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新型靶向αvβ6多肽的设计、合成与亲和力评价
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作者 李跃鹏 王远强 《吉林大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期181-188,共8页
通过计算机辅助药物设计策略及固相合成法设计并筛选具有全新结构的αvβ6多肽配体,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定多肽配体与αvβ6的结合亲和力,建立αvβ6多肽配体的筛选方案.首先用Sybyl-X 1.3对αvβ6多肽配体及天然配体进行分子对... 通过计算机辅助药物设计策略及固相合成法设计并筛选具有全新结构的αvβ6多肽配体,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定多肽配体与αvβ6的结合亲和力,建立αvβ6多肽配体的筛选方案.首先用Sybyl-X 1.3对αvβ6多肽配体及天然配体进行分子对接;其次用Amber 16对分子对接结果进行分子动力学模拟,确定多肽配体与αvβ6蛋白之间的结合模式,并以RGDLXXL(X为任意氨基酸)为多肽配体核心结构,通过逐步延伸氨基酸构建虚拟肽库,筛选获得长度为7~10个氨基酸的多肽配体,进一步通过相似氨基酸替换的方法设计筛选不同于RGDLXXL核心的新的多肽配体;最后用固相合成法合成新设计的多肽配体,利用间接ELISA法测定多肽配体-αvβ6的结合亲和力.已有多肽配体和天然配体的分子对接以及分子动力学模拟结果表明,αvβ6与配体的结合主要通过Asp218和多肽配体之间形成氢键,以及Mg2+和多肽配体形成金属螯合作用完成.结合虚拟组合筛选与相似氨基酸替换,发现GRTDLGTLLFR,GRRTDLATIHG,RTDVGRVRGRG和RGDVGRVGR等多肽均满足该结合模式,RTDVGRVRGRG与αvβ6的亲和力为10.76μmol/L.可见RTDVGRVRGRG与αvβ6亲和力良好,是一条全新的αvβ6多肽配体. 展开更多
关键词 整合素ΑVΒ6 多肽配体 药物设计 亲和力 酶联免疫吸附法
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人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测
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作者 口如琴 王蔚 +1 位作者 李令媛 茹炳根 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期777-782,共6页
人小肠三叶因子的cDNA ,克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,hITF以GST hITF融合蛋白的形式表达 ,融合蛋白占细菌总蛋白的 15%左右。经过Glutathione Sepharose4B亲和柱和Sephacry1S 10 0分子筛层析纯化了hITF。SDS PAGE和... 人小肠三叶因子的cDNA ,克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,hITF以GST hITF融合蛋白的形式表达 ,融合蛋白占细菌总蛋白的 15%左右。经过Glutathione Sepharose4B亲和柱和Sephacry1S 10 0分子筛层析纯化了hITF。SDS PAGE和氨基酸分析证明得到了hITF纯品。以天然hITF为抗原免疫青紫蓝兔制备了抗血清 ,用纯化的IgG建立了hITF的酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法 ,给出了标准工作曲线。应用于纯化过程中样品峰的确立。 展开更多
关键词 小肠三叶因子 酶联免疫吸附检测 克隆 三叶肽
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对克百威具高度特异性的免疫分析技术研究 被引量:41
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作者 刘曙照 冯大和 +1 位作者 陈美娟 钱传范 《分析科学学报》 CAS CSCD 2000年第5期373-378,共6页
合成了保留氨基甲酸酯结构的克百威半抗原 ,并采用活性酯法与载体蛋白质共价连接制备突出克百威分子结构特征的合成抗原。以合成抗原免疫新西兰白兔获得对克百威具高亲合力的抗血清 ,采用硫酸铵盐析和 DEAE纤维素反相吸附法分离和纯化... 合成了保留氨基甲酸酯结构的克百威半抗原 ,并采用活性酯法与载体蛋白质共价连接制备突出克百威分子结构特征的合成抗原。以合成抗原免疫新西兰白兔获得对克百威具高亲合力的抗血清 ,采用硫酸铵盐析和 DEAE纤维素反相吸附法分离和纯化抗体。以辣根过氧化物酶采用改良的过碘酸钠法标记抗体、混合酸酐法标记半抗原。在此基础上分别建立了对克百威具高度特异性的间接竞争 ,包被抗原、包被抗体直接竞争酶联免疫吸附测定 ( ELISA)法。在优化条件下 ,克百威测定的线性浓度范围为 1 0 0 ~ 1 0 - 4 μg/m L,检测限≤ 0 .0 1 ng/m L,其他常用氨基甲酸酯类杀虫剂和呋喃酚不干扰克百威的测定。 展开更多
关键词 克百威 半抗原 合成抗原 抗体 杀虫剂 免疫分析
