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纳米二氧化钛暴露的神经毒性作用及机制
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作者 刘朝阳 方艳艳 章智冰 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期5275-5285,共11页
以多巴胺能神经细胞SH-SY5Y和PC12为实验模型,深入探讨了不同晶型(锐钛矿型、金红石型、混合型)和不同粒径(25,50,100nm)的纳米二氧化钛(TiO_(2)-NPs)暴露对多巴胺能神经细胞的毒性影响及机制.结果表明,金红石型TiO_(2)-NPs暴露具有更... 以多巴胺能神经细胞SH-SY5Y和PC12为实验模型,深入探讨了不同晶型(锐钛矿型、金红石型、混合型)和不同粒径(25,50,100nm)的纳米二氧化钛(TiO_(2)-NPs)暴露对多巴胺能神经细胞的毒性影响及机制.结果表明,金红石型TiO_(2)-NPs暴露具有更强的毒性作用,其次是混合型和锐钛矿型.此外,粒径较小的TiO_(2)-NPs对神经细胞的毒性更显著,特别是25nm粒径的TiO_(2)-NPs,其神经毒性作用与诱导活性氧自由基生成和细胞凋亡相关.蛋白免疫印迹法发现,TiO_(2)-NPs能上调Bax和细胞色素C的水平,下调Bcl-2的表达,同时激活Caspase-3,表明TiO_(2)-NPs通过影响线粒体凋亡途径相关蛋白的表达诱导多巴胺能神经细胞凋亡. 展开更多
关键词 纳米二氧化钛 金红石型 多巴胺能神经细胞 氧化应激 细胞凋亡
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多巴胺能细胞在大鼠消化道不同部位分布的比较 被引量:4
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作者 田岳民 陈昕 +1 位作者 王伟 朱进霞 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第2期225-228,共4页
目的比较正常大鼠消化道不同部位多巴胺能细胞的分布性差异。方法用免疫荧光组织化学法观察多巴胺转运蛋白(DAT)在正常大鼠的胃、十二指肠、回肠以及结肠的分布,提取正常大鼠上述部位组织总RNA,反转录成cDNA后,用酪氨酸羟化酶(TH)与DAT... 目的比较正常大鼠消化道不同部位多巴胺能细胞的分布性差异。方法用免疫荧光组织化学法观察多巴胺转运蛋白(DAT)在正常大鼠的胃、十二指肠、回肠以及结肠的分布,提取正常大鼠上述部位组织总RNA,反转录成cDNA后,用酪氨酸羟化酶(TH)与DAT基因特异性引物进行聚合酶链反应(PCR),并做半定量检测。结果确定了多巴胺能细胞在正常大鼠胃、十二指肠、回肠以及结肠的具体分布情况。发现TH与DAT基因在消化道不同部位的表达有差异。结论正常大鼠消化道存在着大量多巴胺能细胞,它们可能通过分泌多巴胺来调节消化道的分泌与吸收功能。 展开更多
关键词 多巴胺能细胞 酪氨酸羟化酶 多巴胺转运蛋白 消化道
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MN9D多巴胺能细胞损伤模型的建立 被引量:2
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作者 钮洪艳 张学文 +1 位作者 刘淮东 高殿帅 《徐州医学院学报》 CAS 2010年第5期301-304,共4页
目的建立离体多巴胺(dopamin,DA)能神经细胞系MN9D细胞损伤模型。方法离体细胞培养条件下,于培养液中加入不同浓度6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)作用于MN9D细胞30 min。24 h后,MTT比色法检测MN9D细胞的存活率、Hoechst 33258... 目的建立离体多巴胺(dopamin,DA)能神经细胞系MN9D细胞损伤模型。方法离体细胞培养条件下,于培养液中加入不同浓度6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)作用于MN9D细胞30 min。24 h后,MTT比色法检测MN9D细胞的存活率、Hoechst 33258核染色和流式细胞仪检测MN9D细胞的凋亡变化。结果6-OHDA以浓度依赖性的方式引起MN9D细胞的凋亡,导致细胞存活率降低。200μmol/L浓度的6-OH-DA作用30 min、培养24 h后,MN9D细胞的存活率降低至68.8%左右,凋亡率增高至约37.8%。结论6-OH-DA能够引起MN9D细胞的存活率降低,而凋亡率增高,产生类似帕金森病时的DA能神经细胞损伤的表现。 展开更多
关键词 多巴胺能神经细胞 6-羟基多巴胺 MN9D细胞 帕金森病
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α-突触核蛋白磷酸化参与小鼠多巴胺能神经元的保护作用 被引量:2
