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同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累
被引量:
16
1
作者
吕中原
钱江潮
+4 位作者
储炬
郭美锦
王永红
庄英萍
张嗣良
《工业微生物》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期24-30,共7页
利用重组毕赤酵母(Pichia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素。为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了...
利用重组毕赤酵母(Pichia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素。为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了一株既含有AOX1诱导型表达单元,又含有GAP组成型表达单元的双SAMS表达单元P.pastoris重组菌株Gd。它既能受甲醇调控表达SAMS,又能以甘油为碳源表达SAMS。在培养过程中,先是以甲醇诱导SAMS表达,得到较高的酶活,然后在发酵中后期再将碳源换为甘油。这样不但可以维持较高的酶活,而且可以提高胞内ATP含量。实验结果显示,对于同时利用AOX1和GAP启动子表达SAMS的重组菌,可采取甲醇和甘油两阶段补料,该重组菌的SAMS比产率高于组成型重组菌Xg,Gd进入甘油补料期后胞内ATP含量高于诱导型重组菌Ga。双表达单元菌株Gd的SAM产量达到1.41g/L,比诱导型表达SAMS的重组菌株提高了76.3%,比组成型表达SAMS的重组菌株提高了60.2%,。
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关键词
双表达单元
SAM合成酶
PICHIA
PASTORIS
下载PDF
职称材料
题名
同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累
被引量:
16
1
作者
吕中原
钱江潮
储炬
郭美锦
王永红
庄英萍
张嗣良
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
出处
《工业微生物》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期24-30,共7页
基金
华东理工大学优秀青年教师科研基金
上海市曙光跟踪计划资助项目(06GG07)
文摘
利用重组毕赤酵母(Pichia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素。为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了一株既含有AOX1诱导型表达单元,又含有GAP组成型表达单元的双SAMS表达单元P.pastoris重组菌株Gd。它既能受甲醇调控表达SAMS,又能以甘油为碳源表达SAMS。在培养过程中,先是以甲醇诱导SAMS表达,得到较高的酶活,然后在发酵中后期再将碳源换为甘油。这样不但可以维持较高的酶活,而且可以提高胞内ATP含量。实验结果显示,对于同时利用AOX1和GAP启动子表达SAMS的重组菌,可采取甲醇和甘油两阶段补料,该重组菌的SAMS比产率高于组成型重组菌Xg,Gd进入甘油补料期后胞内ATP含量高于诱导型重组菌Ga。双表达单元菌株Gd的SAM产量达到1.41g/L,比诱导型表达SAMS的重组菌株提高了76.3%,比组成型表达SAMS的重组菌株提高了60.2%,。
关键词
双表达单元
SAM合成酶
PICHIA
PASTORIS
Keywords
double
expression
cassettes
SAMS
Pichia
pastoris
分类号
TQ920 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累
吕中原
钱江潮
储炬
郭美锦
王永红
庄英萍
张嗣良
《工业微生物》
CAS
CSCD
北大核心
2008
16
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