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减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析 被引量:17
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作者 李茂祥 金奇 +3 位作者 章金钢 曾力宇 殷震 侯云德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期27-31,共5页
克隆了减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株基因组HindⅢ-E片段,并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央58.7~68.9物理图谱单位(mu),片段全长共3194bp。其中含有1个完整的和2个不完整的开放性读码... 克隆了减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株基因组HindⅢ-E片段,并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央58.7~68.9物理图谱单位(mu),片段全长共3194bp。其中含有1个完整的和2个不完整的开放性读码框架(ORF),分别编码pVⅢ蛋白、100K蛋白基因C端和纤维蛋白N末端部分。pVⅢ蛋白基因由753个碱基(nt)组成,编码250个氨基酸(aa),编码产物的分子量为28500。氨基酸水平的同源性比较表明,EDSV的pVⅢ蛋白与禽腺病毒1型(FAV1)及人和其他动物腺病毒pVⅢ蛋白的同源性为28%~36%,而与羊腺病毒(OAV)的同源性高达52%,提示EDSV与OAV间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征,在pVⅢ和纤维蛋白基因之间,应为E3区,但该序列只有245个nt组成,序列中保留了TATABox和polyA信号。但除了2个仅编码49aa和32aa多肽的ORFs外,不编码任何产物,且核苷酸序列与其他腺病毒的E3区无同源性,证实此区无明显E3区样结构。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 PVⅢ 蛋白基因 序列分析
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胶体金快速诊断方法对鸡减蛋综合征病毒的检测 被引量:10
2
作者 王爱华 王玉珠 +1 位作者 孙继国 陈龙宾 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第11期856-858,共3页
选择15 nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,... 选择15 nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,与鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应。表明,该试纸条用于检测EDSV具有快速、操作简便、特异性强等优点,可用于大批量抗原样本的检测。 展开更多
关键词 鸡减蛋综合征病毒 胶体金 检测
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减蛋综合征病毒套式PCR检测技术的研究 被引量:9
3
作者 李文贵 俞乃胜 宋建领 《中国兽医科技》 CSCD 2000年第12期5-8,共4页
从GeneBank的 1段含六邻体蛋白基因、蛋白酶基因、DNA结合蛋白基因的序列中 ,应用Primer软件设计了 2对引物。用这 2对引物在分别对反应体系成分和聚合酶链反应 (PCR)试验条件进行优化后 ,成功地建立了减蛋综合征病毒(EDSV)套式PCR检测... 从GeneBank的 1段含六邻体蛋白基因、蛋白酶基因、DNA结合蛋白基因的序列中 ,应用Primer软件设计了 2对引物。用这 2对引物在分别对反应体系成分和聚合酶链反应 (PCR)试验条件进行优化后 ,成功地建立了减蛋综合征病毒(EDSV)套式PCR检测技术。对鹌鹑源EDSVQAVC 94株、AV xb西北分离株、AV 1 2 7国际标准株扩增结果 ,第一轮PCR得到约2 90bp的特异性片段 ,第二轮PCR得到约 90bp的片段 ,与预期的 2 89bp、89bp的设计相符合。而传染性腔上囊病病毒(IBDV)疫苗株B87、鸡新城疫病毒 (NDV)Ⅳ系疫苗株 (LaSota)和正常尿囊液等对照的扩增结果均未显示任何扩增条带 ,有很好的特异性。所建立的套式PCR检测方法具有特异、灵敏、快速的优点 ,其灵敏度比常规PCR灵敏 10 0倍 ,可检测出 0 .0 1fg的DNA模板。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 套式PCR 诊断
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鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联油佐剂灭活疫苗的研究 被引量:11
