糖尿病慢性肾脏疾病患者血清上皮衍生因子水平变化及其临床意义 被引量：3

1

作者 杨俊 周雅珊 梁琼 《检验医学与临床》 CAS 2017年第13期1853-1855,共3页

目的探讨血清上皮衍生因子(PEDF)水平检测在糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)的临床意义。方法选取2014年6月至2015年12月该院确诊的140例CKD患者,根据患者的尿蛋白排泄率分为:尿蛋白正常组77例(尿蛋白排泄率小于20μg/min)、尿蛋白阳性组63例(... 目的探讨血清上皮衍生因子(PEDF)水平检测在糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)的临床意义。方法选取2014年6月至2015年12月该院确诊的140例CKD患者,根据患者的尿蛋白排泄率分为:尿蛋白正常组77例(尿蛋白排泄率小于20μg/min)、尿蛋白阳性组63例(≥20μg/min),另选择该院同期50例健康体检者作为健康对照组,比较3组研究对象PEDF水平并分析其与患者血糖、肾功能等指标的相关性。结果尿蛋白正常组和尿蛋白阳性组患者血清PEDF水平均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),尿蛋白阳性组患者血清PEDF水平高于尿蛋白正常组,差异有统计学意义(P<0.05);尿蛋白正常组和尿蛋白阳性组患者空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平均显著高于健康对照组,肾小球滤过率(GFR)均低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),尿蛋白阳性组患者FPG、HbA1c、Scr、BUN水平高于尿蛋白正常组,GFR低于尿蛋白正常组,差异有统计学意义(P<0.05);血清PEDF水平与Scr、BUN呈显著的正相关性(P<0.05),血清PEDF水平与GFR呈显著的负相关性(P<0.05)。结论 CKD患者血清PEDF水平变化可能与患者肾损伤具有一定的相关性。 展开更多

关键词 上皮衍生因子 糖尿病 慢性肾脏疾病

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高度近视对糖尿病豚鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响 被引量：10

2

作者 王爽 梁申芝 +1 位作者 万光明 徐亚娟 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期398-402,共5页

背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变（DR）,高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）在DR的发生和发展过程中具... 背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变（DR）,高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）在DR的发生和发展过程中具有重要作用. 目的 观察高度近视合并糖尿病豚鼠视网膜中VEGF和PEDF表达的变化,探讨高度近视对DR的影响.方法 将出生3d的豚鼠48只采用随机数字表法随机分为正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组,每组12只.高度近视组豚鼠用半透明眼罩行右眼遮盖,构建高度近视动物模型;采用60 mg/kg的链脲佐菌素（STZ）腹腔内注射4次,每3天1次,制作糖尿病豚鼠模型;糖尿病合并高度近视组豚鼠采用半透明眼罩联合STZ制作糖尿病合并高度近视模型.造模成功后行常规苏木精-伊红染色观察视网膜结构,免疫组织化学染色检测视网膜中VEGF和PEDF的表达情况,应用Biosens数字成像分析系统分析阳性反应部位的平均吸光度（A）值. 结果 正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组的屈光度分别为（＋0.25±177;0.07）、（-7.50±177;0.04）、（＋0.25±177;0.03）和（-7.50±177;0.02）D;空腹血糖分别为（5.3±177;0.1）、（5.1±177;0.2）、（19.7±177;0.4）和（18.5±177;0.3）mmol/L.各组豚鼠均造模成功.与正常对照组相比,高度近视组视网膜组织变薄,神经节细胞数目减少;糖尿病组视网膜组织结构疏松、肿胀;糖尿病合并高度近视组视网膜组织变薄,结构肿胀.正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组VEGF阳性反应部位平均A值分别为128.61 ±177;5.57、118.24±177;2.59、155.60±177;9.70和135.15±177;5.22,各组间总体比较差异有统计学意义（F=17.365,P=0.032）,其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中VEGF表达水平（A值）明显低于糖尿� 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 高度近视 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子

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渗出性老年黄斑变性患者玻璃体腔注射康柏西普前后房水中血管内皮生长因子、色素上皮细胞衍生因子浓度的变化 被引量：9

