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FGF10基因调节山羊成肌细胞分化相关基因表达的研究 被引量:5
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作者 王雨雪 许晴 +4 位作者 张浩 王永 朱江江 林亚秋 熊燕 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第3期1-6,共6页
为了阐明FGF10基因对山羊成肌细胞分化的影响,试验以简州大耳山羊羔羊的成肌细胞为研究对象,体外培养并诱导分化为肌管,采用实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因在诱导分化过程中的表达水平;同时采用腺病毒过表达和SiRNA干扰技术、形态学... 为了阐明FGF10基因对山羊成肌细胞分化的影响,试验以简州大耳山羊羔羊的成肌细胞为研究对象,体外培养并诱导分化为肌管,采用实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因在诱导分化过程中的表达水平;同时采用腺病毒过表达和SiRNA干扰技术、形态学观察和实时荧光定量PCR技术检测FGF10基因功能获得和缺失对成肌细胞中肌管形成的影响,以及分化相关基因MyoD1、Myf5、Myf6、MyoG的表达情况。结果表明:成肌细胞在分化第2~4天时,出现大量肌管,诱导分化成功。FGF10基因随着成肌细胞分化时间的延长呈现先升高后下降的趋势,且在诱导分化第2天时极显著高于分化前(P<0.01)。过表达FGF10基因时成肌细胞中的肌管形成减少,极显著下调MyoD1(P<0.01)和显著下调Myf5(P<0.05)基因的相对表达水平;而干扰FGF10基因时成肌细胞中的肌管形成增加,极显著上调MyoG(P<0.01)和显著上调Myf5(P<0.05)基因的相对表达水平。说明FGF10基因可能是山羊成肌细胞分化的负调控因子。 展开更多
关键词 山羊 FGF10基因 成肌细胞 分化相关基因 过表达 RNA干扰
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胃癌细胞中NDRG2的表达及诱导分化研究 被引量:2
2
作者 常晓静 周欢娣 +4 位作者 薛晓英 李彦格 张歌 杨玉 王立文 《肿瘤预防与治疗》 2018年第6期381-385,共5页
目的:研究分化相关基因NDRG2在胃癌细胞中的表达及与细胞分化的关系。方法:采用RT-PCR及Western blot检测胃永生化粘膜上皮细胞GES1及6株胃癌细胞株中NDRG2的m RNA及蛋白的表达情况,进一步采用分化诱导剂TPA处理胃癌细胞株,分析NDRG2的... 目的:研究分化相关基因NDRG2在胃癌细胞中的表达及与细胞分化的关系。方法:采用RT-PCR及Western blot检测胃永生化粘膜上皮细胞GES1及6株胃癌细胞株中NDRG2的m RNA及蛋白的表达情况,进一步采用分化诱导剂TPA处理胃癌细胞株,分析NDRG2的表达水平及恶性表型是否可逆转。结果:与胃永生化粘膜上皮细胞GES1相比,NDRG2在6株胃癌细胞中有不同程度的表达下调,未分化胃癌细胞株HGC27中表达最低(P <0. 05)。不同浓度的分化诱导剂TPA(0、10、50、100nmol/L)处理胃癌细胞株HGC27后,随TPA浓度升高,NDRG2表达上调,100nmol/L组表达最高(P <0. 05),Transwell实验显示TPA干预组胃癌细胞的侵袭力明显减弱。结论:分化诱导剂干预可上调胃癌细胞NDRG2表达水平,逆转细胞恶性表型,且与细胞分化成正相关,故NDRG2可能是胃癌中一种候选的肿瘤抑制基因。 展开更多
关键词 胃癌 分化相关基因 NDRG2 细胞分化
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鼻病毒感染社区获得性肺炎儿童黑色素瘤分化相关基因5基因多态性及其临床意义 被引量:2
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作者 何琼 李艳萍 +2 位作者 何娟 程强 鲁源 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1259-1262,共4页
目的探讨鼻病毒(HRV)感染社区获得性肺炎(CAP)儿童黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)基因多态性及其临床意义。方法选择鄂州市妇幼保健院儿科2020年1月-2022年1月明确HRV感染CAP患儿86例为研究组,按照1∶1比例随机选择医院接受体检健康儿童8... 目的探讨鼻病毒(HRV)感染社区获得性肺炎(CAP)儿童黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)基因多态性及其临床意义。方法选择鄂州市妇幼保健院儿科2020年1月-2022年1月明确HRV感染CAP患儿86例为研究组,按照1∶1比例随机选择医院接受体检健康儿童86名为对照组。统计所有儿童性别、年龄、接种肺炎疫苗和被动吸烟情况;统计HRV感染者混合感染、合并呼吸困难和住院天数。所有患儿均在入院当天抽取外周血标本,根据HRV病毒VP4/VP2结合区片段以及MDA基因多态性位点设计特异性引物,采用一步法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)以相同条件进行扩增,根据CT值区分HRV分型和MDA基因多态性基因型分布情况。结果研究组和对照组MDA5基因GG、GA和AA基因型实际频数和理论频数比较差异无统计学意义;研究组携带GG基因型、G等位基因频率较对照组低,携带AA基因型、A等位基因频率较对照组高(P<0.05),两组携带GA基因型频率对比未见统计学差异;研究组携带AA基因型患儿和携带GG/GA型患儿HRV分型、混合感染、合并呼吸困难和住院天数比较差异无统计学意义。结论MDA5基因的遗传性差异可能是导致不同儿童对HRV感染所致CAP的因素之一,其机制还需进一步深入研究。 展开更多