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作者 刘琦 段春礼 +5 位作者 吴波 范春香 张韬 赵焕英 赵春礼 杨慧 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第6期561-565,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)129位点磷酸化修饰是否具有神经元保护作用。方法应用反转录病毒感染小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D,通过实时定量PCR检测各组细胞内α-SYN过表达情况,并通过免疫细胞化学方法检测野生型α-SYN(WT/α-SYN)及... 目的研究α-突触核蛋白(α-SYN)129位点磷酸化修饰是否具有神经元保护作用。方法应用反转录病毒感染小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D,通过实时定量PCR检测各组细胞内α-SYN过表达情况,并通过免疫细胞化学方法检测野生型α-SYN(WT/α-SYN)及129位点磷酸化α-SYN(S129D/α-SYN)过表达后α-SYN在细胞内聚集情况,应用CCK-8检测细胞活力,观察WT/α-SYN及S129D/α-SYN对MN9D的细胞毒性,从而明确S129D/α-SYN对多巴胺能神经元的影响。结果实时定量PCR结果显示,WT/α-SYN及S129D/α-SYN在MN9D细胞内均过表达(P<0.01)。WT/α-SYN过表达组细胞活力明显下降(P<0.01),共聚焦显微镜观察未见明显的α-SYN聚集;S129D/α-SYN过表达组细胞内可观察到明显的α-SYN聚集体,同WT/α-SYN组相比细胞活力有明显提高(P<0.01)。结论129位点丝氨酸的磷酸化修饰在一定程度上减轻了WT/α-SYN过表达所引起的细胞毒性。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 磷酸化α-突触核蛋白 神经元保护 多巴胺神经元
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Protection of MES23.5 dopaminergic cells by obestatin is mediated by proliferative rather than anti-apoptotic action
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作者 Xiao-Li Shen Feng-Ju Jia +2 位作者 Ning Song Jun-Xia Xie Hong Jiang 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期118-124,共7页
Obestatin is an endogenous peptide sharing a precursor with ghrelin. This study aims to investigate whether and how obestatin protects MES23.5 dopaminergic cells against 1-methyl-4- phenylpyridinium (MPP^+)-induced... Obestatin is an endogenous peptide sharing a precursor with ghrelin. This study aims to investigate whether and how obestatin protects MES23.5 dopaminergic cells against 1-methyl-4- phenylpyridinium (MPP^+)-induced neurotoxicity. MES23.5 cells were pretreated with obestatin (10^-13- 10^-6 mol/L) for 20 min prior to incubation with 200 μmol/L MPP^+ for 12 or 24 h, or treated with obestatin alone (10^-13 to 10^-6 mol/L) for 0, 6, 12, and 24 h. The methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay was used to measure cell viability. Flow cytometry was used to measure the caspase-3 activity and the mitochondrial transmembrane potential. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) protein levels were determined by Western blotting. Obestatin (10^-13 to 10^-7 mol/L) pretreatment blocked or even reversed the MPP^+ induced reduction of viability in MES23.5 cells, but had no effect on MPP^+-induced mitochondrial transmembrane potential collapse and caspase-3 activation. When applied alone, obestatin increased viability. Elevated PCNA levels occurred with 10^-7, 10^-9, 10^-11 and 10^-13 mol/L obestatin treatment for 12 h. The results suggest that the protective effects of obestatin against MPP^+ in MES23.5 cells are due to its proliferation-promoting rather than anti-apoptotic effects. 展开更多
