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柚皮苷保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素诱导的心肌毒性 被引量：9
1
作者 简春燕 郭润民 +3 位作者 刘丹铭 闫海 冯鉴强 吴铿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期238-243,共6页
目的探讨柚皮苷（NRG）能否保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素（DOX）诱导的心肌毒性。方法应用DOX处理H9c2心肌细胞建立DOX心肌损伤模型。CCK一8比色法测定细胞存活率；谷胱甘肽试剂盒检测GSSG／（GSSG＋GSH）的比值；Hoechst 33258核染色法... 目的探讨柚皮苷（NRG）能否保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素（DOX）诱导的心肌毒性。方法应用DOX处理H9c2心肌细胞建立DOX心肌损伤模型。CCK一8比色法测定细胞存活率；谷胱甘肽试剂盒检测GSSG／（GSSG＋GSH）的比值；Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学和数量改变；Western blot法测定葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的表达水平；双氯荧光素（DCFH-DA）染色荧光显微镜摄片检测细胞活性氧（ROS）水平；罗丹明123（Rhl23）染色荧光显微镜照像测定线粒体膜电位（MMP）。结果DOX在3-7μxmol·L^-1浓度范围内处理H9c2心肌细胞24h，呈剂量依赖性降低细胞存活率，其中5Iμmol·L^-1DOX能明显引起心肌细胞损伤，表现为使细胞存活率下降近50％，并呈时间依赖性上调GRP78蛋白的表达；1 μxmol·L^-1NRG预处理60min可明显抑制5 μxmol·L^-1DOX引起的心肌毒性作用，表现为细胞存活率升高，GSSG／（GSSG＋GSH）的比值下降，凋亡细胞数目减少，GRP78表达被抑制，细胞内ROS产生及MMP丢失减少。结论NRG能保护心肌细胞对抗DOX诱导的心肌细胞损伤，保护作用可能与其抗氧化应激及内质网应激有关。 展开更多
关键词 柚皮苷 阿霉素 心肌毒性 心肌保护 氧化应激 内质网应激 H9C2心肌细胞
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参附注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮层IRE1α表达及神经元凋亡的影响 被引量：6
2
作者 刘文强 王军 +1 位作者 杨倩倩 徐艳 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期671-676,共6页
目的:观察参附注射液对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑皮层中内质网应激关键分子-肌醇需求因子1α(inositol-requiring enzyme1α,IRE1α)表达及神经元凋亡的影响,探讨其脑保护机制。方法:参照Rice法制备HIBD模型,将7日龄SD大鼠随机... 目的:观察参附注射液对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑皮层中内质网应激关键分子-肌醇需求因子1α(inositol-requiring enzyme1α,IRE1α)表达及神经元凋亡的影响,探讨其脑保护机制。方法:参照Rice法制备HIBD模型,将7日龄SD大鼠随机分为假手术组(S)和HIBD模型组,模型组又分为生理盐水对照组(C)和参附治疗组(SF),各组按照观察时间点不同进一步分为3、6、12、24、72 h 5个亚组,每组均10只。HE染色光镜下观察脑组织病理变化;RT-PCR方法检测IRE1αmRNA的表达变化;Western blot方法检测IRE1α蛋白表达变化;流式细胞术检测神经元的凋亡率;结果:(1)RT-PCR:C组在HIBD后3、6、12、24 h时间点IRE1αmRNA表达量较S组升高(P<0.05);SF组各时间点IRE1αmRNA表达均较S组升高(P<0.05)。SF组在6、12、24、72 h时间点的IRE1αmRNA表达量较C组升高明显(P<0.05)。(2)Western blot:C组和SF组各时间点IRE1α蛋白表达量均较S组升高(P<0.05),SF组在6、12、24、72 h时间点的IRE1α蛋白表达量较C组升高明显(P<0.05)。(3)神经元的凋亡率:SF组各时间点的凋亡率均明显低于C组(P<0.05)。结论:参附注射液可能通过上调IER1α的表达,减少神经元凋亡来减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤。 展开更多
关键词 参附注射液 缺氧缺血性脑损伤 肌醇需求因子1α 内质网应激 凋亡 大鼠
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高容量血液滤过对多器官功能障碍综合征犬内质网应激标志蛋白Caspase-12基因水平及表达的影响 被引量：5
