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牛产肠毒素大肠杆菌毒力因子多重PCR检测方法的建立 被引量:21
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作者 闻晓波 崔玉东 +1 位作者 朱战波 朴范泽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期322-324,共3页
通过多重PCR扩增产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigentic E.coli,ETEC)的毒力因子F41菌毛、K99菌毛和STa肠毒素的编码基因来检测和鉴定ETEC。试验中对影响PCR扩增的dNTP、Mg2+、引物浓度以及退火温度等因素进行优化,在优化条件的基础上,确... 通过多重PCR扩增产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigentic E.coli,ETEC)的毒力因子F41菌毛、K99菌毛和STa肠毒素的编码基因来检测和鉴定ETEC。试验中对影响PCR扩增的dNTP、Mg2+、引物浓度以及退火温度等因素进行优化,在优化条件的基础上,确定多重PCR的特异性和灵敏性,以此建立同时检测ETEC多个毒力因子的多重PCR方法。用该方法对分离于犊牛腹泻和犊牛肠毒血症的7株大肠杆菌进行检测,结果2株为F41、K99和STa阳性,4株为F41、STa阳性,1株为K99、STa阳性。这与玻片凝集试验检测菌毛的结果一致。试验表明,该方法特异性强、敏感性高、简便、快速,适用于临床鉴定和检测牛ETEC菌株。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 多重PCR K99菌毛 F41菌毛 STa
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上海市2012-2013年4种致泻性大肠埃希菌监测 被引量:22
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作者 汤泓 李勇 +15 位作者 张平平 郭家胤 黄峥 许浩 侯琦 王传清 曾玫 金汇明 胡家瑜 史贤明 张建民 阚飙 熊衍文 赵爱兰 冉陆 许学斌 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1263-1268,共6页
目的 基于临床医院开展4种致泻性大肠埃希菌(DEC)人群监测,探讨公共卫生实验室对临床实验室需求的直接技术指导的实践模式.方法 设立哨点医院,以标准化方法筛选和鉴定DEC菌型;构建DEC流行特征基线;对疑似暴发病例开展基于实验室和流... 目的 基于临床医院开展4种致泻性大肠埃希菌(DEC)人群监测,探讨公共卫生实验室对临床实验室需求的直接技术指导的实践模式.方法 设立哨点医院,以标准化方法筛选和鉴定DEC菌型;构建DEC流行特征基线;对疑似暴发病例开展基于实验室和流行病学调查.结果 2012-2013年选择上海地区4家哨点医院检测7 204份腹泻标本确认的712例DEC感染病例,阳性率为9.9%.其中肠致病性大肠埃希菌(EPEC)感染351例;肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)感染292例;肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)感染32例;产志贺样毒素大肠埃希菌(STEC/EHEC)感染6例;DEC混合感染31例.EPEC感染以1~5岁儿童最多见,菌型均为aEPEC;ETEC流行峰值在8月,阳性率>20%,感染病例2012年聚集于1 ~ 28日龄和2013年的20 ~ 60岁人群(P<0.05),菌型以耐热肠毒素(ST)型最多(59.6%),其次为不耐热肠毒素(LT)型(27.8%)和ST/LT型(12.6%);2013年儿童感染EIEC病例明显增加(P<0.01);未监测到EHEC O157:H7,但确认2例EHEC O26:H11(eae-hlyA-stx1a)儿童病例;调查确认2012年上海地区15例新生儿ETEC聚集性感染病例与四川省自贡市新生儿病例属于同一克隆(STh-CS21-CFA/I-ClyA-EatA-ST2332-SHNL0005).结论 上海地区DEC型谱特征已发生改变,ETEC对新生儿院内感染和食源性感染性腹泻构成潜在暴发风险,需加强实验室主动监测. 展开更多
关键词 致泻性大肠埃希菌 肠产毒性大肠埃希菌 人群监测 暴发
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合生元组合筛选及对仔猪生产性能和腹泻的影响 被引量:17
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作者 戴兆来 董红军 +2 位作者 林勇 黄瑞华 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期81-85,共5页