3

作者 张英辉 李建军 +1 位作者 杨洪帅 王秀超 《药物评价研究》 CAS 2018年第9期1703-1707,共5页

目的探讨玻璃体腔注射康柏西普治疗对渗出性老年黄斑变性(e AMD)患者的临床疗效及房水中血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮细胞衍生因子(PEDF)水平的变化。方法选取2013年5月—2017年4月在西电集团医院眼科治疗的e AMD患者75例(75眼)作... 目的探讨玻璃体腔注射康柏西普治疗对渗出性老年黄斑变性(e AMD)患者的临床疗效及房水中血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮细胞衍生因子(PEDF)水平的变化。方法选取2013年5月—2017年4月在西电集团医院眼科治疗的e AMD患者75例(75眼)作为研究对象,随机分为治疗组和对照组,分别有38、37例。治疗组患者玻璃体腔注入0.05m L康柏西普注射液,对照组患者注入0.5 m L曲安奈德注射液,比较两组患者治疗前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心凹视网膜厚度(CRT)以及房水中VEGF、PEDF浓度,并观察术后并发症的发生情况。结果治疗前,两组BCVA、CRT、房水中VEGF、PEDF浓度均无显著差异;术后1、3、6个月治疗组BCVA、CRT均显著高于治疗前,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05),而对照组无显著变化。治疗后治疗组VEGF显著降低、PEDF显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05),而对照组无显著变化。两组治疗期间不良反应的发生情况比较无显著差异。结论玻璃体腔注射康柏西普可以显著降低eAMD患者房水中VEGF浓度,提高PEDF水平,改善视力,疗效显著,且无严重的并发症,值得临床应用和推广。 展开更多

关键词 渗出性老年黄斑变性 康柏西普 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子

原文传递

卵巢过度刺激综合征与卵泡液血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子水平的关系 被引量：6

4

作者 谭慧芳 祁秀娟 +3 位作者 丁钰 王琳 孙月荣 郭晓静 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第3期171-176,共6页

目的通过对卵泡液中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平的测定,探讨二者与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢过度刺激综合征(OHSS)的关系及其对OHSS的预测价值。方法本研究为单中心的前瞻性病例对照研究。71例IVF-E... 目的通过对卵泡液中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平的测定,探讨二者与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢过度刺激综合征(OHSS)的关系及其对OHSS的预测价值。方法本研究为单中心的前瞻性病例对照研究。71例IVF-ET患者在接受控制性超排卵(COH)过程中呈OHSS高危者43例,其中发生中重度OHSS的13例为OHSS组,未发生OHSS的30例为高危组;同期在COH中卵巢反应正常的28例患者为对照组。采用酶联免疫吸附法分别检测三组患者取卵日卵泡液中VEGF和PEDF水平。结果 (1)OHSS组的卵泡液VEGF水平明显高于高危组和对照组(P<0.05),高危组和对照组间比较无显著性差异(P>0.05)。(2)OHSS组的卵泡液PEDF水平明显低于高危组和对照组(P<0.05),高危组和对照组间比较无显著性差异(P>0.05)。(3)卵泡液VEGF水平与注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清雌激素水平呈正相关(r=0.391,P<0.01),与卵泡液PEDF水平呈负相关(r=-0.280,P<0.05)。结论卵泡液中VEGF和PEDF与OHSS的发病密切相关,局部VEGF和PEDF的失衡可能在OHSS的发病中起一定作用。卵泡液VEGF/PEDF的升高可用于预测OHSS的发生。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子 卵巢过度刺激综合征 体外受精-胚胎移植

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臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和VEGF、PEDF因子表达的影响 被引量：5

5

作者 王清 郭乔茜 +2 位作者 李琴 谢婷玉 陈雪艺 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第3期232-235,共4页

目的探讨臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的影响及其相关机制。方法雄性SD大鼠72只,其中正常对照组(... 目的探讨臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的影响及其相关机制。方法雄性SD大鼠72只,其中正常对照组(N组)18只,余54只采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病大鼠模型,成功造模52只(成模率90%),随机分为3组:糖尿病模型组(D组,17只)无干预;氧气干预组(D+O2组,17只)给予氧气灌肠,每周3次;臭氧治疗组(D+O3组,18只)给予臭氧灌肠,每周3次。1个月后,麻醉下摘除眼球,TUNEL法检测细胞凋亡,并计算凋亡指数(apoptotic index,AI);荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测VEGF mRNA和PEDF mRNA表达。结果 TUNEL法检测结果显示:凋亡细胞主要表达在视网膜神经节细胞层、内核层和血管内皮细胞层。N组、D组、D+O2组、D+O3组AI值分别为:1.97±0.53、34.43±5.56、34.68±5.80、19.22±3.30,各组间差异有统计学意义(F=89.070,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组、D+O3组间以及D+O3组与D组、D+O2组间差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组VEGF mRNA相对表达量分别为:4.22±1.18、11.60±3.42、10.75±2.81、7.40±2.13,各组间差异有统计学意义(F=23.923,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:D组、D+O2组、D+O3组大鼠视网膜中VEGF mRNA的表达量明显高于N组,差异均有统计学意义(均为P=0.000);D+O3组VEGF mRNA的表达量低于D组和D+O2组,差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组PEDF mRNA相对表达量分别为:0.22±0.12、0.13±0.08、0.12±0.07、0.19±0.09,各组间差异无统计学意义(F=2.803,P=0.053)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组比较差异均有统计学意义(P=0.018、P=0.029),余组间比较差异均无统计学意义(均� 展开更多