关键词 黑色素瘤分化相关基因5 基因多态性 儿童 鼻病毒 社区获得性肺炎
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多发性骨髓瘤细胞分泌外泌体对破骨细胞分化的调控及其机制
4
作者 吴洋 吴镜 +2 位作者 罗晓慧 张哲梅 侯金霞 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第11期1470-1476,共7页
目的探究多发性骨髓瘤外泌体调控破骨细胞分化相关基因表达的功能及机制。方法为了探究多发性骨髓瘤细胞对破骨细胞分化的影响,实验分为control组(THP-1细胞)、OPM2组(THP-1+OPM2细胞)、U266组(THP-1+U266细胞)、OPM2+GW4869组(THP-1+O... 目的探究多发性骨髓瘤外泌体调控破骨细胞分化相关基因表达的功能及机制。方法为了探究多发性骨髓瘤细胞对破骨细胞分化的影响,实验分为control组(THP-1细胞)、OPM2组(THP-1+OPM2细胞)、U266组(THP-1+U266细胞)、OPM2+GW4869组(THP-1+OPM2细胞+GW4869)和U266+GW4869组(THP-1+U266细胞+GW4869)。提取OPM2和U266细胞分泌的外泌体(OPM2 exo和U266 exo),透射电镜观察外泌体结构,Western blot鉴定外泌体标志蛋白TSG101、Hsp70、CD9。为了探究外泌体对破骨细胞分化的影响,实验分为OPM2 exo组(THP-1细胞+OPM2 exo)、U266 exo组(THP-1细胞+U266 exo)和PBS组(THP-1细胞+PBS)。qRT-PCR检测所有组细胞中活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATc1)、细胞原癌基因c-Fos、组织蛋白酶K(Cathepsin K,CTSK)mRNA相对表达量,Western blot检测所有组THP-1细胞NFATc1、c-Fos、CTSK、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)、动力蛋白激活蛋白4(dynactin 4,P62)蛋白表达量。结果OPM2 exo和U266 exo粒径在100 nm左右,“杯托”样结构,并且表达标志蛋白TSG101、Hsp70、CD9。相比于control组,OPM2组和U266组THP-1细胞NFATc1、c-Fos、CTSK mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.001),LC3Ⅱ蛋白表达显著上调(P<0.001),P62蛋白表达显著下调(P<0.001)。OPM2+GW4869组细胞NFATc1、c-Fos、CTSK mRNA和蛋白表达显著低于OPM2组(P<0.001),U266+GW4869组细胞NFATc1、c-Fos、CTSK mRNA和蛋白表达显著低于U266组(P<0.001)。相比于PBS组,OPM2 exo组和U266 exo组NFATc1、c-Fos、CTSK mRNA和蛋白表达显著上调(均P<0.001),LC3Ⅱ蛋白表达显著上调(P<0.001),P62蛋白表达显著下调(P<0.001)。结论多发性骨髓瘤细胞外泌体可能通过促进细胞自噬诱导破骨细胞分化。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 外泌体 破骨细胞分化 破骨细胞分化相关基因 自噬
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红鳍东方鲀幼鱼中性别分化相关基因的表达分析 被引量:3
5
作者 姜洁明 沈旭芳 +6 位作者 刘鹰 张琦 周慧婷 王佳 闫红伟 王辰奇 刘奇 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期362-369,共8页
为查明性别分化相关基因在红鳍东方鲀性别分化关键时期的表达规律,以孵化后40、60、80 d的红鳍东方鲀幼鱼为试验对象,对性腺进行组织学观察,并对采样个体进行遗传性别鉴定,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法研究amhr2、dmrt1、gsdf、c... 为查明性别分化相关基因在红鳍东方鲀性别分化关键时期的表达规律,以孵化后40、60、80 d的红鳍东方鲀幼鱼为试验对象,对性腺进行组织学观察,并对采样个体进行遗传性别鉴定,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法研究amhr2、dmrt1、gsdf、cyp19a1a、foxl2、dnmt1基因在遗传型为XX(雌性)和XY(雄性)幼鱼性腺中的表达规律。