中药更年春方通过ERβ及PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元损伤的保护作用 被引量：15

1

作者 张阳 高玲芸 王文君 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期66-75,共10页

目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-S... 目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,通过CCK-8法检测细胞活力摸索Aβ25-35及GNC含药血清(GNC serum,GS)处理神经细胞的合适浓度及时间。采用Aβ25-35作用大鼠胎鼠海马神经元构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的体外模型,分为无血清对照组、模型组、GS组、空白血清对照(normal saline serum,NS)组和PHTPP(选择性ERβ拮抗剂)组。利用正置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力及LDH释放法检测细胞损伤。利用Hoest33258/PI双重荧光染色实验、qRT-PCR及Western blot实验检测细胞凋亡相关指标。结果与无血清对照组相比,模型组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触出现明显的收缩崩解和细胞碎片、细胞活力下降、LDH释放升高。与模型组和NS组相比,GS组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触的收缩崩解和细胞碎片减少、细胞活力上升、LDH释放减少、PI阳性神经元细胞数目下降、神经元bax/bcl-2mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase 3、cyt-c蛋白表达水平下降、p-Akt蛋白表达水平上升。与GS组相比,PHTPP组大鼠胎鼠海马神经元bax/bcl-2 mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase3、cyt-c蛋白表达水平上升、p-Akt蛋白表达水平下降。结论GNC对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元的损伤具有保护作用,此作用是通过ERβ及PI3K/Akt信号通路介导的。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病(AD) 更年春方(GNC) 雌激素受体β(erβ) PI3K/AKT信号通路 大鼠胎鼠海马神经元 SH-SY5Y细胞系

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E_(2)/ERβ信号通路介导引火汤改善慢性应激诱导的双侧卵巢摘除小鼠抑郁样行为 被引量：9

2

作者 徐红丹 邱琦 +2 位作者 杜艳秋 刘爽 黄树明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期10-18,共9页

目的:观察引火汤(YHT)对慢性应激诱导的双侧卵巢摘除(OVX)小鼠抑郁样行为的影响并探索其基于雌二醇(E_(2))/雌激素受体β(ERβ)信号通路的作用机制。方法:实验分两部分完成,第一部分将小鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(OVX),阳性药组(... 目的:观察引火汤(YHT)对慢性应激诱导的双侧卵巢摘除(OVX)小鼠抑郁样行为的影响并探索其基于雌二醇(E_(2))/雌激素受体β(ERβ)信号通路的作用机制。方法:实验分两部分完成,第一部分将小鼠随机分为假手术组(Sham),模型组(OVX),阳性药组(E_(2),0.13 mg·kg^(-1))和引火汤组(YHT,23.4 g·kg^(-1))。采用OVX联合慢性不可预知性温和刺激(CUMS)方法复制OVX。双侧卵巢摘除术后第8天,各组小鼠开始CUMS并开始给药,强迫游泳(FST),悬尾(TST),旷场(OFT)3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清、脑组织E_(2)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测芳香化酶(Cyp19)基因转录,免疫组织化学法(IHC)检测海马齿状回ERα和ERβ表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑内总ERα和ERβ蛋白水平。第二部分实验分Sham,OVX,YHT和阻断剂组(Y+B,23.4 g·kg^(-1)+100μg·kg^(-1)),Y+B组小鼠在引火汤灌胃同时采用隔天腹腔注射方式的给予ERβ阻断剂(PHTPP),3种行为学实验观察各组小鼠不动时间、水平运动评分及垂直运动评分变化。结果:与Sham组比较,OVX组小鼠不动时间显著增加、水平运动及垂直运动水平显著降低(P<0.01),血清和脑内E_(2)显著降低(P<0.01),脑内Cyp19 mRNA表达显著降低(P<0.01),海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著降低(P<0.01);与OVX组比较,E_(2)组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加(P<0.01),血清E_(2)显著升高(P<0.01),脑内Cyp19 mRNA表达差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERα差异无统计学意义,海马齿状回和脑内总ERβ表达显著升高(P<0.01),YHT组小鼠不动时间显著降低、水平运动及垂直运动水平显著增加(P<0.01),血清E_(2)未见升高,脑内E_(2)明显升高(P<0.01),脑内Cyp19 mRNA表达显著增加(P<0.01),海� 展开更多

关键词 引火汤 抑郁症 雌二醇 雌激素受体α(erα) 雌激素受体β(erβ)

