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IL-4/IL-10诱导的树突状细胞对类风湿性关节炎的作用 被引量:17
1
作者 聂瑛洁 周晓泉 +2 位作者 袁军 安宇 肖林生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1104-1108,1112,共6页
目的:探讨经IL-4/IL-10诱导的树突状细胞(DC)对类风湿性关节炎的作用。方法:用Percoll分层离心法从脾脏细胞分离得到DC后,用IL-4或IL-10或IL-4+IL-10进行诱导。用未经诱导和诱导过的DC对类风湿性关节炎大鼠模型进行干扰。SD鼠设为CIA模... 目的:探讨经IL-4/IL-10诱导的树突状细胞(DC)对类风湿性关节炎的作用。方法:用Percoll分层离心法从脾脏细胞分离得到DC后,用IL-4或IL-10或IL-4+IL-10进行诱导。用未经诱导和诱导过的DC对类风湿性关节炎大鼠模型进行干扰。SD鼠设为CIA模型组,DC对照组与DC试验组。用ELISA法检测细胞因子与抗体水平,用MTT法检测细胞增殖情况,对鼠爪关节行病理学检测。结果:DC对照组的临床症状评分,病理改变评分,细胞增殖能力,血清中抗胶原抗体及细胞因子水平与CIA模型组的差异无统计学意义。试验组中,注射IL-10-DC能改善CIA鼠的滑膜炎症情况;在初次免疫后第5天注射IL-4-DC能减轻CIA鼠的滑膜炎程度;注射IL-4+IL-10-DC无明显的保护作用。结论:适时注射IL-4或IL-10诱导的DC,对实验性类风湿性关节炎具有保护作用。 展开更多
关键词 树突状细胞 自身免疫性疾病 类风湿性关节炎 白细胞介素
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DC-CIK细胞治疗对晚期恶性肿瘤患者免疫功能及生活质量的影响 被引量:15
2
作者 何志惠 桑圣刚 +5 位作者 洪涛 苏群豪 曾江正 雷俊华 黄芬 郝新宝 《肿瘤预防与治疗》 2013年第4期213-215,共3页
目的:探讨自体树突状细胞(DC细胞)及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗对晚期恶性肿瘤患者T细胞免疫功能及生活质量的影响。方法:用流式细胞仪检测52例晚期恶性肿瘤患者DC/CIK细胞治疗前后T细胞亚群并观察该治疗对患者生活质量的影... 目的:探讨自体树突状细胞(DC细胞)及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗对晚期恶性肿瘤患者T细胞免疫功能及生活质量的影响。方法:用流式细胞仪检测52例晚期恶性肿瘤患者DC/CIK细胞治疗前后T细胞亚群并观察该治疗对患者生活质量的影响。结果:52例接受DC/CIK治疗的患者CD3、CD4、CD4/CD8比例均较治疗前上升,差异有统计学意义(P<0.05)。Karnofsky评分等级有明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:自体DC-CIK细胞治疗可提高晚期恶性肿瘤患者的免疫功能,改善其生活质量。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 T细胞亚群 生活质量
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结核性胸膜炎患者胸水和外周血Treg细胞及DC细胞亚群的检测 被引量:14
3
作者 陈松林 罗军敏 +2 位作者 汤贤英 姚新生 孙万邦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期965-968,共4页
目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及DC细胞亚群在结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中的表达变化及其临床意义。方法:采集30例健康正常者的外周血以及30例结核性胸膜炎患者的外周血和胸水,应用流式细胞术检测各标本中DC1、DC2亚群、... 目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及DC细胞亚群在结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中的表达变化及其临床意义。方法:采集30例健康正常者的外周血以及30例结核性胸膜炎患者的外周血和胸水,应用流式细胞术检测各标本中DC1、DC2亚群、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。结果:患者外周血的DC1/PBMC、DC2/PBMC明显低于健康正常外周血(P<0.05);患者胸水中检测到DC细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.503及0.437,P<0.05);患者PBMC中的Treg细胞值明显高于健康正常PBMC(P<0.05);患者胸水中检测到Treg细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.672,P<0.05)。结论:结核性胸膜炎患者外周血中树突状细胞数量比正常对照组低,而Treg的数量较正常对照组高,与正常对照组相比存在显著性差异,表明CD4+CD25+CD127-调节性T细胞和DC细胞亚群可能在结核性胸膜炎中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 CD4+CD25+CD127-调节性T淋巴细胞 树突状细胞 结核性胸膜炎