结果显示,上述基因的表达呈现出明显的性别二态性,其中amhr2基因在孵化后40、60 d XX和XY个体性腺中的表达量差异不显著(P>0.05),但在孵化后80 d的XX个体性腺中的表达量显著高于在XY个体性腺中的表达量(P<0.05)。Dmrt1和gsdf基因从孵化后20 d开始在XY个体性腺中的表达量显著上升(P<0.05),且在所有采样时间点的表达量均显著高于在XX个体性腺中的表达量(P<0.05)。Cyp19a1a和foxl2基因在孵化后40、60、80 d的XX个体性腺中的表达量显著高于在XY个体性腺中的表达量(P<0.05)。而dnmt1基因在孵化后40、60 d的XX和XY个体性腺中的表达量差异不显著(P>0.05),但在孵化后80 d时XY个体性腺中的表达量显著高于XX个体性腺中的表达量(P<0.05)。研究结果表明,dmrt1和gsdf基因可能在红鳍东方鲀精巢分化过程中具有重要的作用,cyp19a1a和foxl2可能在卵巢分化过程中具有重要的作用。以上试验结果可为深入研究性别分化相关基因在红鳍东方鲀性别分化过程中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 红鳍东方鲀 幼鱼 性别分化相关基因 基因表达
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脂肪分化相关蛋白基因与2型糖尿病相关 被引量:1
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作者 吴刚 李果 +4 位作者 骆天红 董艳 徐世杰 黄薇 罗敏 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期304-306,共3页
目的通过单核苷酸多态性(SNP)的检测及基因分型来研究脂肪分化相关蛋白基因(ADRP)与2型糖尿病的相关性。方法使用PCR测序方法,对ADRP基因的启动子、外显子以及临近的内含子,分别在正常人群、2型糖尿病人群进行测序,确定该基因是否与华... 目的通过单核苷酸多态性(SNP)的检测及基因分型来研究脂肪分化相关蛋白基因(ADRP)与2型糖尿病的相关性。方法使用PCR测序方法,对ADRP基因的启动子、外显子以及临近的内含子,分别在正常人群、2型糖尿病人群进行测序,确定该基因是否与华东地区汉族2型糖尿病患者相关。结果所测ADRP基因片段总长度5003个碱基,有23个SNP,高频、低频分别是5个、18个。启动子的一个SNP(P/-407)在2型糖尿病人群与正常人群的等位基因型、基因型差异均有显著性(P<0.05);两个错义突变Ser251Pro、Thr396Ala分别在两个2型糖尿病家系中传递。结论ADRP可能与华东地区汉族人2型糖尿病相关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 ADRP 相关蛋白 基因 正常人群 病人 分化 启动子 内含子 碱基
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瘦素对hBMSCs成骨分化的作用及机制研究 被引量:3
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作者 徐俊昌 吴涛 +3 位作者 钟招明 赵成毅 汤勇智 陈建庭 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期140-144,共5页
目的探讨瘦素(leptin,LEP)对hBMSCs成骨分化的作用及机制。方法采用全骨髓法培养hBMSCs,取第3代hBMSCs分为A、B、C、D、E、F组,待细胞贴壁后各组分别加入400、200、100、50 ng/mL LEP、100 ng/mL BMP和普通培养基2 mL进行培养。于培养后... 目的探讨瘦素(leptin,LEP)对hBMSCs成骨分化的作用及机制。方法采用全骨髓法培养hBMSCs,取第3代hBMSCs分为A、B、C、D、E、F组,待细胞贴壁后各组分别加入400、200、100、50 ng/mL LEP、100 ng/mL BMP和普通培养基2 mL进行培养。于培养后7 d行ALP染色、21 d行矿化结节染色,倒置相差显微镜观察染色结果;并于培养后7、14、21 d,检测各组ALP活性、骨钙素(osteocalcin,OCN)水平,筛选LEP的最佳诱导浓度;B、E、F组细胞培养7 d后,采用RT-PCR检测成骨相关基因:核心结合因子(core-binding factorα1,Cbfα1)、ALP、ColⅠ、OCN mRNA的表达。结果诱导培养7 d,ALP染色结果显示,A、B、C、D、E组细胞胞浆均呈蓝色阳性着色,F组呈弱阳性;诱导培养21 d,矿化结节染色结果显示,A、B、C、D、E组细胞染色呈阳性,F组呈阴性。B组培养后7、14、21 d,ALP、OCN活性低于E组,但显著高于其余各组,差异均有统计学意义(P<0.05),200 ng/mL LEP为最佳浓度。B、E、F组细胞培养7 d,F组Cbfα1、ALP、ColⅠ、OCN mRNA均不表达;B、E组各产物mRNA均有表达,但B组低于E组。结论LEP可促进hBMSCs成骨分化,其机制可能为LEP促进了成骨相关基因的表达。 展开更多
关键词 瘦素hBMSCs 成骨分化 成骨相关基因 基因表达
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高温诱导对性成熟尼罗罗非鱼性腺中性别分化相关基因表达的影响 被引量:2
