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DUSP8通过JNK/p38 MAPK通路来改善LPS诱导的巨噬细胞炎症反应 被引量:4
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作者 王潇娅 徐庆宝 何家全 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期229-235,共7页
双特异性磷酸酶8(dual-specificity phosphatase 8,DUSP8)是双特异性蛋白磷酸酶家族的成员之一,被报道参与多个疾病发生过程。然而,DUSP8是否参与巨噬细胞等免疫细胞炎性应答过程,目前仍未有研究证实。本研究旨在检测DUSP8在脂多糖(LPS... 双特异性磷酸酶8(dual-specificity phosphatase 8,DUSP8)是双特异性蛋白磷酸酶家族的成员之一,被报道参与多个疾病发生过程。然而,DUSP8是否参与巨噬细胞等免疫细胞炎性应答过程,目前仍未有研究证实。本研究旨在检测DUSP8在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症反应中的表达,并探讨过表达DUSP8在巨噬细胞炎症反应的作用。利用100 ng/mL LPS刺激野生型C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),分别在不同时间点收取细胞,实时PCR和Western印迹检测发现LPS处理后,BMDM中DUSP8的表达水平明显降低(P<0.05),且在12 h达到最低值;随后,分别转染DUSP8过表达载体(DUSP8-EGFP)和对照载体(EGFP)于BMDM,Western印迹检测发现DUSP8-EGFP转染能够显著上调DUSP8的表达水平(P<0.05);进一步用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测发现DUSP8过表达使巨噬细胞表面分子CD80和CD86的表达显著下调(P<0.05);同时,中性红吞噬实验结果显示,DUSP8过表达后巨噬细胞的吞噬能力明显降低(P<0.05);此外,ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)检测结果显示,过表达DUSP8显著降低IL-1β,IL-6的表达水平(P<0.05);最后,Western印迹结果显示,JNK和p38 MAPK的磷酸化水平在DUSP8过表达组中明显降低(P<0.05)。以上表明,DUSP8过表达可显著改善LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,其机制主要通过抑制JNK和p38 MAPK的活化。 展开更多
关键词 双特异性磷酸酶8 巨噬细胞 炎症
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双特异性磷酸酶3在肿瘤中的作用
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作者 宋妮妮 杨澍均 欧阳桂芳 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第4期507-512,共6页
双特异性磷酸酶3(dual-specificity phosphatase 3,DUSP3)是一种双特异性蛋白酪氨酸磷酸酶,其不仅可使磷酸酪氨酸残基去磷酸化,同时也能使磷酸丝/苏氨酸残基去磷酸化。因此,DUSP3具有多样的底物特异性,除了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-a... 双特异性磷酸酶3(dual-specificity phosphatase 3,DUSP3)是一种双特异性蛋白酪氨酸磷酸酶,其不仅可使磷酸酪氨酸残基去磷酸化,同时也能使磷酸丝/苏氨酸残基去磷酸化。因此,DUSP3具有多样的底物特异性,除了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)ERK、JNK和p38底物外,还可以作用于其他信号通路的蛋白质,通过MAPK依赖性或非依赖性机制参与细胞周期调控、细胞增殖、衰老、凋亡、迁移以及血管生成、基因组稳定性等多种生物学反应,与肿瘤的发生发展密切相关,是一个潜在的有价值的治疗靶点。本文就DUSP3的生物学特征及其在肿瘤研究中的进展进行了综述。 展开更多
关键词 双特异性磷酸酶3 丝裂原活化蛋白激酶 肿瘤
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双特异性磷酸酶家族与胚胎发育的研究现状
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作者 张冉 王经锁 +4 位作者 陈亚芬 李沈蔚 张怀灿 纪威 王海英 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期3664-3668,共5页
胚胎发育是各组织器官及系统形成的主要阶段,胚胎发育的异常会导致胚胎出现畸形,甚至死亡,许多因素都参与此过程的发生。双特异性磷酸酶(DUSP)可以通过多种信号通路调节不同细胞的生长发育,且DUSP家族与胚胎发育有着重要联系。DUSP家族... 胚胎发育是各组织器官及系统形成的主要阶段,胚胎发育的异常会导致胚胎出现畸形,甚至死亡,许多因素都参与此过程的发生。双特异性磷酸酶(DUSP)可以通过多种信号通路调节不同细胞的生长发育,且DUSP家族与胚胎发育有着重要联系。DUSP家族及其下游丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在配子形成过程、消化系统发育和胚胎期耳部发育中起到关键的调节作用;dusp27又是一个极为重要的基因,在胚胎早期发育中的作用有待研讨,但其对胚胎肌肉组织的发育发挥了重要作用。本文就DUSP家族对以上几个系统的发育进行综述,以期为了解胚胎发育疾病的机制提供理论依据。 展开更多
关键词 双特异性磷酸酶(dusp) 胚胎发育 耳部发育 dusp27 肌肉组织
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miR-146b-5p对骨肉瘤细胞增殖抑制及克隆形成的机制研究 被引量:2
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作者 姜富祥 阿尔宾 +1 位作者 高飞 王兴 《现代检验医学杂志》 CAS 2022年第3期37-42,104,共7页
