河豚毒素直接竞争ELISA检测方法的研究 被引量：19

1

作者 董雪 钟青萍 +2 位作者 黄安诚 雷红涛 孙远明 《现代食品科技》 EI CAS 2009年第8期977-981,共5页

本研究应用直接竞争ELISA法对河豚毒素（tetrodotoxin，TTX）进行快速检测。用过碘酸钠氧化法合成酶标记抗原（HRP-OVA-TFX），用直接ELISA方法对合成的酶标记抗原进行鉴定表明其与抗TTX单克隆抗体具有特异性反应。在比基础上建立了包... 本研究应用直接竞争ELISA法对河豚毒素（tetrodotoxin，TTX）进行快速检测。用过碘酸钠氧化法合成酶标记抗原（HRP-OVA-TFX），用直接ELISA方法对合成的酶标记抗原进行鉴定表明其与抗TTX单克隆抗体具有特异性反应。在比基础上建立了包被单抗的直接竞争ELISA方法。该方法对TTX的检测限可达到1.1μg／L，IC50为20.4μg／L，线性范围3.3-137μg／L，批内变异系数小于6.25％，批间变异系数小于7.34%。对鲫鱼的肌肉组织添加TTX标准品，回收率为65％-93.2％，变异系数为9.41％-12.77％。 展开更多

关键词 河豚毒素 酶标抗原 直接竞争elisa

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沙丁胺醇直接竞争ELISA法快速测定 被引量：21

2

作者 王保玲 袁利鹏 +5 位作者 雷红涛 徐振林 杨金易 孙远明 丁武 庞杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第20期270-274,共5页

建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法,采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数,通过单因素试验,考察反应体系中表面活性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH... 建立沙丁胺醇的直接竞争ELISA(dcELISA)快速检测方法,采用高碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记沙丁胺醇单克隆抗体,棋盘滴定法确定包被抗原质量浓度和抗体稀释倍数,通过单因素试验,考察反应体系中表面活性剂、离子浓度、甲醇体积分数、pH值因素对dcELISA性能的影响,确定最优检测条件,同时考察方法的特异性。结果表明:酶标抗体克分子比为2.1时偶合物的滴度最高,最佳反应条件为包被抗原质量浓度1μg/mL,酶标抗体稀释2560倍,0.01mol/L、pH7.4的磷酸盐抗体稀释液(PBS)中含体积分数0.05%的Tween-20、0.5mol/LNaCl溶液和体积分数5%的甲醇时dcELISA具有最高的灵敏度和最好的稳定性,所建立方法的IC50为10.3ng/mL,检测限为0.049ng/mL,线性范围0.3～76.30ng/mL,批内变异系数13.8%,批间变异系数为22.38%,与克伦特罗交叉反应率为321.18%,与溴布特罗交差反应率为29.09%,与其他结构类似物没有明显交叉反应。本研究所建立的dcELISA可用于沙丁胺醇和克伦特罗的多残留检测。 展开更多

关键词 沙丁胺醇 酶标抗体 直接竞争elisa

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直接竞争ELISA检测大米样品中的重金属镉 被引量：18

3

作者 刘艳梅 钟辉 +4 位作者 黄建芳 谈思怡 刘诗琴 邵晨晨 向军俭 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期528-532,共5页

目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米T... 目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米Ti O2对重金属镉有良好的吸附性,20 mg/ml的EDTA·2Na可将纳米Ti O2吸附的镉定量洗脱。用纯化后的镉单克隆抗体建立直接竞争ELISA检测方法,并进行灵敏度和特异性分析,其灵敏度（IC50）为19 ng/ml,检测限（IC10）为2.1 ng/ml,检测范围（IC20~IC80）为3.6~98.2 ng/ml。用优化后的直接竞争ELISA对富集洗脱后的镉溶液进行检测,检测效果满足国家检测标准。结论本研究对6份市售大米样品采用微波消解和富集,通过直接竞争ELISA检测其镉含量,所得结果与仪器法测定结果一致,可用于实际样品的快速检测。 展开更多