利用体外法对4种化学益生素和4株乳酸菌(S1、L7、L17和L18)进行了合生元组合的筛选,并在仔猪上进行了饲养试验。结果表明:4株乳酸菌均能利用菊粉(inulin)和果寡糖(FOS)产生乳酸,只有S1和L18能利用低聚木糖(XOS),低聚异麦芽糖(IMO)只能... 利用体外法对4种化学益生素和4株乳酸菌(S1、L7、L17和L18)进行了合生元组合的筛选,并在仔猪上进行了饲养试验。结果表明:4株乳酸菌均能利用菊粉(inulin)和果寡糖(FOS)产生乳酸,只有S1和L18能利用低聚木糖(XOS),低聚异麦芽糖(IMO)只能被S1利用。当以果寡糖和菊粉混合物(FOS+inulin,质量比为2∶8)为底物时,各株乳酸菌生长良好,产乳酸量高,其次为果寡糖和低聚木糖混合物(FOS+XOS,质量比为1∶1)。当以FOS+inulin为底物,4株乳酸菌混合培养时,24 h产乳酸量最高,为(23.49±0.67)mmol.L-1。以FOS+inulin为底物时,S1和混合乳酸菌均能很好地抑制肠毒素大肠杆菌K88和混合大肠杆菌的生长,混合乳酸菌的抑菌效果优于单菌S1。饲养试验结果表明,添加乳酸菌、化学益生素或合生元均可降低哺乳期、断奶期仔猪腹泻率,增加断奶后仔猪平均日增重,降低料重比,其中合生元作用效果最优,其次为混合化学益生素,最后为乳酸菌,混合乳酸菌组优于单独使用S1组。结果提示,混合乳酸菌与FOS+inulin组合以及与FOS+XOS组合具有减少腹泻,提高生长性能的作用,可用于断奶期仔猪饲料。 展开更多
关键词 乳酸菌 化学益生素 合生元 肠毒素大肠杆菌 仔猪
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上海市普陀区2012年-2016年4种致泻性大肠埃希菌的监测分析 被引量:15
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作者 李勇 顾文超 +3 位作者 唐海丰 黄文静 赖淼菊 张玉 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第23期3465-3468,共4页
目的分析上海市普陀区2012年-2016年腹泻人群中4种致泻性大肠埃希菌(EPEC、ETEC、EIEC、EHEC)感染及分布情况,为致泻性大肠埃希菌病的监测、暴发预警提供基线与参考数据。方法设立哨点医院,以标准化方法筛选和鉴定DEC的毒力因子、菌型... 目的分析上海市普陀区2012年-2016年腹泻人群中4种致泻性大肠埃希菌(EPEC、ETEC、EIEC、EHEC)感染及分布情况,为致泻性大肠埃希菌病的监测、暴发预警提供基线与参考数据。方法设立哨点医院,以标准化方法筛选和鉴定DEC的毒力因子、菌型和耐药特征;构建DEC流行特征基线。结果 2012年-2016年,2家哨点医院检测2 988份腹泻标本确认DEC病例共334例,阳性率为11.2%,其中EPEC 169例(5.7%)、ETEC 148例(5.0%)、EIEC 3例(0.1%)、STEC/EHEC 3例(0.1%)、MDEC 11例(0.4%)。成人腹泻监测点优势病例为ETEC感染,流行呈明显的季节特征,峰值多在每年8月;儿童腹泻监测点优势病例为EPEC感染,感染峰值每年均在6月,男、女性别比为37∶20,男性明显高于女性。DEC药敏试验中耐药率最高的药物为萘啶酸(NA)(39.6%),其次为四环素(TE)(38.0%)和复方新诺明(SXT)(25.5%)。结论上海市普陀区DEC型谱特征已发生变化。ETEC夏季食源性感染风险大,需要加强公共卫生实验室主动监测能力。 展开更多
关键词 致泻性大肠埃希菌 肠致病性大肠埃希菌 肠产毒性大肠埃希菌 人群监测
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产肠毒素大肠杆菌肠毒素LTB、STⅠ和STⅡ融合基因的构建与表达研究 被引量:7
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作者 葛艳 尤永进 +1 位作者 徐泉兴 饶忠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期346-348,共3页
PCR方法扩增产肠毒素大肠杆菌 (EnterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)LTB、STⅠ、STⅡ基因 ,将LTB、STⅠ、STⅡ基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pBST进行酶切分析、PCR检测以及核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LTB_STⅡ... PCR方法扩增产肠毒素大肠杆菌 (EnterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)LTB、STⅠ、STⅡ基因 ,将LTB、STⅠ、STⅡ基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pBST进行酶切分析、PCR检测以及核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LTB_STⅡ_STⅠ的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。pBST在宿主菌BL2 1(DE3 )RIL中的表达产物经SDS_PAGE初步分析 ,显示重组融合蛋白的分子量约为 40kD ,其表达量约占菌体总蛋白的 46 %。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 肠毒素 LTB STI STⅡ 融合基因 构建 幼畜 基因表达