3
作者 马林 郭雯 +7 位作者 刘新华 阿尔帕提.阿不力提步 隋晓露 努尔孜叶.阿布里克木 胡磊 周小佳 阿依古丽.那斯木 陈继红 《中国血液净化》 2015年第2期105-109,共5页
目的探讨高容量血液滤过(HVHF)治疗多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)对内质网应激相关性细胞凋亡及应激标志蛋白Caspase-12基因水平及表达的影响,并探讨高容量血液滤过(high volume hemofiltration,HVHF... 目的探讨高容量血液滤过(HVHF)治疗多脏器功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)对内质网应激相关性细胞凋亡及应激标志蛋白Caspase-12基因水平及表达的影响,并探讨高容量血液滤过(high volume hemofiltration,HVHF)治疗MODS的机制。方法经二次打击建立犬MODS模型。分HVHF组和MODS组,于术前(T1)、内毒素注射完后0h(T2)、6h(T3)、12h(T4)及24h(T5)留血标本。体内实验:应用荧光定量PCR法检测肝、肾及肺组织Caspase-12m RNA基因表达水平。体外实验:2组血清体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立内质网应激凋亡模型。测定si RNA干扰前后Caspase-12m RNA基因表达、蛋白表达及内皮细胞凋亡率。结果体内实验:与MODS组相比,HVHF组肾、肺组织Caspase-12m RNA基因表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而肝组织Caspase-12m RNA基因表达水平无明显差异(P>0.05)。体外实验:干扰前与MODS组相比,HVHF组在T2-T5HUVECs Caspase-12m RNA基因表达水平、Caspase-12蛋白表达水平及细胞凋亡率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。干扰后2组HUVECs Caspase-12m RNA基因表达水平、Caspase-12蛋白表达水平及细胞凋亡率均较干扰前显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论内质网应激凋亡信号通路在MODS演进过程中占重要地位,经过HVHF治疗后内质网应激(ERS)凋亡信号通路中的关键蛋白Caspase-12基因表达、Caspase-12蛋白表达水平及细胞凋亡率均明显下降,此作用有助于减轻机体细胞凋亡程度,有效地救治MODS。而RNA干扰(RNAi)技术有望成为治疗MODS新的治疗靶点。 展开更多
关键词 多器官功能障碍综合征 高容量血液滤过 内质网应激 RNA干扰技术 Caspase-12基因
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机械牵张应力对人根尖牙乳头干细胞增殖分化的影响 被引量：4
4
作者 杜希希 李波 袁小平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第10期1041-1047,共7页
目的根尖牙乳头干细胞(SCAP)被看作是根尖周组织再生的种子细胞并被用于以干细胞为基础的根尖周组织再生工程中。文章探讨不同力值的机械牵张应力对人SCAP增殖、分化潜能的影响。方法利用组织块酶消化法及有限稀释法分离、培养人SCAP并... 目的根尖牙乳头干细胞(SCAP)被看作是根尖周组织再生的种子细胞并被用于以干细胞为基础的根尖周组织再生工程中。文章探讨不同力值的机械牵张应力对人SCAP增殖、分化潜能的影响。方法利用组织块酶消化法及有限稀释法分离、培养人SCAP并加以鉴定。根据对细胞加载机械牵张应力大小不同将实验分为150、200、250 g组,另设空白对照组(未做加力处理)。利用MTT法检测不同大小静态机械牵张应力刺激对SCAP增殖活性的影响。利用Western blot检测机械牵张应力作用下SCAP成骨/成牙分化相关蛋白(ALP、OSX、DSP)表达的变化以及不同大小静态机械牵张应力作用下SCAP内质网应激分子伴侣GRP78的表达情况。结果 SCAP细胞经过3周的成骨诱导后进行茜素红染色,镜下可见块状矿化结节的出现,SCAP细胞经过2周的成脂诱导后进行油红O染色,镜下可见红染的脂滴出现。SCAP细胞表面抗原表型通过流式细胞仪检测分析显示:SCAP对CD31(2.46%,内皮细胞标记物)和CD45(0.07%,造血干细胞标记物)呈阴性表达,对CD90(99.89%,间质细胞标记)和STRO-1(15.21%,干细胞标记)呈阳性表达。与150 g组比较,200 g加力组的加载机械牵张应力第2天,SCAP增殖能力明显下降(P<0.05);250 g加力组的加载机械牵张应力的第2、3、4、5天,SCAP增殖能力显著下降(P<0.05)。与200 g组比较,250 g加力组的加载机械牵张应力的第2、3、4、5天,SCAP增殖能力显著下降(P<0.05)。Western blot检测结果显示:加载牵张应力的第5天,与对照组相比,150 g组、200 g组、250 g组成骨分化相关蛋白ALP和OSX和DSP表达均显著升高(P<0.05)。与150 g组相比,200g组ALP、OSX表达差异无统计学意义(P>0.05),DSP表达显著升高(P<0.05);250 g组ALP、OSX、DSP表达均显著降低(P<0.05)。与200 g组相比,250 g组ALP、OSX、DSP表达均显著降低(P<0.05)。Western blot检测显示:加载牵张应力的第5天,与对照组GRP78表达(0.279 展开更多