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反复呼吸道感染患儿树突状细胞水平和免疫功能的研究 被引量:11
4
作者 冯战桂 张国英 《海南医学》 CAS 2013年第12期1772-1774,共3页
目的检测反复呼吸道感染(RRI)患儿树突状细胞(DC)水平及与树突状细胞活性密切相关的细胞免疫及体液免疫功能指标的变化,并探讨其临床指导意义。方法分别检测53例反复呼吸道感染患儿外周血CD3、CD4、CD8、CD4/CD8淋巴细胞亚群及免疫球蛋... 目的检测反复呼吸道感染(RRI)患儿树突状细胞(DC)水平及与树突状细胞活性密切相关的细胞免疫及体液免疫功能指标的变化,并探讨其临床指导意义。方法分别检测53例反复呼吸道感染患儿外周血CD3、CD4、CD8、CD4/CD8淋巴细胞亚群及免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量变化,其中42例测DC水平,并与具有可比性的36例健康儿童进行对照研究。结果病例组外周血DC水平[(5.21±1.74)×106/L)]显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);CD3、CD4、CD4/CD8与对照组比较均明显下降(P<0.05);CD8无显著性变化;免疫球蛋白IgG、IgA含量显著性下降(P<0.01),IgM无显著性变化。结论 RRI患儿存在DC活性下降和免疫功能失调,细胞免疫和体液免疫功能均有不同程度的下降,并可能与患儿的发病、病情转归、预后等有关,这些指标的变化可作为评价疗效的参考指标。DC计数及活性分析可作为RRI研究的一个新视角。 展开更多
关键词 反复呼吸道感染 免疫功能 树突状细胞
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化疗联合DC和CIK方案治疗非小细胞肺癌的临床疗效观察 被引量:10
5
作者 陈英杰 刘恒 +1 位作者 陈强 梁宁震 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第2期323-325,共3页
目的:探讨化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)方案治疗非小细胞肺癌的临床疗效。方法:随机选取2008年10月份-2011年02月份因非小细胞肺癌就诊于我院进行治疗的患者120例,随机分为治疗组60例患者(采用化疗联合树突状细... 目的:探讨化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)方案治疗非小细胞肺癌的临床疗效。方法:随机选取2008年10月份-2011年02月份因非小细胞肺癌就诊于我院进行治疗的患者120例,随机分为治疗组60例患者(采用化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)方案治疗),对照组60例患者(采用常规化疗),统计两组患者的治疗效果以及生活质量情况,并对结果进行统计分析。结果:治疗组患者治疗总有效率为68.4%,生活质量提高率为88.4%,明显好于与对照组,经统计分析,P<0.05,差异存在显著性。结论:化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)方案治疗非小细胞肺癌能够显著改善患者的生活质量,是治疗非小细胞肺癌的有效方法。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 非小细胞肺癌 化疗
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特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤效应 被引量:8
6
作者 何跃 谢新波 +3 位作者 秦文珍 林学颜 湛海伦 高新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期343-345,共3页
目的检测特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤效应。方法采用肿瘤抗原致敏的DC与CIK细胞共培养,分析其免疫表型,并用MTT染色法检测其对肿瘤细胞的杀伤力。结果所获得DC-CIK细胞的CD3异质性T细胞群,对肾透明细胞癌786-0和前... 目的检测特异性抗原致敏的DC-CIK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤效应。方法采用肿瘤抗原致敏的DC与CIK细胞共培养,分析其免疫表型,并用MTT染色法检测其对肿瘤细胞的杀伤力。结果所获得DC-CIK细胞的CD3异质性T细胞群,对肾透明细胞癌786-0和前列腺癌PC-3细胞的杀伤率分别为70.64%和65.65%。结论DC-CIK细胞对肾透明细胞癌786-0细胞和前列腺癌PC-3细胞具有较强的杀伤效应。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 杀伤效应
