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lncRNA NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制
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作者 张永涛 唐雪娣 徐枫钞 《山东医药》 CAS 2023年第25期37-41,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic、NKILA-NC质粒,空白组不予转染。收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA NKILA、miR-21表达,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin表达;通过TargetScan预测lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系,并通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系。取SD裸鼠10只,随机分为观察组和对照组各5只,分别于右前肢腋下注射转染lncRNA NKILA的放射抵抗CNE2细胞、单纯放射抵抗CNE2细胞,常规饲养4周处死,分离并测量移植瘤体积。结果转染组lncRNA NKILA表达、E-cadherin表达均高于空白组和NC组,miR-21表达及细胞增殖、侵袭、迁移能力和N-cadherin表达均低于空白组和NC组(P均<0.05);而空白组与NC组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。TargetScan预测显示,lncRNA NKILA与miR-21存在靶向结合位点;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染NKILA-mimic质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞荧光素酶活性低于共转染NKILA-NC质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞(P<0.05),而共转染NKILA-mimic质粒、miR-21-3′-UTR-MUT与共转染NKILA-NC质粒、miR-21-3′-UTR-MUT的CNE2细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组移植瘤体积小于对照组(P<0.05)。结论lncRNA NKILA可能通过靶向抑制miR-21表达而抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,继而抑制鼻咽癌细胞的放射抵抗和上皮间质转化。 展开更多
关键词 鼻咽癌 长链非编码RNA NKILA 微小RNA-21 放射抵抗 上皮间质转化
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癌相关成纤维细胞促进胃癌细胞迁移与侵袭
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作者 周畅 陈伟强 +4 位作者 王宇恒 杨晓夏 涂幸 刘靖 罗利 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期501-508,共8页
【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-C... 【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-CM),分别作用于胃癌细胞系AGS及MGC803,利用细胞划痕实验检测胃癌细胞迁移能力;Transwell小室迁移及侵袭实验评价胃癌细胞迁移与侵袭能力;光学显微镜观察胃癌细胞形态变化;荧光定量PCR检测胃癌细胞中“上皮-间质”转化(EMT)相关指标的表达变化。【结果】我们成功分离培养NFs及CAFs;与NFs-CM组相比,CAFs-CM组胃癌细胞的迁移与侵袭能力均增强(P<0.05),胃癌细胞形态由扁圆的上皮细胞形态演变为梭形的间质细胞形态,胃癌细胞中上皮细胞标志E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达降低,间质细胞标志波形蛋白(Vimentin)和N-钙粘蛋白(N-cadherin)表达上升(P<0.05)。【结论】CAFs可通过调节EMT进程促进胃癌细胞迁移与侵袭。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 胃癌 迁移 侵袭 “上皮-间质”转化
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