关键词 机械牵张应力 根尖牙乳头干细胞 增殖 分化 内质网应激
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匹诺塞林对脑缺血再灌注内质网应激凋亡相关基因mRNA表达的影响 被引量：3
5
作者 武彩霞 杜冠华 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第1期34-40,共7页
目的:观察匹诺塞林对大鼠脑缺血再灌注急性期损伤内质网应激凋亡途径相关基因的调控作用。方法:雄性SD大鼠50只,阻塞大脑中动脉建立脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、匹诺塞林1 mg/kg组、3 mg/kg组和10 mg/kg组,其中模型组... 目的:观察匹诺塞林对大鼠脑缺血再灌注急性期损伤内质网应激凋亡途径相关基因的调控作用。方法:雄性SD大鼠50只,阻塞大脑中动脉建立脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、匹诺塞林1 mg/kg组、3 mg/kg组和10 mg/kg组,其中模型组及匹诺塞林各给药组,分别于大脑中动脉阻塞2 h后再灌注同时给药,6 h后取血并断头取脑,取缺血半暗带组织,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法测定GRP78、CHOP、ATF4、XBP-1的mRNA变化。结果:匹诺塞林能增加急性局灶性脑缺血再灌注GRP78 mRNA水平,其中匹诺塞林3 mg/kg、10 mg/组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);匹诺塞林能降低内质网应激凋亡相关蛋白CHOP、ATF4,XBP-1mRNA水平,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:匹诺塞林能抗脑缺血再灌注损伤,其机制可能与保护内质网功能,减少GRP78、CHOP、ATF4及XBP-1相关基因表达有关。 展开更多
关键词 匹诺塞林 内质网应激 脑缺血再灌注 GRP78 CHOP ATF4 XBP-1
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内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力 被引量：1
6
作者 彭荣东 何学敏 +6 位作者 王瑨 文哲瑶 艾鹤英 朱延华 鲁岩 石国军 陈燕铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期809-818,共10页
目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路... 目的:鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子(STING)信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法:通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸(DMXAA)处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系(NIT-1、Min6及beta-TC-6),并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素(TG)诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力。结果:人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异。免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小鼠β细胞的表达量更高。在3种小鼠β细胞系中,只有beta-TC-6细胞具有较显著的STING表达,并能被STING通路激动剂DMXAA激活。TG能同时引起beta-TC-6细胞的内质网应激和STING通路激活;与STING激动剂联合处理可协同抑制细胞的活力。结论:人和小鼠胰岛β细胞及小鼠胰岛β细胞系beta-TC-6均表达STING信号通路的主要组分。在beta-TC-6细胞中,内质网应激能激活STING通路;内质网应激与STING通路可协同作用降低β细胞活力。 展开更多
关键词 糖尿病 干扰素基因刺激因子 单细胞测序 内质网应激 胰岛Β细胞 细胞活力
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内质网应激上调导致机械通气相关性膈肌功能障碍研究
7
作者 张菊梅 吴松林 +3 位作者 关发升 涂锐 李学欣 刘力 《重庆医学》 CAS 2023年第21期3201-3207,3213,共8页