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猪源产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子研究进展 被引量:15
6
作者 吴文文 丁雪燕 +3 位作者 洪天旗 羊扬 段强德 朱国强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1403-1409,共7页
产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起婴幼儿和幼畜腹泻的主要细菌性病原,初生幼畜感染后常因剧烈腹泻脱水而死亡。菌毛黏附素和肠毒素是ETEC目前研究最多的2类毒力因子,随着技术手段的不断进步和研究的深... 产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起婴幼儿和幼畜腹泻的主要细菌性病原,初生幼畜感染后常因剧烈腹泻脱水而死亡。菌毛黏附素和肠毒素是ETEC目前研究最多的2类毒力因子,随着技术手段的不断进步和研究的深入,一些新型毒力因子不断被发现,如鞭毛、非菌毛黏附素、肠聚集性耐热毒素(the enteroaggregative heat-stable toxin1,EAST1)、自转运黏附蛋白、细胞溶血素等。本综述主要针对猪源ETEC的主要毒力因子以及新型毒力的结构功能及致病性进行阐述,为进一步深入探索ETEC的致病机理提供理论基础。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 黏附素 肠毒素 毒力因子
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产肠毒素大肠杆菌K88诱发BALB/c鼠肠炎模型的建立及评价 被引量:14
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作者 齐宇 王开 +2 位作者 伊淑帅 潘娜 胡桂学 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期19-22,共4页
为建立BALB/c小鼠感染产肠毒素大肠杆菌(ETEC)K88肠炎模型,本研究分别灌服小鼠浓度为1.0×107cfu/m L、1.0×108cfu/m L和1.0×109 cfu/m L的菌液,连续灌服3 d,对其发病情况和外周血中各细胞因子水平进行检测。结果显示,灌... 为建立BALB/c小鼠感染产肠毒素大肠杆菌(ETEC)K88肠炎模型,本研究分别灌服小鼠浓度为1.0×107cfu/m L、1.0×108cfu/m L和1.0×109 cfu/m L的菌液,连续灌服3 d,对其发病情况和外周血中各细胞因子水平进行检测。结果显示,灌菌后小鼠食欲下降、体重降低,外周血中IL-1α、TNF-α以及髓过氧化物酶(MPO)含量增加,十二指肠病理组织切片显示炎症发生。灌菌期结束后第5 d,小鼠粪便稀软,体重降到最低,所检测的细胞因子含量达到峰值,与对照组差异极显著(p<0.05);十二指肠肠黏膜层与肌层间隙增宽、杯状细胞增多、固有层与黏膜层炎性细胞侵润,炎症变化最为明显。本研究建立了BALB/c小鼠感染ETEC K88肠炎模型,于灌菌期结束后第5 d炎症最为严重。此外,接种不同浓度菌液的小鼠炎性因子数量变化差异不显著(p>0.05)。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 细胞因子 肠道组织学评分 模型
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产肠毒素大肠杆菌对仔猪肠道黏膜屏障功能的影响及其损伤修复研究进展 被引量:13
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作者 黄登桂 周加义 +1 位作者 高春起 王修启 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期48-56,共9页
完整的肠道黏膜结构是其功能实现的基础,也是畜禽健康生长的重要保障。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原体之一。ETEC及其代谢产物可引起肠道上皮细胞代谢紊乱,破坏黏膜结构,导致功能失调,进而损害畜禽肠道健康。本文就E... 完整的肠道黏膜结构是其功能实现的基础,也是畜禽健康生长的重要保障。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原体之一。ETEC及其代谢产物可引起肠道上皮细胞代谢紊乱,破坏黏膜结构,导致功能失调,进而损害畜禽肠道健康。本文就ETEC对仔猪肠道黏膜屏障功能的影响及其损伤修复研究进展作一综述,旨在为养猪生产中预防和治疗仔猪细菌性腹泻提供参考。 展开更多
关键词 仔猪腹泻 肠道黏膜 产肠毒素大肠杆菌 损伤修复