4
作者 姜北宇 刘月焕 +3 位作者 郑世兰 景小冬 姚颖 白丽萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期106-113,共8页
用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,1... 用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定,证明本疫苗安全、无任何副作用;免疫10-14 d后产生免疫力;ND部分效检,攻毒100%保护,每羽份含ND效价达50-123 PD50;IB部分效检,免疫21-28 d后攻毒保护率达80%-100%,IB HI效价≥1:64;EDS76效检,免疫后21 d HI效价≥1:128;AE效检,保护率达80%-100%。 展开更多
关键词 新城疫 传染性支气管炎 减蛋综合征 传染性脑脊髓炎 四联油佐剂灭活疫苗
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鸡4种病毒抗原液的浓缩及其四联油佐剂灭活苗的研制 被引量:6
5
作者 吴清民 陈福勇 +5 位作者 张中直 庄文忠 钱凤芹 任红梅 李爱芹 王长法 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期9-11,共3页
本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒的尿囊液进行了 10倍或 10倍以上的浓缩处理 ,并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗 ,对鸡的最小免疫剂量是 0 .2 5ml,免疫... 本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒的尿囊液进行了 10倍或 10倍以上的浓缩处理 ,并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗 ,对鸡的最小免疫剂量是 0 .2 5ml,免疫接种二周后 ,鸡新城疫和产蛋下降综合征病毒的 HI抗体效价分别达到 8log2 和 7log2 以上 ,传染性支气管炎和传染性法氏囊病病毒抗体 S/ P值均在 0 .2以上 ,抗体效价呈现明显的递增 ,抗体水平至少可维持 4个月以上。这一结果证明该试验采用的禽类病毒性抗原的浓缩方法 ,适合鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等不同抗原液的浓缩 。 展开更多
关键词 新城疫病毒 传染性支气管炎病毒 减蛋综合征病毒 传染性法氏囊炎病毒 抗原 浓缩 四联疫苗
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减蛋综合征病毒基因组Hind Ⅲ酶切片段的克隆及酶谱分析 被引量:9
6
作者 胡敬东 章金钢 +3 位作者 李红卫 金扩世 涂长春 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期7-10,共4页
以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法克隆减蛋综合征病毒(EDSV)基因组的HindⅢ酶切片段,用Digoxigenin-dUTP标记的EDSVHindⅢ片段探针打点杂交,证实13个克隆插入了EDSVDNA的HindⅢ片... 以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法克隆减蛋综合征病毒(EDSV)基因组的HindⅢ酶切片段,用Digoxigenin-dUTP标记的EDSVHindⅢ片段探针打点杂交,证实13个克隆插入了EDSVDNA的HindⅢ片段。酶切分析结果表明,克隆到了A、B、F、G、H、I、J7个不同大小的片段,选取含有上述插入片段的、具有代表性的7个相应质粒pUHA、pUHB、pUHF、pUHG、pUHH、pUHI、pUHJ,在分别以BamHI、BglⅡ、ClaⅠ、EcoRI、EcoRV、PstⅠ、SmaⅠ、XbaⅠ、XhoⅠ单酶切的基础上,经适当组合的双酶切,得出各片段存在的单一酶切位点为A:BglⅡ、EcoRV、SmaⅠ、XhoⅠ位点;B:BglⅡ、SmaⅠ位点;F:BglⅡ、EcoRV位点;G:PstⅠ位点;H:0;I:PstⅠ位点;J:EcoRV、XhoⅠ位点。为进一步筛选病毒复制非必需区,构建腺病毒表达载体,以及研究禽类腺病毒的分子生物学特性打下了基础。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 克隆 限制酶图谱分析
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减蛋综合征病毒五邻体重组蛋白的原核表达及抗原性鉴定 被引量:10
7
作者 肖妙 于志丹 +1 位作者 马波 王君伟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期83-87,共5页