关键词 臭氧 糖尿病视网膜病变 细胞凋亡 血管内皮生长因子 色素上皮衍生因子

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色素上皮源性因子、内质网氨基肽酶1和Sprouty1在银屑病皮损组织中的表达及相关性研究 被引量：1

6

作者 凌琬茗 张晓茹 +2 位作者 刘晓霞 陈银肖 刘岩 《实用皮肤病学杂志》 2023年第3期129-132,共4页

目的研究银屑病皮损组织中色素上皮源性因子(PEDF)、表皮内质网氨基肽酶1(ERAP1)和Sprouty1的表达情况及相关性。方法收集河北省儿童医院皮肤科病理室2019年1月—2020年12月诊断的120例银屑病患者皮损组织蜡块标本进行研究,并纳入病例组... 目的研究银屑病皮损组织中色素上皮源性因子(PEDF)、表皮内质网氨基肽酶1(ERAP1)和Sprouty1的表达情况及相关性。方法收集河北省儿童医院皮肤科病理室2019年1月—2020年12月诊断的120例银屑病患者皮损组织蜡块标本进行研究,并纳入病例组;另外选取该院实验室保存的120例健康体检者的皮肤组织蜡块标本作为对照,纳入健康对照组。对比两组PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达差异,单因素分析银屑病患者不同病情严重程度的PEDF、ERAP1和Sprouty1表达差异,分析PEDF、ERAP1和Sprouty1与银屑病患者皮损严重程度的相关性。结果①与健康对照组相比,病例组的PEDF、ERAP1 mRNA和蛋白均呈高表达,Sprouty1 mRNA和蛋白均呈低表达(P<0.05);②重度银屑病患者皮损的PEDF、ERAP1表达明显高于轻中度患者,Sprouty1表达明显低于轻中度患者(P<0.05);③PEDF、ERAP1的表达均与银屑病皮损面积严重度指数(PASI)评分呈正相关,Sprouty1的表达与PASI评分呈负相关。结论银屑病患者皮损组织中PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达与正常组织存在明显差异,PEDF、ERAP1和Sprouty1的表达均与银屑病皮损组织严重程度存在密切关系。在银屑病患者治疗以及诊断中可将PEDF、ERAP1和Sprouty1作为新的研究方向进行深入探索。 展开更多

关键词 银屑病 色素上皮源性因子 表皮内质网氨基肽酶1 Sprouty1蛋白 相关性

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PEDF基因修饰骨髓干细胞对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量：4

7

作者 刘宇 石云 +3 位作者 张旭 高妍 王欢 王斌 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1091-1095,1099,共6页

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(DMI组)、给予沉默PEDF的MSC糖尿病心肌梗死组(PM组)以及给予沉默PEDF的MSC和Wnt/β-catenin通路抑制剂的糖尿病心肌梗死组(WPM组)。采用高脂喂养+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合结扎大鼠冠状动脉建立糖尿病心肌梗死模型。PM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL)。WPM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL),30 min后静脉注射HY-15597(8 mg/kg)。观察大鼠心功能情况;HE染色观察大鼠心脏的病理变化;免疫荧光检测各组大鼠心肌组织中血管生成因子VEGF、IGF-1、PDGF B的表达;Western blotting检测各组大鼠心肌组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果术后24 h,PM组CK、CK-MB、BNP水平明显低于DMI组(P<0.05),术后4周CK、CK-MB、BNP水平检测结果显示,与24 h结果比较DMI组和PM组各项指标均下降(P<0.05)。与DMI组比较,超声提示PM组大鼠左室射血分数(LVEF)明显升高(P<0.05);病理学检查PM组可见心肌细胞改善,损伤程度有所好转,心肌细胞形态尚完整,肌纤维排列有序,心肌组织充血、肿胀减轻。免疫荧光提示沉默PEDF的MSC可以促进血管生成因子表达,同时显著下调wnt3a、β-catenin、survivin的表达(P<0.05)。结论沉默PEDF的MSC可通过促进血管生成改善糖尿病大鼠心肌梗死的心功能,对心脏具有保护作用。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 骨髓干细胞 糖尿病心肌梗死 大鼠 心肌损伤 信号通路