关键词 重金属镉 单克隆抗体 直接竞争elisa 纳米TiO2富集

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基于单克隆抗体的三聚氰胺ELISA检测方法的建立 被引量：14

4

作者 王黎丽 陈芳芳 +1 位作者 吴超 余为一 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期962-966,共5页

建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联... 建立三聚氰胺直接和间接竞争ELISA检测方法。三聚氰胺(melamine)-BSA免疫BALB/c小鼠,通过融合小鼠脾细胞与SP2/0细胞,制备分泌MEL单克隆抗体(monoclonal anti-body)的细胞株;体内诱生腹水制备MEL-mAb。用高碘酸钠法制备MEL-OVA-HRP偶联物并对其活性进行鉴定。分别用MEL-OVA和制备的MEL-mAb包被,用三聚氰胺标准液作为抑制物,做直接和间接竞争ELISA,并对两种ELISA方法在灵敏度、线性检测范围、检测时间进行比较。筛选出4株可以稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。其中的C4株腹水效价达到1∶104,亲和力常数(Ka)为2.92×108L/mol。三聚氰胺间接竞争ELISA和直接竞争ELISA检测法的IC50分别为3.12μg/L和56.88μg/L,线性检测范围分别为0.05～10μg/L和0.1～1 000μg/L。两种竞争ELISA方法都能应用于三聚氰胺的快速检测,但间接竞争ELISA比直接竞争ELISA更加灵敏。 展开更多

关键词 三聚氰胺 单克隆抗体 间接竞争elisa 直接竞争elisa

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拟除虫菊酯类农药多残留直接竞争ELISA建立及初步应用 被引量：13

5

作者 余向阳 骆爱兰 +3 位作者 刘媛 徐敦明 刘贤进 常有宏 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期249-252,共4页

以辣根过氧化物酶对兔抗拟除虫菊酯类农药抗体进行标记，通过优化分析条件和样品前处理方法，建立了可同时检测蔬菜中多种拟除虫菊酯类农药的直接竞争抑制ELISA方法（DC-ELISA），并在实际检测中进行了初步应用。该方法可用于同时检测... 以辣根过氧化物酶对兔抗拟除虫菊酯类农药抗体进行标记，通过优化分析条件和样品前处理方法，建立了可同时检测蔬菜中多种拟除虫菊酯类农药的直接竞争抑制ELISA方法（DC-ELISA），并在实际检测中进行了初步应用。该方法可用于同时检测蔬菜中甲氰菊酯、氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯4种农药的残留，检出限（I10）分别为0．25、0．30、0．43、0．81mg·L^-1，青菜样品添加含量为0．5-5．0mg·kg^-1，回收率分别为93％-114％，97％-110％，89％-126％，93％-113％。采用该方法对南京市场抽取的107个样品进行检测，并与气相色谱法进行比较，直接竞争ELISA阳性检出率为8．46％，气相色谱法阳性检出率为3．74％。 展开更多

关键词 拟除虫菊酯 农药残留 直接elisa 甲氰菊酯 氯氰菊酯 三氟氯氰菊酯 溴氰菊酯

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孔雀石绿单克隆抗体的制备及直接竞争ELISA方法的建立 被引量：12

6

作者 李晓丽 陈雪岚 +1 位作者 刘春梅 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第24期283-286,共4页

通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的... 通过合成羧基化孔雀石绿,采用活泼酯法制备孔雀石绿免疫抗原CMG-BSA、检测抗原CMG-OVA。采用CMG-BSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化获得了一株稳定的抗孔雀石绿单克隆抗体,并建立了检测孔雀石绿的直接竞争ELISA方法。ELISA方法的最佳操作参数:孔雀石绿抗体稀释倍数1:16000(1mg/ml),酶标抗原(CMG-HRP)使用质量浓度0.2μg/ml。该方法具有良好的灵敏度和特异性,IC50值0.3ng/ml,最低检测灵敏度达到0.05ng/ml,标准曲线方程为y=-20.888x+81.423(R2=0.9813)。 展开更多

关键词 孔雀石绿 单克隆抗体 直接竞争elisa

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重金属铜的单抗的制备及免疫学检测方法的建立 被引量：11