根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆载体pMD18-T,经过鉴定后测序。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-l27株... 根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆载体pMD18-T,经过鉴定后测序。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-l27株的五邻体比较有9个碱基突变,但利用DNAstar分析,两者的氨基酸完全一致。然后酶切胶回收后将目的片段连接到质粒表达载体pET-30a(+),获得的阳性克隆命名为pET-30a-Penton。将pET-30a-Penton转化E.coli Rosetta,经37℃、1.0 mmol·L-1 IPTG诱导表达5 h,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,结果显示目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.0 ku。Western Blot试验结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 五邻体 原核表达 抗原性
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减蛋综合征病毒末端片段的克隆及细胞内DNA重组 被引量:4
8
作者 向华 章金刚 +4 位作者 宣华 李茂祥 王国庆 刘振润 万遂如 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期226-229,共4页
采用9~10日龄非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒(EDSV)AA-2毒株,经差速离心法浓缩纯化后,提取病毒基因组DNA。采用碱变性法除去病毒基因组共价结合的末端蛋白(TP)。用限制性内切酶HindⅢ水解纯化的EDSV基... 采用9~10日龄非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒(EDSV)AA-2毒株,经差速离心法浓缩纯化后,提取病毒基因组DNA。采用碱变性法除去病毒基因组共价结合的末端蛋白(TP)。用限制性内切酶HindⅢ水解纯化的EDSV基因组DNA。经低熔点琼脂糖凝胶电泳后,回收C、D、E片段。克隆到pUC19载体的HindⅢ和SmaⅠ双酶切位点及HindⅢ位点上,经蓝白斑筛选和单、双酶切鉴定,获得了pUHC、pUHD、pUHE重组质粒,其中pUHC含有末端片段。将EDSVSalⅠ水解产生并回收的大片段与pUHC在95℃水浴中变性,65℃复性后,用钙离子介导法,共转染50%~70%的单层鸭胚成纤维细胞,转染后36h开始产生细胞病变(CPE)。48h后将病变细胞反复冻融,经尿囊腔接种9~10日龄鸭胚,回收的尿囊液能凝集鸡红细胞,这种血凝性能被EDSV高免血清抑制,电镜下观察到腺病毒样颗粒。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 末端蛋白 末端片段 重组 DNA
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减蛋综合征病毒(EDSV)的分离与鉴定 被引量:5
9
作者 王雪敏 《中国家禽》 北大核心 2002年第20期12-14,共3页
从河北邯郸某鸡场190d未经EDS疫苗免疫的、突然产蛋下降并出现大量软壳蛋、无壳蛋的鸡群中分离到一株病毒,经理化特性鉴定、单抗Dot-ELISA检测、DNA探针斑点杂交,确定分离到的病毒为EDSV。经限制性核酸内切酶酶切分析,表明分离株与EDSV... 从河北邯郸某鸡场190d未经EDS疫苗免疫的、突然产蛋下降并出现大量软壳蛋、无壳蛋的鸡群中分离到一株病毒,经理化特性鉴定、单抗Dot-ELISA检测、DNA探针斑点杂交,确定分离到的病毒为EDSV。经限制性核酸内切酶酶切分析,表明分离株与EDSV标准株AV127属于同一个基因型。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 EDSV 分离 鉴定
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减蛋综合征病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制及初步应用
10
作者 宋亚鹏 孙亚宁 +4 位作者 刘琳 杨继飞 李新生 魏蔷 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第1期125-132,共8页