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外源赤霉素GA_3对大豆光合作用的促进和叶片内源赤霉素GA_(1+3)水平(英文) 被引量:41
4
作者 袁琳 许大全 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期317-320,共4页
在营养生长阶段大豆正在扩展和刚刚完全扩展的叶片 (4~ 1 2天龄 )观察到外源赤霉素GA3引起净光合速率增高 ,但是在成龄叶片 (1 7~ 2 2天龄 )观察不到这种效应 (图 1 )。在扩展着的叶片 (4~ 8天龄 )中用免疫实验检测的内源赤霉素GA1 +... 在营养生长阶段大豆正在扩展和刚刚完全扩展的叶片 (4~ 1 2天龄 )观察到外源赤霉素GA3引起净光合速率增高 ,但是在成龄叶片 (1 7~ 2 2天龄 )观察不到这种效应 (图 1 )。在扩展着的叶片 (4~ 8天龄 )中用免疫实验检测的内源赤霉素GA1 +3含量低于成龄叶片中的含量 (图 2 )。由这些结果得出结论 展开更多
关键词 酶联免疫实验 赤霉素 净光合速率 大豆
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Level of circulating PD-L1 expression in patients with advanced gastric cancer and its clinical implications 被引量:39
5
作者 Zhixue Zheng Zhaode Bu +10 位作者 Xijuan Liu Lianhai Zhang Ziyu Li Aiwen Wu XiaojiangWu Xiaojing Cheng Xiaofang Xing Hong Du Xiaohong Wang Ying Hu Jiafu Ji 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期104-111,共8页
Objective:The programmed cell death-1 receptor/programmed cell death-1 ligand (PD-1/PD-L1) pathway plays a crucial role in tumor evasion from host immunity.This study was designed to evaluate the association betwee... Objective:The programmed cell death-1 receptor/programmed cell death-1 ligand (PD-1/PD-L1) pathway plays a crucial role in tumor evasion from host immunity.This study was designed to evaluate the association between circulating PD-L1 expression and prognosis in patients with advanced gastric cancer.Methods:Totally 80 advanced gastric cancer patients and 40 health controls from Beijing Cancer Hospital were enrolled in the present study.Circulating PD-L1 expression was tested by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA).The associations between the expression level of PD-L1 and clinicopathological features and prognosis were analyzed statistically.Results:Expression of PD-L1 in advanced gastric cancer patients was significandy up-regulated compared with health people (P=0.006).The expression of PD-L1 was significantly correlated with differentiation and lymph node metastasis (P=0.026 and P=0.041,respectively).Although we didn't find significant difference in all advanced gastric cancer patients with different PD-L1 expression,the adenocarcinoma patients with higher up-regulated PD-L1 expression had much better prognosis than low expression patients (65.6% vs.44.7%,P=0.028).Conclusions:PD-L1 was elevated in advance gastric cancer patients and may play an important role in tumor immune evasion and patients prognosis. 展开更多