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细胞因子联合人参皂甙及三氧化二砷诱导HL-60细胞向树突状细胞分化的实验研究 被引量:5
7
作者 方美云 王忠裕 王一 《实用癌症杂志》 2005年第1期15-19,共5页
目的 研究HL- 60细胞在体外经细胞因子联合人参皂甙及三氧化二砷(AS2 O3 )诱导向树突状细胞(DC )分化的情况。方法 选用HL 60细胞与重组人粒单核细胞集落刺激因子(rh -GM - CSF)、白细胞介素- 4(I-L 4)、γ干扰素(INF γ)、TSPG及AS2 ... 目的 研究HL- 60细胞在体外经细胞因子联合人参皂甙及三氧化二砷(AS2 O3 )诱导向树突状细胞(DC )分化的情况。方法 选用HL 60细胞与重组人粒单核细胞集落刺激因子(rh -GM - CSF)、白细胞介素- 4(I-L 4)、γ干扰素(INF γ)、TSPG及AS2 O3 共培养。根据细胞因子、TSPG及AS2 O3 不同组合分为12组。在培养后7天及14天以光学和电子显微镜观察细胞的形态学特征,用HLA- DR、CD- 1a、CD86等五种单克隆抗体标记流式细胞术检测细胞表型,用ELISA法测定HL- 60 - DC培养上清液中的IL- 12及INF γ的量,培养14天后的细胞再继续以1∶10的比例与HL 60细胞共培养2 4h ,观察HL- 60 - DC对白血病细胞的杀伤情况,用流式细胞仪检测凋亡率。结果 HL 60细胞在组合细胞因子并分别加入TSPG及AS2 O3 后,均可诱生出不同比例的DC。光镜及电镜下均有典型的树突状细胞的形态学特征,细胞表达DC的表面分化抗原,诱生的DC培养上清中可测出不同量的IL- 12及INF- γ。细胞凋亡率均明显高于对照组,联合中药各组的凋亡率均高于GM CSF与IL 4组。结论 ①GM - CSF、IL- 4与HL 60细胞共培养可诱导出HL 60- DC ,在此基础上加入适当浓度的TSPG、AS2 O3 可使树突状细胞的特异性抗原表达加强。②在DC诱生过程中,GM - CSF联合IL -4组DC特异性抗原表? 展开更多
关键词 HL-60细胞 细胞因子 人参皂甙 重组人粒单核细胞集落刺激因子 实验研究 细胞分化 砷诱导 INF-γ AS2O3 树突状细胞 细胞共培养 流式细胞术检测 流式细胞仪检测 形态学特征 IL-12 IL-4 HLA-DR ELISA法 表面分化抗原 GM-CSF
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肾癌术后联合DC-CIK免疫细胞治疗的临床研究 被引量:6
8
作者 姜涛 张颖 +4 位作者 胡志林 王国良 叶剑飞 毕海 马潞林 《医学与哲学(B)》 2016年第3期42-44,共3页
探讨肾癌术后联合DC-CIK免疫细胞治疗方案的耐受性、安全性、生活质量及不良反应。回顾分析2014年11月-2015年11月收治的肾癌患者18例,患者均手术治疗,手术方式包括开放(3例)或腹腔镜(15例)根治性肾切除(5例)或保留肾单位(13... 探讨肾癌术后联合DC-CIK免疫细胞治疗方案的耐受性、安全性、生活质量及不良反应。回顾分析2014年11月-2015年11月收治的肾癌患者18例,患者均手术治疗,手术方式包括开放(3例)或腹腔镜(15例)根治性肾切除(5例)或保留肾单位(13例)手术,术后均联合DC-CIK免疫细胞治疗肿瘤技术3周期。3周期后评价肝肾功能、耐受性、不良反应、生活质量。结果18例患者中3例出现发热,达39℃以上,给予对症处理,体温好转,1例出现困乏,5小时后缓解,1例出现下肢轻微水肿,2天后消失。按抗癌药物急性及亚急性毒性反应分度标准,应用3个周期后18例患者的肾功、肝功均为0度。腹腔镜或开放的根治性肾切除和保留肾单位手术术后,联合DC—CIK免疫细胞治疗3周期后患者肝肾功能无明显变化、耐受性良好、不良反应轻微、生活质量改善明显。但是远期疗效及影响尚缺乏大样本资料,需进一步临床观察与研究。 展开更多
关键词 肾癌 肝肾功能 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 生活质量
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雌激素通过调节MSC分泌细胞因子影响其对DC成熟与功能的抑制 被引量:5
9
作者 赵叶琳 赵晓寅 +1 位作者 孙凌云 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期41-45,50,共6页
