目的获得球形孢子丝菌液泡分选蛋白34(vacuolar protein sorting 34,Vps34)编码基因全长序列,并探讨vps34基因在球形孢子丝菌(Sporothrix globosa)由菌丝相向酵母相转换中的作用。方法利用快速扩增cDNA末端技术(rapid amplification of ...目的获得球形孢子丝菌液泡分选蛋白34(vacuolar protein sorting 34,Vps34)编码基因全长序列,并探讨vps34基因在球形孢子丝菌(Sporothrix globosa)由菌丝相向酵母相转换中的作用。方法利用快速扩增cDNA末端技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)方法分别扩增球形孢子丝菌vps34基因3′端和5′端序列,序列拼接后进行生物信息分析,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析vps34基因在菌丝相和酵母相的表达差异。结果球形孢子丝菌vps34基因全长共3 228bp,其中CDS区长度为3000bp,编码999个氨基酸,相对分子质量(Mr)为111.49×10^3,等电点为6.38,包含C2_PI3K_class_Ⅲ、PI3Ka_Ⅲ、PI3Kc_Ⅲ共3个结构域;qRT-PCR检测结果显示,24h时,球形孢子丝菌酵母相的vps34表达量高于菌丝相(P<0.05),48h时差异最大(P<0.01)。结论vps34基因参与了球形孢子丝菌双相型转换的过程,而球形孢子丝菌vps34基因全长的获得为进一步研究Vps34p的功能提供实验资料。展开更多