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棕色田鼠和沼泽田鼠雄性社会行为与嗅觉相关脑区性激素受体表达之间的关系 被引量：4

3

作者 何凤琴 邰发道 +1 位作者 张育辉 安书成 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期165-175,共11页

应用行为聚焦取样观察和免疫组织化学相结合的方法 ,比较研究了棕色田鼠 (Microtusmandarinus)(n =15 )和沼泽田鼠 (M .fostis) (n =15 )在同种雄雄交往中的行为差异 ,及在雄雄交往前后雌激素 β受体(ERβ)和雄激素受体 (AR)表达的差异... 应用行为聚焦取样观察和免疫组织化学相结合的方法 ,比较研究了棕色田鼠 (Microtusmandarinus)(n =15 )和沼泽田鼠 (M .fostis) (n =15 )在同种雄雄交往中的行为差异 ,及在雄雄交往前后雌激素 β受体(ERβ)和雄激素受体 (AR)表达的差异。在 2h的雄雄交往中 ,前 1h棕色田鼠对同性入侵者有较多的攻击和防御行为 ,后 1h攻击行为较少 ,沼泽田鼠前后 1h差异不大 ,整个 2h期间 ,棕色田鼠较沼泽田鼠对同性入侵者有较多的攻击、防御行为 ,较少的非社会行为。经过免疫组织化学检测 ,没有社会交往时棕色田鼠主嗅球系统投射区和犁鼻系统投射区ERβ免疫阳性细胞 (ERβ IRs)明显少于沼泽田鼠 ,且显色淡 ,AR免疫阳性细胞(AR IRs)在两种鼠间差异不大 ,且都明显少于各自的ERβ IRs。 2h交往后 ,棕色田鼠主嗅球投射区和犁鼻系统投射区的ERβ IRs细胞数明显少于交往前 ,AR IRs细胞数明显多于交往前 ;沼泽田鼠交往前与交往后ERβ IRs和AR IRs细胞数均无显著差异 ,且显著多于交往后棕色田鼠ERβ IRs细胞数 ,显著少于交往后棕色田鼠AR IRs细胞数。以上结果表明 :两种田鼠在社会交往中社会行为不同 ;ERβ的减少和AR的增多可能在社会识别及攻击行为中均起一定的作用 。 展开更多

关键词 棕色田鼠 沼泽田鼠 雄性 社会行为 嗅觉 主嗅球系统 犁鼻系统 雌激素β受体

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雌激素受体β表达对于乳腺癌细胞生长特性及内分泌治疗的影响 被引量：5

4

作者 查中青 元敏 +1 位作者 吴巧胜 章乐虹 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第31期18-22,共5页

目的通过脂质体转染技术,将ERβ转染给ERα+的MCF-7细胞和ERα-的MDA-MB-231细胞,研究在ERα+和ERα-的不同条件下ERβ的功能。方法利用脂质体转染试剂Lipofectmine LTX将质粒pReveicer-M72-ERβ对MCF-7细胞和MDA-MB-231进行转染,并将... 目的通过脂质体转染技术,将ERβ转染给ERα+的MCF-7细胞和ERα-的MDA-MB-231细胞,研究在ERα+和ERα-的不同条件下ERβ的功能。方法利用脂质体转染试剂Lipofectmine LTX将质粒pReveicer-M72-ERβ对MCF-7细胞和MDA-MB-231进行转染,并将细胞分为MCF-7组(ERα+ERβ-)、MCF-7ERβ组(ERα+ERβ+)、MCF-7空组(ERα+ERβ-)、MDA-MB-231组(ERα-ERβ-)、MDA-MB-231 ERβ组(ERα-ERβ+)、MDA-MB-231空组(ERα-ERβ-),对各组细胞进行雌二醇、他莫昔芬处理,并同时设置未处理组作为对照。用MTT法绘制各组细胞在不同处理因子作用下的生长曲线。结果①与MDA-MB-231组和MDA-MB-231空组相比,MDA-MB-231 ERβ组细胞生长速度加快(P<0.05),三组细胞对于雌二醇、他莫昔芬的反应差异无显著性;②与MCF-7组和MCF-7空组对比,MCF-7ERβ组细胞生长速度减慢(P<0.05);在雌二醇的作用下,MCF-7ERβ组细胞的生长速度比其他两组细胞减慢(P<0.05),三组细胞对于他莫昔芬的反应差异无显著性。结论①在ERα表达的条件下,ERβ的表达能够抑制细胞的生长,并且能够使细胞对于雌激素的敏感性下降;②在无ERα表达的条件下,ERβ的表达能够促进细胞的生长。 展开更多