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PEDF对胎盘位置附着异常中异常胎盘微血管床形成的研究

8

作者 李蕊 林靓 +3 位作者 杨茵 陈小岩 凌航 俞训彬 《临床医学工程》 2019年第9期1190-1192,共3页

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对胎盘位置附着异常中胎盘微血管床形成的影响。方法选择2014年6月至2015年8月我院剖宫产分娩的孕妇48例,其中胎盘植入(PA组)16例,前置胎盘(PP组)16例,对照组16例。胎盘进行病理学检查,免疫组化检测三组... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对胎盘位置附着异常中胎盘微血管床形成的影响。方法选择2014年6月至2015年8月我院剖宫产分娩的孕妇48例,其中胎盘植入(PA组)16例,前置胎盘(PP组)16例,对照组16例。胎盘进行病理学检查,免疫组化检测三组胎盘组织的MVD;RT-PCR及Western Blot检测胎盘组织中PEDF和VEGF的m RNA和蛋白质表达。结果①三组胎盘组织中PEDF及VEGF蛋白含量、PEDF及VEGF m RNA含量及MVD比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②胎盘中PEDF与VEGF、MVD均呈负相关关系(r=-0.778,P=0.000;r=-0.827,P=0.000)。③胎盘血管情况:PA组绒毛血管数量丰富,管径粗大,侵及肌壁间血管;PP组绒毛间血管增生程度有所减轻,未侵及肌层;对照组则无上述变化。结论①胎盘位置异常组中胎盘的PEDF表达过低是导致VEGF负性调节不足以及胎盘病理性血管形成的原因,参与了胎盘位置异常的发生。②三组胎盘中PEDF含量均有显著差异,提示PEDF含量可以反映异常胎盘血管的侵袭程度。 展开更多

关键词 前置胎盘 胎盘植入 色素上皮衍生因子 血管内皮生长因子 微血管密度

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色素上皮衍生因子在眼部疾病中的研究进展

9

作者 陈玲 谭薇 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期763-767,共5页

色素上皮衍生因子(PEDF)是分子量为50kDa的一种分泌型糖蛋白,最初发现由色素上皮细胞分泌,随后发现其广泛分布于全身多种器官组织中并发挥多种生物学作用。近年来,大量研究已经证实PEDF在眼部组织中通过与多种受体结合启动广泛的细胞反... 色素上皮衍生因子(PEDF)是分子量为50kDa的一种分泌型糖蛋白,最初发现由色素上皮细胞分泌,随后发现其广泛分布于全身多种器官组织中并发挥多种生物学作用。近年来,大量研究已经证实PEDF在眼部组织中通过与多种受体结合启动广泛的细胞反应,具有调节血管生成、抗炎、抗氧化应激和营养神经的作用。新近的研究发现,应用外源性PEDF在干眼和角膜损伤的修复方面具有较好治疗效果。除此外,通过编码PEDF基因的治疗方法在年龄相关性黄斑变性及糖尿病视网膜病变的治疗中也展现出良好前景。本综述主要对近年来PEDF在干眼、角膜损伤、年龄相关性黄斑变性和糖尿病视网膜病变等疾病中的潜在治疗作用及局限性做简要概述,为进一步研究PEDF在诊治眼部疾病方面提供帮助。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 干眼 角膜损伤 年龄相关性黄斑变性 糖尿病视网膜病变

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色素上皮衍生因子对人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响

10

作者 付艳红 李娜 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2023年第6期589-593,共5页

目的探究分析色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法培养人胶质母细胞瘤细胞株U87MG,分别添加0 nmol/L、80 nmol/L、160 nmol/L、320 nmol/L PEDF蛋白,记为空白对照组、实验... 目的探究分析色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)对人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法培养人胶质母细胞瘤细胞株U87MG,分别添加0 nmol/L、80 nmol/L、160 nmol/L、320 nmol/L PEDF蛋白,记为空白对照组、实验A组、实验B组、实验C组,采用CCK8实验和细胞单克隆实验检测PEDF在U87MG增殖中的作用;采用流式细胞凋亡实验检测PEDF在U87MG凋亡中的作用;采用流式细胞周期实验检测PEDF在U87MG细胞周期中的作用。结果与空白对照组比较,同一时点各实验组细胞增殖率和细胞单克隆能力明显降低(P<0.05),实验C组细胞增殖率与细胞单克隆量明显低于实验A组和实验B组(P<0.05),实验B组的细胞增殖率与单克隆形成量明显低于实验A组(P<0.05);与空白对照组比较,各实验组细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞G1期、S期进程明显减缓(P<0.05),实验C组细胞凋亡率明显高于实验A、B组(P<0.05),C组S期细胞数明显少于实验A、B组(P<0.05),实验B组细胞凋亡率明显高于实验A组(P<0.05),B组S期细胞数则明显少于实验A组(P<0.05)。结论PEDF能抑制人胶质母细胞瘤细胞U87MG增殖和单克隆形成,并可通过影响细胞周期进程促进U87MG凋亡,其作用与PEDF浓度有关。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 人脑胶质瘤细胞 增殖 凋亡 细胞周期