目的:本研究试图检测不同浓度17β-雌二醇(E2)存在的情况下人胎肺间充质干细胞(MSC)增殖和表型的变化,并分析这种状态的MSC对树突状细胞(DC)成熟和功能影响及其可能的机制。方法:分离培养人胎肺MSC,加入不同浓度E2,在24小时后对MSC进行... 目的:本研究试图检测不同浓度17β-雌二醇(E2)存在的情况下人胎肺间充质干细胞(MSC)增殖和表型的变化,并分析这种状态的MSC对树突状细胞(DC)成熟和功能影响及其可能的机制。方法:分离培养人胎肺MSC,加入不同浓度E2,在24小时后对MSC进行细胞计数、测定其增殖和贴壁能力,并用流式细胞仪分析MSC表面标志,RT-PCR测定MSC中细胞因子(IL-6、TGF-β和VEGF)mRNA的表达情况。进一步探讨了E2处理24小时后的MSC对DC成熟和功能的影响。结果:分离得到的MSC纯度达到95%以上;E2影响MSC的增殖和贴壁能力,但不影响MSC表面标记的表达;MSC与DC共培养后DC表面CD86、MHCⅡ和CD80的表达均有所降低,而当DC与经E2预处理过的MSC共培后,DC表面MHCⅡ、CD80和CD86的表达回升;高浓度E2作用MSC24小时后,MSC表达的TGF-β与对照组相比减少,而IL-6和VEGF与对照组相比增加。结论:E2可能通过调节MSC分泌细胞因子的水平,改变MSC对DC的免疫抑制作用。 展开更多
关键词 雌激素 间充质干细胞 树突状细胞 系统性红斑狼疮
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全葡聚糖颗粒促进肿瘤微环境驯化的小鼠树突状细胞成熟并抑制调节性T细胞分化 被引量:4
10
作者 白煜 宁永玲 +1 位作者 周洪 戚春建 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1171-1176,共6页
目的体外模拟肿瘤微环境驯化免疫抑制性树突状细胞(TEDC),研究全葡聚糖颗粒(WGP)对其免疫功能的影响。方法采用重组小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)法诱导C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC),同时加入白细胞介素10(IL-10)、转化生长... 目的体外模拟肿瘤微环境驯化免疫抑制性树突状细胞(TEDC),研究全葡聚糖颗粒(WGP)对其免疫功能的影响。方法采用重组小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)法诱导C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC),同时加入白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)共培养,诱导得到TEDC,再加入WGP激发2 d。磁珠分选出OT-Ⅱ小鼠淋巴结和脾脏中的CD4+T细胞,加入特异性抗原卵清蛋白(OVA),再与TEDC共培养。流式细胞术检测细胞的CD11c、CD86、CD40、CD80、MHC-Ⅱ的水平和CD4+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的分化情况。实时荧光定量PCR检测TEDC的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12p40、IL-10、IL-6、IL-4、TGF-β1 m RNA水平;ELISA检测TEDC培养上清中的TNF-α、IL-23、IL-12p70、IL-4水平。结果WGP可以上调TEDC表面MHC-Ⅱ、CD86、CD80和CD40的表达,提高TNF-α、IL-12p40、IL-6水平,降低TGF-β1水平;抑制其诱导CD4+FOXP3+T细胞分化能力。结论β-葡聚糖可以改变TEDC的成熟和分化状态,改善其免疫抑制功能。 展开更多
关键词 全葡聚糖颗粒(WGP) 树突状细胞(dc) 调节性T细胞(Treg)
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非小细胞肺癌患者DC-CIK过继免疫治疗前后外周血TLR4表达的变化 被引量:4
11
作者 王细勇 袁琳娜 张志豪 《浙江医学》 CAS 2017年第7期505-507,511,共4页
目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)过继免疫治疗前后非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化,及脂多糖刺激下PBMC分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在DC-CIK过继免疫治疗中的作用。方法对50例采... 目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)过继免疫治疗前后非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化,及脂多糖刺激下PBMC分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在DC-CIK过继免疫治疗中的作用。方法对50例采用DC-CIK治疗的NSCLC患者,运用RT-PCR检测治疗前后PBMC TLR4mRNA表达变化,ELISA法检测治疗前后NSCLC患者PBMC在脂多糖刺激下细胞因子(IL-6、IL-8及TNF-α)分泌的变化。结果 DC-CIK治疗后NSCLC患者PBMC TLR4mRNA的表达水平较治疗前显著降低(t=6.272,P<0.01);脂多糖刺激下PBMC分泌IL-6(t=17.407,P<0.01)、IL-8(t=15.244,P<0.01)及TNF-α(t=12.428,P<0.01)显著减少。结论 DC-CIK过继免疫治疗可能通过降低PBMC TLR4mRNA的表达,提高机体抗肿瘤免疫功能。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 非小细胞肺癌 TLR4