关键词 雌激素受体β(erβ) 雌激素受体α(erα) 转染 内分泌治疗

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ERβ在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的关系 被引量：3

5

作者 徐彬 方志沂 刘君 《实用癌症杂志》 2002年第6期588-590,598,共4页

目的　探讨ERβ在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。 方法　采用免疫组化S -P法测定 97例原发性乳腺癌组织中ERα、ERβ和PR的表达 ,并与生化法测得的ER、PR及临床病理指标作对比分析。 结果　ERβ在原发性乳腺癌组织中阳... 目的　探讨ERβ在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。 方法　采用免疫组化S -P法测定 97例原发性乳腺癌组织中ERα、ERβ和PR的表达 ,并与生化法测得的ER、PR及临床病理指标作对比分析。 结果　ERβ在原发性乳腺癌组织中阳性表达率为 62 .9% ( 61/ 97)。ERβ与ERα的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。ERα、生化ER、PR及免疫组化PR均阴性表达的乳腺癌组织内ERβ阳性表达率为 83 .3 % ( 10 / 12 )。ERβ阳性表达与组织学分级呈负相关 (P <0 .0 1)。无腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 81.6% ( 3 1/ 3 8) ,有腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 5 0 .8% ( 3 0 / 5 9) ,两者具有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ,且ERβ阳性表达与腋淋巴结转移呈负相关。ERβ表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、月经状况和病理类型无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论　ERβ与ERα、PR一样也为细胞核受体。原发性乳腺癌组织内亦有ERβ表达。在原发性乳腺癌组织内ERβ阳性表达与组织学分级和腋淋巴结转移呈负相关。ERβ与ERα的表达无相关性 ,不能通过ER、PR及ERα联合测定来取代ERβ的检测。 展开更多

关键词 病理因素 乳腺癌 雌激素受体β 雌激素受体Α 孕激素受体 表达 免疫组化

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乳腺癌雌激素受体表达和临床病理因素的关系 被引量：4

6

作者 郭丽英 郭晨明 +1 位作者 马方婧 迪丽米娜.伊拉木 《新疆医科大学学报》 CAS 2009年第1期48-50,共3页

目的:探讨雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor,ERβ)在乳腺癌组织中的表达与雌激素受体ɑ亚型(ERɑ)、孕激素受体(PR)表达和临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化显色系统二步法(EnVision系统)测定75例原发性乳腺癌组织中ERβ与ERα... 目的:探讨雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor,ERβ)在乳腺癌组织中的表达与雌激素受体ɑ亚型(ERɑ)、孕激素受体(PR)表达和临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化显色系统二步法(EnVision系统)测定75例原发性乳腺癌组织中ERβ与ERα、PR的表达,并对临床诊断相关指标进行对比分析。结果:ERβ阳性表达率为53.33%(40/75),共同表达46.66%(35/75),ERα和ERβ共同表达,二者无相关性(P>0.05),ERβ表达与组织学分级、腋淋巴结阳性差异有统计学意义(P<0.05);与肿瘤大小、临床分期、和病理类型无相关性(P>0.05)。结论:ERβ表达与乳腺癌高危患者密切相关,与乳腺癌的发生、发展及预后有关,可作为反映乳腺癌生物学行为的指标,不能通过ER、PR及ERα联合测定来代替ERβ的检测。 展开更多

关键词 乳腺癌 雌激素受体β 雌激素受体Α 孕激素受体 临床病理学

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醒脑益智方对T2DM痴呆小鼠性激素信号通路的影响 被引量：4

7

作者 高晓斐 徐萌 +1 位作者 张静 岳仁宋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期81-85,共5页