关键词 OBESTATIN MPP^+ proliferation apoptosis dopaminergic cells
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木犀草素抗鱼藤酮致小鼠多巴胺能细胞损伤机制的研究 被引量:4
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作者 刘琦 温雅 +3 位作者 贾珍 王珊 王梁 董惠 《脑与神经疾病杂志》 2020年第11期669-673,共5页
目的观察木犀草素减轻鱼藤酮对小鼠多巴胺能神经母细胞瘤细胞系MN9D细胞的损伤并探讨可能的机制。方法将MN9D细胞分为对照组、鱼藤酮组、木犀草素组和鱼藤酮+木犀草素组。通过细胞增殖实验检测24、48及72h后细胞活力;使用凋亡试剂盒检... 目的观察木犀草素减轻鱼藤酮对小鼠多巴胺能神经母细胞瘤细胞系MN9D细胞的损伤并探讨可能的机制。方法将MN9D细胞分为对照组、鱼藤酮组、木犀草素组和鱼藤酮+木犀草素组。通过细胞增殖实验检测24、48及72h后细胞活力;使用凋亡试剂盒检测细胞凋亡水平;通过2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测活性氧的水平,通过蛋白印迹实验检测蛋白磷酸化酶2A(proteinphosphatase 2A,PP2A)的磷酸化水平。结果鱼藤酮组MN9D细胞活力在24、48及72h分别下降至对照组的84.3±6.2%,67.6±5.7%和54.4±4.1%;而鱼藤酮+木犀草素组则为95.3±7.4%,84.7±6.4%和74.3±5.9%(P<0.05)。鱼藤酮组Annexin V阳性细胞数为总细胞数的14.1±3.7%,鱼藤酮+木犀草素组为6.8±2.4%;而PI阳性细胞分别为9.2±2.7%和5.5±2.1%(P<0.05)。鱼藤酮组活性氧平均荧光强度较对照组升高3.4±0.7倍,而鱼藤酮+木犀草素组的活性氧荧光强度仅为鱼藤酮组的42±13%(P<0.05)。鱼藤酮组PP2A的磷酸化水平增加为对照组的182±34%,而鱼藤酮+木犀草素组为对照组的119±21%(P<0.05)。结论木犀草素可以降低鱼藤酮引起的氧化应激反应,对MN9D发挥保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 小鼠多巴胺能MN9D细胞 鱼藤酮 木犀草素
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姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用研究 被引量:3
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作者 胡丹 汪宁 +1 位作者 张振涛 张兆辉 《卒中与神经疾病》 2011年第6期326-328,347,共4页
目的探讨姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用及机制。方法采用神经毒素鱼藤酮(1μmol/L)处理经神经生长因子(NGF)(50 ng/ml×7)诱导分化过的PC12细胞,并在处理前6 h加入1μmol/L的姜黄素进行干预,MTT法检测细胞活力,荧光分光光度法检... 目的探讨姜黄素对多巴胺能细胞的保护作用及机制。方法采用神经毒素鱼藤酮(1μmol/L)处理经神经生长因子(NGF)(50 ng/ml×7)诱导分化过的PC12细胞,并在处理前6 h加入1μmol/L的姜黄素进行干预,MTT法检测细胞活力,荧光分光光度法检测细胞内活性氧水平,比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果 NGF诱导后的PC12细胞经1μmol/L鱼藤酮处理24 h后,细胞活力下降至对照组的57.1%,细胞内活性氧水平为对照组的189%,而GSH水平显著下降(P<0.05);姜黄素干预后,与鱼藤酮组相比,细胞活力和GSH含量显著提高,活性氧水平显著降低(P<0.05)。结论姜黄素对多巴胺细胞具有保护作用,其机制与抗氧化活性有关。 展开更多
关键词 姜黄素 鱼藤酮 帕金森病 多巴胺能细胞
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α-突触核蛋白对N-甲基-D-天门冬氨酸所致细胞毒性作用的影响 被引量:1
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作者 李昕 程芙蓉 +3 位作者 李尧华 王玉兰 张燕莉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期726-731,共6页
目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)引起的多巴胺能神经细胞毒性作用的影响。方法在MES23.5多巴胺能神经细胞建立NMDA细胞毒模型,MTS法检测细胞活力,AO/PI荧光标记以及免疫印记测定caspase-3表达检测细胞凋亡,... 目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)引起的多巴胺能神经细胞毒性作用的影响。方法在MES23.5多巴胺能神经细胞建立NMDA细胞毒模型,MTS法检测细胞活力,AO/PI荧光标记以及免疫印记测定caspase-3表达检测细胞凋亡,细胞外添加α-Syn蛋白,观察α-Syn对NMDA所致细胞毒性作用的影响。结果 NMDA(5mmol/L)引起明显的细胞内Ca2+升高以及细胞毒性作用,表现为细胞活力下降、凋亡细胞增加以及caspase-3表达升高。NMDA的细胞毒性作用可被NMDA受体特异性阻断剂MK801阻断。预先用α-Syn(2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L)处理细胞明显抑制NMDA引起的细胞内Ca2+升高以及细胞毒性作用,其作用随α-Syn浓度增高而增强。结论α-Syn对NMDA所致多巴胺能神经元的细胞毒性作用具有抑制作用,其机制可能与其抑制与NMDA引起的Ca2+内流以及caspase-3激活有关。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 MES23.5细胞 N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA) 细胞毒性