7

作者 郝代玲 黄建芳 +4 位作者 杨浩 冯沛然 张宇 王宏 向军俭 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第19期245-248,255,共5页

目的:制备针对重金属铜离子的单克隆抗体,建立Cu2+的间接和直接竞争ELISA检测法,实现对Cu2+的快速定量测定。方法:利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-NOTA将Cu2+分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测原;用免疫原免疫Balb/c小鼠;细胞融合... 目的:制备针对重金属铜离子的单克隆抗体,建立Cu2+的间接和直接竞争ELISA检测法,实现对Cu2+的快速定量测定。方法:利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-NOTA将Cu2+分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测原;用免疫原免疫Balb/c小鼠;细胞融合后,通过间接及间接竞争ELISA筛选稳定分泌抗重金属铜的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;制备腹水型单抗并进行鉴定;建立间接竞争ELISA和直接竞争ELISA。结果:成功筛选出4株稳定分泌抗重金属铜的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中G8制备出腹水型单抗效价为5×105倍,抗体亚型为Ig G1型,轻链类型为κ型,特异性检测结果表明该单抗对NOTA及Mn2+、Pb2+、Cd2+、Zn2+等其金属离子交叉反应率远低于2%,与Mg2+交叉反应率小于8%,表明单克隆抗体G8对重金属Cu2+具有很强的特异性,不会干扰结果的准确性;建立间接竞争ELISA的检测灵敏度为29.8 ng/m L,检测限为2.4 ng/m L,线性范围为4.5~196.7 ng/m L;直接竞争ELISA检测法的检测灵敏度为12.89 ng/m L,检测限为0.88 ng/m L,检测范围为1.72~96.58 ng/m L。结论:成功制备出抗重金属铜离子的单克隆抗体,并建立了间接竞争ELISA和直接竞争ELISA。 展开更多

关键词 铜离子 单克隆抗体 间接竞争elisa 直接竞争elisa

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直接竞争ELISA法快速测定水产品中6种氟喹诺酮类药物 被引量：12

8

作者 王强 王旭峰 +4 位作者 杨金兰 陈培基 杨宏亮 黎智广 李刘冬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期61-65,共5页

采用过碘酸钠法将抗环丙沙星单克隆抗体（MAb-CIP）与辣根过氧化物酶（HRP）偶联制备酶标抗体MAbCIP-HRP,建立了检测水产品中6种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争酶联免疫吸附分析方法（dcELISA）,考察了包被原浓度、竞争反应时间和有机溶... 采用过碘酸钠法将抗环丙沙星单克隆抗体（MAb-CIP）与辣根过氧化物酶（HRP）偶联制备酶标抗体MAbCIP-HRP,建立了检测水产品中6种氟喹诺酮类药物残留的直接竞争酶联免疫吸附分析方法（dcELISA）,考察了包被原浓度、竞争反应时间和有机溶剂等因素对方法灵敏度的影响。结果表明：在优化的反应条件下,所建立的dcELISA针对环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星和双氟沙星6种氟喹诺酮类药物的检测限（LOD）均不超过0.5ng/mL,线性范围（IC20-IC80）在1.0-12.1ng/mL之间;对虾、鳗鲡和鲫鱼三种水产样品中添加5.0、10.0和20μg/kg时,加标回收率为70.4%-104.1%,相对标准偏差为5.0%~14.7%;本方法可用于水产品中氟喹诺酮类（FQs）药物多残留的快速测定。 展开更多

关键词 氟喹诺酮 抗体 直接竞争elisa 水产品

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牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立 被引量：10

9

作者 冯挺财 邵谱 +2 位作者 胡珩 杨正涛 张乃生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第18期7650-7652,7761,共4页

