大黄素-BSA不同表位构型的免疫原性和特异性研究 被引量：14

1

作者 李丽华 刘文泰 +4 位作者 戴军 窦玉红 王茹 刘艳臣 彭洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期419-422,共4页

目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法... 目的:研究不同偶联法制备大黄素-BSA的大黄素表位构型及其免疫原性和特异性。方法:用重氮化对氨基苯甲酸偶联法和琥珀酸酐偶联法制备两种不同表位构型的大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗原,免疫小鼠制备抗血清,用醋酸纤维素膜双向免疫扩散法检测免疫原性及其抗体特异性。结果:大黄素-BSA1和大黄素-BSA2抗血清与大黄素反应的抗体效价分别为1∶144 0±357.771和1∶440±219.089,二者有极显著性差异(P=0.006)。分别与大黄素等五种蒽醌类化合物反应,前者对大黄素有较高特异性,抗原结合效价可达1∶1 843.2±457.947。后者对大黄素的特异性较低,结合效价仅为1∶8.8±4.382。结论:两种偶联法制备大黄素-BSA的表位构型不同,其免疫原性和特异性存在着显著差异。重氮化对氨基苯甲酸偶联法制备大黄素-BSA的免疫原性较高、大黄素特异性较强。 展开更多

关键词 抗原抗体反应 双向免疫扩散法 大黄素 半抗原-载体偶联法 表位

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蛇毒降纤酶多克隆抗体的制备及其某些性质 被引量：5

2

作者 赵会英 郑俊民 +2 位作者 卞生杰 韩珍珍 潘妍 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期57-58,共2页

为制备长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的多克隆抗体 ,以期获得酶免疫测定所需的反应试剂 ,供药剂学的研究应用。经免疫兔获得高效价的抗长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的抗血清 ,以环状沉淀反应、琼脂免疫双扩散 ,以及酶联免疫吸附法 ,验证了产生... 为制备长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的多克隆抗体 ,以期获得酶免疫测定所需的反应试剂 ,供药剂学的研究应用。经免疫兔获得高效价的抗长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶的抗血清 ,以环状沉淀反应、琼脂免疫双扩散 ,以及酶联免疫吸附法 ,验证了产生的抗体。免疫双扩散及ELISA测定的结果表明 ,长白山白眉蝮蛇蛇毒降纤酶与日本克栓酶有着不同的抗原决定簇结构。 3只兔的抗血清以 1∶7 2万的倍数稀释时 ,其在ELISA测定中的光密度 (OD4 90nm)仍比空白对照高出 0 2以上 ,具有较高效价 ;该抗体与精制蝮蛇抗栓酶有一定的交叉反应 (比率为 0 0 2 4) ,与江浙蝮蛇蛇毒粗品及日本克栓酶间的交叉反应微小 (比率小于 0 0 0 1) 。 展开更多

关键词 长白山白眉蝮蛇 蛇毒降纤酶 多克隆抗体 免疫双扩散 酶联免疫吸附法

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3种免疫学方法对肺炎球菌结合物及其中间品的多糖抗原性研究 被引量：3

3

作者 刘方蕾 候亚莉 +7 位作者 吴兵 刘佳 王欣茹 于旭博 慕艳红 刘爱萍 赵志强 谢贵林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期471-475,共5页

目的：对肺炎球菌结合物及其制备过程中间品进行多种方法抗原性监控，以期对肺炎球菌结合物制备过程中多糖抗原性进行差异分析，进而为制备工艺参数的选择提供重要参考指标。方法用已建立的免疫双扩散法、抑制ELISA、速率比浊法对23 F... 目的：对肺炎球菌结合物及其制备过程中间品进行多种方法抗原性监控，以期对肺炎球菌结合物制备过程中多糖抗原性进行差异分析，进而为制备工艺参数的选择提供重要参考指标。方法用已建立的免疫双扩散法、抑制ELISA、速率比浊法对23 F型肺炎球菌结合物制备过程中间品和结合物进行抗原性分析；对不同方法结果比较、综合分析23 F型肺炎球菌结合物制备过程中的多糖抗原性变化。结果建立分析抗原性变化的抑制ELISA和速率比浊法；3种方法均可用于肺炎球菌结合物制备过程中的多糖抗原性分析；其中抑制ELISA可监控制备过程中抗原性的微小改变并可量化。结论用多种方法对23 F型肺炎球菌结合物制备过程中的多糖抗原性进行分析，为结合物制备过程中多糖抗原性的监控提供了多层面的有效方法，并为抗原性监控提供可量化的方法。 展开更多

关键词 肺炎球菌结合物 抑制ELISA 抗原性 免疫双扩散法 速率比浊法

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抗金黄色葡萄球菌IgY酶解稳定性及体外抑菌研究 被引量：3

