[(-83.39±1.45)m V比(-69.05±2.58)m V]差异有统计学意义(P<0.05)。结论E-4031能改善WT/G572R-h ERG通道功能。 展开更多
关键词 遗传性长QT综合征 人类ether-a-go-go相关基因 快激活延迟整流性钾电流 E-4031
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