目的检测骨肉瘤组织中miR-146b-5p表达,探究其对骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖、克隆形成的影响及潜在分子作用机制。方法选取2018年1月~2020年12月内蒙古自治区巴彦淖尔市医院病理科30组临床骨肉瘤组织及邻近正常组织标本,采用实时... 目的检测骨肉瘤组织中miR-146b-5p表达,探究其对骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖、克隆形成的影响及潜在分子作用机制。方法选取2018年1月~2020年12月内蒙古自治区巴彦淖尔市医院病理科30组临床骨肉瘤组织及邻近正常组织标本,采用实时荧光定量PCR实验(qRT-PCR)法检测组织中miR-146b-5p表达水平;通过介导转染miR-146b-5p mimics和miR-146b-5p ASO分别过表达和敲低miR-146b-5p表达,探究其对骨肉瘤细胞增殖及克隆形成的影响。通过生物学信息数据库预测miR-146b-5p的潜在靶基因,荧光素酶实验验证两者结合关系,分析miR-146b-5p对靶基因的调控作用。分析靶基因在骨肉瘤中的表达特征及与miR-146b-5p的相关性,通过细胞增殖实验验证两者的调控作用,以其探究在骨肉瘤中发挥功能的潜在分子机制。结果骨肉瘤组织中miR-146b-5p表达(4.096±1.237)显著低于邻近正常组织(5.895±0.834),差异有统计学意义(t=6.605,P<0.001)。miR-146b-5p过表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖能力(t=13.233~34.599,均P<0.01)。miR-146b-5p过表达组克隆形成数目(48.912±2.032)较对照组(160.834±9.031)明显降低,差异有统计学意义(t=20.942,P<0.001)。DUSP16是miR-146b-5p的潜在靶基因,miR-146b-5p负向调控双特异性磷酸酶(dual specificity phosphatase 16,DUSP16)表达。骨肉瘤组织中DUSP16表达(5.683±0.457)较邻近正常组织(4.665±0.531)显著升高,差异有统计学意义(t=7.959,P<0.001),与miR-146b-5p表达呈负相关(r=-0.667,P<0.05)。共转染过表达DUSP16逆转了miR-146b-5p对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用。miR-146b-5p过表达组P21水平(4.995±0.214)较对照组(1.001±0.002)显著升高,差异有统计学意义(t=32.325,P<0.001);当共转染DUSP16过表达后,P21表达(0.986±0.012)较单独过表达miR-146b-5p组(4.995±0.214)显著降低,差异有统计学意义(t=32.398,P<0.001)。结论骨肉瘤组织中miR-146b-5p显著低表达,其过表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖及克隆� 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小核糖核酸-146b-5p 双特异性磷酸酶16 增殖 克隆形成
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罗格列酮保护氧糖剥夺复氧PC12细胞通过减少HMGB1释放和上调DUSP
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作者 王莉 张美杰 +5 位作者 李文静 毛森林 刘美玲 黄山 蔡灵钰 俞春江 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2019年第6期541-545,共5页
目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对氧葡萄糖剥夺/复氧处理后大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用及机制。方法建立氧葡萄糖剥夺/复氧细胞模型,给予不同浓度罗格列酮及PPAR-γ特异性抑制剂GW9662,MTT法检测细胞存活率;EL... 目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对氧葡萄糖剥夺/复氧处理后大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用及机制。方法建立氧葡萄糖剥夺/复氧细胞模型,给予不同浓度罗格列酮及PPAR-γ特异性抑制剂GW9662,MTT法检测细胞存活率;ELISA法检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)浓度;Western blot法检测双特异性蛋白磷酸酶8(Dual-specificity Phosphotase,DUSP8)、Bcl-xl、PPARγ以及RAGE蛋白表达水平。结果OGD10h/R24 h后,DUSP8、Bcl-xl及PPARγ蛋白水平明显降低,RAGE和HMGB1水平明显增高(P<0.05);罗格列酮干预后,DUSP8、Bcl-xl及PPARγ蛋白水平明显增加,RAGE和HMGB1水平下降(P<0.05)。罗格列酮上调DUSP8、Bcl-xl及下调HMGB1、RAGE的作用可被GW9662有效抑制。结论罗格列酮通过上调PC12细胞OGD/R后的PPARγ蛋白表达,继而增加DUSP8和Bcl-xl抗凋亡蛋白的表达并减少晚期炎症介质HMGB1的分泌,是PPARγ激动剂保护氧糖剥夺复氧细胞的机制,PPARγ有望成为治疗脑缺血再灌注损伤的靶标。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖激活受体Γ 氧葡萄糖剥夺/复氧 高迁移率族蛋白B1 双特异性蛋白磷酸酶8
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microRNA-23a对氟暴露大鼠成骨肉瘤细胞成骨活性的影响及靶基因验证 被引量:3
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作者 杨璐珲 陈宣好 +2 位作者 卢明丽 王楠兰 韦艳 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期753-758,共6页
目的探讨miR-23a对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞成骨活性的影响并验证其靶基因。方法体外培养UMR-106细胞,分别转染miR-23a的激动剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),再以0、80μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后利用实时荧光定量PCR(q... 目的探讨miR-23a对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞成骨活性的影响并验证其靶基因。方法体外培养UMR-106细胞,分别转染miR-23a的激动剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),再以0、80μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-23a、Ⅰ型胶原(COL1)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达水平;培养96 h后利用免疫蛋白印记法(Western blot)检测COL1、OPN、Runx2蛋白的表达水平;体外培养人胚胎肾细胞(293T),利用双荧光素酶报告基因法验证miR-23a可能的靶基因。