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α-突触核蛋白促进多巴胺能神经细胞表面NMDA受体的内在化
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作者 程芙蓉 李昕 +3 位作者 李尧华 王玉兰 张燕莉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期737-741,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对多巴胺能神经细胞表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的影响及其机制。方法免疫荧光标记法和Western blotting分析法测定NMDA受体(NMDAR)和Rab5b含量。低钾休克抑制... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对多巴胺能神经细胞表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的影响及其机制。方法免疫荧光标记法和Western blotting分析法测定NMDA受体(NMDAR)和Rab5b含量。低钾休克抑制内吞,Rab5b反义寡核苷酸抑制Rab5b基因表达。以MES23.5多巴胺能神经细胞为模型,观察细胞外添加α-Syn蛋白对细胞膜NMDAR含量的影响以及内吞和Rab5b的作用。结果α-Syn(10μmol/L)明显上调Rab5b表达,下调细胞表面NMDAR;低钾休克及抑制Rab5b表达可消除α-Syn的这一作用。结论α-Syn通过上调Rab5b的表达促进NMDAR的内在化。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 MES23.5细胞 N-甲基-D-天门冬氨酸 内在化
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Rho激酶抑制剂Y27632促进人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞向多巴胺能神经前体细胞的转化
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作者 李洋洋 徐佳佳 +8 位作者 姜诚诚 陈子龙 陈颖 应梦娇 王澳 马彩云 王春景 郭俣 刘长青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期236-243,共8页
目的提高人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞(hiPSCs-NECs)定向诱导中脑多巴胺能神经前体细胞(DAPs)的效率。方法将人iPSCs在含有小分子组合[DMH1(10μmol/L)、SB431542(10μmol/L)、音猬因子(SHH 200 ng/mL)、成纤维细胞生长因8(FGF... 目的提高人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞(hiPSCs-NECs)定向诱导中脑多巴胺能神经前体细胞(DAPs)的效率。方法将人iPSCs在含有小分子组合[DMH1(10μmol/L)、SB431542(10μmol/L)、音猬因子(SHH 200 ng/mL)、成纤维细胞生长因8(FGF8100 ng/mL)、嘌吗啡胺(2μmol/L)、CHIR99021(3μmol/L)、N2(1%)]的mTeSRTM培养基中诱导至12 d,细胞分化为原始神经上皮细胞(NECs)。特异性诱导DAPs,将诱导的hiPSCs-NECs用胶原酶IV消化后,在神经分化培养基[添加1%N2、2%B27-A、BDNF(10 ng/mL)、GDNF(10 ng/mL)、AA、TGF-β、cAMP、1%GlutaMax]中加入不同浓度的Rho激酶抑制剂Y27632重新接种,并于次日更换培养基去除Y27632,持续诱导至第28天获得DAPs。结果人iPSCs可在基质胶上稳定传代,表达多潜能性标记物OCT4、SOX2、Nanog和SSEA1,且碱性磷酸酶染色呈阳性。诱导分化至第13天获得hiPSCs-NECs,形成玫瑰花结样结构,能够表达特征性标记物(SOX2、Nestin和PAX6)。将hiPSCs-NECs消化后,添加5μmol/LY27632的hiPSCs-NECs相比较未加Y27632的对照组,细胞解离后贴壁存活率明显增加,处于S期的细胞(P<0.01)与细胞活力显著提高(P<0.01),且凋亡率显著降低(P<0.05),持续诱导至第28天,细胞高表达DAPs特异性的标记物(TH、FOXA2、NURR1和Tuj1)。结论添加Y27632(5μmol/L)24 h可显著提高人iPSCs-NECs细胞向iPSCs-DA神经前体转化时的细胞存活率,并且Y27632去除后,不会影响后续向DA神经前体细胞分化,间接的提高了细胞的分化效率. 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 Y27632 原始神经上皮细胞 多巴胺能神经前体细胞