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作者 李春歌 赵燕 +3 位作者 陈红菊 付佩胜 王慧 季相山 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期214-224,共11页
利用qRT-PCR系统分析了高温诱导对8月龄尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)性腺组织中8个性别分化相关基因、4个热激蛋白基因及2个甲基转移酶基因表达的影响。结果显示,高温诱导能显著下调卵巢发育相关基因Cyp19a1a、ERα和ERβ的表达水... 利用qRT-PCR系统分析了高温诱导对8月龄尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)性腺组织中8个性别分化相关基因、4个热激蛋白基因及2个甲基转移酶基因表达的影响。结果显示,高温诱导能显著下调卵巢发育相关基因Cyp19a1a、ERα和ERβ的表达水平(P<0.05),但对雌鱼精巢发育相关基因Cyp11b2和Dmrt1的表达水平没有显著影响(P>0.05),这与高温对性腺分化期罗非鱼性别分化相关基因表达的影响不同。高温诱导后雌雄鱼性腺中Hsp70的表达水平显著上升(P<0.05),而DNAJB1的表达水平却显著下降(P<0.05),Hsp27和Hsp90的表达水平无显著变化。高温诱导能显著上调雌鱼性腺中Dnmt1与Dnmt3a基因的表达水平(P<0.05)。本研究通过分析高温诱导对性成熟尼罗罗非鱼性别分化相关基因表达的影响,旨在揭示高温诱导对罗非鱼性别分化相关基因表达的影响具有一定的时期特异性,为研究温度影响鱼类性别分化的分子机理提供基础。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 高温诱导 性别分化相关基因 热激蛋白基因 甲基转移酶基因
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玉柏石松中甾体化合物对体外培养成骨细胞活性的影响 被引量:3
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作者 王朝元 胡蝶 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第2期22-27,共6页
为研究玉柏石松中甾体化合物豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA)对体外培养小鼠成骨细胞系MC3T3-E1活性的影响,用Alamar Blue法检测了成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶试剂盒检测了细胞中碱性磷酸酶活性,茜素红染色检测了成骨细胞矿化水平,荧光定量PCR... 为研究玉柏石松中甾体化合物豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA)对体外培养小鼠成骨细胞系MC3T3-E1活性的影响,用Alamar Blue法检测了成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶试剂盒检测了细胞中碱性磷酸酶活性,茜素红染色检测了成骨细胞矿化水平,荧光定量PCR检测了成骨细胞骨分化相关基因的表达.结果显示:8μmol/L和16μmol/L的SA处理细胞8 d能抑制成骨细胞碱性磷酸活性;处理细胞16 d能提高骨细胞矿化水平.SA抑制成骨早期分化相关基因(Runx-2和Osterix)的表达,促进骨基质蛋白OPN和骨重建相关转录因子(Jun-D,Fra-1和Fra-2)的表达.故SA具有促进骨折愈合的成骨活性,可能通过促进相关转录因子表达,骨折断面旧骨的吸收和骨基质钙化等方式完成. 展开更多
关键词 豆甾烷-3-酮-21-羧酸(SA) 成骨活性 骨分化相关基因表达 骨矿化
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抗MDA5抗体相关性皮肌炎的临床、 实验室表现及治疗研究 被引量:2
10
作者 孙瑞希 付萍 《医学信息》 2021年第8期31-35,共5页
抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体是一种首先发现于临床无肌病性皮肌炎(CADM)的自身抗体,常见于皮肌炎(DM)患者,临床表现比较特别。MDA5在亚裔人群中与快速进展性肺间质病变(RPILD)高度相关,患者病情往往较重,常规免疫治疗效果不佳,... 抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体是一种首先发现于临床无肌病性皮肌炎(CADM)的自身抗体,常见于皮肌炎(DM)患者,临床表现比较特别。MDA5在亚裔人群中与快速进展性肺间质病变(RPILD)高度相关,患者病情往往较重,常规免疫治疗效果不佳,预后极差,死亡率较高,治疗上无统一标准。本文主要对抗MDA5抗体及其相关性皮肌炎的临床表现、实验室指标、治疗进展进行综述,以期提高临床对该病的认识。 展开更多
关键词 抗黑色素瘤分化相关基因5抗体 皮肌炎 肺间质病变
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N-乙酰半胱氨酸对大鼠压力负荷性心力衰竭保护作用研究 被引量:1