结果与空白对照组相比,NaF组UMR-106细胞miR-23a、COL1、OPN、Runx2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与激动剂对照组比较,过表达组miR-23a mRNA表达水平明显上升、COL1 mRNA表达明显降低(P<0.05),Runx2、OPN mRNA表达变化不显著(P>0.05);与抑制剂对照组相比,抑制组miR-23a、COL1、OPN、Runx2 mRNA表达明显降低(P<0.05)。与激动剂对照组比较,过表达组Runx2、OPN蛋白表达水平明显升高(P<0.05),COL1蛋白表达水平变化不显著(P>0.05);与抑制剂对照组相比,抑制组COL1、OPN、Runx2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与过表达组比较,过表达+NaF组OPN mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),COL1、Runx2变化不显著;与抑制组比较,抑制+NaF组COL1、OPN、Runx2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。过表达miR-23a后的293T细胞中双特异性磷酸酶5(DUSP5 mRNA)和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),抑制mi R-23a后DUSP5表达水平均明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告确定DUSP5为miR-23a的靶基因。结论miR-23a能促进染氟UMR-106细胞中成骨活性基因的表达;DUSP5是miR-23a的靶基因。 展开更多
关键词 氟化物 大鼠成骨肉瘤细胞(UMR-106) miR-23a 成骨活性 双特异性磷酸酶5
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长链非编码RNA双特异性磷酸酶5假基因1对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的作用 被引量:2
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作者 曹亚伟 桂百卉 《转化医学杂志》 2020年第1期12-16,共5页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)双特异性磷酸酶5假基因1(dual-specificity phosphatase 5 pseudogene 1,DUSP5P1)对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞生物学行为的作用。方法采用实时荧光定量... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)双特异性磷酸酶5假基因1(dual-specificity phosphatase 5 pseudogene 1,DUSP5P1)对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞生物学行为的作用。方法采用实时荧光定量PCR法检测TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1、MDA-MB-468及正常人乳腺导管上皮细胞MCF-10A中lncRNA DUSP5P1的表达水平;将MDA-MB-231细胞系分为对照组、sh-vector组和sh-DUSP5P1组,分别不感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-DUSP5P1-慢病毒(lentivirus,lenti)。采用MTT实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western Blot实验检测上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin、Snail的表达。结果TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1及MDA-MB-468中lncRNA DUSP5P1的表达水平均明显高于正常人乳腺导管上皮细胞系MCF-10A(F=65.10,P<0.05)。细胞培养12、24、48、72 h后,sh-DUSP5P1组吸光度值(OD 490值)明显低于对照组和sh-vector组(分别F=33.62,90.72,41.17,77.94;均P<0.05)。细胞培养7 d后,与对照组和sh-vector组比较,sh-DUSP5P1组克隆形成数明显下降(F=575.1,P<0.05)。敲减DUSP5P1后,TNBC细胞系MDA-MB-231侵袭和迁移能力明显下降(分别F=933.30,160.20;均P<0.05),上皮标志物E-cadherin明显上升(F=6.21,P<0.05),间质标志物Vimentin和Snail明显下降(分别F=100.11,227.37;均P<0.05)。结论LncRNA DUSP5P1可能通过上皮间质转化过程促进TNBC细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 长链非编码RNA 双特异性磷酸酶5假基因1
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宿主转录标志物GBP5、DUSP3和KLF2的研究进展
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作者 韩婷婷 陈秋奇 邓国防 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第2期193-196,共4页
结核病依旧是全球特别是发展中国家重要的公共卫生问题,严重威胁着人类的健康,为实现世界卫生组织2035年“终止结核病”的目标,人们迫切需要新型、快速、准确、价格低廉的结核病诊断和监测治疗反应的技术。研究表明,基因宿主转录标志物... 结核病依旧是全球特别是发展中国家重要的公共卫生问题,严重威胁着人类的健康,为实现世界卫生组织2035年“终止结核病”的目标,人们迫切需要新型、快速、准确、价格低廉的结核病诊断和监测治疗反应的技术。研究表明,基因宿主转录标志物鸟苷酸结合蛋白5(guanylate binding protein5,GBP5)、双特异性磷酸酶3(dual specificity phosphatase3,DUSP3)、Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor2,KLF2)可改善结核病的临床诊断并用于结核病治疗监测。为更好地认识其临床意义,笔者从GBP5、DUSP3和KLF23基因宿主转录标志物的发现、发展、临床价值和局限性等方面进行综述,以供读者参考借鉴。 展开更多
关键词 结核 鸟苷酸结合蛋白5 双特异性磷酸酶3 Krüppel样转录因子2
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