关键词 Programmed cell death-1 ligands (PD-L1) tumor immunity advanced gastric cancer enzyme-linked immunosorbent assay elisa
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抗克百威多克隆抗体的研制 被引量:26
6
作者 朱国念 杨挺 吴银良 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期1025-1029,共5页
以 2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃酚为反应原料经两步化学反应合成了 2种克百威半抗原 :6 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]己酸 (BFNH)和 4 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]... 以 2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃酚为反应原料经两步化学反应合成了 2种克百威半抗原 :6 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]己酸 (BFNH)和 4 [[(2 ,3 二氢 2 ,2 二甲基 7 苯并呋喃基氧 )羰基 ]氨基 ]丁酸 (BFNB)。通过活性酯法和混合酸酐法将半抗原与载体蛋白 (BSA、OVA)偶联制备了克百威的人工抗原。利用BFNH BSA和BFNB BSA分别免疫日本大耳白家兔获得了 2种抗克百威的多克隆抗体 :抗BFNH BSA抗体和抗BFNB BSA抗体 ,并用间接竞争ELISA方法测定了 2种抗体的效价。 展开更多
关键词 克百威 多克隆抗体 研制 elisa 农药残留 免疫分析
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牛组织中阿维菌素残留的ELISA研究 被引量:20
7
作者 李俊锁 钱传范 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期77-83,共7页
本文探讨了检测牛组织(血浆、肌肉和肝)中阿维菌素(AVM)残留的间接竞争ELISA反应条件和样本前处理方法,并对添加样本进行了测定。竞争反应可耐受20%(v/v)的甲醇。使用4″-O-(单)琥珀酰AVM-OVA和5-... 本文探讨了检测牛组织(血浆、肌肉和肝)中阿维菌素(AVM)残留的间接竞争ELISA反应条件和样本前处理方法,并对添加样本进行了测定。竞争反应可耐受20%(v/v)的甲醇。使用4″-O-(单)琥珀酰AVM-OVA和5-O-(单)琥珀酰AVM-OVA作包被原,AVM标准液的I50=1.8~4.0ng/mL,检测极限为0.02~0.2ng/mL。样本经甲醇一次提取和稀释后直接进行检测,各样本介质中AVM的I50=3.6~30.2ng/mL,样本检测极限为0.1~0.6μg/kg。在6.0~60.0μg/kg添加浓度范围内,回收率(%)=87.9~108.8(95.0±8.0),变异系数(CV.%)=2.8~16.9(10.0±5.2)。本方法适宜对大批量样本进行快速检测。 展开更多
关键词 阿维菌素 组织残留 酶联免疫吸附 残留
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细胞因子IL-1a、IL-6、TNF-a、MMP3与颈椎间盘退变机制的相关性研究 被引量:36
8
作者 杜伟 申勇 +2 位作者 李宝俊 刘法敬 张鑫 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期259-262,共4页
[目的]探讨细胞因子在颈椎间盘退变机制中的作用及其与神经功能的相关性。[方法]实验组椎间盘组织取自46例颈椎病患者,根据术前颈椎MRI及术中椎间盘突出情况分为两组:退变组(24例)和突出组(22例)。对照组椎间盘组织取自15例无颈椎病病... [目的]探讨细胞因子在颈椎间盘退变机制中的作用及其与神经功能的相关性。[方法]实验组椎间盘组织取自46例颈椎病患者,根据术前颈椎MRI及术中椎间盘突出情况分为两组:退变组(24例)和突出组(22例)。对照组椎间盘组织取自15例无颈椎病病史的颈椎外伤患者。根据颈椎病患者术前JOA评分分为三组:轻度组(17例),中度组(15例)和重度组(14例)。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)分别检测不同退变程度颈椎间盘中IL-1a、IL-6、TNF-a和MMP3的表达水平。[结果]对照组、退变组和突出组三组之间比较,IL-1a、IL-6、TNF-a和MMP3的表达有统计学意义(P<0.05),其表达水平与颈椎间盘退变呈正相关趋势;轻度组、中度组和重度组三组之间比较,MMP3、TNF-a的表达有统计学意义(P<0.05),其表达水平与JOA评分呈负相关趋势。[结论]IL-1、IL-6、TNF-a和MMP3与颈椎间盘退变密切相关,其表达水平与椎间盘退变呈正相关趋势;TNF-a与神经功能有关,可能在神经损伤中起主导作用;MMP3与椎间盘突出有关,对TNF-a的神经功能损伤可能起促进作用。 展开更多
关键词 细胞因子 颈椎间盘 酶联免疫吸附法 JOA评分
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鲫鱼(Carassius auratus)卵黄蛋白原的ELISA检测 被引量:27
9