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PEDF在类风湿关节炎滑膜组织中的表达及临床意义 被引量：3

11

作者 潘昉 祝丽华 +2 位作者 王倩 孙巍 贾会欣 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第17期3287-3288,3286,共3页

目的:研究类风湿关节炎患者滑膜组织中色素上皮衍生因子(Piment epithelial-derived factor,PEDF)的表达情况。方法:采用免疫组化法,检测30例类风湿关节炎活动期膝关节滑膜组织中PEDF蛋白表达,以16例退行性关节炎患者、16例正常人及该3... 目的:研究类风湿关节炎患者滑膜组织中色素上皮衍生因子(Piment epithelial-derived factor,PEDF)的表达情况。方法:采用免疫组化法,检测30例类风湿关节炎活动期膝关节滑膜组织中PEDF蛋白表达,以16例退行性关节炎患者、16例正常人及该30例患者治疗后(稳定期)关节滑膜组织中PEDF蛋白作对照,进行对比分析。结果:PEDF在类风湿关节炎患者明显低于正常人、退行性关节炎患者滑膜组织中的表达,在活动期滑膜组织中的表达明显低于稳定期,组间比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PEDF与类风湿关节炎的疾病过程密切相关,针对色素上皮衍生因子的靶点治疗有望成为类风湿关节炎治疗的新的方向及策略。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 滑膜组织 色素上皮衍生因子

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色素上皮衍生因子修饰的人脐带间充质干细胞构建方法 被引量：2

12

作者 闻慧 张芸 +7 位作者 纪惜銮 刘晓雷 杨顺 罗朝霞 谢亮 邹文文 李结明 姜舒 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第7期1226-1231,共6页

目的:构建携带色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)基因的重组慢病毒,感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs),探讨PEDF在hUCMSCs中的表达及重组慢病毒对hUCMSCs... 目的:构建携带色素上皮衍生因子(pigment epithelialderived factor,PEDF)基因的重组慢病毒,感染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUCMSCs),探讨PEDF在hUCMSCs中的表达及重组慢病毒对hUCMSCs活性的影响。方法:利用pLenti-CMV-hChR2-EYFP载体系统,构建携带PEDF基因的重组慢病毒pLenti-CMV-PEDF-EYFP,进一步感染hUCMSCs,获得携带PEDF基因的hUCMSCs(PEDF-hUCMSCs),激光共聚焦显微镜和ELISA法检测PEDF-hUCMSCs的PEDF蛋白表达情况,采用CCK8法检测PEDF-hUCMSCs的活性。通过观察细胞形态和流式细胞术检测验证重组慢病毒pLenti-CMV-PEDFEYFP感染hUCMSCs后对细胞传代、细胞表型的影响。结果:成功构建携带PEDF基因的重组慢病毒pLentiCMV-PEDF-EYFP,高效感染hUCMSCs,获得的PEDFhUCMSCs能有效表达PEDF蛋白,检测结果显示重组病毒感染组细胞与空白对照组细胞活性无统计学差异(P>0.05)。重组慢病毒pLenti-CMV-PEDF-EYFP感染对hUCMSCs的增殖能力、细胞形态和细胞表型没有明显改变。结论:携带PEDF基因的重组慢病毒pLenti-CMV-PEDFEYFP修饰的PEDF-hUCMSCs能有效表达PEDF蛋白。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 慢病毒载体 人脐带间充质干细胞

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玻璃体腔注射抗氧化剂NAC对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用 被引量：2

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作者 陈玲 刘彦芳 林萍 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期438-441,共4页

目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对早期糖尿病大鼠视网膜保护作用的机制。方法:健康成年雄性SD大鼠30只,按照随机分配的原则分为正常对照组(CON组,n=10),糖尿病组(DM组,n=20)。DM组禁食12h后,按照60mg/kg体质量剂量一次性左下腹... 目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对早期糖尿病大鼠视网膜保护作用的机制。方法:健康成年雄性SD大鼠30只,按照随机分配的原则分为正常对照组(CON组,n=10),糖尿病组(DM组,n=20)。DM组禁食12h后,按照60mg/kg体质量剂量一次性左下腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液,CON组注入等量的柠檬酸缓冲溶液。用药72h后,鼠尾静脉取血检测血糖,≥16.7mmol/L者定为糖尿病模型动物。成模大鼠随机分为糖尿病对照组(D组)和NAC治疗组(N组)。模型建立后,N组大鼠每周通过玻璃体腔注射4μL 1.6μg/μL的NAC,CON组、D组大鼠则给予玻璃体腔注射4μL 0.01mmol/L的磷酸缓冲盐溶液(pbs)不限饮食水,分组喂养。每周记录各组大鼠体质量及血糖。糖尿病成模后2mo,处死实验动物,通过HE染色法,检测各组大鼠视网膜内核层厚度;通过免疫荧光法,检测各组大鼠视网膜神经节细胞数量及视网膜中色素上皮衍生因子(PEDF)水平。结果:N组视网膜内核层厚度较D组厚度增加(P<0.01),与CON组厚度无差异(P>0.05)。与CON组相比,D组视网膜神经节细胞数量减少(P<0.01),N组视网膜神经节细胞略减少(P>0.05)。D组视网膜神经节细胞较N组减少(P<0.01)。与CON组相比,D组PEDF表达下降(P<0.01),N组PEDF表达略下降(P>0.05)。D组PEDF表达较N组下降(P<0.01)。结论:抗氧化剂NAC对早期糖尿病大鼠视网膜组织有保护作用的机制可能是通过上调视网膜中PEDF水平。 展开更多