为建立快速检测减蛋综合征病毒(EDSV)抗体的方法,基于EDSV的Fiber蛋白,制备快速检测EDSV抗体的免疫层析试纸条,为养禽业提供针对病原微生物的感染预警及免疫评估。利用胶体金标记EDSV Fiber蛋白抗原为探针,将羊抗鸡IgG和抗Fiber蛋白的... 为建立快速检测减蛋综合征病毒(EDSV)抗体的方法,基于EDSV的Fiber蛋白,制备快速检测EDSV抗体的免疫层析试纸条,为养禽业提供针对病原微生物的感染预警及免疫评估。利用胶体金标记EDSV Fiber蛋白抗原为探针,将羊抗鸡IgG和抗Fiber蛋白的抗体包被到硝酸纤维膜上,分别作为质控线和检测线,对家禽EDSV抗体水平进行监测。结果表明,制备的EDSV免疫层析试纸条具有高度特异性,与其他家禽病毒抗体无交叉反应,仅与EDSV抗体反应,在试纸条上产生可见的检测线;并且制备的试纸条具有高度稳定性,在室温条件下可至少保存6个月。应用制备的检测EDSV抗体的免疫层析试纸条对从河南、安徽、山东等地养鸡场采集的576份鸡血清样本检测,与血凝抑制试验(HI)结果进行平行比较,二者的Kappa值为0.878,具有良好一致性。综上,制备的检测ESDV抗体的免疫层析试纸条具有高度的特异性、敏感性、稳定性和易操作性,对EDSV抗体的临床检测具有实际应用价值。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 Fiber蛋白 免疫层析试纸 血凝抑制试验
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减蛋综合征病毒33K蛋白基因克隆及结构分析 被引量:5
11
作者 李茂祥 李红卫 +5 位作者 金奇 章金刚 余兴龙 吕宗吉 侯云德 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期221-225,共5页
纯化的减蛋综合征病毒(EDSV)DNA经HindⅢ水解、0.8%琼脂糖电泳后,回收各DNA条带并克隆至pBluescriptKS载体,建立了EDSV基因文库,对33K蛋白基因进行了分析。本研究证实,EDSV33K蛋白... 纯化的减蛋综合征病毒(EDSV)DNA经HindⅢ水解、0.8%琼脂糖电泳后,回收各DNA条带并克隆至pBluescriptKS载体,建立了EDSV基因文库,对33K蛋白基因进行了分析。本研究证实,EDSV33K蛋白基因含有2个外显子,与羊腺病毒(OAV)33K蛋白比较,N端编码产物的同源性为30.8%,C端的为60%。用RT-PCR扩增33KmRNA和cDNA克隆及序列分析证实,EDSV33K蛋白含有82碱基(nt)的内含子,去掉内含子33K蛋白基因能形成完整的ORF,其编码产物由177氨基酸(aa)组成,推测分子质量为2.06×104,与人5型腺病毒和OAV的同源性分别为28.1%和44.7%。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 33K蛋白 禽腺病毒 克隆 内含子
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减蛋综合征病毒六邻体重组蛋白的表达和初步应用 被引量:4
12
作者 汪铭书 程安春 +1 位作者 郭万柱 陈孝跃 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期58-61,共4页
The plasmid PE which harbored the whole hexon-encoding gene of egg drop syndrome virus(EDSV) was identified and the hexon protein gene was obtained from it by restriction endonucleases.The gene was then directionally ... The plasmid PE which harbored the whole hexon-encoding gene of egg drop syndrome virus(EDSV) was identified and the hexon protein gene was obtained from it by restriction endonucleases.The gene was then directionally inserted into the PphI/KpnI sites of pQE32 and fused with the 6×His gene.This recombinant plasmid was transformed into E.coli M15 for expression and induced with IPTG.It was demonstrated by SDS-PAGE and Western blot that one expressed protein,110kD in size,could be specifically recognized by polyclonal anti-EDSV serum.The objective product was principally soluble and accounted for 21% of the total cellular proteins.The protein was used to detect the existence of antiEDSV IgG in 41 clinical chicken sera by agar diffusion test,and the result was in accordance with that when EDSV was used as antigen.These results showed that the expressed hexon recombinant protein can be used as diagnostic antigen of EDSV. 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 六邻体蛋白基因 表达 诊断抗原 应用