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Macleaya cordata extract alleviated oxidative stress and altered innate immune response in mice challenged with enterotoxigenic Escherichia coli 被引量:13
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作者 Guiping Guan Sujuan Ding +3 位作者 Yulong Yin Veeramuthu Duraipandiyan Naif Abdullah Al-Dhabi Gang Liu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期1019-1027,共9页
This study examines the effects of dietary Macleaya cordata extract(MCE) on bacterial burden and resistance to enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC) in ICR mice. ICR mice were randomly distributed into one of the fol... This study examines the effects of dietary Macleaya cordata extract(MCE) on bacterial burden and resistance to enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC) in ICR mice. ICR mice were randomly distributed into one of the following groups:(i) basal diet;(ii)basal diet with 200 mg kg–1 MCE;(iii) basal diet challenged with ETEC;and(iv) basal diet with 200 mg kg–1 MCE and challenged with ETEC. Following a 7-day period of pre-treatment, CTRL-ETEC and MCE-ETEC mice were subjected to oral infection using 5×108 E. coli SEC 470. The results showed dietary 200 mg kg–1 MCE markedly reduced intestinal ETEC burden(P<0.05) and the disease-associated mortality was significantly alleviated in the MCE treated group(P<0.05). In addition,dietary MCE markedly alleviated ETEC-induced oxidative stress, evidenced by the lowered methane dicarboxylic aldehyde(MDA) abundance and enhanced activities of catalase and glutathione peroxidase(P<0.05). Furthermore, MCE mice exhibited higher immune activity, which might have further mediated ETEC infection. These results indicate MCE plays a preventative role with respect to ETEC infection. Future research should aim to develop MCE as a therapeutic approach to the promotion of intestinal health and a safeguard against ETEC infection. 展开更多
关键词 Macleaya cordata EXTRACT enterotoxigenic escherichia coli bacterial BURDEN OXIDATIVE stress
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产肠毒素大肠杆菌多重PCR检测方法的建立 被引量:11
10
作者 曲泽慧 陈佩佩 +3 位作者 张爱芹 郭东春 师东方 曲连东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期980-982,共3页