4

作者 彭维 欧爱芬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期109-112,共4页

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一,近年来由金黄色葡萄球菌污染引起的食品安全问题,越来越受到人们的关注。抗金黄色葡萄球菌IgY热稳定性能优良,同时IgY具有较强的耐酸碱能力;IgY虽然对胃蛋... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一,近年来由金黄色葡萄球菌污染引起的食品安全问题,越来越受到人们的关注。抗金黄色葡萄球菌IgY热稳定性能优良,同时IgY具有较强的耐酸碱能力;IgY虽然对胃蛋白酶有较好的抵抗力,但在胰蛋白酶作用下会失去活性;体外抑菌实验表明IgY对金黄色葡萄球菌具有抑制生长活性,抑菌率达到93.5%;双向琼脂扩散实验检测IgY效价为64。因此,抗金黄色葡萄球菌IgY有望代替抗生素用于细菌感染性疾病的治疗。 展开更多

关键词 金黄葡萄球菌 卵黄免疫球蛋白 体外抑菌 双向琼脂扩散

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山蚂蝗植物的免疫双扩散研究 被引量：2

5

作者 张渝文 李鑫 《重庆工商大学学报（自然科学版）》 2004年第4期339-341,共3页

以豆科山蚂蝗类(传统的山蚂蝗属)植物中的长柄山蚂蝗属的两种代表植物尖叶长柄山蚂蝗(Podocarpiumoxyphyllum)和长柄山蚂蝗(P.podocarpum);山蚂蝗属的两种代表种波叶山蚂蝗(Desmodiumsinuatum)和大叶拿身草(D.laxiflorum)等4种植物的种... 以豆科山蚂蝗类(传统的山蚂蝗属)植物中的长柄山蚂蝗属的两种代表植物尖叶长柄山蚂蝗(Podocarpiumoxyphyllum)和长柄山蚂蝗(P.podocarpum);山蚂蝗属的两种代表种波叶山蚂蝗(Desmodiumsinuatum)和大叶拿身草(D.laxiflorum)等4种植物的种子为材料,提取分离其球蛋白组份作为抗原,免疫家兔得到相应的抗血清。在免疫实验中,反应抗原增加了山蚂蝗属的总状山蚂蝗(D.spicatum)、圆锥山蚂蝗(D.esquirdii)和小槐花(D.caudatum)3种,通过免疫双扩散,研究了山蚂蝗植物7个种的部分血清学行为以及他们之间的相互关系。其结果为尖叶长柄山蚂蝗和长柄山蚂蝗具有相似的血清学特性,支持了形态学将广义的山蚂蝗属分成山蚂蝗属和长柄山蚂蝗属的分类学结论。 展开更多

关键词 山蚂蝗植物 免疫双扩散 长柄山蚂蝗属 豆科 血清学行为

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SIgA分泌片分离、纯化研究 被引量：1

6

作者 胡正强 黎光 +2 位作者 江咏梅 魏大鹏 蔡美英 《微生物学免疫学进展》 2002年第2期35-38,共4页

为了研究SIgA分泌片 (Secretorycomponent,SC)分离、纯化及鉴定方法 ,以SC存在游离和结合两种形式 ,本研究应用凝胶过滤和盐析法直接从初乳中分离纯化游离SC ,并进行鉴定。分离纯化获得蛋白溶液 12 4ml,蛋白含量 0 85mg/ml,免疫双扩... 为了研究SIgA分泌片 (Secretorycomponent,SC)分离、纯化及鉴定方法 ,以SC存在游离和结合两种形式 ,本研究应用凝胶过滤和盐析法直接从初乳中分离纯化游离SC ,并进行鉴定。分离纯化获得蛋白溶液 12 4ml,蛋白含量 0 85mg/ml,免疫双扩仅与抗SC多克隆抗体 (PcAb)反应 ,分子量约 75kD ,免疫印迹实验与抗SC单克隆抗体(McAb)和PcAb特异反应 ,表明纯化蛋白为SC。该SC的分离纯化和鉴定处于不断完善之中 ,其方法的改进有利于获得更纯的SC 。 展开更多

关键词 SIgA分泌片 分离纯化 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫双扩散 免疫印迹法

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同时检测抗SSA和抗RNP在诊断结缔组织病中的意义 被引量：1