[目的]建立一种检测牛乳铁蛋白（LF）含量的竞争ELISA检测方法。[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体，采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价，建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法。[结果]纯化后，制备的鼠抗牛LF单抗效价达1：1280000，且鉴定为I... [目的]建立一种检测牛乳铁蛋白（LF）含量的竞争ELISA检测方法。[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体，采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价，建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法。[结果]纯化后，制备的鼠抗牛LF单抗效价达1：1280000，且鉴定为IgGl。该单抗对牛乳铁蛋白具有很强的特异性。制备酶标单抗的效价为1：640000。抗原包被物和酶标单抗的最适工作浓度分别为1．0μg／ml和1：40000。抗原用碳酸盐缓冲液（pH值为9．6）包被先在4℃过夜、再37℃放置2h的效果最好。采用2％牛血清白蛋白作为封闭剂的效果最好。在31．25．1000 ng／ml浓度范围内，牛乳铁蛋白的logit（B／B0）与牛乳铁蛋白浓度的对数值呈显著的线性关系，其回归方程为γ=-1．8991x＋5．0433（R^2=0．9873）。[结论]该研究为研制用于奶牛乳腺炎诊断的牛LF检测试剂盒奠定基础。 展开更多

关键词 牛乳铁蛋白 Celisa 定量检测

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苏丹红Ⅰ直接竞争ELISA检测试剂盒的研制 被引量：9

10

作者 张明洲 方结红 +4 位作者 陈宗伦 胡华军 杨岭 刘军 俞晓平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期341-348,共8页

直接包被多克隆抗体建立了苏丹红ⅠELISA检测技术,研制苏丹红ⅠELISA检测试剂盒。结果表明,制备的多克隆抗体对苏丹红Ⅰ亲合力强、特异性高,试剂盒标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1.55～100μg/L,50%抑制率(IC50... 直接包被多克隆抗体建立了苏丹红ⅠELISA检测技术,研制苏丹红ⅠELISA检测试剂盒。结果表明,制备的多克隆抗体对苏丹红Ⅰ亲合力强、特异性高,试剂盒标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1.55～100μg/L,50%抑制率(IC50)为13.52μg/L,灵敏度(IC10)为1.95μg/L,平均批内与批间变异系数分别为7.6%与10.6%,与苏丹红Ⅱ、Ⅲ的交叉反应率分别为4.40%和1.70%,与苏丹红Ⅳ及其他违禁食品染色剂交叉反应率低于0.01%;干辣椒、辣椒粉、辣椒油与辣椒酱等4种样品的苏丹红平均添加回收率分别为88.1%、91.4%、78.2%和84.3%,最低检测限分别为1.82、1.71、2.19和2.12μg/kg;与HPLC检测方法具有较高的相符性,4种样品相关系数分别为0.95,0.94,0.86和0.87;该试剂盒在4℃下至少可保存180d,可用于辣椒及其制品中苏丹红Ⅰ的批量快速低成本筛查。 展开更多

关键词 苏丹红Ⅰ 多克隆抗体 elisa直接竞争法 快速检测试剂盒

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直接竞争ELISA法检测蜂蜜中氯霉素残留 被引量：10

11

作者 刘姚 韦倩妮 +6 位作者 王弘 杨金易 孙远明 徐振林 沈兴 李向梅 雷红涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第16期336-342,共7页

建立蜂蜜中氯霉素直接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以抗氯霉素单克隆抗体为包被原,氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺作显色底物,对其主要影响因素,如标准品稀... 建立蜂蜜中氯霉素直接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以抗氯霉素单克隆抗体为包被原,氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺作显色底物,对其主要影响因素,如标准品稀释液、包被温度、包被抗体稀释倍数等6个因素进行优化,同时还对该方法的准确性和稳定性进行考察。结果表明:所建立的直接竞争ELISA标准曲线方程式为y=-17.425x+97.509,相关系数R^2为0.991 2,IC_(50)值为0.63 ng/mL,检出限和线性检测范围分别为(0.04±0.01)ng/mL和0.10~4.17 ng/mL;另外整个检测反应过程耗时约为40 min。蜂蜜样品的检出限和定量限分别为0.15 ng/g和0.33 ng/g,添加回收率在97.58%~100.94%之间,批内变异系数和批间变异系数均小于11%,表明该方法具有高精确度和稳定性。 展开更多

关键词 氯霉素 蜂蜜 直接竞争elisa 优化

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直接竞争酶联免疫吸附分析法测定桃中氰戊菊酯的残留量 被引量：10