为快速检测和鉴定产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌毛(K88和K99)和毒素(STa)基因,本研究设计合成了针对K88、K99和STa基因的3对特异性引物,对K88、K99和STa基因扩增条件进行优化,建立了检测K88、K99和STa的多重PCR方法。该方法对K88、K99和STa... 为快速检测和鉴定产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌毛(K88和K99)和毒素(STa)基因,本研究设计合成了针对K88、K99和STa基因的3对特异性引物,对K88、K99和STa基因扩增条件进行优化,建立了检测K88、K99和STa的多重PCR方法。该方法对K88、K99和STa基因的扩增产物分别为237 bp,314 bp和166 bp;此外,该方法具有良好的灵敏性和特异性。本实验建立的多重PCR方法为致幼畜腹泻ETEC的检测提供了快速准确方法。用所建立的多重PCR方法对实验室分离的23株大肠杆菌进行检测,结果 2株为K99/STa阳性,1株为STa阳性。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 多重PCR K88菌毛 K99菌毛 STa毒素
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致犊牛腹泻肠毒素大肠杆菌多重PCR检测方法的建立 被引量:10
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作者 段新华 李建军 +2 位作者 杨学云 王登峰 王治才 《中国动物检疫》 CAS 2010年第1期33-34,共2页
肠毒素大肠杆菌((Ent erot oxi geni c E.col i,ETEC)是引起犊牛腹泻的主要病原之一。本试验建立了多重PCR检测ETEC毒力因子F41菌毛、K99菌毛和STa、LT肠毒素相关基因的技术方法。试验对影响PCR扩增的dNTP、引物浓度以及退火温度等因素... 肠毒素大肠杆菌((Ent erot oxi geni c E.col i,ETEC)是引起犊牛腹泻的主要病原之一。本试验建立了多重PCR检测ETEC毒力因子F41菌毛、K99菌毛和STa、LT肠毒素相关基因的技术方法。试验对影响PCR扩增的dNTP、引物浓度以及退火温度等因素进行优化,确定了多重PCR的特异性和灵敏性。结果表明:所建立的多重PCR方法快速、特异、灵敏,在2.5h-3h内就可以完成,为致犊牛腹泻肠毒素大肠杆菌的快速准确检测提供另一种选择。 展开更多
关键词 肠毒素大肠杆菌 多重PCR F41菌毛 K99菌毛 STa LT
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产肠毒素性大肠埃希氏菌基因工程疫苗的研究进展 被引量:9
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作者 卫广森 许崇波 孙宇 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第11期923-927,共5页
简述了产肠毒性大肠埃希氏菌(ETEC)K88-K99、K88ac-LTB、K99-F41和ST-LT双价基因工程疫苗的研制方法、生产工艺、免疫效果及生态效应及其研究进展,同时阐明了用这些疫苗免疫妊娠母畜,可使吸吮了母畜初乳的幼畜的腹泻发病率和死亡率显著... 简述了产肠毒性大肠埃希氏菌(ETEC)K88-K99、K88ac-LTB、K99-F41和ST-LT双价基因工程疫苗的研制方法、生产工艺、免疫效果及生态效应及其研究进展,同时阐明了用这些疫苗免疫妊娠母畜,可使吸吮了母畜初乳的幼畜的腹泻发病率和死亡率显著下降,且不会带来生态环境污染。认为这些基因工程疫苗仍有不足之处,需要进一步加以改进。 展开更多
关键词 产肠毒性大肠埃希氏菌 基因工程疫苗 腹泻 仔猪 羔羊
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猪源产肠毒素大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:10
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作者 刘国梅 李培 +5 位作者 左玉柱 李杰峰 张宁 刘曼迪 刘迎迎 李妍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1134-1139,共6页
为建立一种可同时快速准确检测5种菌毛类型的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的多重PCR方法,本研究首先通过大肠杆菌特异性基因uidA的PCR方法鉴定大肠杆菌;选取国内外流行的携带K88、K99、F18ab、F18ac和F41菌毛基因的ETEC菌株,根据这5种菌毛基... 为建立一种可同时快速准确检测5种菌毛类型的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的多重PCR方法,本研究首先通过大肠杆菌特异性基因uidA的PCR方法鉴定大肠杆菌;选取国内外流行的携带K88、K99、F18ab、F18ac和F41菌毛基因的ETEC菌株,根据这5种菌毛基因的保守序列设计5对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能同时检测上述5种菌毛ETEC的多重PCR方法。uidA基因的PCR结果显示,除了大肠杆菌有特异性扩增外,其他细菌均不能扩增,可以用于大肠杆菌的鉴定。