关键词 抗氧化剂 N-乙酰半胱氨酸 玻璃体腔注射 色素上皮衍生因子

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色素上皮衍生因子基因修饰的脐带间充质干细胞对糖尿病大鼠视网膜组织病理改变的影响 被引量：2

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作者 韩新红 李艳 +2 位作者 李聪伶 单田慧 王淑娜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期126-130,共5页

目的观察玻璃体内注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织病理结构改变的影响。方法组... 目的观察玻璃体内注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(pigment epithelial-derived factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜组织病理结构改变的影响。方法组织块培养法获取人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)。获取的h UCMSCs表达CD105、CD73和CD90,不表达CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR。用慢病毒载体以感染复数值为50对其转染。利用链脲佐菌素腹腔注射途径诱导糖尿病大鼠模型,实验动物分为四组:正常对照组(N组)、实验对照组糖尿病注射PBS组(D1组)、糖尿病注射h UCMSCs治疗组(D2组)、糖尿病注射PEDF-MSCs治疗组(D3组)。造模成功后3个月进行干预治疗,N组不予特殊治疗。玻璃体内注射2周后利用荧光显微镜观察PEDF-MSCs在大鼠眼内表达情况。干预治疗2周后进行HE染色观察各层视网膜结构,及各组视网膜总厚度变化。结果玻璃体内注射后2周,荧光显微镜下观察到D2组大鼠玻璃体内簇状排列的红色荧光,视网膜中未发现明显红色荧光;D3组大鼠玻璃体内簇状排列的绿色荧光,视网膜中未发现明显绿色荧光。HE染色显示,N组大鼠的视网膜各层结构完整,层次清晰,细胞排列整齐,染色均匀;D1组大鼠视网膜神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)出现明显水肿、血管扩张,内丛状层(innerplexiform layer,IPL)结构疏松,内核层(inner nuclear layer,INL)细胞排列紊乱;D2组NFL水肿减轻;D3组NFL水肿明显减轻,INL与外核层(outer nuclear layer,ONL)层细胞排列规整。视网膜总厚度N组为(103.82±4.15)μm、D1组为(138.86±4.71)μm、D2组为(131.17±3.89)μm、D3组为(112.24±4.22)μm;各组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 PEDF-MSCs可较长时间在糖尿病大鼠玻璃体内存活且持续表达。玻璃体内注射PEDF-MSCs能明显改善糖尿病大鼠视网膜损伤,减轻视网膜水肿。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 间充质干细胞 糖尿病视网膜病变 大鼠

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探究PEDF-MSCs对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 贾凡 韩新红 +3 位作者 栾莉 宋春媛 李艳 王俊 《潍坊医学院学报》 2019年第5期334-337,共4页

目的观察经玻璃体腔注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响,探讨PEDF联合人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对视网膜神经损伤的保护作用。方法组织块培养法获取hUCMSCs。流式... 目的观察经玻璃体腔注射色素上皮衍生因子基因修饰的人脐带间充质干细胞(PEDF-MSCs)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响,探讨PEDF联合人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对视网膜神经损伤的保护作用。方法组织块培养法获取hUCMSCs。流式细胞仪检测表面标志,检测其分化能力。用慢病毒载体以感染复数值为50对其转染。经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合糖尿病饮食诱导糖尿病大鼠模型。实验动物分为4组:正常对照组(N组)、糖尿病注射磷酸盐缓冲液(PBS)实验对照组(A组)、糖尿病注射hUCMSCs治疗组(B组)、糖尿病注射PEDF-MSCs治疗组(C组)。造模成功后3个月进行干预治疗,N组不予特殊治疗。玻璃体腔注射PEDF-MSCs 2周后,用荧光显微镜观察PEDF-MSCs在大鼠眼内表达情况。干预治疗2周后用TUNEL法测定并计算各组视网膜神经节细胞凋亡指数AI。结果玻璃体腔注射后2周,于荧光显微镜下观察到B组及C组大鼠玻璃体腔内呈簇状排列的标记荧光,在视网膜内均未发现明显标记荧光。TUNEL法结果显示,N组各层视网膜无凋亡情况,A组视网膜神经纤维层(NFL)及内丛状层(IPL)层出现大量棕黄色细胞,B组NFL及INL层出现棕黄色细胞较A组减少,C组NFL层有少量棕黄色细胞。结论 PEDF-MSCs可较长时间在糖尿病大鼠玻璃体内存活且持续表达。经玻璃体腔注射PEDF-MSCs能明显改善糖尿病大鼠视网膜神经细胞损伤且效果优于经玻璃体腔注射hUCMSCs。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 间充质干细胞 糖尿病视网膜病变