作者 李康 周忠良 +2 位作者 于静 王明山 余晓君 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2003年第3期276-280,共5页
采用Sephadex G-200柱层析从鲫鱼(Carassius auratus)成熟鱼卵中提取卵黄脂磷蛋白并制备抗卵黄脂磷蛋白抗血清.用DEAE-cellulose阴离子交换层析和Sephacryl S-300分子筛凝胶层析相结合的两步层析从经17(-雌二醇诱导的雌鱼血浆中提纯卵... 采用Sephadex G-200柱层析从鲫鱼(Carassius auratus)成熟鱼卵中提取卵黄脂磷蛋白并制备抗卵黄脂磷蛋白抗血清.用DEAE-cellulose阴离子交换层析和Sephacryl S-300分子筛凝胶层析相结合的两步层析从经17(-雌二醇诱导的雌鱼血浆中提纯卵黄蛋白原.免疫印迹反应显示卵黄脂磷蛋白和卵黄蛋白原都与抗卵黄脂磷蛋白抗血清有特异的反应.以抗卵黄脂磷蛋白抗血清作为抗体,卵黄蛋白原作为竞争抗原建立了间接竞争法酶联免疫吸附反应(ELISA)方法来检测雄鱼血液中卵黄蛋白原含量.该方法可测的最低浓度为7.8ng/mL,工作范围为0.39~25(g/mL,批内和批间误差分别为6.5%和7.5%. 展开更多
关键词 环境雌激素 鲫鱼 elisa 卵黄蛋白原
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专一识别脱落酸甲酯的单克隆抗体的制备与应用 被引量:26
10
作者 周燮 郑志富 +1 位作者 陈溥言 章迪 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1996年第3期284-290,共7页
专一识别2-顺(S)ABA甲酯的单克隆抗体来源于以ABA分子中的1-COOH为偶联位点合成的免疫原。它与游离态ABA和结合态ABA葡萄糖酯的交叉反应仅分别为1%与3.5%,而与ABA类似物,如2-顺-黄质醛、紫黄质以... 专一识别2-顺(S)ABA甲酯的单克隆抗体来源于以ABA分子中的1-COOH为偶联位点合成的免疫原。它与游离态ABA和结合态ABA葡萄糖酯的交叉反应仅分别为1%与3.5%,而与ABA类似物,如2-顺-黄质醛、紫黄质以及ABA的2-反式异构体和(R)-对映体则无交叉反应。利用该抗体建立的高度灵敏和精确的ABAme酶联免疫测定法,其检测线性范围为0.048~1.52pmol。通过ABAmeELISA和GA1+3ELISA分析可知羊蹄叶片衰老与内源GA1+3/ABA比值的下降有关。 展开更多
关键词 植物激素 脱落酸 甲酯 单克隆抗体
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胶体层析法与酶联免疫吸附试验在急诊艾滋病病毒(HIV)抗体初次筛查中的比较分析 被引量:35
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作者 刘洋 杨慧娣 +3 位作者 蒋苏 李鹏 张蕾 薛洁 《中国性科学》 2019年第1期118-121,共4页
目的分析胶体层析法与酶联免疫吸附试验在急诊艾滋病病毒(HIV)抗体初次筛查中的应用。方法选取2014年9月至2017年9月内蒙古自治区疾病控制预防中心收治的608例高危病例,均采用胶体层析法与酶联免疫吸附试验进行HIV抗体检测,以免疫印迹... 目的分析胶体层析法与酶联免疫吸附试验在急诊艾滋病病毒(HIV)抗体初次筛查中的应用。方法选取2014年9月至2017年9月内蒙古自治区疾病控制预防中心收治的608例高危病例,均采用胶体层析法与酶联免疫吸附试验进行HIV抗体检测,以免疫印迹法为金标准,分析比较两种不同检测方法对低、高值质控血清检出率及HIV抗体检测结果、阳性样本带型分布情况。结果酶联免疫吸附试验对低、高值质控血清检出率为100. 00%(14/14),高于胶体层析法64. 29%(9/14),差异具有统计学意义(P <0. 05);酶联免疫吸附试验诊断准确度(97. 53%)、灵敏度(96. 15%)、特异度(96. 15%)略高于胶体层析法检测(95. 89%、95. 19%、96. 25%);假阳性率为1. 75%(7/400)、假阴性率为3. 85%(8/208),略低于胶体层析法检测(3. 75%、4. 81%);但组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05);酶联免疫吸附试验检测出阳性例数200例,其中以条带g P160、g P120出现率最高,高达100. 00%;其次为P24 (98. 00%)、g P41 (97. 00%)、P66(94. 50%),P55出现率最低为34. 50%。结论酶联免疫吸附试验对高、低值质控血清检出率高,可显示阳性样本带型分布,较胶体层析法更适用于急诊艾滋病病毒抗体初次筛查中,具有诊断准确度高、灵敏度高、特异度高、假阳性及假阴性率低等特点。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 抗体 急诊 胶体层析法 酶联免疫吸附试验
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化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的价值分析 被引量:29
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作者 辛晓阳 徐立群 潘峰 《中国现代医生》 2018年第10期127-130,共4页