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鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立 被引量:5
13
作者 孙敏华 李林林 +3 位作者 董嘉文 袁建丰 邝瑞欢 胡奇林 《广东畜牧兽医科技》 2015年第1期29-33,共5页
参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对... 参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过检测两种病毒感染的阳性病料各10份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100%。这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 产蛋下降综合征病毒 二重PCR
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应用降落PCR检测减蛋综合征病毒的研究 被引量:2
14
作者 张春杰 李银聚 +2 位作者 程相朝 吴庭才 郑祥海 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第7期11-13,共3页
根据已发表的减蛋综合征病毒 (EDSV)核苷酸序列设计了 1对扩增长度为 1 .1kb左右的引物 ,采取降落PCR对EDSV gDNA进行扩增。结果 ,从 2份EDSV鸭胚尿囊液、3份人工感染鸡输卵管组织液的核酸抽提物中 ,均扩增出与设计大小完全一致的目的片... 根据已发表的减蛋综合征病毒 (EDSV)核苷酸序列设计了 1对扩增长度为 1 .1kb左右的引物 ,采取降落PCR对EDSV gDNA进行扩增。结果 ,从 2份EDSV鸭胚尿囊液、3份人工感染鸡输卵管组织液的核酸抽提物中 ,均扩增出与设计大小完全一致的目的片段 ,而对照样品的扩增均为阴性 ,该方法最低可检测到 32pg的EDSV gDNA。表明该降落PCR用于检测EDSV特异性和敏感性均较强 。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 降落PCR 检测 特异性 敏感性 诊断 蛋鸡
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减蛋综合征病毒100K蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:2
15
作者 李茂祥 金奇 +4 位作者 章金钢 曾力宇 姚二梅 殷震 侯云德 《中国病毒学》 CSCD 1998年第2期160-165,共6页
用常规方法提取减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株(AA2株)病毒DNA,分别构建了限制性内切酶HindⅢ、SphⅠ、PstⅠ水解片段的全基因文库,并对其中100K蛋白基因的序列进行了分析。EDSV100K蛋白基因... 用常规方法提取减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株(AA2株)病毒DNA,分别构建了限制性内切酶HindⅢ、SphⅠ、PstⅠ水解片段的全基因文库,并对其中100K蛋白基因的序列进行了分析。EDSV100K蛋白基因位于减蛋综合征病毒基因组55.7~64.8物理图谱单位(m.u),共2091个核苷酸(nt),其编码产物由696个氨基酸(aa)组成,推测其分子量为77.7kD。编码蛋白氨基酸同源性分析表明,EDSV100K蛋白与人腺病毒(Ad2、Ad5、Ad12、Ad41)、Ⅰ群禽腺病毒(CELO和FAV10)的同源性为32.3~34.4%之间,而与羊腺病毒(OAV)的同源性达到56.4%。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 DNA 序列分析 100K蛋白 克隆
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鸡产蛋下降综合征病毒内蒙分离株的生物学特性研究 被引量:4
16
作者 关平原 田丽英 +3 位作者 申之义 李平安 张七斤 霍澍田 《中国家禽》 北大核心 1999年第3期6-8,共3页
对鸡产蛋下降综合征病毒内蒙古地区分离株进行了生物学特性测定和血清学鉴定,结果表明,B4、N3株与127株均能抵抗乙醚、氯仿和胰蛋白酶,而在对酸、碱、温度及甲醛的稳定性测定中,N3株EDS76病毒对这些因素抵抗力强于B... 对鸡产蛋下降综合征病毒内蒙古地区分离株进行了生物学特性测定和血清学鉴定,结果表明,B4、N3株与127株均能抵抗乙醚、氯仿和胰蛋白酶,而在对酸、碱、温度及甲醛的稳定性测定中,N3株EDS76病毒对这些因素抵抗力强于B4株和127株,而B4株和127株EDS76病毒对这些因素的抵抗力基本相同,说明不同EDS76病毒株间理化特性上存在有差异。血清学试验结果表明,B4、N3株与127株EDS76病毒的血清学关系非常相近。 展开更多
关键词 EDS76 病毒 理化特性 生物学特性