12

作者 曾俊源 崔巧利 刘曙照 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期61-65,共5页

采用包被抗体、酶标半抗原直接竞争酶联免疫吸附分析法（ELISA）测定了氰戊菊酯在桃中的残留量。结果表明：在氰戊菊酯多克隆抗体包被浓度为4．0mg／L、辣根过氧化物酶（HRP）标记氰戊菊酯半抗原稀释1．0×10^5倍条件下，ELISA法检... 采用包被抗体、酶标半抗原直接竞争酶联免疫吸附分析法（ELISA）测定了氰戊菊酯在桃中的残留量。结果表明：在氰戊菊酯多克隆抗体包被浓度为4．0mg／L、辣根过氧化物酶（HRP）标记氰戊菊酯半抗原稀释1．0×10^5倍条件下，ELISA法检测氰戊菊酯的线性浓度范围为0．01-10mg／L，氰戊菊酯对抗体．酶标半抗原反应的抑制中浓度（IC50）为193μg／L，相对标准偏差（RSD，n=5）为4．5％，IC20为13．5μg／L。在2、0．2和0．05mg／kg添加水平下，ELISA法测定桃中氰戊菊酯的回收率分别为81％-89％、85％～98％和85％-106％，RSD（n=5）分别为5．1％、5．6％和7．7％。ELISA法对桃中氰戊菊酯的最低检出浓度为0．014mg／kg。 展开更多

关键词 氰戊菊酯 桃 直接竞争酶联免疫吸附分析 高效液相色谱 残留

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除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究 被引量：6

13

作者 雷红涛 冯伟雯 +4 位作者 沈玉栋 杨金易 王弘 方坚生 孙远明 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期1018-1023,共6页

制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2... 制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2×PBS,不含BSA、甲醇,建立的标准曲线IC50=1.7ng·mL-1,检测限为0.006ng·mL-1,检测范围0.06～2616.7ng·mL-1,批内变系数9.25%,批间变异系数23.55%。蒸馏水以及稀释10倍后的矿泉水、池塘水、稻田水添加1ng·mL-1和10ng·mL-1的丁草胺,用所建立的方法检测,平均回收率分别为93.27%、158.50%、119.75%、124.51%。本研究为进一步开发丁草胺免疫分析试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 丁草胺 酶标抗体 直接竞争elisa 除草剂

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直接竞争化学发光酶免疫法检测谷物中的伏马菌素B_1 被引量：7

14

作者 何庆华 许杨 刘师文 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第22期173-176,共4页

建立1种检测谷物中伏马菌素B1的直接竞争化学发光酶免疫方法。该方法的最佳检测条件为:抗原包被质量浓度0.4μg/mL,酶标抗体3000倍稀释,竞争反应时间20min;检测限为0.13ng/mL,半抑制浓度(IC50)为1.43ng/mL,批内变异系数2.4%,批间变异系... 建立1种检测谷物中伏马菌素B1的直接竞争化学发光酶免疫方法。该方法的最佳检测条件为:抗原包被质量浓度0.4μg/mL,酶标抗体3000倍稀释,竞争反应时间20min;检测限为0.13ng/mL,半抑制浓度(IC50)为1.43ng/mL,批内变异系数2.4%,批间变异系数9.2%,以玉米为样品的加标回收率达到100.2%～115.4%。谷物盲样的检测结果显示,该方法与酶联免疫吸附检测试剂盒、高效液相色谱检测结果的相关系数分别为0.9793、0.9851,三者之间无显著性差异,所建立的直接竞争化学发光酶免疫方法可用于谷物样品中伏马菌素B1的大规模快速筛查。 展开更多

关键词 伏马菌素B1 化学发光酶免疫分析 直接竞争酶联免疫分析

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兽药制剂中氯霉素的ELISA检测方法的研究 被引量：6

15

作者 张连彦 王亚芳 +4 位作者 李应超 李蓉蓉 邢维维 杨柳 陶晓奇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期85-88,共4页