目的比较化学发光免疫分析技术(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙肝病毒血清学检验中的应用价值。方法选取2014年1月~2017年6月间我院收治的80例疑似乙型肝炎患者,采用CLIA法、ELISA法对乙肝病毒血清学指标进行检测,以实时荧光定量PC... 目的比较化学发光免疫分析技术(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙肝病毒血清学检验中的应用价值。方法选取2014年1月~2017年6月间我院收治的80例疑似乙型肝炎患者,采用CLIA法、ELISA法对乙肝病毒血清学指标进行检测,以实时荧光定量PCR检验结果作为参照,分析CLIA法、ELISA法对乙肝的诊断结果。结果 ELISA法对乙肝的诊断灵敏度、特异度、准确性分别为91.84%、93.55%、92.50%,CLIA法分别为93.88%、96.77%、95.00%,二者比较均无统计学差异(P均>0.05)。CLIA法、ELISA法对乙肝的诊断结果与实时荧光定量PCR之间具有良好一致性,Kappa均>0.7。CLIA法对HBs Ag、HBe Ag、HBe Ab的阳性检出率高于ELISA法(P<0.05),而在HBs Ab、HBc Ab阳性检出率比较无统计学差异(P>0.05)。结论 CLIA法、ELISA法对乙型肝炎的诊断效果均较好,而在乙肝病毒血清学标志物检验中,CLIA法的检验准确性高于ELISA法。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙肝病毒 血清学检验 化学发光免疫分析法 酶联免疫吸附试验
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凡纳滨对虾红体病病原菌间接ELISA快速检测方法的研究 被引量:26
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作者 樊景凤 梁玉波 +3 位作者 宋立超 王斌 臧红梅 李文哲 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期113-117,共5页
以凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌为抗原,免疫兔获得高免血清,建立一种快速检测凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌的ELISA技术。采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU·mL-1和1∶2000;病原菌检测灵敏度为每... 以凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌为抗原,免疫兔获得高免血清,建立一种快速检测凡纳滨对虾红体病病原菌副溶血弧菌的ELISA技术。采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU·mL-1和1∶2000;病原菌检测灵敏度为每孔104CFU;抗血清与其它细菌标准菌株的交叉反应结果均呈阴性;阻断实验中的阻断率达75.88%;交叉反应和阻断实验结果表明该方法具有较高的特异性。将该方法标准化后检测了30份人工感染后的凡纳滨对虾和健康凡纳滨对虾,阳性检测率分别为93.3%和13.3%,表明该技术不仅能够检测已发病的凡纳滨对虾,而且能够检测带菌的凡纳滨对虾,这对于水产养殖业中疾病的早期诊断有着重要意义。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 红体病 副溶血弧菌 间接elisa技术
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药用植物细胞培养代谢全能性及产物检测技术的研究进展 被引量:12
14
作者 朱西儒 雷光富 《广西科学院学报》 1998年第2期2-7,共6页
回顾“植物培养细胞次级代谢全能性”理论的发展和应用,为开辟一条新的生产途径和一个新型产业提供参考依据。同时报道如何简便、快速、灵敏、专一性强,适于植物组织和细胞培养物中次生代谢物的检测新方法,以便大规模地进行细胞系筛选。
关键词 药用植物细胞培养 次级代谢全能性 酶联免疫吸附试验(elisa)
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核酸检测与酶免检测在郑州地区血液筛查中的联合应用 被引量:27
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作者 赵红娜 王艺芳 +2 位作者 李俊英 葛文超 方建华 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期1269-1271,共3页
目的探讨NAT和ELISA联合应用于郑州地区血液筛查的意义。方法 184 095份标本(酶免检测双试剂阳性除外)采用2种核酸检测系统进行HBV DNA/HCV RNA/HIV RNA检测,并对ELISA阴性、NAT阳性标本进行鉴别试验、血清学补充实验和追踪随访。结果... 目的探讨NAT和ELISA联合应用于郑州地区血液筛查的意义。方法 184 095份标本(酶免检测双试剂阳性除外)采用2种核酸检测系统进行HBV DNA/HCV RNA/HIV RNA检测,并对ELISA阴性、NAT阳性标本进行鉴别试验、血清学补充实验和追踪随访。结果核酸试剂1共检测了98 371例标本,检出63例NAT阳性标本,NAT阳性率为0.06%;其中49例经鉴别确认,检出率分别为59.18%(29/49)、69.39%(34/49),其差异无统计学意义(P>0.05),14例未鉴别。核酸试剂2共检测了85 724例标本,检出28例HBV DNA+、1例HCV RNA+,NAT阳性率为0.03%;其中22例经鉴别确认,检出率分别为72.73%(16/22)、63.64%(14/22),其差异无统计学意义(P>0.05),7例标本未鉴别。2厂家核酸试剂的拆分阳性率和NAT阳性率相比较差异均有统计学意义(P<0.05)。追踪随访3例ELISA阴性、NAT阳性的献血者,确定2例为阴性,1例为HCV感染者。结论在血液筛查中,应用不同厂家NAT试剂能形成互补减少ELISA的漏检,有效地预防经输血传播病毒性疾病。将NAT阳性标本送检做鉴别确认,对NAT实验室的检测能力起到一定监控作用。 展开更多