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肺癌细胞和蛙皮素抑制树突状细胞的产生和功能 被引量:2
12
作者 韩宝惠 范小红 +1 位作者 钟华 董强刚 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期115-118,共4页
目的 了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞 (DC)产生及功能的影响。方法 树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14+,在完全细胞培养液中加入 10 0 0U /mlGM CSF和 10 0 0U /mlIL 4 ,培养 7天获得 ,肺癌细胞株CRL 5 815 ,CRL 5 82 6 ,B... 目的 了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞 (DC)产生及功能的影响。方法 树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14+,在完全细胞培养液中加入 10 0 0U /mlGM CSF和 10 0 0U /mlIL 4 ,培养 7天获得 ,肺癌细胞株CRL 5 815 ,CRL 5 82 6 ,Bombesin和Bombesin受体拮抗剂加入培养液中 ,AnnxinV检测DC凋亡 ;流式细胞仪检测CD40 ,CD86 ,CD83,CD80 ,HLA DR阳性表达。结果 培养 7~ 10天后的DC前体细胞表达高水平的HLA DRCD80CD86CD83CD40。肺癌及蛙皮素可导致DC前体细胞凋亡 ,而蛙皮素受体拮抗剂可部分保护蛙皮素致DC凋亡的作用。加入肺癌细胞株或蛙皮素与DC共培养时明显抑制上述细胞表型的表达和DC刺激同种异体T细胞的增殖能力 ,当加入蛙皮素受体拮抗剂时 ,DC细胞表达HLA DRCD80CD86CD83CD40明显增加 ,接近DC正常对照组。结论 肺癌细胞株及蛙皮素可导致DC的凋亡 ,抑制树突状细胞的产生和功能。 展开更多
关键词 肺癌 蛙皮素 树突状细胞 dc
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T-exo负载DC诱导抗肝癌细胞免疫效应研究 被引量:3
13
作者 李洁羽 陈明水 +3 位作者 陈淑萍 周智锋 王玲 叶韵斌(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期519-523,共5页
目的:观察肝癌细胞来源的外泌体(T-exo)负载DC体外诱导细胞毒T细胞(CTL)对肝癌细胞的杀伤作用。方法:采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体(T-exo),透射电镜鉴定形态,Western ... 目的:观察肝癌细胞来源的外泌体(T-exo)负载DC体外诱导细胞毒T细胞(CTL)对肝癌细胞的杀伤作用。方法:采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体(T-exo),透射电镜鉴定形态,Western blot检测外泌体相关蛋白CD9、CD63、HSP70及肿瘤抗原分子AFP的表达;分离健康供者外周血单个核细胞(PBMC)培养DC,流式细胞术鉴定负载T-exo的DC细胞表型;用2-(4-碘苯)-3-(4硝基苯)-5-(2,4-磺苯基四氮唑)-2H-四唑单钠盐-1(WST-1)法检测负载T-exo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测负载T-exo的DC诱导CTL分别对AFP阳性Huh-7细胞及AFP阴性的SMMC7721细胞的杀伤作用。结果:透射电镜下可见T-exo为圆形或椭圆形双层膜囊泡状小体,大小不等,平均直径50~100 nm,表达外泌体膜相关分子及肿瘤抗原分子。负载T-exo的DC可促进初始T细胞增殖,T-exo致敏DC对AFP阳性的Huh-7肝癌细胞系杀伤活性明显高于AFP阴性的SMMC7721肝癌细胞组(P〈0.05)及未负载T-exo的对照组DC(P〈0.05)。结论:负载T-exo的DC能促进T细胞增殖,提高CTL细胞的细胞毒活性诱导特异性的抗肝癌效应。经T-exo抗原致敏DC诱导的CTL对肝癌细胞有明显的细胞毒作用,明显高于DC对照组(P〈0.05)。 展开更多
关键词 树突状细胞 外泌体 肝癌 细胞毒T细胞
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自体抗原负载DC联合CIK对肾癌免疫治疗的实验研究 被引量:3
14