7

作者 史丽璞 梁永峰 +2 位作者 窦丽芳 张倩 肖红 《新乡医学院学报》 CAS 2005年第3期240-241,共2页

目的探讨抗SSA和抗RNP在结缔组织病中出现的机率。方法采用双免疫扩散法(ID)和免疫印迹法(IBT)同时检测抗SSA和抗RNP。结果用ID法检测系统性红斑狼疮(SLE)患者抗SSA阳性率远高于抗RNP(P<0.05),混合性结缔组织病患者中抗RNP阳性率l00... 目的探讨抗SSA和抗RNP在结缔组织病中出现的机率。方法采用双免疫扩散法(ID)和免疫印迹法(IBT)同时检测抗SSA和抗RNP。结果用ID法检测系统性红斑狼疮(SLE)患者抗SSA阳性率远高于抗RNP(P<0.05),混合性结缔组织病患者中抗RNP阳性率l00%高于抗SSA的19%(P<0.001),结缔组织病患者中抗SSA阳性率82.8%亦远高于抗RNP的14.1%(P<0.05)。结论ID法比IBT法检测抗SSA较全面,使用ID法和IBT法同时检测抗SSA和抗RNP,可以提高临床诊断的正确性,减少漏诊。 展开更多

关键词 免疫双扩散法 免疫印迹法 抗SSA 抗RNP

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苦瓜籽蛋白的分离纯化及免疫原性分析 被引量：1

8

作者 杨梅强 聂宇 +4 位作者 姚兴川 王殊睿 刘敏 赵欣平 孟延发 《四川动物》 CSCD 北大核心 2011年第6期893-896,共4页

经过NaCl溶液匀浆抽提、硫酸铵分级分离、SP-SepharoseFastFlow层析、SephacrylS-100层析、Macro-Cap-SP层析,从苦瓜籽中同时分离纯化出大量的α-苦瓜素和苦瓜抗HIV蛋白30。经SDS-PAGE鉴定,二者均为单一条带,表观分子量为28kDa。用两种... 经过NaCl溶液匀浆抽提、硫酸铵分级分离、SP-SepharoseFastFlow层析、SephacrylS-100层析、Macro-Cap-SP层析,从苦瓜籽中同时分离纯化出大量的α-苦瓜素和苦瓜抗HIV蛋白30。经SDS-PAGE鉴定,二者均为单一条带,表观分子量为28kDa。用两种蛋白分别免疫Balb/c小鼠,双向免疫扩散表明,两种苦瓜籽蛋白无交叉反应。本实验为进一步探索PEG修饰MAP30免疫原性变化打下了基础。 展开更多

关键词 α-苦瓜素 苦瓜抗HIV蛋白30 分离纯化 双向免疫扩散

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二步超离心法分离纯化人血浆Apo B100及兔抗人Apo B100抗血清制备

9

作者 张海花 王婕 +2 位作者 高慧 付彩云 童富淡 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2012年第1期115-118,共4页

建立一种从人血浆中分离纯化Apo B100的方法,并制备兔抗人Apo B100抗血清。将血浆用溴化钾调成1.019g/mL的密度液进行差分超速离心,将分离产物在溴化钾不连续密度梯度液(1.006～1.210g/mL)中进行等密度超速离心。用G-100葡聚糖凝胶柱纯... 建立一种从人血浆中分离纯化Apo B100的方法,并制备兔抗人Apo B100抗血清。将血浆用溴化钾调成1.019g/mL的密度液进行差分超速离心,将分离产物在溴化钾不连续密度梯度液(1.006～1.210g/mL)中进行等密度超速离心。用G-100葡聚糖凝胶柱纯化Apo B100,以ELISA双抗体夹心法检测浓度,真空冷冻干燥。取冻干粉与弗氏佐剂混合后免疫新西兰白兔,制备兔抗人Apo B100抗血清,利用双向免疫扩散检测抗原纯度与抗血清效价。结果是一步超离法分离的Apo B100最高浓度为0.91μg/mL;二步超离法分离的Apo B100最高浓度为1.40μg/mL,对应的抗血清效价为1∶64。结果表明二步超离心法提高了人血浆Apo B100的分离效果。 展开更多

关键词 APO B100 超速离心 ELISA 双向免疫扩散

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多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白抗血清的制备及鉴定

10

作者 阮期平 赵莉 +2 位作者 周立 李建吾 郑远棋 《绵阳师范学院学报》 1997年第S1期57-60,共4页

用电泳纯的小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白免疫新西兰雄兔,获得了特异性强,效价较高的小麦.多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白抗血清.用此抗血清采用Dot—immunobinding assay,对流免疫电泳二种方法测定PGIP的检出限量,由此建立了多聚半糖醛酸酶... 用电泳纯的小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白免疫新西兰雄兔,获得了特异性强,效价较高的小麦.多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白抗血清.用此抗血清采用Dot—immunobinding assay,对流免疫电泳二种方法测定PGIP的检出限量,由此建立了多聚半糖醛酸酶抑制蛋白的Dot—immunobinding检测方法,并对制备该抗血清的意义予以讨论. 展开更多

关键词 小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 Dot-immunobindingassay 抗血清 对流免疫电泳 免疫双扩散