关键词 核酸检测 酶联免疫吸附法 血液筛查 血液安全
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有机磷杀虫剂通用结构半抗原的设计及广谱特异性抗体的制备 被引量:25
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作者 刘贤进 颜春荣 +2 位作者 刘媛 余向阳 张存政 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期727-733,共7页
【目的】制备针对有机磷农药的广谱特异性抗体,用于有机磷农药的免疫快速筛选检测。【方法】设计采用二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原,用NHS-DCC法和EDC法合成两种人工抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清。【结果】NHS-DCC法所制得抗血... 【目的】制备针对有机磷农药的广谱特异性抗体,用于有机磷农药的免疫快速筛选检测。【方法】设计采用二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原,用NHS-DCC法和EDC法合成两种人工抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清。【结果】NHS-DCC法所制得抗血清的最高滴度为25600,EDC法合成的抗原制得的抗血清滴度最高为6400,均获得免疫应答。以二乙基膦酸乙酸为对象建立的间接竞争ELISA检测方法对二乙基膦酸乙酸最低检测浓度0.0035μg·ml-1,抑制中浓度I50为0.182μg·ml-1。经对12种常见磷酸酯类有机磷农药特异性检测反应试验,结果发现:所得抗体对毒死蜱、氧乐果、二嗪农、乙基对硫磷、丙溴磷、辛硫磷等农药有特异性反应,I50分别为0.12、0.21、0.24、0.78、0.97、3.8μg·ml-1。【结论】该检测技术可用于毒死蜱、氧乐果、二嗪农、乙基对硫磷、丙溴磷等药剂的快速定性或半定量检测。 展开更多
关键词 有机磷杀虫剂 广谱性抗体 酶联免疫吸附试验(elisa)
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丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值 被引量:26
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作者 许方 李晓兰 祝琳 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第5期713-715,共3页
目的通过同时检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)两项指标,且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测,探讨HCV-cAg检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对90例HCV-Ab阳性的感染者血清以及391例丙... 目的通过同时检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)两项指标,且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测,探讨HCV-cAg检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对90例HCV-Ab阳性的感染者血清以及391例丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高但HCV-Ab阴性的高危人群血清同时检测HCV-cAg,其中高危人群组中有2例为阳性,对其做HCV-RNA定量检测。结果 90例丙肝抗体阳性组中,34例为HCV-cAg阳性,阳性率为37.78%;391例丙肝抗体阴性的高危人群组中,2例为HCV-cAg阳性,阳性率为0.51%,此2例经HCV-RNA定量检测确证为1例阳性,1例阴性。结论丙型肝炎病毒核心抗原检测能够有效缩短窗口期,操作简便,费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。 展开更多
关键词 丙型肝炎 核心抗原 酶联免疫吸附试验
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浙江北部农村孕妇麻疹抗体水平的调查 被引量:23
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作者 李淑华 王学才 +6 位作者 居丽雯 王法第 周连娣 朱建福 郑英杰 徐海涛 姜庆五 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期277-280,共4页