菌毛多重PCR优化后的反应条件为:各混合菌毛基因引物终浓度为3.2μmol/L,各大肠杆菌混合DNA模板浓度为2.5×107拷贝/μL,退火温度为58℃;特异性试验结果显示,该多重PCR方法能够特异性扩增5种ETEC的菌毛基因,而猪源沙门氏菌、猪源链球菌和大肠杆菌DH5α未见扩增,特异性强;敏感性试验结果显示,该方法对携带5种菌毛的大肠杆菌基因组DNA的最低检测量均为2.5×104拷贝/μL,敏感性较高。采用uidA基因的PCR方法检测了河北省腹泻致死仔猪脏器分离的101株细菌,结果均为大肠杆菌。采用该多重PCR方法和单一PCR方法分别检测这101株大肠杆菌的菌毛类型,结果显示二者的符合率为100%;检测结果还显示,河北省仔猪腹泻大多数为携带3种及3种以上菌毛的ETEC混合感染所致,且ETEC携带的优势菌毛类型为K88、K99、F18ab和F41。综上所述,本研究为猪源ETEC菌毛分型及该病的临床诊断、流行病学调查提供了快速准确的鉴定方法。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 UIDA 菌毛 多重PCR
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一起由桶装水污染引起的学校感染性腹泻暴发调查 被引量:9
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作者 吴苇 李辉 刘明斌 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2014年第1期77-80,共4页
目的:探讨某学校一起学生感染性腹泻暴发的原因。方法采用描述性流行病学方法对疫情特点进行描述;运用11配对病例对照研究方法对腹泻发病因素进行分析;条件Logistic回归计算各危险因素的OR 值及其95%CI;采集可疑食物、桶装水、... 目的:探讨某学校一起学生感染性腹泻暴发的原因。方法采用描述性流行病学方法对疫情特点进行描述;运用11配对病例对照研究方法对腹泻发病因素进行分析;条件Logistic回归计算各危险因素的OR 值及其95%CI;采集可疑食物、桶装水、病人粪便和从业人员肛拭子等样品进行致病菌检测。结果喝学校桶装水学生发生腹泻的风险升高(OR=7.68,95%CI:1.67~35.36),而喝瓶装矿泉水与学生发生腹泻无关(OR=2.47,95%CI:0.43~14.02)。1份桶装水和1份病例粪便标本中检出肠产毒性大肠埃希氏菌(LT毒力基因阳性)。结论本次疫情为一起由桶装水受大肠杆菌污染导致的腹泻暴发,可疑致病菌为肠产毒性大肠埃希氏菌。 展开更多
关键词 肠产毒性大肠埃希氏菌 感染性腹泻 桶装水 病例对照研究
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生物活性肽对产肠毒素大肠杆菌诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用 被引量:4
15
作者 王兆雨 吴晓宇 +1 位作者 裴小琪 魏宏逵 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期4659-4667,共9页
本试验旨在研究生物活性肽(BTP)对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用。选用6周龄体重为(18±2)g的C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,分别为对照组、ETEC组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组10只。试验期共15 d,在第8~14天,... 本试验旨在研究生物活性肽(BTP)对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)诱导的小鼠肠道损伤的缓解作用。选用6周龄体重为(18±2)g的C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,分别为对照组、ETEC组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组10只。试验期共15 d,在第8~14天,空白对照组和阴性对照组小鼠每天灌胃0.1 mL的磷酸盐缓冲液(PBS),试验Ⅰ组和试验Ⅱ组小鼠每天分别灌胃150和300 mg/kg的BTP(溶于0.1 mL PBS中);在第15天,空白对照组小鼠灌胃0.2 mL的PBS,阴性对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组小鼠灌胃5×109 CFU/mL的ETEC菌悬液(重悬于0.2 mL PBS中),连续观察8 h后进行屠宰。结果表明:1)与空白对照组相比,阴性对照组小鼠的存活率显著降低(P<0.05),腹泻指数显著升高(P<0.05);空肠肿瘤坏死因子-α(TNF⁃α)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),白细胞介素-1β(IL⁃1β)、白细胞介素-6(IL⁃6)含量显著升高(P<0.05);空肠闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO⁃1)、闭锁小带蛋白-2(ZO⁃2)、转录因子核受体77(Nur77)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)活性显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05)。