为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争E... 为了检测兽药制剂中氯霉素的非法添加,优化反应条件和前处理方法,建立直接竞争ELISA方法。该方法检出限为1 mg/kg,添加回收率为81.00%~112.00%,批内和批间变异系数均小于10%,与国标仪器方法检测结果一致性好。本文建立的氯霉素直接竞争ELISA方法具有较高的精确度和稳定性,操作简单,检测时间短,可满足兽药制剂中氯霉素的检测。 展开更多

关键词 氯霉素 兽药制剂 直接竞争酶联免疫方法

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直接竞争酶联免疫吸附分析法测定甘蔗中的克百威残留 被引量：5

16

作者 刘腾飞 刘曙照 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期289-293,共5页

采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定了甘蔗中的克百威残留量。在优化条件下,对克百威标样检测的线性范围为0.0001～1mg/L,抑制中浓度(IC50)=3.09μg/L,5次重复测定的相对标准偏差(RSD)为9.3%,IC20值为0.085μg/L。甘蔗... 采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定了甘蔗中的克百威残留量。在优化条件下,对克百威标样检测的线性范围为0.0001～1mg/L,抑制中浓度(IC50)=3.09μg/L,5次重复测定的相对标准偏差(RSD)为9.3%,IC20值为0.085μg/L。甘蔗中分别添加克百威标样1,0.1,0.01mg/kg,直接竞争ELISA法测定的回收率分别为86.3%～99.1%,89.0%～101%和70.7%～90.6%,RSD(n=5)分别为5.4%,5.2%和10.7%。ELISA法对甘蔗中克百威残留的最小检出量为6.3×10-11g,定量限可达1.26μg/kg。而同样前处理条件下高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)法对克百威的最小检出量为5×10-8g,检测甘蔗中克百威残留的定量限仅为2.5mg/kg。 展开更多

关键词 直接竞争酶联免疫吸附分析 甘蔗 克百威 残留量 高效液相色谱

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基于氯霉素单克隆抗体的ELISA方法的建立 被引量：5

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作者 张立辰 生威 +2 位作者 胡高爽 张燕 王硕 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第24期127-130,共4页

旨在建立一种用于检测海产品中氯霉素残留的ELISA检测方法。利用活化酯法将氯霉素半抗原连接到载体蛋白KLH上,制备氯霉素人工抗原,并免疫小鼠。通过杂交瘤技术筛选出一株能稳定分泌抗体的细胞株10A3B6E,经小鼠体内培养制备腹水并经纯化... 旨在建立一种用于检测海产品中氯霉素残留的ELISA检测方法。利用活化酯法将氯霉素半抗原连接到载体蛋白KLH上,制备氯霉素人工抗原,并免疫小鼠。通过杂交瘤技术筛选出一株能稳定分泌抗体的细胞株10A3B6E,经小鼠体内培养制备腹水并经纯化得到单克隆抗体。单克隆抗体的重链为Ig G1,轻链为Kappa。通过对免疫分析方法工作条件的优化,建立了一种简便、快捷、实用的检测氯霉素的直接竞争ELISA方法。该方法 IC50值为（0.54±0.04）ng/m L,IC15值为（0.10±0.03）ng/m L。该抗体与氯霉素琥珀酸钠、甲砜霉素、氟甲砜霉素、链霉素的交叉反应率分别为78%、0.09%、0.25%和0.05%,与四环素的交叉反应率低于0.002%,说明该抗体是一种高特异性抗体。利用所建立的直接竞争ELISA方法对鳕鱼和虾样品进行检测,添加回收率在62.6%~120.0%之间,变异系数在0.94%~13.52%之间。本研究所建立的直接竞争ELISA方法具有较好的准确性和灵敏度,可以用来对海产品中的氯霉素残留情况进行检测。 展开更多

关键词 氯霉素 海产品 兽药残留 单克隆抗体 直接竞争elisa

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饲料中T-2毒素直接竞争ELISA检测方法的建立 被引量：5

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作者 冯才伟 郝士元 +3 位作者 孙满义 马腊腊 刘琳 王建霞 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第1期110-113,共4页