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作者 宋宏界 李艳华 +3 位作者 王宇奇 张健 赵川 王翠兰 《临床军医杂志》 CAS 2019年第3期228-230,233,共4页
目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠压力负荷性心力衰竭的保护作用。方法将30只普通级8周龄雄性SD大鼠分入对照组、模型组和NAC给药组。所有大鼠术后干预3周,饲养至第7周后,测量每组剩余大鼠心脏质量,并计算心脏质量指数(HWI),通过实时... 目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠压力负荷性心力衰竭的保护作用。方法将30只普通级8周龄雄性SD大鼠分入对照组、模型组和NAC给药组。所有大鼠术后干预3周,饲养至第7周后,测量每组剩余大鼠心脏质量,并计算心脏质量指数(HWI),通过实时聚合酶链反应和Western blot技术检测黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、肌醇依赖酶1α(IRE1α)、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)和氧化应激Nrf2/Keap1通路关键基因及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏质量、HWI显著增加,氧化应激指标MDA5与IRE1αmRNA及蛋白表达均明显升高,SOD-1 mRNA及蛋白表达显著降低,氧化应激通路Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白表达均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,给药组大鼠心脏质量、HWI显著降低,MDA5与IRE1αmRNA及蛋白水平明显降低,而SOD-1 mRNA及蛋白水平明显升高,Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白平均明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NAC对大鼠压力负荷性心力衰竭有保护作用,其作用机制可能通过调控氧化应激Nrf2/Keap1通路有关。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 氧化应激 心力衰竭 黑色素瘤分化相关基因5 肌醇依赖酶1α 超氧化物歧化酶-1 Nrf2/Keap1通路
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N-myc分化相关基因1与癌症的关系 被引量:1
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作者 史杪 陈晓东 《包头医学院学报》 CAS 2013年第3期113-115,共3页
N-myc分化相关基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)在许多细胞的生理功能中起着重要作用,细胞生长、分化和多种应激的情况都可以影响NDRG1蛋白的表达水平,NDRG1的缺乏可能导致多种疾病。在多种癌细胞系中,NDRG1的转录和翻... N-myc分化相关基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)在许多细胞的生理功能中起着重要作用,细胞生长、分化和多种应激的情况都可以影响NDRG1蛋白的表达水平,NDRG1的缺乏可能导致多种疾病。在多种癌细胞系中,NDRG1的转录和翻译与肿瘤的分化和转移有关。在缺氧环境中,NDRG1的表达水平上调,而在许多肿瘤细胞中都存在缺氧的现象,这使得NDRG1与缺氧和癌症之间存在着复杂的关系。NDRG1与癌症的关系使NDRG1可能作为癌症进展的标识和癌症诊断的辅助工具。 展开更多
关键词 N-myc分化相关基因1 缺氧 癌症
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抗MDA5抗体在皮肌炎相关性间质性肺病中的表达意义 被引量:1
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作者 曲祥文 楚荷莹 +2 位作者 孙金磊 李靖 张国俊 《河南医学研究》 CAS 2020年第10期1739-1743,共5页
目的探讨抗MDA5抗体在皮肌炎相关性间质性肺病(DM-ILD)严重程度及预后评估中的意义。方法收集2018年3月至2019年7月在郑州大学第一附属医院就诊的140例皮肌炎(DM)患者的临床资料。将101例抗MDA5抗体阴性的患者纳入A组,将39例抗MDA5抗体... 目的探讨抗MDA5抗体在皮肌炎相关性间质性肺病(DM-ILD)严重程度及预后评估中的意义。方法收集2018年3月至2019年7月在郑州大学第一附属医院就诊的140例皮肌炎(DM)患者的临床资料。将101例抗MDA5抗体阴性的患者纳入A组,将39例抗MDA5抗体阳性的患者纳入B组。根据患者是否合并ILD,将A组患者分为A1组(抗MDA5抗体阴性不合并ILD,54例)和A2组(抗MDA5抗体阴性合并ILD,47例),将B组患者分为B1组(抗MDA5抗体阳性不合并ILD,2例)和B2组(抗MDA5抗体阳性合并ILD,37例)。比较各组一般资料、血清涎液化糖链抗原-6(KL-6)、一氧化碳弥散量(DLCO)及胸部高分辨率CT(HRCT)评分。