2)与阴性对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组小鼠的存活率显著升高(P<0.05),腹泻指数显著降低(P<0.05);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的空肠TNF⁃α的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),IL⁃1β、IL⁃6含量显著降低(P<0.05);试验Ⅱ组的空肠Occludin和Nur77的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的血清MDA含量显著降低(P<0.05),试验Ⅱ组的血清GSH⁃Px活性显著升高(P<0.05)。综上所述,BTP能够缓解ETEC感染导致的小鼠肠道炎症及屏障功能损伤,该作用可能与BTP上调了Nur77表达,抑制小肠上皮细胞凋亡、坏死性凋亡及焦亡有关。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 生物活性肽 肠道炎症 程序性死亡
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L-茶氨酸对产肠毒素大肠杆菌引起的免疫应激小鼠肠道的保护作用研究 被引量:8
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作者 刘遵莹 刘秋玲 +2 位作者 邓燕莉 陈凌 肖文军 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期469-476,共8页
以SPF级Balb/c雌性小鼠为实验动物,对其适应性饲养3 d后连续30 d灌喂不同剂量L-茶氨酸,然后腹腔注射产肠毒素大肠杆菌E44813诱导免疫应激,5 h后取样,分析研究了L-茶氨酸对小鼠体重,回肠组织谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,G... 以SPF级Balb/c雌性小鼠为实验动物,对其适应性饲养3 d后连续30 d灌喂不同剂量L-茶氨酸,然后腹腔注射产肠毒素大肠杆菌E44813诱导免疫应激,5 h后取样,分析研究了L-茶氨酸对小鼠体重,回肠组织谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(Homogenate catalase,CAT)与诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)活性,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、空肠组织病理学变化,以及血清肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、细胞间粘附分子1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和白介素1β(Interleukin-1β,IL^(-1)β)表达量的影响,以探明L-茶氨酸对产肠毒素大肠杆菌免疫应激小鼠肠道的保护作用。结果表明,各剂量L-茶氨酸均能显著增加小鼠体重,可减轻产肠毒素大肠杆菌E44813引起的肠道组织病变程度,升高回肠组织GSH-Px和CAT酶活性,降低MDA含量和i NOS酶活性,在不同程度上抑制血清TNF-α、IL^(-1)β和ICAM-1的表达量。说明L-茶氨酸可通过抑制炎性细胞因子表达水平、降低脂质过氧化程度和提高抗氧化能力来维护肠道组织形态与结构的完整性,并达到保护肠道的作用。 展开更多
关键词 L-茶氨酸 产肠毒素大肠杆菌 免疫应激 保护肠道
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产肠毒素性大肠杆菌K88的致病特性及其益生菌的筛选 被引量:7
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作者 张赛群 朱红梅 +2 位作者 周涵韬 黄素芳 刘波 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期386-392,共7页
在获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的菌株K88-GFP并证明其与K88具有遗传同质性的基础上,以K88-GFP为致病菌,腹腔注射侵染小鼠,在不同时间进行眼球采血,测定血液生理生化指标,并采取不同器官或组织,培养后利用紫外光激发K88-GFP的绿色荧光,观... 在获得绿色荧光蛋白(GFP)标记的菌株K88-GFP并证明其与K88具有遗传同质性的基础上,以K88-GFP为致病菌,腹腔注射侵染小鼠,在不同时间进行眼球采血,测定血液生理生化指标,并采取不同器官或组织,培养后利用紫外光激发K88-GFP的绿色荧光,观察计数这种产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)在小鼠体内的分布。同时通过体外抑制和活体饲喂试验,进行了益生菌的筛选。结果证实,ETEC致病菌具有较强的侵袭性,它可以侵袭小鼠肝、肾、心、肺及脑、肌肉等器官和组织,尤其可对肝、肾造成严重的损伤;筛选得到益生菌株PB JK-2,在体内外均对K88具有较好的抑制作用。 展开更多