目的:探讨醒脑益智方对2型糖尿病痴呆小鼠血清性激素水平及雌激素受体(estrogen receptor,Er)α,ErβmRNA表达的影响及其作用机制。方法:设昆明小鼠为空白组,将KK-Ay小鼠血糖≥13.9 mmol·L-1者随机分为模型组、吡拉西坦组、醒脑益... 目的:探讨醒脑益智方对2型糖尿病痴呆小鼠血清性激素水平及雌激素受体(estrogen receptor,Er)α,ErβmRNA表达的影响及其作用机制。方法:设昆明小鼠为空白组,将KK-Ay小鼠血糖≥13.9 mmol·L-1者随机分为模型组、吡拉西坦组、醒脑益智方组。吡拉西坦组ig吡拉西坦片(150 mg·kg-1),醒脑益智方组ig醒脑益智方(7.2 g·kg-1),空白组和模型组每天用等体积生理盐水ig。给药前后行Morris水迷宫测试并记录潜伏期。小鼠麻醉后迅速取血、大脑海马及额叶皮质。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆性激素水平,包括卵泡刺激素(FSH),孕酮(P),雌二醇(E2),睾酮(T)等;实时荧光定量PCR检测Erα,ErβmRNA表达水平。结果:与模型组比较,空白组、吡拉西坦组和醒脑益智方组第5天潜伏期明显减少(P<0.05);与模型组比较,空白组、醒脑益智方组促黄体生成素(LH),T水平明显下降(P<0.05),E2,P水平明显升高(P<0.05);与吡拉西坦组比较,醒脑益智方组LH水平明显下降(P<0.05)。与模型组比较,吡拉西坦组、醒脑益智方组Erβ受体mRNA表达水平明显增高(P<0.05),其他各组间差异均不明显。结论:糖尿病痴呆的出现可能与性激素通路有关,醒脑益智方对糖尿病轻度认知功能障碍有明显改善作用,这一作用可能通过提高血浆E2,P水平及雌激素受体Eβ表达水平,降低LH,T水平实现。 展开更多

关键词 醒脑益智方 糖尿病痴呆 血浆性激素水平 雌激素受体Α 雌激素受体β

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消乳块胶囊抑制DMBA诱发大鼠乳腺癌及其机制 被引量：4

8

作者 陈占红 王晓稼 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第5期1031-1034,共4页

目的：观察消乳块胶囊对二甲基苯蒽（DMBA）诱发SD大鼠乳腺癌的影响及其机制。方法：50天龄Sprague-Daw ley系健康雌性未孕大鼠30只随机分为3组：模型组、治疗组和对照组。模型组和治疗组大鼠均先经两次DMBA（15mg溶于1.5mL芝麻油,间隔... 目的：观察消乳块胶囊对二甲基苯蒽（DMBA）诱发SD大鼠乳腺癌的影响及其机制。方法：50天龄Sprague-Daw ley系健康雌性未孕大鼠30只随机分为3组：模型组、治疗组和对照组。模型组和治疗组大鼠均先经两次DMBA（15mg溶于1.5mL芝麻油,间隔1周）灌胃造模,同时治疗组大鼠以消乳块胶囊0.4g/（kg.d）灌胃,持续给药,在第14周处死。大鼠乳腺组织及肿瘤组织均作常规病理,免疫组化检测ERα、ERβ、PR、AhR的表达,酶联免疫吸附法测定血浆E2、P、LH、FSH水平。结果：治疗组癌变率明显低于模型组（P〈0.05）,分别是25.0%（2/8）和71.4%（5/7）。同对照组相比,ERβ、PR和AhR在治疗组和模型组中升高明显（P〈0.05～P〈0.01）,ERβ在治疗组升高更为明显,同模型组相比,差异仍有显著性（P〈0.05）。血清激素测定显示,同对照组和模型组相比,E2、FSH和LH在模型组中升高明显（P〈0.05～P〈0.01）;治疗组E2、FSH仍高于对照组（P〈0.05～P〈0.01）。结论：消乳块胶囊对DMBA诱导的大鼠乳腺恶性肿瘤有预防作用,其机制可能是通过ERβ介导的保护作用和调节体内激素水平来实现。 展开更多

关键词 消乳块胶囊 二甲基苯蒽(DMBA) 乳腺肿瘤 雌激素受体β 芳香烃受体 性激素 垂体激素

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ERα和ERβ在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性研究 被引量：3