结果 B组仅存在皮疹的患者比例高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。B2组女性所占比例低于A2组,且仅存在皮疹的患者比例高于A2组,差异有统计学意义(均P<0.05)。B组KL-6水平高于A组,DLCO水平低于A组,差异有统计学意义(均P<0.05)。B2组与B1组抗MDA5抗体滴度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。B2组KL-6水平高于B1组和A2组,B2组DLCO水平低于B1组和A2组,差异有统计学意义(均P<0.05)。DLCO与KL-6呈负相关(r=-0.573,P<0.05),与抗MDA5抗体滴度无关(r=0.245,P>0.05)。B2组HRCT评分高于A2组,差异有统计学意义(P<0.05)。HRCT评分与抗MDA5抗体滴度水平呈正相关(r=0.356,P<0.05),与KL-6水平呈正相关(r=0.638,P<0.05),与DLCO呈负相关(r=-0.326,P<0.05)。B组累积生存率低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗MDA5抗体阳性的DM-ILD患者的KL-6水平高,肺部病变严重,生存率低。 展开更多
关键词 间质性肺病 皮肌炎 抗黑色素瘤分化相关基因5抗体 预后
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有效EDRF启动子驱动GFP基因表达的研究
14
作者 王萍玉 迟永良 +4 位作者 李有杰 马颖 岳真 杨建 谢书阳 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第2期19-22,27,共5页
目的通过克隆不同长度红系分化相关因子(EDRF)基因启动子,驱动GFP基因的表达,探讨EDRF启动子的特点。方法利用PCR扩增5种不同长度的EDRF启动子(长度分别为697、496、484、372、283bp),并将启动子分别克隆至pcDNA-GFP载体上,构建驱动GFP... 目的通过克隆不同长度红系分化相关因子(EDRF)基因启动子,驱动GFP基因的表达,探讨EDRF启动子的特点。方法利用PCR扩增5种不同长度的EDRF启动子(长度分别为697、496、484、372、283bp),并将启动子分别克隆至pcDNA-GFP载体上,构建驱动GFP表达载体后,转染N IH3T3和M EL细胞,采用荧光显微镜、流式细胞术比较不同长度启动子的活性。结果经荧光检测,在N IH3T3和M EL细胞中,372bp长的启动子(EDRF基因的-116^+256bp区)驱动GFP荧光强度最亮、阳性细胞最多。FACS分析发现,在M EL细胞中,372bp启动子组GFP细胞的阳性率明显高于其他长度启动子组(P<0.01);在N IH3T3细胞中,372bp启动子组GFP细胞的阳性率为(31.0±0.7)%,高于其他长度启动子组(P<0.01),但其他长度启动子组GFP阳性率均高于20%,说明在N IH3T3细胞中EDRF启动子驱动GFP表达的特异性差,而在M EL细胞(红细胞系)中该启动子驱动GFP表达的特异性较强。结论EDRF启动子(-116^+256)bp区为最有效的驱动基因表达区域,可以用于驱动基因表达的后续研究。 展开更多
关键词 红系分化相关因子 启动子 基因表达 绿色荧光蛋白
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平菇子实体分化发育相关基因片段的克隆 被引量:7
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作者 马爱民 关海山 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期299-302,共4页
采用RAP PCR差异显示技术对平菇菌丝体及原基、菇蕾和成熟子实体进行研究 ,获得了在原基阶段差异表达的 3条cDNA片段POD1、POD2与POD3 ,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测序分析 ,初步的结果表明 3条差异片段的长度分别为 745bp、48... 采用RAP PCR差异显示技术对平菇菌丝体及原基、菇蕾和成熟子实体进行研究 ,获得了在原基阶段差异表达的 3条cDNA片段POD1、POD2与POD3 ,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测序分析 ,初步的结果表明 3条差异片段的长度分别为 745bp、482bp与 477bp。同时 。 展开更多
关键词 分化发育相关基因 HSP70 平菇子实体 菌丝体 RAP-PCR差异显示技术 分子生物学技术 克隆 银染法
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PPARγ基因修饰对兔骨髓间充质干细胞成脂分化及ADRP、LPL表达的影响 被引量:7
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作者 刘厂辉 曾艳辉 +2 位作者 唐海林 罗怡军 陈代钦 《南华大学学报(医学版)》 2009年第4期386-389,共4页