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人诱导多能干细胞体外定向分化为多巴胺能神经元祖细胞 被引量:1
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作者 徐佳佳 李洋洋 +6 位作者 仲光尚 方祝玲 刘淳博 马彩云 王春景 郭俣 刘长青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期175-182,共8页
目的 探讨人诱导多能干细胞(hiPSCs)体外高效定向分化为中脑多巴胺能神经元祖细胞(DAPs)的方法体系。方法 人iPSCs诱导分化为DAPs遵循两个主要阶段,第1阶段是化学诱导产生中间态细胞,人i PSCs在含小分子化合物组合的神经诱导培养基中培... 目的 探讨人诱导多能干细胞(hiPSCs)体外高效定向分化为中脑多巴胺能神经元祖细胞(DAPs)的方法体系。方法 人iPSCs诱导分化为DAPs遵循两个主要阶段,第1阶段是化学诱导产生中间态细胞,人i PSCs在含小分子化合物组合的神经诱导培养基中培养至第13天,其表观特征类似于原始神经上皮细胞。第2阶段,特异性诱导DAPs,将中间态细胞在神经分化培养基中诱导至第28天获得DAPs。CM-DiI染色后,定向移植帕金森(PD)大鼠模型右前脑内侧束(MFB),实验动物随机分为3组:健康对照组,模型组和DAPs移植组。移植后2周的大鼠全脑冷冻切片免疫荧光检测移植细胞在宿主脑内微环境中存活、迁移及分化状况,移植后8周,对细胞移植组PD大鼠进行行为学鉴定。结果 人iPSCs可在基质胶上稳定传代,具有正常的二倍体核型,表达多潜能性标记物OCT4、SOX2和Nanog,且碱性磷酸酶染色呈阳性。诱导分化至第13天获得原始神经上皮细胞形成玫瑰花结样结构,且能够表达其表面特征性标记物(SOX2、Nestin和PAX6,91.3%~92.8%)。诱导至第28天的DAPs高表达其特异性的标记物(TH、FOXA2、LMX1A和NURR1,93.3%~96.7%)。而且,DAPs移植PD大鼠脑内2周后,可分化为TH^(+),FOXA2^(+)与Tuj1^(+)神经元,移植后8周,移植组较模型组相比,经水迷宫实验(P<0.0001)和阿扑吗啡(APO)诱导的旋转实验(P<0.0001)检测,PD大鼠的运动功能得到明显改善。结论 人iPSCs经多级诱导可高效分化为中脑DA能神经元祖细胞,具备体内和体外分化为功能神经元与胶质细胞的潜能,并可显著改善PD大鼠的运动功能障碍,为hiPSCs-DAPs移植治疗神经系统损伤疾病奠定细胞基础和实验依据。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 多巴胺能神经元祖细胞 原始神经上皮细胞 细胞移植 帕金森模型大鼠
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Is there a relationship between dopamine and rhegmatogenous retinal detachment? 被引量:2
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作者 Alessio Martucci Massimo Cesareo +5 位作者 Maria Dolores Pinazo-Durán Michela Di Pierro Matteo Di Marino Carlo Nucci Massimiliano Coletta Raffaele Mancino 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期311-314,共4页
Dopamine and its receptors have been widely studied in the neurological conditions and in the retina. In this study, we evaluated the possible role of dopamine in rhegmatogenous retinal detachment(RRD) by comparing th... Dopamine and its receptors have been widely studied in the neurological conditions and in the retina. In this study, we evaluated the possible role of dopamine in rhegmatogenous retinal detachment(RRD) by comparing the amount of 3,4-dihydroxyphenylacetic acid(DOPAC), a surrogate index of retinal dopamin levels, in the vitreous sample of patients affected by RRD with those affected by macular pucker and vitre ous hemorrhage. Our results showed that significantly higher levels of DOPAC were found in the vitreou sample of patients affected by RRD compared with those affected by vitreous hemorrhage and