9

作者 徐晓鸿 陈家斌 夏银稳 《实用癌症杂志》 2015年第8期1119-1122,共4页

目的探讨雌激素受体(ER)α和β在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性。方法选取经组织病理学检查确诊的非小细胞肺癌220例患者作为研究对象。采用免疫组化方法检测ERα和ERβ表达水平。结果两种雌激素受体表达于细胞核内... 目的探讨雌激素受体(ER)α和β在非小细胞性肺癌组织中的表达及与其临床病理的相关性。方法选取经组织病理学检查确诊的非小细胞肺癌220例患者作为研究对象。采用免疫组化方法检测ERα和ERβ表达水平。结果两种雌激素受体表达于细胞核内,其中ERα阳性表达率为4.09%,ERβ阳性表达率为86.36%;ERα阳性表达与临床分期、病理分化程度有关:Ⅰ期患者ERα阳性表达率高于分期晚的患者(9.38%>0.00%,χ2=12.121,P<0.01);高分化患者ERα阳性表达率高于中低分化患者(14.29%>3.00%>0.00%,χ2=14.756,P<0.01)。ERβ阳性表达与患者临床分期、分化程度及病理类型有关:Ⅰ期患者ERα阳性表达率最低(78.12%,χ2=10.732,P=0.01),腺癌及高分化非小细胞性肺癌患者ERβ具有更高表达率(70.7%,χ2=7.749,P=0.02;83.3%,χ2=12.738,P<0.01)。结论 ERα和ERβ在非小细胞肺癌患者中表达情况与其临床病理特点具有相关性,提示雌激素受体表达可能在非小细胞肺癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 雌激素受体β 雌激素受体Α

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苯甲酸雌二醇预处理的去势大鼠致前后血清雌二醇和海马组织雌激素β受体的变化 被引量：3

10

作者 汪昕 刘剑英 +1 位作者 马昱 彭伟锋 《中国临床神经科学》 2006年第6期600-604,共5页

目的:分析不同剂量苯甲酸雌二醇(EB)预处理的去势大鼠以海人藻酸(kainicacid,KA)致前后血清雌二醇(E2)和海马组织雌激素β受体(ERβ)的水平,探讨E2、ERβ与KA之间的相关性。方法:将去势大鼠随机分为对照组(O组)、不同剂量EB干预组(O+E)... 目的:分析不同剂量苯甲酸雌二醇(EB)预处理的去势大鼠以海人藻酸(kainicacid,KA)致前后血清雌二醇(E2)和海马组织雌激素β受体(ERβ)的水平,探讨E2、ERβ与KA之间的相关性。方法:将去势大鼠随机分为对照组(O组)、不同剂量EB干预组(O+E)、致组(O+KA)和不同剂量EB预处理致组(O+E+KA)。分别利用电化学发光法与免疫印迹法检测E2浓度与海马组织ERβ表达水平的变化。结果:①除小剂量EB(25μg·kg-1)预处理的去势大鼠血清E2水平(88.8±3.23)pmol·L-1与O组(88.49±8.31)pmol·L-1差异无统计学意义外,其余剂量EB预处理(≥EB1mg·kg-1)的各组去势大鼠血清E2浓度均明显高于O组,且E2水平随EB的增加而增高,但不影响去势大鼠海马组织ERβ的表达。②癫发作的早期(癫发作后2h内)不仅降低了癫动物血清雌激素的水平,也降低了海马组织ERβ的表达,但这种降低与癫发作的轻重程度无关。结论:去势大鼠海马ERβ蛋白的表达水平主要与癫发作有关,雌激素对癫发作的影响可能并不体现在其对ERβ表达的影响。 展开更多

关键词 雌二醇 癫癇 雌激素β受体

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山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立 被引量：3

11

作者 刘海港 李宏梅 +5 位作者 王树迎 成子强 刘法孝 窦文文 井维芳 郭慧君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期302-308,共7页

本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩... 本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。 展开更多

关键词 山羊 雌激素受体β 多克隆抗体 免疫组化

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ERβ基因多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌相关性研究 被引量：3

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作者 朱琳 李迅 +3 位作者 刘炜 马小平 赵振慧 杨顺娥 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第20期1585-1591,共7页

目的雌激素受体β基因（estrogen receptorp，ERβ）为雌激素受体（estrogen receptor，ER）亚型之一，有2个常见多态位点，不同个体ERβ的表达水平和功能可能受其基因多态性的影响，本研究探讨ERβ基因RsaI多态性与新疆维吾尔族和汉族... 目的雌激素受体β基因（estrogen receptorp，ERβ）为雌激素受体（estrogen receptor，ER）亚型之一，有2个常见多态位点，不同个体ERβ的表达水平和功能可能受其基因多态性的影响，本研究探讨ERβ基因RsaI多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌易感性的关系。方法选择2013-01-01—2014-09—30新疆医科大学附属肿瘤医院初次诊断为原发性乳腺癌的维吾尔族患者130例和汉族患者120例，选择本院同期健康体检者维吾尔族125名和汉族118名。应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR—RFLP）方法检测入选对象ERβ基因RsaI位点多态性，比较该位点多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌易感性的关系。结果维吾尔族和汉族两民族病例组、对照组基因型分布及等位基因频率差异均有统计学意义，P〈0．05。在维吾尔族中，病例组与对照组的基因型分布差异及等位基因频率差异无统计学意义，P〉0．05；在汉族中，病例组与对照组的基因型分布及等位基因频率差异均有统计学意义，P〈0．05。以rr基因型为对照，非条件Logistic回归分析发现，汉族妇女中，无多产史（OR=0．466，95％CI为0．234～0．928，P〈0．05）和无乳腺良性病史（OR=0．421，95％CI为0．204-0．869，P〈0．05）的Rr型乳腺癌发病风险降低。结论维吾尔族和汉族两民族ERβ基因RsaI基因型分布和等位基因频率差异有统计学意义。携带Rr基因型可能降低新疆汉族妇女乳腺癌易感性。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 雌激素受体β基因 维吾尔族 汉族 基因多态性