目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因转染对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)向脂肪细胞分化的影响,探讨PPARγ在脂肪细胞早期分化中可能的调控机制。方法原代培养新西兰大白兔MSCs,应用脂质体介导法将pEGFP-N1-PPARγ表达载体转... 目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因转染对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)向脂肪细胞分化的影响,探讨PPARγ在脂肪细胞早期分化中可能的调控机制。方法原代培养新西兰大白兔MSCs,应用脂质体介导法将pEGFP-N1-PPARγ表达载体转入MSCs中,G418筛选。分成不诱导组、空转染诱导组及转染诱导组以成脂诱导剂诱导分化,每日观察细胞形态学变化,镜下计数并计算脂肪细胞分化率,采用RT-PCR方法检测脂肪分化相关蛋白(ADRP)、脂蛋白脂酶(LPL)mRNA表达,Western blot检测ADRP、LPL蛋白表达。结果不诱导组细胞内没有脂滴出现,空转染诱导组和转染诱导组部分细胞成功分化为脂肪细胞,转染诱导组分化率明显高于空转染诱导组(P<0.05);不诱导组ADRP、LPLmRNA及蛋白均不表达,转染诱导组ADRP、LPLmR-NA及蛋白表达水平显著高于空转染诱导组(P<0.05)。结论PPARγ基因转染MSCs可促进其向脂肪细胞分化,增强其分化能力,可能与促进ADRP、LPL基因和蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体 脂肪分化相关蛋白 脂蛋白脂酶 基因转染
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高密度养殖彭泽鲫造成雄鱼较多的分子机制及成因分析 被引量:2
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作者 郑尧 瞿建宏 +2 位作者 邴旭文 陈家长 王在照 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期826-833,共8页
前期将同一批经雌核发育产生的F1彭泽鲫仔鱼(Pcc)分别置于实验室和池塘进行养殖,发现实验室养殖缸中出现了高比例的雄鱼。本研究为验证雌雄比例是否与密度有关,采用F1彭泽鲫雌鱼经人工雌核发育技术繁育出PccF 2,分高、低密度在实验室进... 前期将同一批经雌核发育产生的F1彭泽鲫仔鱼(Pcc)分别置于实验室和池塘进行养殖,发现实验室养殖缸中出现了高比例的雄鱼。本研究为验证雌雄比例是否与密度有关,采用F1彭泽鲫雌鱼经人工雌核发育技术繁育出PccF 2,分高、低密度在实验室进行养殖,并比较了高、低养殖密度下雌雄鱼中性腺分化相关基因的表达。结果表明在PccF 2高、低密度养殖组中,雌鱼中dmrt1c、抗缪勒氏管激素基因amh、芳香化酶基因cyp19a1a的表达显著高于雄鱼中对应基因的表达;雌鱼中dmrt1a、dmrt1b、3β羟基类固醇脱氢酶(3bhsd)、11β羟基类固醇脱氢酶2(11bhsd2)、17α羟化酶/17,20碳链裂解酶a1(cyp17a1)和类固醇激素急性调节蛋白(star)的表达显著低于雄鱼中对应基因的表达。实验室不同密度养殖、不同性别PccF 2彭泽鲫中差异表达基因主要为类固醇合成酶类基因,这些基因的表达差异可能造成雄鱼过多。 展开更多
关键词 养殖密度 性腺分化相关基因 雌雄激素受体 类固醇合成酶类 基因
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山羊骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导后成骨分化相关基因表达的变化 被引量:1
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作者 何悦 贺捷 +2 位作者 邱蔚六 张秀丽 竺涵光 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第6期545-550,共6页
目的:研究山羊骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导后成骨分化相关基因ALP、OCN、COL I mRNA表达水平的变化。方法:采用全骨髓培养法培养骨髓基质干细胞,使用成骨条件培养液体外诱导成骨细胞,通过细胞形态学观察、免疫组化染色、钙结节等检测... 目的:研究山羊骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导后成骨分化相关基因ALP、OCN、COL I mRNA表达水平的变化。方法:采用全骨髓培养法培养骨髓基质干细胞,使用成骨条件培养液体外诱导成骨细胞,通过细胞形态学观察、免疫组化染色、钙结节等检测手段进行成骨细胞鉴定,采用RT-PCR和实时定量PCR检测诱导2周后骨髓基质干细胞ALP、OCN、COL I的表达水平,未诱导的骨髓基质干细胞作为对照组。结果:通过成骨细胞鉴定,骨髓基质干细胞成功诱导分化为成骨细胞;OCN和COL I基因在细胞诱导组表达上调,ALP基因表达在诱导组和未诱导组间无显著差异。结论:成功诱导山羊BMSCs向成骨细胞分化,成骨分化相关基因在诱导后为适应成骨细胞的功能发生变化。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 实时定量PCR 成骨分化相关基因