关键词 产肠毒素性大肠杆菌 K88 K88-GFP致病特性 益生菌
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产肠毒素大肠杆菌快速检测方法的建立和评价 被引量:8
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作者 张小飞 张召军 +5 位作者 张广州 崔晓霞 赵爽 定明 白杰英 曾林 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第5期31-35,I0007,I0008,共7页
目的利用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的快速、便捷、敏感、特异的检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行评价,为实验动物检测和细菌性腹泻的诊断提供技术支持。方法根据GenBank公布的产肠毒素大肠杆菌的LT... 目的利用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的快速、便捷、敏感、特异的检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行评价,为实验动物检测和细菌性腹泻的诊断提供技术支持。方法根据GenBank公布的产肠毒素大肠杆菌的LT毒素基因序列(S60731.1)设计外引物和内引物进行LAMP扩增,对LAMP特异性和敏感性与PCR方法做比较。结果建立的LAMP方法检测最低浓度为100 pg/μL,灵敏度是PCR的10倍以上并具有较高的特异性,利用该方法对27份猴腹泻样品进行LAMP和PCR方法检测,发现PCR检出率为33.3%,LAMP(60 min内)结果与PCR相同,而LAMP(90 min内)检出率为92.6%,约是PCR检出率的3倍。结论建立了一种用于检测肠毒性大肠杆菌(ETEC)的LAMP检测方法,该方法特异性强,灵敏度高,方便快捷,适合于ETEC临床快速检测。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 LAMP 诊断
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肠毒性大肠杆菌的绿色荧光蛋白转化及表达研究 被引量:6
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作者 朱红梅 周涵韬 +2 位作者 张赛群 曹宜 刘波 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期43-46,共4页
通过电击转化法,将带有gfp标记基因的pGLO质粒成功转化到肠毒素型大肠杆菌K88、K99中,经过紫外检测及荧光显微镜检测均发现转化菌株发出绿色的荧光,表明gfp基因得到稳定、高效的表达.进一步通过PCR分子鉴定、血清型鉴定、微生物学特性... 通过电击转化法,将带有gfp标记基因的pGLO质粒成功转化到肠毒素型大肠杆菌K88、K99中,经过紫外检测及荧光显微镜检测均发现转化菌株发出绿色的荧光,表明gfp基因得到稳定、高效的表达.进一步通过PCR分子鉴定、血清型鉴定、微生物学特性分析均表明,转化菌株与原始菌株是一致的.该转化菌株将为研究肠毒性大肠杆菌的致病机理及益生素的筛选提供有效的手段. 展开更多
关键词 肠毒性大肠杆菌 绿色荧光蛋白 遗传转化
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新生仔猪产肠毒素性大肠埃希氏菌致病因子的分子生物学研究进展 被引量:5
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作者 卫广森 许崇波 孙宇 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第10期837-842,共6页
阐述了新生仔猪产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)菌毛的结构、分子生物学特性、基因检测技术、菌毛抗原受体的生化特性以及菌毛载体系统的优点;另外,从分子结构与功能、作用机理、基因检测三方面叙述了新生仔猪ETEC不耐热肠毒素和耐热肠毒... 阐述了新生仔猪产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)菌毛的结构、分子生物学特性、基因检测技术、菌毛抗原受体的生化特性以及菌毛载体系统的优点;另外,从分子结构与功能、作用机理、基因检测三方面叙述了新生仔猪ETEC不耐热肠毒素和耐热肠毒素的研究进展。 展开更多
关键词 产肠毒素性大肠埃希氏菌 新生仔猪 菌毛 不耐热肠毒素 耐热肠毒素
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