macula pucker(P = 0.002). Specifically, no trace of the substance was found in vitreous hemorrhage and macula pucker samples. A slightly significant positive correlation was found among DOPAC and post-operativ best corrected visual acuity(r = 0.470, P = 0.049). No correlation was found between DOPAC and the day elapsed between diagnosis and surgery(P = 0.317). For the first time our findings suggest that DOPAC i released in RRD, but not in other retinal diseases such as vitreous hemorrhage and macular pucker. More over, we showed a correlation between visual acuity outcome and the amount of DOPAC in the vitreous This might have a potential, although still unknown, implication in the pathogenesis of the disease and/o in the associated photoreceptors loss. This study was approved by the Ethics Committee of Rome Tor Ver gata University Hospital(R.S.92.10) on September 24, 2010. 展开更多
关键词 3 4-dihydroxyphenylacetic acid DOPAC DOPAMINE dopaminergic amacrine cells dopaminergic neurotoxicity MACULAR pucker oxidative stress PHOTORECEPTOR degeneration rhegmatogenous retinal DETACHMENT VITREOUS hemorrhage
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多巴胺能神经细胞慢性损伤过程中RET的表达变化 被引量:5
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作者 王婷 刘美英 +4 位作者 刘亚萍 袁红花 高秀先 朱孝荣 高殿帅 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第15期2818-2822,共5页
目的:为了检测RET在多巴胺能神经细胞损伤过程中中脑黑质部位的表达变化,并探索其在多巴胺能神经细胞损伤中的可能作用。方法:本实验将C57BL/6小鼠分为三组:MPTP组、NS组和空白对照组,采用MPTP腹腔注射建立小鼠中脑黑质多巴胺能神经细... 目的:为了检测RET在多巴胺能神经细胞损伤过程中中脑黑质部位的表达变化,并探索其在多巴胺能神经细胞损伤中的可能作用。方法:本实验将C57BL/6小鼠分为三组:MPTP组、NS组和空白对照组,采用MPTP腹腔注射建立小鼠中脑黑质多巴胺能神经细胞慢性损伤模型,设立第一周到第六周六个时间点(1w-6w),检测小鼠行为学变化,并采用免疫荧光染色和western blotting等方法检测中脑黑质部酪氨酸羟化酶(TH)和RET的表达情况。结果:行为学结果显示,随给药次数及时间延长,悬挂实验中,MPTP组悬挂评分逐渐下降,MPTP组第三周给药以后与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05);跳台实验中,小鼠受电击后跳上跳台的时间逐渐延长,错误次数逐渐增多。免疫荧光双标结果显示,在检测的各时间点,在小鼠中脑黑质一直有RET阳性细胞存在,且与TH阳性细胞共表达;western blotting结果显示,TH在给予MPTP后第三周表达开始降低,RET在给予MPTP后第一周和第二周持续高表达,并且也从第三周开始,其表达量明显降低。结论:这种表达变化提示RET的表达与多巴胺能神经细胞损伤有关。 展开更多
关键词 RET 黑质 多巴胺能神经细胞
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α-突触核蛋白功能片段向多巴胺能神经细胞内的转运及其对细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 殷娟娟 韩俊燕 +3 位作者 李昕 李尧华 刘耀波 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第3期345-349,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)3个功能片段的促多巴胺能神经细胞增殖作用并且观察其亚细胞分布。方法原核表达重组人野生型α-Syn及其3个功能片段:N-末端、NAC片段和C-末端。向MES 23.5多巴胺能神经细胞的培养基中添加α-Syn及其3个功... 目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)3个功能片段的促多巴胺能神经细胞增殖作用并且观察其亚细胞分布。方法原核表达重组人野生型α-Syn及其3个功能片段:N-末端、NAC片段和C-末端。