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分化相关基因-1在血管损伤后新生内膜形成中的表达及临床意义
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作者 徐涛 金法 +3 位作者 李宁 叶志鹏 吴可人 李志杰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第10期1108-1113,共6页
目的:探讨分化相关基因-1在大鼠颈动脉球囊损伤后血管新生内膜形成中的表达情况及作用。方法:24只SD大鼠随机分为实验组和对照组,各12只。实验组给予建立颈动脉球囊损伤模型,对照组不做任何处理。第14天后分别测定两组大鼠血清中分化相... 目的:探讨分化相关基因-1在大鼠颈动脉球囊损伤后血管新生内膜形成中的表达情况及作用。方法:24只SD大鼠随机分为实验组和对照组,各12只。实验组给予建立颈动脉球囊损伤模型,对照组不做任何处理。第14天后分别测定两组大鼠血清中分化相关基因-1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth,VEGF)、内皮抑素(endostatin,ES)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和内膜变化情况。结果:实验组12只大鼠建模成功10只,成功率83.33%。建模前两组大鼠NDRG-1、VEGF、ES、TNF-α、IL-1检测结果差异无统计学意义(P>0.05);建模后14 d实验组NDRG-1、VEGF、ES、TNF-α、IL-1检测结果明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);NDRG-1的表达与VEGF的表达呈正相关,与ES、TNF-α、IL-1的表达呈负相关(r=0.724,-0.822,-0.776,-0.814,P<0.01);实验组内膜面积、内膜面积/中膜面积比等明显大于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),NDRG-1的表达与内膜面积、内膜面积/中膜面积比呈负相关(r=-0.712,r=-0.776,P<0.01)。结论:NDRG-1与血管损伤后新生内膜形成关系密切,可能是新生内膜增生的重要参与者。 展开更多
关键词 分化相关基因-1 血管内皮生长因子 血管损伤 内膜形成
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银屑病患者外周血miR-146a、皮损部位MDA5、IL-6及IFN-Ⅰ水平与PASI评分相关性分析 被引量:7
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作者 田金兰 蒋亚辉 +2 位作者 曾慧 邓玲俐 于春水 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期710-713,共4页
目的:探讨银屑病患者外周血微小RNA(miR)-146a、皮损部位黑素瘤分化相关基因(MDA)5、白细胞介素(IL)-6、Ⅰ型干扰素(IFN)-Ⅰ水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分的相关性。方法:选择该院2019年8月—2021年5月就诊的30例银屑... 目的:探讨银屑病患者外周血微小RNA(miR)-146a、皮损部位黑素瘤分化相关基因(MDA)5、白细胞介素(IL)-6、Ⅰ型干扰素(IFN)-Ⅰ水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分的相关性。方法:选择该院2019年8月—2021年5月就诊的30例银屑病患者为银屑病组,将30例整形科诊治的正常人为对照组。采用聚合酶链式反应(PCR)检测2组miR-146a表达。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹法(western blot)检测2组MDA5、IL-6及IFN-Ⅰ的表达。银屑病组患者皮损MDA5、miR-146a、IL-6及IFN-Ⅰ表达与PASI评分的相关性采用Spearman相关性分析。应用受试者工作特征曲线(ROC)检验MDA5、IL-6及IFN-Ⅰ对银屑病患者皮损的评估价值。结果:正常对照组MDA5、miR-146a、IL-6及IFN-ⅠmRNA表达水平均低于银屑病组,差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组MDA5、IL-6、IFN-Ⅰ蛋白表达均低于银屑病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果示MDA5、miR-146a、IL-6及IFN-Ⅰ水平与银屑病患者PASI评分均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示MDA5、IL-6及IFN-Ⅰ的曲线下面积分别为0.901、0.952、0.962,结果均有统计学意义(P<0.05)。结论:银屑病患者外周血miR-146a、MDA5及其下游IL-6及IFN-Ⅰ表达水平与PASI评分均有相关性。 展开更多
关键词 银屑病 MIR-146A 黑素瘤分化相关基因5 白细胞介素-6 Ⅰ型干扰素
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