作者 吴迪 付立业 +3 位作者 李妍 张玲 田昕 姜又红 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第24期3919-3923,共5页
目的:评价自体抗原负载DC联合CIK体外治疗肾癌的杀瘤活性差异,为临床上肿瘤抗原不明确的肾癌免疫治疗提供一种新的研究思路。方法:收集2010年8月至2013年1月在中国医科大学附属第一医院泌尿外科接受手术治疗的20例肾癌患者肾癌组织及其... 目的:评价自体抗原负载DC联合CIK体外治疗肾癌的杀瘤活性差异,为临床上肿瘤抗原不明确的肾癌免疫治疗提供一种新的研究思路。方法:收集2010年8月至2013年1月在中国医科大学附属第一医院泌尿外科接受手术治疗的20例肾癌患者肾癌组织及其外周血,10例健康成人志愿者外周静脉血。分为无抗原DC组、自体肿瘤全细胞抗原递呈DC组、异体肿瘤细胞裂解物抗原递呈DC组,与CIK混合培养后检测杀瘤率,并用流式细胞仪分别检测DC的CIK细胞表面成熟标志,统计两者的相关性。结果:加入肿瘤裂解物抗原及诱导成熟因子后,DC表面成熟标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达明显增加。与DC共培养的CIK表面抗原CD3^+CD4^+、CD3^+CD56^+、CD3^+CD8^+均高于单独培养CIK;自体全抗原递呈的CIK-DC-自体A组与异体全抗原递呈的CIK-DC-异体A组杀瘤活性最大,两者之间无差异;未经抗原刺激的CIK-DC组次之,单纯CIK组杀瘤活性最低;四组效应细胞组间杀伤率相关性分析显示,除CIK-DC-自体A组与CIK-DC-异体A组之间差异无统计学意义外,各组间差异均显著,各组之间杀伤率比较具有正相关关系;肾癌患者外周血杀瘤活性比健康供者杀瘤活性低,有统计学意义;肾癌细胞患者自体效应细胞与异体健康效应细胞差别无统计学意义;此外,各实验组间两两比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:自体/异体全抗原负载可促进DC成熟,提高CIK细胞免疫表型及增殖能力,增强其对肾癌细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 肾癌 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 肿瘤抗原
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体外培养的小鼠子宫自然杀伤细胞与树突状细胞的相互影响 被引量:2
15
作者 田玄玄 翁静 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期223-229,共7页
目的:探讨小鼠子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK细胞)与树突状细胞(dendritic cells,DC)之间的相互影响。方法:①妊娠12~13d昆明小鼠子宫腺细胞区组织块培养后,分离出uNK细胞,单独培养(uNK组);②从小鼠骨髓... 目的:探讨小鼠子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK细胞)与树突状细胞(dendritic cells,DC)之间的相互影响。方法:①妊娠12~13d昆明小鼠子宫腺细胞区组织块培养后,分离出uNK细胞,单独培养(uNK组);②从小鼠骨髓分离得到未成熟DC,单独培养(DC组);③DC和uNK细胞直接接触共培养(共培养组)。观察各组细胞的生长状况,ELISA法检测培养上清液中IL-4、IL-10、IL-12、IL-15及IFN-γ的浓度,流式细胞术检测细胞表面CD40、CD86和CD83的表达。结果:与uNK组和DC组比,共培养组DC和uNK细胞生长聚集现象减少,2种细胞间相互接触,DC细胞表面CD40和CD86表达增高,但是CD83表达仍很低;培养上清液中IL-4、IL-10、IL-12、IL-15及IFN-γ的浓度均增加,尤以IL-4和IL-10增加显著。结论:uNK细胞和DC两者相互作用,DC参与介导uNK细胞的激活,促进其增殖,同时uNK细胞诱导DC呈部分激活状态,使其具有更好的耐受性。 展开更多
关键词 子宫自然杀伤细胞(uNK细胞) 树突状细胞(dc) 体外培养
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DC-CIK细胞联合治疗18例晚期复发性卵巢癌的临床疗效 被引量:3
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作者 陈裕浩 沈丽蓉 +3 位作者 蔡学敏 庞荣清 潘兴华 朱向情 《西南军医》 2017年第3期203-207,共5页