采用直接竞争ELISA方法建立了一种快速检测饲料样本中T-2毒素残留的方法,在0～81μg/L范围内,T-2毒素的Logit(B/B0)与T-2毒素质量浓度的对数呈显著的线性关系,并对该检测体系的检测限、准确度、精密度等性能进行了测定。结果显示,该方法... 采用直接竞争ELISA方法建立了一种快速检测饲料样本中T-2毒素残留的方法,在0～81μg/L范围内,T-2毒素的Logit(B/B0)与T-2毒素质量浓度的对数呈显著的线性关系,并对该检测体系的检测限、准确度、精密度等性能进行了测定。结果显示,该方法的IC50(半数抑制质量浓度)为2.8μg/L,对饲料样本的检测限为10μg/kg,样本添加回收率为77.6%～98.2%,变异系数为5.1%～12.0%。该方法操作简便、准确,检测时间短(仅需15min),适用于饲料样本中T-2毒素的快速检测。 展开更多

关键词 直接竞争酶联免疫法 T-2毒素 饲料 检测

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谷物中伏马菌素B_1残留的直接竞争ELISA检测方法研究 被引量：4

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作者 介明沙 张卫民 +3 位作者 于斐 玉崧成 吴拥军 张洪权 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期35-38,共4页

以抗伏马菌素B1（Fumonisin B1,FB1）单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶（HRP-FB1）作为标记抗原,建立检测谷物中FB1的直接竞争酶联免疫吸附法（dc-ELISA）;并与国家标准方法（HPLC,GB/T255228—2010）进行比较,选取真菌毒素呕吐毒素、... 以抗伏马菌素B1（Fumonisin B1,FB1）单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶（HRP-FB1）作为标记抗原,建立检测谷物中FB1的直接竞争酶联免疫吸附法（dc-ELISA）;并与国家标准方法（HPLC,GB/T255228—2010）进行比较,选取真菌毒素呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1考察方法的特异性.结果显示：该dc-ELISA方法线性范围在200~800ng/mL之间,回归方程为Y=-0.0008X＋0.9789,决定系数R2为0.9974,检出限为182.4ng/mL,6份样品的批内和批间变异系数分别为7.4%和7.7%,平均加标回收率为98.5%（n=6）.样品检测显示dc-ELISA与HPLC方法具有良好的相关性（r=0.9996）,与其他真菌毒素无交叉反应.因此,dc-ELISA法可应用检测玉米等谷物中FB1的含量,适合大批量筛选样品. 展开更多

关键词 伏马菌素B1 直接竞争elisa 检测 谷物

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麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体在直接竞争ELISA检测方法中的应用 被引量：3

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作者 罗辉武 向军俭 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期717-719,共3页

目的利用麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体建立麻痹性贝类毒素GTX2,3直接竞争ELISA(dc-ELISA)检测方法。方法通过过氧化反应将GTX2,3与辣根过氧化物酶(HRP)偶联。以兔抗小鼠IgG多抗为包被抗体,GTX2,3为竞争剂,与GTX2,3-HRP竞争结合GTX2,... 目的利用麻痹性贝类毒素GTX2,3单克隆抗体建立麻痹性贝类毒素GTX2,3直接竞争ELISA(dc-ELISA)检测方法。方法通过过氧化反应将GTX2,3与辣根过氧化物酶(HRP)偶联。以兔抗小鼠IgG多抗为包被抗体,GTX2,3为竞争剂,与GTX2,3-HRP竞争结合GTX2,3单克隆抗体,初步建立检测麻痹性贝类毒素GTX2,3的dc-ELISA,并用该方法检测GTX2,3单克隆抗体与C2毒素之间的交叉反应。结果直接ELISA检测证实GTX2,3与HRP偶联成功。dc-ELISA检测麻痹性贝类毒素GTX2,3的灵敏度为1.5μg/ml,工作范围为1.5～40μg/ml,GTX2,3毒素与C2毒素无交叉反应。该方法具有良好的特异性。结论dc-ELISA适用于麻痹性贝类毒素的快速检测。 展开更多

关键词 麻痹性贝类毒素 GTX2-3 单克隆抗体 直接竞争elisa

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