目的研究内质网应激(ERS)在大鼠机械通气相关性膈肌功能障碍(VIDD)中是否上调,以及ERS与膈肌功能障碍的关系。方法将30只无特殊病原体(SPF)级雄性SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸对照组(Con组)、机械通气6 h组(MV6 h组)、机械通气12 h... 目的研究内质网应激(ERS)在大鼠机械通气相关性膈肌功能障碍(VIDD)中是否上调,以及ERS与膈肌功能障碍的关系。方法将30只无特殊病原体(SPF)级雄性SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸对照组(Con组)、机械通气6 h组(MV6 h组)、机械通气12 h组(MV12 h组)、机械通气18 h组(MV18 h组)、机械通气24 h组(MV24 h组),每组6只。达到建模时间后采用RM6240生物信息采集系统测量膈肌功能学相关指标,主要包括复合肌肉动作电位(CMAP)、膈肌疲劳指数、膈肌频率-收缩曲线;苏木素-伊红(HE)染色观察膈肌纤维形态,测量膈肌纤维横截面积;实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)法和Western blot检测ERS标志物C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94),以及膈肌萎缩蛋白肌肉特异性环指蛋白-1(MuRF-1)和肌肉萎缩F盒蛋白(Atrogin-1)的mRNA及蛋白表达水平。结果与Con组比较,各机械通气组大鼠膈肌CMAP幅值和疲劳指数均明显减小(P<0.05),MV12 h组、MV18 h组、MV24 h组大鼠膈肌CMAP时程均明显延长(P<0.05),同一刺激频率下MV18 h组和MV24 h组大鼠膈肌收缩力明显减小(P<0.05),且随着机械通气时间的延长,膈肌CMAP幅值、疲劳指数及收缩力逐渐下降,CMAP时程逐渐延长,且在MV24 h组最为明显。HE染色结果显示,随着机械通气时间延长膈肌纤维萎缩程度加重,肌束内肌纤维排列紊乱,体积减小,形态不规则,细胞间隔略有增宽;与Con组相比,各机械通气组大鼠膈肌纤维横截面积均明显减小(P<0.05)。随着机械通气时间延长,大鼠膈肌萎缩指标MuRF-1和Atrogin-1,以及ERS相关指标CHOP、GRP78、GRP94的mRNA和蛋白表达水平都逐渐升高。结论在机械通气大鼠膈肌中,随着通气时间延长,ERS上调,膈肌功能障碍程度加重,ERS是VIDD的致病因素之一。 展开更多
关键词 机械通气 机械通气相关性膈肌功能障碍 内质网应激 上调
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ADSC-CM干预对小型猪肝损伤模型中内质网应激的影响 被引量：1
8
作者 刘笑凝 焦智慧 +5 位作者 马亚军 张千振 徐嘉元 朴晨曦 张建涛 王洪斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2405-2412,共8页
为探究在小型猪肝脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)合并部分肝切除损伤模型中,脂肪间充质干细胞条件培养液(adipose tissue-derived mesenchymal stem cell condition medium,ADSC-CM)干预对内质网应激(endoplasmic reticulum st... 为探究在小型猪肝脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)合并部分肝切除损伤模型中,脂肪间充质干细胞条件培养液(adipose tissue-derived mesenchymal stem cell condition medium,ADSC-CM)干预对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响,试验选取24头20~30 kg的4~6月龄健康巴马香猪,随机分为模型组、基础培养基对照组(DMEM组)、脂肪间充质干细胞条件培养液组(ADSC-CM组)和脂肪间充质干细胞组(ADSCs组),每组6头。各组均在腹腔镜下进行右半肝缺血60min合并左半肝切除手术,术后即刻4组分别于肝脏局部注射等量的生理盐水、DMEM培养基、ADSC-CM和ADSCs。各组于术前、术后1,3和7d经腹腔镜采取肝脏组织,进行HE染色检测,并对肝脏内质网应激相关通路关键因子的基因水平表达进行检测。肝脏组织病理检测结果显示,与术前相比,4组术后1d的肝脏组织损伤均较严重,其中ADSC-CM组和ADSCs组肝脏组织病理变化较模型组和DMEM组轻微。基因表达水平检测结果与HE结果一致,术后1 d,ADSC-CM组和ADSCs组的GRP78、ATF6、PERK、IRE1、ATF4和CHOP等ERS相关通路蛋白的mRNA表达水平均显著低于模型组和DMEM组。结果表明,肝脏I/R损伤引起的肝细胞过度的ERS可能是导致该手术模型中肝脏损伤的重要原因,而ADSC-CM能通过抑制过度的ERS减轻缺血再灌注后的肝损伤。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 条件培养液 内质网应激 肝脏缺血再灌注 小型猪
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