向MES 23.5多巴胺能神经细胞的培养基中添加α-Syn及其3个功能片段,观察α-Syn全长及其3个功能片段对细胞的增殖的影响的生长曲线,用细胞免疫荧光检测α-Syn及其功能片段向细胞内的进入和分布。结果α-Syn全长及其NAC片段和C-末端均可促进细胞的增殖,但其N-末端片段对细胞增殖无影响。α-Syn及其3个功能片段均可以进入MES23.5多巴胺能神经细胞,3个功能片段在细胞内的亚细胞分布不同:α-Syn全长分子分布于胞质和胞核,但胞核中的含量多于胞质;N-末端片段主要分布于胞质和突起;NAC片段分布于胞质;C-末端片段主要分布于细胞核中。结论α-Syn对细胞增殖的促进作用与其NAC片段以及C-末端片段的氨基酸排列顺序有关。α-Syn及其功能片段均可进入多巴胺能神经细胞内,但其亚细胞分布不同。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 细胞增殖 多巴胺能神经细胞
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氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
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作者 郑淑荣 杨巍巍 +1 位作者 高华 杜婷婷 《山东医药》 CAS 2023年第21期1-4,共4页
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,... 目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。 展开更多
关键词 帕金森病 氨溴索 β-葡萄糖脑苷脂酶 α-突触核蛋白寡聚体 鼠多巴胺能神经元细胞株
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MiR-125a-5p靶向APC激活经典WNT信号通路促进hiPSCs分化为多巴胺能神经前体细胞 被引量:3
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作者 吴玉兰 蔡皓然 +5 位作者 谢海航 苏中强 叶国生 梁宁 徐丽萍 龙大宏 《解剖学研究》 CAS 2020年第1期4-14,共11页
目的通过调节miR-125a-5p的表达实现人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向多巴胺(DA)能神经前体细胞及DA能神经元的高效转化。方法应用MicroRNAs高通量测序与分析,miR-125a-5p的筛选、靶基因(APC)的预测与验证;miR-125a-5p前体miR-125a慢病毒... 目的通过调节miR-125a-5p的表达实现人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向多巴胺(DA)能神经前体细胞及DA能神经元的高效转化。方法应用MicroRNAs高通量测序与分析,miR-125a-5p的筛选、靶基因(APC)的预测与验证;miR-125a-5p前体miR-125a慢病毒载体的构建与包装,miR-125a-5p过表达hiPSCs细胞株的构建、筛选及其向多DA能神经前体细胞与DA能神经元的诱导分化;免疫细胞化学、实时定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹(WB)法检测miR-125a-5p过表达hiPSCs与对照hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元诱导分化过程中神经前体细胞标志物Nestin、底板细胞标志物Foxa2、DA能神经前体细胞标志物En1、DA能神经前体细胞分选标志物Corin、神经元标志物Tuj1及DA能神经元标志物TH的表达。结果 MiR-125a-5p在hiPSCs向DA能神经前体细胞及神经元诱导分化过程中的表达呈递增趋势,miR-125a-5p靶向调节经典WNT信号通路关键因子APC,稳定过表达miR-125a-5p的hiPSCs细胞株能向DA能神经前体细胞及DA能神经元分化,其诱导分化效率与对照hiPSCs相比在神经前体细胞(NPCs)阶段FOXA2、EN1、CORIN的表达明显增高,神经元阶段TH、DAT和Nurr1的表达明显增高,提示过表达miR-125a-5p的hiPSCs具有更好的向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化潜能。结论 MiR-125a-5p能通过靶向下调APC的表达激活经典WNT信号通路活性,促进hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化。 展开更多
关键词 人诱导性多能干细胞 经典WNT信号通路 MiR-125a-5p 腺瘤型结肠息肉 多巴胺能神经前体细胞
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多巴胺对嗅球神经回路调节作用的研究进展 被引量:2
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作者 党琳琳 谭洁 《中国临床神经科学》 2017年第1期77-80,共4页
多巴胺是中枢神经系统内很重要的神经递质,发挥很多生理功能,如认知活动和运动功能的调控。对帕金森病患者早期临床研究表明,脑内多巴胺水平也与嗅觉功能有关。嗅球是嗅觉系统中很重要的组成部分。近年来对多巴胺在嗅球嗅觉信息处理的... 多巴胺是中枢神经系统内很重要的神经递质,发挥很多生理功能,如认知活动和运动功能的调控。对帕金森病患者早期临床研究表明,脑内多巴胺水平也与嗅觉功能有关。嗅球是嗅觉系统中很重要的组成部分。近年来对多巴胺在嗅球嗅觉信息处理的作用多有研究。文中就多巴胺在嗅球中的分布及其作用进行综述。 展开更多
