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半枝莲乙醇提取物对高低转移性肝细胞癌细胞生长和侵袭的影响 被引量：1
1
作者 王倩 陈亭亭 +1 位作者 王守梅 张树辉 《中医学报》 CAS 2023年第3期584-594,共11页
目的:研究半枝莲乙醇提取物对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞生长、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:实验选用高、低转移性HCC细胞系MHCC-97H和MHCC-97L,采用不同浓度(0.25 g·L^(-1)、0.5 g·L^(-1)、1.0 g·... 目的:研究半枝莲乙醇提取物对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞生长、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:实验选用高、低转移性HCC细胞系MHCC-97H和MHCC-97L,采用不同浓度(0.25 g·L^(-1)、0.5 g·L^(-1)、1.0 g·L^(-1)、2.0 g·L^(-1)和3.0 g·L^(-1))的半枝莲乙醇提取物进行干预,筛选出50%最大抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)作为后续实验浓度,CCK-8实验和平板克隆实验测定细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡及EpCAM^(+)和CD133^(+)细胞比例;细胞划痕实验评估细胞迁移率;Transwell小室迁移和侵袭实验评估细胞迁移抑制率和侵袭抑制率;细胞成球实验测定肿瘤细胞的干细胞特性;Western Blot检测CyclinD1、P27、Bcl-2、Vimentin、Ki-67、Bax、E-cadherin蛋白表达水平。将16只SPF级4周龄雄性BALB/c裸鼠分为半枝莲乙醇提取物组(0.97 g·kg^(-1))和对照组,每组8只,于裸鼠左侧腋窝皮下注射100μL(2×10^(6)个)MHCC-97H细胞,待移植瘤直径>0.5 cm开始给药治疗,对照组给予0.9%生理盐水灌胃,隔5天评估移植瘤体积变化;给药35 d后HE染色检测移植瘤的形态变化及移植瘤肝、肺转移情况;免疫组织化学染色检测Ki-67蛋白表达水平。结果:2.0 g·L^(-1)为半枝莲乙醇提取物的最佳干预浓度。与对照组比较,半枝莲乙醇提取物可明显抑制MHCC-97H和MHCC-97L细胞增殖,明显减少MHCC-97H和MHCC-97L细胞克隆数目,G0/G1期细胞比例显著增加,S期和G2/M期细胞比例显著减少,细胞凋亡率显著升高,细胞划痕愈合进程明显减缓、细胞迁移和侵袭数目明显减少,细胞成球体积明显变小,细胞成球数目、球体形成率及EpCAM^(+)与CD133^(+)细胞比例明显降低,Cyclin D1、Bcl-2、Ki-67、Vimentin蛋白表达水平明显降低,P27、Bax、E-cadherin蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,半枝莲乙醇提取物组裸鼠MHCC-97H细胞移植瘤体� 展开更多
关键词 半枝莲乙醇提取物 肝细胞癌 上皮间质转化 干细胞特性 细胞凋亡 细胞侵袭 裸鼠
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