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基于分子对接的雌激素类化合物与雌激素β受体的CoMSIA研究 被引量：1

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作者 王琳 易忠胜 +3 位作者 李连臣 刘红艳 莫凌云 张爱茜 《桂林理工大学学报》 CAS 北大核心 2010年第4期625-631,共7页

采用分子对接方法完成了分子结构复杂多样的74个化合物的叠合,应用比较分子相似性指数分析方法(CoMSIA)研究了化合物与雌激素β受体(ERβ)之间的三维定量结构-活性关系(3D-QSAR),建立了相关性显著、预测能力强的定量模型(q2=0.533,r2=0.... 采用分子对接方法完成了分子结构复杂多样的74个化合物的叠合,应用比较分子相似性指数分析方法(CoMSIA)研究了化合物与雌激素β受体(ERβ)之间的三维定量结构-活性关系(3D-QSAR),建立了相关性显著、预测能力强的定量模型(q2=0.533,r2=0.870,rp2re=0.787)。CoMSIA和对接结果从一个侧面揭示了影响雌激素活性的分子结构特征和可能的分子机理。 展开更多

关键词 雌激素类化合物 雌激素β受体(erβ) 分子对接 COMSIA 3D-QSAR

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ERβ与其变异体对三阴性乳腺癌细胞株生长的影响 被引量：1

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作者 陈迪 章乐虹 查中青 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期30-35,共6页

目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β(ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性;探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内... 目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β(ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性;探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内分泌治疗的预测因子和新的治疗靶点。方法①构建真核细胞表达克隆pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△。②脂质体法转染人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,设ERβ组、ERβ△组、空载体组及空白对照四组。③转染后荧光显微镜检,免疫荧光、免疫细胞化学、WesternBlot等方法验证蛋白表达。按实验设计分别加入不同药物浓度的三苯氧胺、雌激素。④流式细胞术观察细胞周期情况。MTT法检测细胞相对活性。结果①以IRES2-EGFP为蓝本改造的pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△成功构建。②转染ERβ后细胞生长速度加快,细胞周期中G1期比例减少,S期比例增加,克隆形成能力增强;转染ERβ△后细胞系相对活性及细胞周期未见明显改变;雌激素及tamoxifen对转染ERβ及其剪切体ERβ△的细胞生长无明显影响。结论 ERβ单独表达促进MDA-MB-231细胞生长,增加细胞相对活性及克隆形成能力;转染ERβ的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中对雌激素及雌激素抑制剂tamoxifen无明显反应。 展开更多

关键词 雌激素受体β(erβ) 转染 三阴性乳腺癌 内分泌治疗

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ERβ1基因及其剪切变异体真核表达载体的构建与鉴定 被引量：1

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作者 陈迪 章乐虹 彭伟强 《中华普通外科学文献（电子版）》 2013年第4期18-20,共3页

目的应用基因克隆技术构建雌激素受体β1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增基因ERβ1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告... 目的应用基因克隆技术构建雌激素受体β1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增基因ERβ1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告基因的非融合真核细胞表达质粒IRES2-EGFP,菌群转化扩增后琼脂糖凝胶电泳,限制性酶切后行DNA测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明ERβ1长度为1593 bp,ERβ△长度为972 bp,与GeneBank上公布的蛋白编码区序列一致。结论成功构建ERβ1基因及其剪切变异体ERβ△真核表达载体。 展开更多

关键词 基因克隆 质粒 雌激素受体β(erβ)

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基于启发式变量筛选方法研究与雌激素β受体结合的化合物结构与活性之间的关系 被引量：1