原文传递

色素上皮衍生因子对缺氧/复氧血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响 被引量：1

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作者 刘振华 顾春虎 +4 位作者 梁宏亮 李子林 杨阳 谢甲琦 易定华 《心脏杂志》 CAS 2012年第2期162-167,共6页

目的:观察重组人源性色素上皮衍生因子(Pigment epithelium-derived factor,PEDF)对缺氧/复氧(H/R)后平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和凋亡的影响。方法:以组织贴块法培养VSMCs后,随机分为3组,即对照组、H/R模型... 目的:观察重组人源性色素上皮衍生因子(Pigment epithelium-derived factor,PEDF)对缺氧/复氧(H/R)后平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和凋亡的影响。方法:以组织贴块法培养VSMCs后,随机分为3组,即对照组、H/R模型组及模型+PEDF组。模型+PEDF组又按PEDF的浓度(50、100、200及400 ng/ml)分为4组。用MTT比色法检测VSMCs增殖的变化;用Hoechst/PI双染色法和流式细胞仪法(FCM)检测VSMCs的凋亡;用Western blot法测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:①MTT比色法检测显示,缺氧、复氧可促进VSMCs增殖;PEDF能够抑制VSMCs增殖,以200 ng/ml的PEDF作用更显著。Hoechst/PI双染色法和FCM检测显示,经100、200 ng/ml的PEDF作用后,VSMCs的凋亡率较对照组和H/R组明显增高(P<0.01)。与对照组和H/R组比较,Western blot检测显示,100、200 ng/ml的PEDF能够下调Bcl-2蛋白表达并上调Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:H/R后,VSMCs增殖增多,PEDF可抑制H/R后VSMCs增殖,其作用可能与Bcl-2、Bax通路促进VSMCs凋亡有关。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 血管平滑肌细胞 缺氧复氧 细胞凋亡 大鼠

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TLR4及其在卵巢癌细胞增殖调控中的研究进展 被引量：3

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作者 郑丽华 程忠平 《中国妇幼健康研究》 2014年第1期168-171,共4页

Toll样受体-4(TLR4)可识别病原相关分子模式(PAMP),是脂多糖的唯一功能性受体,其不仅发挥抗感染免疫作用,也参与调控肿瘤细胞的增殖与存活。X射线晶体学显示,脂多糖等刺激机体细胞后,TLR4与MD2发生异二聚体化,形成MD2/TLR4受体复合物,T... Toll样受体-4(TLR4)可识别病原相关分子模式(PAMP),是脂多糖的唯一功能性受体,其不仅发挥抗感染免疫作用,也参与调控肿瘤细胞的增殖与存活。X射线晶体学显示,脂多糖等刺激机体细胞后,TLR4与MD2发生异二聚体化,形成MD2/TLR4受体复合物,TLR4胞内域发生活化,并募集Myd88等相关接头蛋白,激活下游NF-κB等信号通路,发挥抗感染免疫作用。TLR4除了正常的生殖道上皮组织中可见表达外,卵巢上皮性肿瘤、颗粒细胞瘤及其细胞株也可见差异表达,并参与卵巢上皮性肿瘤及卵巢颗粒细胞瘤的异常增殖调控,揭示TLR4介导的慢性炎症可能参与卵巢肿瘤的发生发展。 展开更多

关键词 TOLL样受体-4 TOLL样受体-4 MD-2复合物 卵巢上皮性肿瘤 NF—κB信号通路

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色素上皮衍生因子对高糖环境下肺鳞癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 被引量：1

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作者 马建梅 张彦 +3 位作者 陈承 史红阳 倪菁 马卫国 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期263-268,共6页