目的评价DC-CIK作为效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,探讨DC-CIK治疗卵巢癌的可行性。方法无菌条件下抽取外周血100 m L,分离、培养树突状细胞(DC)和诱导性杀伤细胞(CIK),细胞培养10天后,第一天输注给患者2×10~7个DC细胞,第二天输注2... 目的评价DC-CIK作为效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,探讨DC-CIK治疗卵巢癌的可行性。方法无菌条件下抽取外周血100 m L,分离、培养树突状细胞(DC)和诱导性杀伤细胞(CIK),细胞培养10天后,第一天输注给患者2×10~7个DC细胞,第二天输注2×10~9个CIK细胞,第三天输注2×10~9个CIK细胞,每个月1次,连续治疗3个月,治疗后根据实体瘤疗效评价标准(RECIST)评价疗效,通过QLQ-C30量表对治疗前后生命质量进行评估。结果 (1)患者生命质量:总体健康、躯体功能、情绪功能、症状领域、失眠及食欲丧失在治疗后均得到改善;(2)免疫功能:T淋巴细胞(CD3^+)、辅助性T细胞(CD3^+CD4^+)、自然杀伤细胞(NK)均有所升高,抑制性T细胞(CD3^+CD8^+)下降;(3)肿瘤标记物:糖类抗原CA125和CA153水平降低。结论 DC-CIK生物疗法对于卵巢癌晚期患者是有效和安全的,能够改善患者生活质量,提高患者免疫功能,降低肿瘤标志物且无毒副作用。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导杀伤细胞 卵巢癌 生物治疗 肿瘤
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镉对诱导成熟人树突状细胞的毒性作用 被引量:3
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作者 梁嘉斌 林育纯 +3 位作者 方飞 陈雯 陈成章 林忠宁 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2007年第4期265-267,270,共4页
目的 探讨镉化合物对人树突状细胞(DC)的细胞毒性作用。方法 应用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人外周血单核细胞获得DC,流式细胞仪(FACS)检测细胞表面标记鉴定;给予C... 目的 探讨镉化合物对人树突状细胞(DC)的细胞毒性作用。方法 应用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人外周血单核细胞获得DC,流式细胞仪(FACS)检测细胞表面标记鉴定;给予CdCl2处理进行剂量-效应和时间-效应分析,采用甲基四氮唑盐(MTS)颜色反应法检测细胞毒性作用。结果 诱导获得的DC呈悬浮生长,部分细胞聚集成簇。细胞表面标志分子表达阳性CD14为2.7%,HLA-DR为96.3%,CD1a为83.9%,CD80为88.3%,CD83为58.8%,CD86为42.4%。不同剂量(1.25-80.00μmol/L)和作用时间(24-48h)CdCl2染毒组细胞增殖抑制率不同程度增高,呈剂量-和时间-依赖性关系。结论 诱导获得成熟的人DC;镉作用可致成熟DC的细胞毒性效应。 展开更多
关键词 树突状细胞 免疫细胞毒性
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肿瘤细胞裂解物疫苗与其修饰的树突状细胞联合抗A20鼠淋巴瘤的作用 被引量:3
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作者 曹荣月 李飞 +5 位作者 邢芸 徐茂磊 陈檬 张鹏 汤啸天 黄巧玲 《药物生物技术》 CAS 2013年第4期331-335,共5页
将A20淋巴瘤细胞,反复冻融,获得肿瘤细胞裂解物的抗原肽,以来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2小肽为佐剂,通过双功能偶联试剂戊二醛偶联制备肿... 将A20淋巴瘤细胞,反复冻融,获得肿瘤细胞裂解物的抗原肽,以来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2小肽为佐剂,通过双功能偶联试剂戊二醛偶联制备肿瘤细胞疫苗A20-M2,偶联产物在体外修饰未成熟的DC,通过检测负载肿瘤细胞抗原的DC细胞分泌的细胞因子以及抗原来确定被修饰DC细胞的成熟度,获得成熟DC即获得DC疫苗。用A20-M2与DC两种疫苗联合给药治疗小鼠,实验结果显示,激发的免疫应答对于A20肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低(P〈0.01),通过ELISA法,从小鼠血清中检测到高滴度抗细胞裂解物类抗体,淋巴细胞增殖试验显示疫苗联合给药后能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖反应。A20-M2能够有效的刺激DC细胞成熟,A20-M2与成熟DC细胞联合给药能够有效的抑制小鼠A20淋巴瘤的生长。 展开更多
关键词 肿瘤细胞裂解物 疫苗 树突状细胞 A20鼠淋巴瘤 生物治疗 mHSP70407-426
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脓毒症老年小鼠树突状细胞高尔基体应激和自噬水平变化及其对免疫功能的影响 被引量:1
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作者 樊琪 董宁 +4 位作者 吴瑶 童森 贺鹏翼 祝筱梅 姚咏明 《中国急救医学》 CAS CSCD 2023年第11期868-874,共7页
