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题名新生大鼠肠神经嵴干细胞的体外培养和鉴定
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作者
尚卿
刘远梅
高明娟
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机构
河南省新乡市中心医院普通外科
遵义医学院附属医院小儿普胸泌外科
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出处
《遵义医学院学报》
2016年第3期314-318,共5页
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基金
贵州省科科学技术基金资助项目(NO:黔科合J字[2012]2364)
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文摘
目的探索体外分离培养新生大鼠肠神经嵴干细胞(ENCSCs)的方法,观察肠神经嵴干细胞神经球(NLBs)的原代及分化情况。方法取新生SD大鼠,无菌环境下解剖分离从小肠至直肠的肠管,胰酶消化成单细胞悬液后,接种于培养瓶行原代培养,并传代;传到第3代时,加入分化培养基进行分化培养。观察ENCSCs原代培养及分化培养的情况,免疫荧光染色观察NLBs巢蛋白(nestin)的表达以及分化后ENCSCs Hu D蛋白、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况。结果 ENCSCs原代培养第1天,可见细胞贴壁成长,第2天,贴壁细胞减少,出现大量悬浮的细胞团,第4天,悬浮细胞团增大,形成体积稍小的NLBs,7 d后,大量NLBs漂浮于培养液中。未分化的NLBs行免疫荧光染色可见nestin阳性表达;NLBs分化后贴壁的细胞可见Hu D、GFAP阳性表达。结论新生大鼠肠道可提取出ENCSCs,培育出ENCSCs神经球,并能够分化成神经元和神经胶质细胞。
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关键词
肠神经嵴干细胞
细胞培养
细胞分化
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Keywords
enteric neural crest stemcells
cell culture
cell differentiation
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分类号
R656.9
[医药卫生—外科学]
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