目的为了解浙江北部小于8月龄幼儿麻疹病例增多的原因,对孕龄妇女麻疹抗体水平进行调查。方法采集外周静脉血分离血清,采用ELISA法和中和实验方法分别检测麻疹IgG抗体和中和抗体的平均水平及阳性率。结果218名孕妇麻疹抗体IgG水平的阳... 目的为了解浙江北部小于8月龄幼儿麻疹病例增多的原因,对孕龄妇女麻疹抗体水平进行调查。方法采集外周静脉血分离血清,采用ELISA法和中和实验方法分别检测麻疹IgG抗体和中和抗体的平均水平及阳性率。结果218名孕妇麻疹抗体IgG水平的阳性率为80.7%,与麻疹分离野毒株的中和抗体几何平均滴度为30.36±4.70,其中中和抗体<1∶2的阴性样本占16.51%,<1∶8者所占比例为19.27%,≥1∶16者所占比例为73.39%。结论孕妇人群中麻疹低滴度抗体会影响母传抗体的维持时间,这很可能和近年来麻疹爆发表现为成人和低月龄儿病例,尤其是未满8月龄婴幼儿病例增多有极大的关系。 展开更多
关键词 孕妇麻疹抗体 麻疹中和试验 麻疹酶联免疫吸附试验
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三种梅毒螺旋体血清学检验方法的临床应用分析 被引量:22
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作者 肖霞 滕春燕 +3 位作者 马慧 宋丹丹 李艳蕾 王欣 《中国实验诊断学》 2020年第2期286-289,共4页
目的针对3种梅毒螺旋体血清学检验方法在临床应用进行分析。方法患者标本首先进行梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)检测,其中336例阳性患者再进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)、快速血浆反应素环状卡片实验(RPR)两种血清... 目的针对3种梅毒螺旋体血清学检验方法在临床应用进行分析。方法患者标本首先进行梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)检测,其中336例阳性患者再进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)、快速血浆反应素环状卡片实验(RPR)两种血清学检测。临床上明确诊断为梅毒的238例患者作为研究组,同期来我院就诊的150例健康体检者作为对照组,统计检测结果进行分析。结果随着TP-ELISA试验的S/CO值的升高,TPELISA与TPPA检测结果的符合率随之升高。TPPA敏感度与特异度分别为97.47%、99.16%;ELISA分别为98.32%、98.00%;RPR分别为78.57%、94.00%。RPR对于早期与潜伏期梅毒的实验室检测阳性检出率明显低于TPPA、ELISA(P<0.05),而三种方法对晚期梅毒实验室检测阳性检出率未见明显差异(P>0.05)。结论 TPPA与ELISA方法检验梅毒螺旋体敏感度和特异度均较好,是良好的血清学检测方法适用于筛查和确诊,RPR适用于判断梅毒疗效及观察病情进程。TPPA或ELISA联合RPR实验可作为各期梅毒检测的可靠方法。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 酶联免疫吸附法(elisa) 明胶颗粒凝集法(TPPA) 快速血浆反应素环状卡片实验(RPR) 敏感度 特异度
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梅毒临床诊断的3种检测方法的应用评价 被引量:22
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作者 王靖 王丽 王春风 《临床和实验医学杂志》 2008年第3期19-20,共2页
目的评价酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TP-PA)对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。方法同时用ELISA、RPR和TPPA试剂对4 825例住院及门诊病人血清进行检测,TPPA试验作为确认试验,从而得... 目的评价酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TP-PA)对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。方法同时用ELISA、RPR和TPPA试剂对4 825例住院及门诊病人血清进行检测,TPPA试验作为确认试验,从而得出其他两种方法的敏感性和特异性。结果ELISA法的阳性率95.06%(385/405),假阳性率0.66%(29/4 420);RPR法阳性率70.12%(284/405),假阳性率0.45%(20/4 420);2种方法即ELISA、RPR法均阳性为275例,检出率为67.90%(275/405),假阳性率为0.11(5/4 420)。结论ELISA法是一种高敏感性的梅毒血清学诊断检测方法,ELISA与TPPA相关性良好,可作为确证试验。RPR只能作为辅助试验,如果3种方法结合使用,可使假阳性率下降。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA) 酶联免疫吸附试验(elisa) 血浆反应素试验(RPR)
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