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作者 张一鸣 杨旭曙 +1 位作者 孙成 王连生 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期893-899,共7页

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在两种亚型(ERα和ERβ),化合物与两种受体亚型在结合活性和化合物结构特征方面存在差异.以31种与雌激素β受体亚型(ERβ)结合的化合物为研究对象,采用启... 雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在两种亚型(ERα和ERβ),化合物与两种受体亚型在结合活性和化合物结构特征方面存在差异.以31种与雌激素β受体亚型(ERβ)结合的化合物为研究对象,采用启发式变量筛选方法,从1524个变量中筛选出5个与化合物活性(lgRBA)最相关的变量,然后采用多元线性回归(MLR)建立最佳预测模型.模型相关性显著,而且具有良好的稳健性和预测能力(r2=0.829,q2LOO=0.742,r2pred=0.772,q2ext=0.724,RMSEE=0.395).同时揭示了影响化合物与ERβ受体结合的配体化合物分子的结构特征,并对模型的应用域进行了研究. 展开更多

关键词 雌激素β受体(erβ) 定量结构与活性相关(QSAR) 启发式变量筛选 模型应用域

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育龄妇女雌激素受体β基因RsaⅠ多态性调查 被引量：1

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作者 李学成 于学文 +1 位作者 任永惠 李芬 《中国优生与遗传杂志》 2005年第3期17-18,共2页

目的　雌激素受体 β是一种核调节蛋白 ,其介导雌激素发挥多重作用。雌激素受体 β基因突变与某些疾病的发生有关 ,本文调查了雌激素受体基因RsaⅠ突变在女性人群中的分布。方法　采用PCR -RFLP方法检测ER β基因第 5外显子 1 0 82位核... 目的　雌激素受体 β是一种核调节蛋白 ,其介导雌激素发挥多重作用。雌激素受体 β基因突变与某些疾病的发生有关 ,本文调查了雌激素受体基因RsaⅠ突变在女性人群中的分布。方法　采用PCR -RFLP方法检测ER β基因第 5外显子 1 0 82位核苷酸G -A突变。结果　 1 0 1名女性人群中 ,ERβ基因RsaⅠ纯合突变型基因的频率为 9 9% ,杂合突变型基因的频率为 4 4 5 5 % ,野生型基因的频率为 4 5 5 5 % ,R等位基因的频率为 32 1 8,r等位基因的频率为 6 7 82 %。结论　陕西农村女性人群ERβ基因RsaⅠ多态性高于德国、新加坡妇女的突变率。需进一步研究该基因突变与疾病的相关性。 展开更多

关键词 基因 雌激素受体β 人群 突变型 性调查 erβ 育龄妇女 多态性 外显子 调节蛋白

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雌激素受体α和β免疫反应在雄性和雌性棕色田鼠脑区分布的比较（英文）

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作者 何凤琴 张巨武 +3 位作者 方刚 刘凌 王波 郭春林 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期184-199,共16页

单配制和多配制动物社会行为有差异,这些差异可能与雌激素受体类型有关(ERs)。虽然多配制大鼠和小鼠中枢神经雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)免疫反应在大脑的分布已有报道,单配制雄性草原田鼠中枢神经ERα的分布也有报道,但单配制田鼠ER... 单配制和多配制动物社会行为有差异,这些差异可能与雌激素受体类型有关(ERs)。虽然多配制大鼠和小鼠中枢神经雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)免疫反应在大脑的分布已有报道,单配制雄性草原田鼠中枢神经ERα的分布也有报道,但单配制田鼠ERα和(或)ERβ在雌性和雄性分布差异未见报道。本研究对雄性和雌性棕色田鼠前脑区域ERα和ERβ免疫反应(IR)细胞数量进行比较。研究结果表明:(1)免疫反应主要分布在细胞核中。(2)ERα-IR和ERβ-IR细胞广泛分布于整个雌性和雄性前脑区域,在许多脑区表达有重叠。然而,不同受体在雌雄不同脑核中的分布数量不同。(3)ERα和ERβ的分布存在性别差异。例如,雌性ERα在视前核中部(MPN),终纹床核(BNST)和杏仁内侧核(Me A)比雄性多,相反雄性ERβ在MPN和BNST比雌性多。这些研究结果可能为我们理解如何通过ERα和ERβ调节动物的社会行为,及雌性和雄性社会行为的差异提供一个重要的神经解剖学基础。 展开更多

