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低氧下沉默HLA-G对JEG-3细胞、EPAS1表达及其生物学行为的影响
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作者 孙春蕾 杨娟 +3 位作者 谢莹莺 许文宇 雷娟 刘朵朵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第1期47-53,共7页
目的探讨在低氧条件下,沉默绒毛膜滋养细胞系JEG-3细胞的人类白细胞相关抗原-G(HLA-G)表达对JEG-3细胞生物学功能的影响和通过内皮PAS1区域蛋白1(EPAS1)低氧反应通路参与高原低氧条件下子痫前期发病的分子机制。方法通过转染小干扰RNA(s... 目的探讨在低氧条件下,沉默绒毛膜滋养细胞系JEG-3细胞的人类白细胞相关抗原-G(HLA-G)表达对JEG-3细胞生物学功能的影响和通过内皮PAS1区域蛋白1(EPAS1)低氧反应通路参与高原低氧条件下子痫前期发病的分子机制。方法通过转染小干扰RNA(siRNA)抑制JEG-3细胞中HLA-G的表达,将转染后的JEG-3细胞分为4组:常氧对照组、低氧对照组、常氧抑制组、低氧抑制组。采用CCK-8实验及体外侵袭实验法检测4组细胞的增殖及侵袭能力;用流式细胞术检测4组细胞凋亡和细胞周期的影响;通过qPCR技术及Western blot法检测4组细胞中HLA-G和EPAS1 mRNA及蛋白的表达水平。结果(1)与常氧对照组相比,低氧对照组及常氧、低氧抑制组均可使JEG-3细胞的增殖活性、侵袭能力降低,使得细胞凋亡率显著升高,低氧对照组与低氧抑制组产生了明显的坏死细胞群。低氧条件下,降低HLA-G的表达会提高细胞坏死率。无论在常氧还是低氧下,抑制HLA-G表达均使细胞被阻滞在G1期。(2)与常氧对照组相比,低氧对照组及常氧、低氧抑制组均降低HLA-G蛋白表达,且低氧和抑制HLA-G蛋白表达二者有协同作用,均可增加缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮素-1(ET-1)蛋白表达,抑制HLA-G则降低诱导型一氧化氮合成酶(NOS2)的表达。结论低氧环境下,沉默HLA-G可能通过EPAS1低氧反应通路影响滋养细胞生物学行为,参与了子痫前期的发生发展。 展开更多
关键词 子痫前期 低氧 人类白细胞抗原G 内皮pas1区域蛋白1 高海拔
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在低氧环境下沉默EPAS1对JEG-3细胞生物学行为的影响
2
作者 许文宇 谢莹莺 +2 位作者 孙春蕾 刘朵朵 雷娟 《中国高原医学与生物学杂志》 CAS 2023年第2期81-87,共7页
目的在常氧及低氧条件下培养人滋养细胞株JEG-3细胞,探讨在低氧环境下沉默内皮PAS蛋白1(EPAS1)对人滋养细胞株JEG-3细胞增殖活性、侵袭行为、凋亡程度及细胞周期分布的影响。方法通过转染小干扰RNA(siRNA)抑制JEG-3细胞中EPAS1的表达,... 目的在常氧及低氧条件下培养人滋养细胞株JEG-3细胞,探讨在低氧环境下沉默内皮PAS蛋白1(EPAS1)对人滋养细胞株JEG-3细胞增殖活性、侵袭行为、凋亡程度及细胞周期分布的影响。方法通过转染小干扰RNA(siRNA)抑制JEG-3细胞中EPAS1的表达,将转染后的JEG-3细胞分为4组(常氧对照组、常氧抑制组、低氧对照组及低氧抑制组)。在此基础上,根据处理时间分为48、72 h组。用CCK8实验检测4组细胞活力;用体外侵袭实验(transwell)检测4组细胞的侵袭能力;用流式细胞术检测不同处理条件对4组细胞凋亡和细胞周期的影响。结果(1)低氧及敲低HIF-2α的表达均可使JEG-3细胞的增殖活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);经低氧处理72 h的JEG-3细胞的增殖活性较48 h时的降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)低氧条件及敲低HIF-2α的表达均可使JEG-3细胞的侵袭能力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)低氧条件及敲低HIF-2α的表达均可使JEG-3细胞的凋亡率显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)低氧条件及敲低HIF-2α的表达均可使JEG-3细胞的G1相细胞数量增加,表示细胞被阻滞在G1期,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在低氧环境下沉默EPAS1使人滋养细胞株JEG-3细胞增殖活性及侵袭能力降低、凋亡率增高且使JEG-3细胞被阻滞在G1期。由此推测,在低氧环境下沉默EPAS1可影响滋养细胞生物学行为,以此参与子痫前期的发生。 展开更多
关键词 内皮pas蛋白1 滋养细胞 低氧 子痫前期
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