期刊导航
期刊开放获取
cqvip
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
与猪流行性腹泻病毒M蛋白互作的宿主蛋白的鉴定
被引量：
3
1
作者
王瑞阳
于瑞嵩
+5 位作者
陈冰清
李凤平
谢春芳
司伏生
董世娟
李震
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期1434-1442,共9页
【背景】猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)膜蛋白(M)在病毒粒子的组装、膜融合和病毒复制等方面具有重要的作用,但M蛋白与宿主细胞的互作机制尚不清楚。【目的】利用免疫沉淀技术和液质联用技术筛选细胞内与PEDV...
【背景】猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)膜蛋白(M)在病毒粒子的组装、膜融合和病毒复制等方面具有重要的作用,但M蛋白与宿主细胞的互作机制尚不清楚。【目的】利用免疫沉淀技术和液质联用技术筛选细胞内与PEDVM蛋白相互作用的蛋白,为揭示M蛋白在病毒增殖过程中发挥的功能提供研究基础。【方法】将MOI=0.1的PEDV DR13疫苗株接种于长成单层的Vero细胞,感染36 h后,收集细胞并进行裂解。利用抗M的单克隆抗体沉淀与M相互作用蛋白复合物,通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进行鉴定并利用细胞功能富集分析(Gene ontology,GO)对感染组鉴定到的细胞蛋白进行分析,确定两个细胞内源性蛋白为候选蛋白,进行免疫共沉淀(Co-IP)验证和共定位分析。【结果】基于鉴定蛋白的肽段数的方法分析显示,感染组与对照组相比,鉴定了218个与M蛋白相互作用的细胞内源性蛋白,分别与蛋白质合成、代谢、细胞信号通路转导等密切相关,选择细胞分裂周期蛋白42 (Cell division cycle 42,CDC42)、真核翻译起始因子3亚基L蛋白(eIF3L)为候选蛋白进行Co-IP(Co-immunoprecipitation)验证和共定位分析,结果证实CDC42、eIF3L蛋白分别与M蛋白在细胞内存在相互作用。【结论】鉴定出PEDV M蛋白能够与宿主细胞CDC42和eIF3L蛋白相互作用,并鉴定出其他可能与M蛋白发生相互作用的宿主蛋白60个,为开展PEDV与宿主细胞蛋白相互作用研究提供了重要理论依据。
展开更多
关键词
免疫共沉淀
猪流行性腹泻病毒
CDC42
eif
3
l
膜蛋白
蛋白互作
原文传递
新疆细毛羊eIF3l基因的克隆、原核表达及蛋白检测
2
作者
于常江
沈敏
+3 位作者
杨华
杨永林
祁成年
张云生
《畜牧与兽医》
北大核心
2017年第8期16-20,共5页
为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核...
为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核表达和蛋白检测。结果显示:完整获得eIF3l基因1 695 bp,共编码564个氨基酸残基;37℃,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3.5 h可形成大量包涵体蛋白,其分子量约为69 ku;Western blot鉴定目的蛋白表达正确。结果表明:新疆细毛羊eIF3l基因原核表达成功,为进一步研究其功能和应用提供了科学数据。
展开更多
关键词
新疆细毛羊
eif
3
l
基因
载体构建
原核表达
原文传递
题名
与猪流行性腹泻病毒M蛋白互作的宿主蛋白的鉴定
被引量：
3
1
作者
王瑞阳
于瑞嵩
陈冰清
李凤平
谢春芳
司伏生
董世娟
李震
机构
上海海洋大学水产与生命学院
上海市农业科学院畜牧兽医研究所
上海农业遗传育种重点实验室
上海种猪工程技术研究中心
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期1434-1442,共9页
基金
国家自然科学基金(31602060)
上海市农业科学院学科领域建设专项(31602060-2016匹配)
+1 种基金
国家重点研发计划(2016YFD0500101)
上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2015)第6-1-9号)~~
文摘
【背景】猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)膜蛋白(M)在病毒粒子的组装、膜融合和病毒复制等方面具有重要的作用,但M蛋白与宿主细胞的互作机制尚不清楚。【目的】利用免疫沉淀技术和液质联用技术筛选细胞内与PEDVM蛋白相互作用的蛋白,为揭示M蛋白在病毒增殖过程中发挥的功能提供研究基础。【方法】将MOI=0.1的PEDV DR13疫苗株接种于长成单层的Vero细胞,感染36 h后,收集细胞并进行裂解。利用抗M的单克隆抗体沉淀与M相互作用蛋白复合物,通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进行鉴定并利用细胞功能富集分析(Gene ontology,GO)对感染组鉴定到的细胞蛋白进行分析,确定两个细胞内源性蛋白为候选蛋白,进行免疫共沉淀(Co-IP)验证和共定位分析。【结果】基于鉴定蛋白的肽段数的方法分析显示,感染组与对照组相比,鉴定了218个与M蛋白相互作用的细胞内源性蛋白,分别与蛋白质合成、代谢、细胞信号通路转导等密切相关,选择细胞分裂周期蛋白42 (Cell division cycle 42,CDC42)、真核翻译起始因子3亚基L蛋白(eIF3L)为候选蛋白进行Co-IP(Co-immunoprecipitation)验证和共定位分析,结果证实CDC42、eIF3L蛋白分别与M蛋白在细胞内存在相互作用。【结论】鉴定出PEDV M蛋白能够与宿主细胞CDC42和eIF3L蛋白相互作用,并鉴定出其他可能与M蛋白发生相互作用的宿主蛋白60个,为开展PEDV与宿主细胞蛋白相互作用研究提供了重要理论依据。
关键词
免疫共沉淀
猪流行性腹泻病毒
CDC42
eif
3
l
膜蛋白
蛋白互作
Keywords
Co-IP
PEDV
CDC42
eif
3
l
Membrane protein
Protein-protein interaction
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
新疆细毛羊eIF3l基因的克隆、原核表达及蛋白检测
2
作者
于常江
沈敏
杨华
杨永林
祁成年
张云生
机构
塔里木大学动物科学学院
绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2017年第8期16-20,共5页
基金
国家"863"计划(2013AA102506)
国家自然科学基金项目(30960249)
兵团种质资源创新与功能基因发掘及利用专项(2012BB044)
文摘
为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核表达和蛋白检测。结果显示:完整获得eIF3l基因1 695 bp,共编码564个氨基酸残基;37℃,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3.5 h可形成大量包涵体蛋白,其分子量约为69 ku;Western blot鉴定目的蛋白表达正确。结果表明:新疆细毛羊eIF3l基因原核表达成功,为进一步研究其功能和应用提供了科学数据。
关键词
新疆细毛羊
eif
3
l
基因
载体构建
原核表达
Keywords
Xinjiang Fine-woo
l
sheep
eif
3
l
gene
vector construction
prokaryotic expression
分类号
S826 [农业科学—畜牧学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
与猪流行性腹泻病毒M蛋白互作的宿主蛋白的鉴定
王瑞阳
于瑞嵩
陈冰清
李凤平
谢春芳
司伏生
董世娟
李震
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
原文传递
2
新疆细毛羊eIF3l基因的克隆、原核表达及蛋白检测
于常江
沈敏
杨华
杨永林
祁成年
张云生
《畜牧与兽医》
北大核心
2017
0
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