关键词 多巴胺 嗅球 多巴胺能球周细胞 气味反应 帕金森病
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酪氨酸羟化酶与视网膜疾病 被引量:1
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作者 刘政海 万炜 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第11期2168-2171,共4页
酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)是儿茶酚胺(catecholamines,CAs)合成过程中的限速酶,提高或抑制该酶的活性可大幅度影响CAs的合成。近年来对于TH的关注越来越多,大量的研究表明,TH含量及活性的异常改变能通过影响CAs的含量而导... 酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)是儿茶酚胺(catecholamines,CAs)合成过程中的限速酶,提高或抑制该酶的活性可大幅度影响CAs的合成。近年来对于TH的关注越来越多,大量的研究表明,TH含量及活性的异常改变能通过影响CAs的含量而导致相应生理功能的异常,从而导致疾病。本文将TH的结构功能、分布、表达变化及其与视网膜疾病关系做一综述。 展开更多
关键词 酪氨酸羟化酶 多巴胺 多巴胺能无长突细胞
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多效生长因子诱导人脐血间充质干细胞向多巴胺能神经元样细胞分化
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作者 薛丹丹 孙海梅 +1 位作者 季凤清 周德山 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第6期694-699,共6页
目的探讨多效生长因子(PTN)诱导人脐血间充质干细胞(CB-MSCs)向多巴胺(DA)能神经元样细胞分化的可能机制。方法密度梯度离心和贴壁筛选法纯化CB-MSCs,加入重组人PTN(rPTN)作为诱导组(rPTN组),以单纯传代培养的CB-MSCs作为对照(CON组),培... 目的探讨多效生长因子(PTN)诱导人脐血间充质干细胞(CB-MSCs)向多巴胺(DA)能神经元样细胞分化的可能机制。方法密度梯度离心和贴壁筛选法纯化CB-MSCs,加入重组人PTN(rPTN)作为诱导组(rPTN组),以单纯传代培养的CB-MSCs作为对照(CON组),培养48 h后用免疫荧光染色和RT-PCR鉴定CB-MSCs表达PTN及其受体SDC3和ALK,以及诱导分化的细胞表达TH、DAT和NSE的情况。结果随rPTN诱导时间延长,CB-MSCs形态发生变化,TH、DAT和NSE的表达量明显增加,免疫荧光细胞阳性率:TH(CON组)为3.77%±0.42%,(rPTN组)为7.91%±0.55%;DAT(CON组)为1.89%±0.28%,(rPTN组)为6.21%±0.77%;NSE(CON组)为4.35%±0.76%,(rPTN组)为7.67%±0.97%,同对照组相比(P<0.05);诱导的CB-MSCs表达PTN受体SDC3明显高于对照组;rPTN可诱导CB-MSCs自身表达PTN增加,免疫荧光细胞阳性率:PTN(CON组)为14.38%±0.54%,(rPTN组)为20.21%±1.51%;SDC3(CON组)为5.70%±0.78%,(rPTN组)为10.02%±1.45%;ALK(CON组)为4.87%±0.34%,(rPTN组)为5.01%±0.99%(P>0.05)。结论 rPTN能够通过促进CB-MSCs上调PTN及其受体SDC3表达,诱导CB-MSCs向DA能神经元样细胞分化。 展开更多
关键词 脐血间充质干细胞 多效生长因子 多巴胺能神经元
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多巴胺能神经细胞损伤过程中NCAM-140的表达变化
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作者 王婷 滕达 +4 位作者 刘美英 刘亚萍 袁红花 高秀先 高殿帅 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第23期4425-4428,共4页
目的:检测NCAM-140在多巴胺能神经细胞损伤过程中中脑黑质部位的表达变化,探索其在多巴胺能神经细胞损伤中的可能作用。方法:采用MPTP腹腔注射建立小鼠中脑黑质多巴胺能神经细胞慢性损伤模型,采用免疫荧光染色和western blotting检测中... 目的:检测NCAM-140在多巴胺能神经细胞损伤过程中中脑黑质部位的表达变化,探索其在多巴胺能神经细胞损伤中的可能作用。方法:采用MPTP腹腔注射建立小鼠中脑黑质多巴胺能神经细胞慢性损伤模型,采用免疫荧光染色和western blotting检测中脑黑质部酪氨酸羟化酶(TH)和NCAM-140的表达情况。结果:在小鼠中脑黑质一直有NCAM-140阳性细胞存在,且与TH阳性细胞共表达;TH在给予MPTP后第三周表达开始降低,NCAM-140在给予MPTP后第一周至第三周持续高表达,并且从第四周开始,其表达量明显降低。结论:NCAM-140的表达与多巴胺能神经细胞损伤有关。 展开更多
关键词 NCAM-140 黑质 多巴胺能神经细胞
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