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高效价抗肠道病毒71型兔血清的制备及鉴定 被引量：4

11

作者 王继麟 陈晓琦 +5 位作者 吴杰 明平刚 宰家敏 郭长福 杨京生 段凯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期664-670,共7页

目的制备高效价的抗肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）兔血清。方法分别用RD细胞和Vero细胞培养EV71,纯化后,将经甲醛灭活和未灭活的EV71抗原分别加入佐剂或不加佐剂,经不同途径（肌肉、皮下、腹腔）免疫家兔,每周采血,分离血清,分... 目的制备高效价的抗肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）兔血清。方法分别用RD细胞和Vero细胞培养EV71,纯化后,将经甲醛灭活和未灭活的EV71抗原分别加入佐剂或不加佐剂,经不同途径（肌肉、皮下、腹腔）免疫家兔,每周采血,分离血清,分别采用ELISA、免疫双扩散、免疫荧光和中和抗体试验检测兔血清抗体效价,并分析不同方法检测兔血清抗体结果的相关性。结果未灭活和灭活的纯化EV71抗原加弗氏佐剂后,经皮下或肌肉途径免疫家兔均可获得高效价的抗EV71兔血清,其中加弗氏佐剂的灭活疫苗经皮下途径免疫获得了最高滴度的中和抗体;当抗血清ELISA效价达到或接近1∶10^8,免疫双扩散效价达到或接近1∶512,抗血清1∶2 000稀释后荧光强度〉荻时,可进行免疫家兔的全血采集;不同方法免疫家兔全血采集的血清中和抗体效价为29 406～1 280 652 U/0.2 ml;免疫双扩散检测与中和抗体和免疫荧光检测结果的相关性较高。结论获得了高效价的抗EV71兔血清,为EV71疫苗抗原的相关检定创造了条件。 展开更多

关键词 肠道病毒71 家兔 抗血清 酶联免疫吸附测定 免疫双扩散 中和抗体

原文传递

多角体病毒琼脂免疫双扩散和ELISA检测研究 被引量：1

12

作者 金凤 方光远 +1 位作者 张长青 侯建文 《金陵科技学院学报》 2005年第3期66-68,共3页

用提纯的SpltNPV、AcNPV病毒粒子分别为免疫抗原获得抗血清,以此抗血清为抗体,提纯的SpltNPV、AcNPV多角体裂解所得粗提纯病毒粒子为检测抗原,初步建立两种病毒的琼脂免疫双扩散法和ELISA间接检测方法。琼脂免疫双扩散结果表明:所得抗... 用提纯的SpltNPV、AcNPV病毒粒子分别为免疫抗原获得抗血清,以此抗血清为抗体,提纯的SpltNPV、AcNPV多角体裂解所得粗提纯病毒粒子为检测抗原,初步建立两种病毒的琼脂免疫双扩散法和ELISA间接检测方法。琼脂免疫双扩散结果表明:所得抗血清能识别粗提抗原,但不能与细胞培养的病毒粒子反应。两种病毒I-ELISA检测灵敏度分别达11.23、11.67 ng。 展开更多

关键词 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 斜纹夜蛾核型多角体病毒 琼脂免疫双扩散 间接ELISA

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中华锯齿米虾卵巢发育过程中卵黄蛋白积累的研究 被引量：1

13

作者 李超 朱杰 +4 位作者 陈娇 杨炎 张晗 穆淑梅 康现江 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期94-98,共5页

为了研究中华锯齿米虾(Neocaridina denticulata sinensis)卵巢发育过程中卵黄蛋白的积累情况,采用电泳洗脱法从其成熟卵巢中获得卵黄蛋白(Vitellin,Vn),制备多抗,进行双向免疫扩散和免疫印迹试验,结果显示,中华锯齿米虾的卵黄蛋白具有... 为了研究中华锯齿米虾(Neocaridina denticulata sinensis)卵巢发育过程中卵黄蛋白的积累情况,采用电泳洗脱法从其成熟卵巢中获得卵黄蛋白(Vitellin,Vn),制备多抗,进行双向免疫扩散和免疫印迹试验,结果显示,中华锯齿米虾的卵黄蛋白具有物种特异性和组织特异性。分别对孵化后12,32,43,55,70和82d的中华锯齿米虾进行解剖,免疫组织化学技术检测分析显示,仅82d的卵巢中出现免疫阳性反应,说明该阶段的卵巢中存在卵黄蛋白;用甲苯胺蓝染色分析同期结果显示与该结果一致。本研究旨在了解中华锯齿米虾卵黄蛋白在卵巢发育过程中累积的时间节点,为中华锯齿米虾卵巢发育的研究提供基础资料。 展开更多

关键词 中华锯齿米虾 卵黄蛋白 双向免疫扩散 免疫印迹 免疫组化

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