目的 探究脓毒症状态下老年小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell,DC)功能状态的异常改变及其与高尔基体应激反应和自噬反应的内在联系。方法 不同年龄小鼠(青年鼠8周龄,老年鼠18月龄)分别随机分为假手术组与脓毒症模型组(CLP组)(n=4)。CL... 目的 探究脓毒症状态下老年小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell,DC)功能状态的异常改变及其与高尔基体应激反应和自噬反应的内在联系。方法 不同年龄小鼠(青年鼠8周龄,老年鼠18月龄)分别随机分为假手术组与脓毒症模型组(CLP组)(n=4)。CLP组小鼠于术后24 h处死并取脾脏组织。采用免疫磁珠法分离纯化脾脏DC,流式细胞术检测各组DC表面标志物及共刺激分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ)表达水平。分离纯化不同年龄小鼠脾脏DC,各自分为空白对照组、LPS刺激组(1μg/mL)(n=4)。免疫印迹法检测各组细胞高尔基体应激反应相关蛋白——高尔基体磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)、高尔基体重组堆积蛋白2(Golgi reassembly stacking protein of 55 kDa,GRASP55)以及高尔基体自噬相关蛋白高尔基体蛋白亚家族A成员2(Golgi matrix protein,GM130)、微管相关蛋白1A和1B(microtubule-associated proteins 1A and 1B,MAP1LC3B)表达水平。激光共聚焦显微镜检测高尔基体红色荧光探针(Golgi-tracker Red)在各空白对照组中的显示情况。进一步应用抑制高尔基体蛋白转运的莫能菌素(monensin,MON)(1μg/mL)预处理,检测扰乱高尔基体稳态对小鼠DC功能分化的影响。结果 与青年小鼠比较,老年脓毒症模型小鼠脾脏DC活化障碍显著。CLP术后24 h老年小鼠脾脏DC表面标志分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达升高水平明显低于青年小鼠(P<0.05)。对比健康小鼠脾脏DC胞内高尔基体的结构功能状态发现,与青年小鼠比较,老年DC胞内高尔基体结构蛋白GRASP55、GM130呈高表达(P<0.001),提示高尔基体结构肿胀;高尔基体外膜蛋白GOLPH3表达减弱(P<0.001),提示蛋白修饰及转运功能低下。分离提取不同年龄小鼠脾脏DC进行体外培养并给予LPS刺激,发现脓毒症老年小鼠DC胞内高尔基体应激反应增强、自噬明显,与DC功能障碍密切相关。给予MON抑制高尔基体蛋白转运,观察到青年、老年小鼠DC 展开更多
关键词 老年 脓毒症 免疫抑制 树突状细胞(dc) 高尔基体自噬 高尔基体应激 内毒素 莫能菌素
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DC在口腔鳞癌中的活化率分析 被引量:2
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作者 胡小华 黄桂林 董平 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第4期253-256,共4页
目的:探讨肿瘤浸润树突状细胞(tumor infiltration dendritic cells,TIDC)在口腔鳞癌中的活化率和意义。方法:采用免疫组织化学方法(Envision法)对10例正常口腔黏膜、10例癌前病变及30例不同分化程度口腔鳞癌中CD1a、HLA-DR的表达进行检... 目的:探讨肿瘤浸润树突状细胞(tumor infiltration dendritic cells,TIDC)在口腔鳞癌中的活化率和意义。方法:采用免疫组织化学方法(Envision法)对10例正常口腔黏膜、10例癌前病变及30例不同分化程度口腔鳞癌中CD1a、HLA-DR的表达进行检测,并结合细胞形态特征确定树突状细胞(dendritic cells,DC)在组织中的浸润程度,依据Sprinzl等提出的分级标准分级,对其活化率进行统计分析。结果:①DC活化率:癌前病变组显著高于正常口腔黏膜组和口腔鳞癌组(P<0.01);而口腔鳞癌组略高于正常口腔黏膜组,但差异无显著性(P>0.05)。②CD1a表达阳性的DC活化率均与年龄、性别、发病部位无关(P>0.05)。③CD1a表达阳性的DC浸润程度与活化率间呈正相关(r=0.615,P<0.01)。结论:①口腔鳞癌中TIDC数量减少并存在功能缺陷,且随着恶性程度增加而加重。②TIDC浸润度及活化率反映了组织局部的免疫状况,可作为判断机体抗肿瘤免疫能力的一项指标。③肿瘤组织中TIDC浸润度及活化率降低,可能是肿瘤发生免疫逃逸的原因之一。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 CD1A HLA-DR 树突状细胞 免疫组织化学
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