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鸡产蛋下降综合症病毒的血凝特性测定 被引量:4
17
作者 李梅 李永明 +2 位作者 吴彤 周碧君 苟万里 《贵州畜牧兽医》 1998年第1期3-5,共3页
本试验旨在探讨EDS病毒血凝反应的最佳反应条件,观察病毒对各种动物红细胞的凝集谱,测定各种因素对病毒血凝素的影响。结果表明,血凝反应宜采用1%的鸡红血球,稀释液用pH7的生理盐水,室温作用35min(分钟)后观察结果;该病毒能凝集鸡,鸭,... 本试验旨在探讨EDS病毒血凝反应的最佳反应条件,观察病毒对各种动物红细胞的凝集谱,测定各种因素对病毒血凝素的影响。结果表明,血凝反应宜采用1%的鸡红血球,稀释液用pH7的生理盐水,室温作用35min(分钟)后观察结果;该病毒能凝集鸡,鸭,鹅红细胞,而不能凝集哺乳动物红细胞;耐热,56℃1h不影响其血凝性;对胰酶和浓度大于0.4%的甲醛敏感;反复冻融8次对血凝效价无影响。 展开更多
关键词 鸡病 减蛋综合症 病毒 血凝谱 血凝效价
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减蛋综合征病毒的分子生物学 被引量:3
18
作者 李文贵 俞乃胜 尹革芬 《畜牧兽医杂志》 2000年第3期10-14,共5页
减蛋综合征病毒具有典型的腺病毒形态结构 ,其基因组长 3 3 .2 kb,分子量为 2 2 .6× 1 0 6Da,各地分离株间有变异。以 DNA复制为界 ,EDSV基因组分为早期 E区(包括 EIb、E2 a、E2 b、E3和 E4区 )和晚期 L区 (L1-L5区 ) ,早期区编码... 减蛋综合征病毒具有典型的腺病毒形态结构 ,其基因组长 3 3 .2 kb,分子量为 2 2 .6× 1 0 6Da,各地分离株间有变异。以 DNA复制为界 ,EDSV基因组分为早期 E区(包括 EIb、E2 a、E2 b、E3和 E4区 )和晚期 L区 (L1-L5区 ) ,早期区编码病毒复制所必需的酶类 ;晚期区编码五邻体、六邻体等主要结构蛋白 ,以及 DNA结合蛋白、末端前体蛋白等病毒包装蛋白。EDSV分子生物学的深入研究为建立本病的诊断与防制技术 ,开发理想的表达载体系统 。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 分子生物学 病毒基因组
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产蛋下降综合征病毒PCR检测方法的建立 被引量:3
19
作者 刘大程 周伟光 +1 位作者 关平原 张孝荣 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第11期56-59,共4页
根据已报道的腺病毒DNA序列 ,设计合成了 1对核苷酸引物 ,引物间隔约 63 0bp。用该引物对EDS76病毒内蒙古分离株 (N3 ,N4 )和参考株 (AV 1 2 7)核酸进行聚合酶链式反应 (PCR)。结果 ,均扩增出了约 63 0bp的特异性DNA片段。所建立的PCR... 根据已报道的腺病毒DNA序列 ,设计合成了 1对核苷酸引物 ,引物间隔约 63 0bp。用该引物对EDS76病毒内蒙古分离株 (N3 ,N4 )和参考株 (AV 1 2 7)核酸进行聚合酶链式反应 (PCR)。结果 ,均扩增出了约 63 0bp的特异性DNA片段。所建立的PCR方法可检出 1 0 0pg的样品模板。结果表明 ,此PCR方法是检测EDS76病毒的一种简便快速。 展开更多
关键词 产蛋下降综合征病毒 PCR 检测
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TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用 被引量:3
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作者 马震原 李刚 +1 位作者 李文超 郭宇飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期767-772,共6页
根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方... 根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达10copies.μL-1,在1.0×102~1.0×108copies.μL-1检测范围间有良好的线性关系,特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法检测感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物,与普通PCR相比,该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性,可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。 展开更多
关键词 鸡产蛋下降综合征病毒 TAQMAN探针 荧光实时定量PCR 临床检测
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