关键词 雌激素受体Α 雌激素受体β 前脑 单配制田鼠 棕色田鼠

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比格犬雌激素受体β的原核表达、纯化及鉴定

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作者 许琴 赵彦斌 +7 位作者 任秀梅 孙兆增 叶华虎 刘一 李微 白杰英 曾林 胡仲明 《实验动物与比较医学》 CAS 2013年第3期174-179,共6页

目的研究比格犬雌激素受体β（Estrogenreceptorβ，ERβ）及其剪接异构体在生殖调控中的功能，构建比格犬ERβ的pMAL-p5x／ERβ 480DE3E．coli重组菌株，并进行纯化和鉴定。方法Trizol法提取发情期比格犬下丘脑总RNA，RT-PCR获得cDNA，... 目的研究比格犬雌激素受体β（Estrogenreceptorβ，ERβ）及其剪接异构体在生殖调控中的功能，构建比格犬ERβ的pMAL-p5x／ERβ 480DE3E．coli重组菌株，并进行纯化和鉴定。方法Trizol法提取发情期比格犬下丘脑总RNA，RT-PCR获得cDNA，以NCBI网站公布的比格犬ERβ基因CDS序列设计特异性引物，扩增ERβ保守区基因编码序列（16-496bp），连接原核表达载体pMAL-p5x，筛选、鉴定阳性克隆并测序。将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α，再转化大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，表达产物经经麦芽糖亲和树脂（AmylomResin）亲和层析分离纯化，并对纯化的融合蛋白进行鉴定。结果构建了pMAL-p5x／ERa480重组质粒，在DE3大肠杆菌中诱导表达出MBP-ERβ融合蛋白，SDS-PAGE显示分子量约为60000，与预期结果一致：优化了MBP-ERβ表达体系的表达条件：分别在0．2％葡萄糖，1000g／mlAmpcillin，0．1mmol／LIPTG37℃培养5h或在0．2％葡萄糖，50μg／mlAmpcillin，0．2mmol／LIPTG37℃培养3h，融合蛋白表达效果比较好。结论构建了pMAL-p5x／ERβ480原核表达重组质粒，获得了比格犬MBP—ERB融合蛋白，为犬种属特异性ERB多克隆抗体的制备及功能分析奠定了基础。 展开更多

关键词 比格犬 雌激素受体β(erβ) 原核表达

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基于雌激素受体通路探讨青娥丸对CUMS大鼠的抗抑郁机制 被引量：9

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作者 宋珊珊 孙红 +2 位作者 井汶 戴国梁 居文政 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期9-15,共7页

目的:研究青娥丸对慢性温和不可预知应激模型(CUMS)大鼠的抗抑郁效果,及其对雌激素受体及相关信号通路的调控作用,探讨青娥丸的抗抑郁机制。方法:54只SD大鼠建立CUMS抑郁大鼠模型,实验设为正常组、模型组、草酸依他普伦组(6.3 mg·k... 目的:研究青娥丸对慢性温和不可预知应激模型(CUMS)大鼠的抗抑郁效果,及其对雌激素受体及相关信号通路的调控作用,探讨青娥丸的抗抑郁机制。方法:54只SD大鼠建立CUMS抑郁大鼠模型,实验设为正常组、模型组、草酸依他普伦组(6.3 mg·kg^-1)及青娥丸低、中、高剂量组(1.71,5.13,15.39 g·kg^-1)。CUMS造模4周后给予各组相应药物治疗2周,采用行为学[糖水消耗实验(SPT),强迫游泳实验(FST),旷场实验(OFT)]评价大鼠抑郁状态;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测雌激素受体α(ERα),雌激素受体β(ERβ),脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体B(Trk B)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的糖水消耗率及旷场得分均下降(P<0.05,P<0.01),游泳不动时间显著延长(P<0.01),同时ERα,ERβ,BDNF和Trk B的蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠的行为学表现得到改善,糖水消耗率及旷场得分增加(P<0.05,P<0.01),游泳不动时间减少(P<0.05),同时ERα,ERβ,BDNF和Trk B蛋白的表达明显上调(P<0.05,P<0.01),其中青娥丸中剂量组的调节作用更为显著。结论:青娥丸可改善CUMS模型大鼠的抑郁样行为,其机制可能与上调ERα,ERβ的表达,激活雌激素受体介导的ERβ/BDNF/Trk B通路起到神经保护作用有关。 展开更多

关键词 青娥丸 慢性温和不可预知应激模型(CUMS) 抑郁 雌激素受体 雌激素受体β(erβ)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)信号通路

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