目的研究色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖环境下肺鳞癌细胞株增殖、凋亡、侵袭的影响,探索PEDF对肺癌合并糖尿病的疾病发展、预后及治疗的意义。方法培养肺鳞癌细胞株SK-MES-1,分为阴性对照组、高糖组及PEDF干预高糖1、2、3组,倒置显微镜... 目的研究色素上皮衍生因子(PEDF)对高糖环境下肺鳞癌细胞株增殖、凋亡、侵袭的影响,探索PEDF对肺癌合并糖尿病的疾病发展、预后及治疗的意义。方法培养肺鳞癌细胞株SK-MES-1,分为阴性对照组、高糖组及PEDF干预高糖1、2、3组,倒置显微镜观察各组细胞形态改变;MTT比色法分析各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡率;Transwell细胞侵袭实验检测各组细胞穿透数;ELISA法检测各组细胞培养基上清液中VEGF的表达。结果①高糖组较阴性对照组细胞增殖抑制率降低、凋亡率降低、阻滞于G0/G1期的百分比相对减少、细胞穿透数增加、VEGF浓度增高(P<0.05);②随着PEDF干预浓度的增高,各组细胞的增殖抑制率和凋亡率、G0/G1期的百分比增加,细胞穿透数减少,VEGF浓度降低,各组差异有统计学意义(P<0.05);结论①高糖环境促进肺鳞癌发展。②PEDF抑制高糖环境下肺鳞癌细胞的增殖,促进早期凋亡,减弱侵袭力,并呈浓度依赖;预测PEDF将成为肺癌合并糖尿病的靶向治疗药物。 展开更多

关键词 高糖 色素上皮衍生因子(PEDF) 肺癌

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LEDGF基因在高危型人乳头瘤病毒感染的宫颈癌中表达的研究现状

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作者 王中芹 尹香花 《医学综述》 2015年第18期3323-3325,共3页

人乳头瘤病毒(HPV)是一种无包膜的小DNA病毒,其持续感染可导致人类皮肤和黏膜的异常增生。晶状体上皮源性生长因子(LEDGF)是一种应激反应蛋白,其在多种癌组织中的表达上调,HPV-E6/E7和LEDGF蛋白的表达与宫颈癌的发生、发展密切相关,两... 人乳头瘤病毒(HPV)是一种无包膜的小DNA病毒,其持续感染可导致人类皮肤和黏膜的异常增生。晶状体上皮源性生长因子(LEDGF)是一种应激反应蛋白,其在多种癌组织中的表达上调,HPV-E6/E7和LEDGF蛋白的表达与宫颈癌的发生、发展密切相关,两者相互作用,最终导致细胞癌变。该文概述了HPV-E6/E7与LEDGF蛋白相互作用的机制及其与宫颈癌的研究进展。 展开更多

关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒 晶状体上皮源性生长因子

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色素上皮衍生因子对鼠视网膜新生血管形成的保护作用

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作者 孙清秀 宁建红 孟瑞华 《右江医学》 2006年第3期227-230,共4页

目的本课题通过小鼠视网膜新生血管动物模型观察玻璃体内注入色素上皮衍生因子(PEDF)对视网膜新生血管形成的影响,并探讨其治疗作用。方法选取鼠龄为7天的健康昆明小鼠28只(56只眼),随机分为4组:正常组、高氧组、PEDF干预组和对照生理... 目的本课题通过小鼠视网膜新生血管动物模型观察玻璃体内注入色素上皮衍生因子(PEDF)对视网膜新生血管形成的影响,并探讨其治疗作用。方法选取鼠龄为7天的健康昆明小鼠28只(56只眼),随机分为4组:正常组、高氧组、PEDF干预组和对照生理盐水组,每组7只。正常对照组鼠在正常空气环境中饲养,其余3组鼠置于氧箱中,建立高氧诱导的视网膜新生血管动物模型。正常组鼠不做任何处理,PEDF干预组幼鼠在出生后第12天向玻璃体腔内注射PEDF 1μl,而对照生理盐水组注射相同体积的生理盐水。各组小鼠均在出生后第17天处死,摘除眼球制作标本,进行组织病理学观察。在光学显微镜下观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞细胞核数目。采用CD31分子免疫组化方法鉴别视网膜内界膜与血管内皮细胞。结果正常对照组标本HE染色未见突破内界膜的内皮细胞核,高氧组和对照生理盐水组标本可见较多的突破内界膜的内皮细胞核,与正常组比较差异具有显著性(P<0.05),PEDF干预组的数目明显少于高氧组和对照生理盐水组,差异均具有显著性(P<0.05),且未见明显药物毒性反应。CD31分子免疫组化染色证实突破内界膜的细胞为血管内皮细胞。结论玻璃体内注入一定剂量的PEDF,能够有效抑制高氧诱导下的小鼠视网膜新生血管形成,PEDF有望成为防治血管增生性视网膜病变的一种有效的方法。 展开更多

关键词 视网膜新生血管 色素上皮衍生因子(PEDF) 血管生成抑制剂

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