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骨髓间充质干细胞和猪去细胞瓣膜支架构建组织工程瓣膜 被引量:7
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作者 孙晓宁 赵强 +3 位作者 徐德民 陈安清 翟万银 常江 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期183-186,共4页
目的探讨运用组织工程技术以骨髓间充质干细胞和去细胞猪心脏瓣膜支架构建组织工程心脏瓣膜的方法。方法体外培养、扩增自体骨髓间充质干细胞并鉴定,接种于以曲拉通-脱氧胆酸钠、RNaseⅠ和DNaseⅠ去细胞的猪心脏瓣膜支架上,形成细胞材... 目的探讨运用组织工程技术以骨髓间充质干细胞和去细胞猪心脏瓣膜支架构建组织工程心脏瓣膜的方法。方法体外培养、扩增自体骨髓间充质干细胞并鉴定,接种于以曲拉通-脱氧胆酸钠、RNaseⅠ和DNaseⅠ去细胞的猪心脏瓣膜支架上,形成细胞材料复合物,体外培养7d,将该复合物移植于裸鼠腹腔,4周后行组织学检测。结果骨髓间充质干细胞具有与成纤维细胞相似的生物学特性,表达ASMA,Vimentin抗原,去细胞瓣膜去细胞彻底,骨髓间充质干细胞可在支架表面良好生长,形成表面光滑的细胞层,分泌细胞外基质,生长好。在裸鼠体内可继续扩增,形成多层细胞。结论运用组织工程技术以骨髓间充质干细胞和去细胞猪心脏瓣膜可生成初级组织工程瓣膜。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 去细胞瓣膜 组织工程
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去细胞猪主动脉瓣膜支架的生物学特性
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作者 孙晓宁 赵强 +2 位作者 徐德民 陈安清 翟万银 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期553-556,共4页
目的探讨以Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶去细胞后的组织工程心脏瓣膜支架的生物学特性。方法经Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶处理新鲜猪主动脉瓣膜,去除内皮细胞和间质细胞,常规苏木精伊红染色,电子扫描显微镜检查,评价去细胞效... 目的探讨以Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶去细胞后的组织工程心脏瓣膜支架的生物学特性。方法经Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶处理新鲜猪主动脉瓣膜,去除内皮细胞和间质细胞,常规苏木精伊红染色,电子扫描显微镜检查,评价去细胞效果,并检测去细胞瓣叶的力学特性、可溶性蛋白含量、同时行兔皮下包埋实验,观察其免疫反应性。结果Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶能有效去除细胞成分,获得组织工程心脏瓣膜支架。去细胞瓣叶与新鲜瓣叶有相同的拉伸强度-拉伸率曲线。可溶性蛋白含量明显降低,去细胞瓣叶的免疫反应性明显降低。结论经Triton-X100、脱氧胆酸钠和核酸酶去细胞处理的猪主动脉瓣膜可以做为组织工程瓣膜支架。 展开更多
关键词 去细胞瓣膜 组织工程
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去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及生物相容性研究
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作者 丁静丽 朱志刚 +5 位作者 周建良 张智 聂彬恩 杨威 龚艺 徐建军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2775-2778,共4页
目的 观察曲拉通X-100(Triton X-100)与脱氧胆酸钠(SD)对猪主动脉瓣的去细胞效果,探讨去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及其生物相容性.方法 分别采用1% Triton X-100和1%SD对猪主动脉瓣进行去细胞处理,通过苏木素-伊红(HE)、Van Gie... 目的 观察曲拉通X-100(Triton X-100)与脱氧胆酸钠(SD)对猪主动脉瓣的去细胞效果,探讨去细胞猪主动脉瓣膜超微结构及其生物相容性.方法 分别采用1% Triton X-100和1%SD对猪主动脉瓣进行去细胞处理,通过苏木素-伊红(HE)、Van Gieson染色,扫描电子显微镜从组织学上对去细胞瓣观察,通过血小板黏附实验和细胞毒性实验评价去细胞瓣的生物相容性.结果 1%SD去除细胞完全,细胞外基质保存完整,但去细胞瓣膜血小板黏附严重且具有一定的细胞毒性,24h和48 h的细胞相对增殖率分别为(80.29±2.05)%和(75.44±3.22)%;1% Triton X-100去除细胞不完全,血小板黏附严重,也具有一定的细胞毒性,24h和48 h的细胞相对增殖率分别为(88.05±1.82)%和(82.95 ±3.07)%.结论 1%SD联合核酸酶对猪主动脉瓣的去细胞效果优于1% Triton X-100,但均不够理想,其他无毒环保的去细胞试剂有待进一步探索. 展开更多
关键词 去细胞猪主动脉瓣膜 细胞外基质 生物相容性
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猪脱细胞主动脉瓣叶不同方法预处理后种植内皮细胞的比较研究 被引量:3
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作者 王晓伟 徐志云 +3 位作者 张宝仁 黄盛东 韩林 叶福林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1297-1299,共3页
目的:猪脱细胞主动脉瓣叶经不同的方法预处理后,种植新生牛主动脉内皮细胞(BAECs),观察细胞的增殖状态.方法:猪脱细胞主动脉瓣叶分别经纤维连接蛋白(Fn,50μg/m1)预铺、胎牛血清(FCS)浸泡、无血清DMEM浸泡预处理12 h,采用间隔24 h、3次... 目的:猪脱细胞主动脉瓣叶经不同的方法预处理后,种植新生牛主动脉内皮细胞(BAECs),观察细胞的增殖状态.方法:猪脱细胞主动脉瓣叶分别经纤维连接蛋白(Fn,50μg/m1)预铺、胎牛血清(FCS)浸泡、无血清DMEM浸泡预处理12 h,采用间隔24 h、3次种植的方法种植BAECs,于种植后第4天、第7天进行细胞计数,并行MTT法和3H-TdR掺入量检测比较细胞的增殖状态.同时于第7天取瓣叶进行组织学检测,观察瓣叶表面内皮细胞覆盖情况.结果:种植后第4天和第7天,采用Fn预铺、FCS浸泡预处理的脱细胞瓣叶,其细胞计数、MTT的光密度和3H-TdR掺入值明显高于无血清DMEM预处理组(P<0.01).瓣叶经H-E染色,可见Fn预铺、FCS浸泡预处理组内皮细胞的覆盖情况优于无血清DMEM浸泡组.结论:Fn或FCS预处理能明显增加内皮细胞在脱细胞瓣叶表面的黏附和增殖,有利于组织工程心脏瓣膜的体外构建. 展开更多
关键词 脱细胞 主动脉瓣叶 预处理 内皮细胞种植 组织工程 心脏瓣膜
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重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域对骨髓基质干细胞黏附力的影响 被引量:3
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作者 徐瑞剑 黄盛东 +3 位作者 徐志云 龚德军 张宝仁 徐驯海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期965-968,共4页
目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨... 目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨髓基质干细胞(BMSCs),于种植后第8天进行细胞计数及MTT法检测比较去细胞瓣叶上黏附、增殖的细胞数量,同时取瓣叶进行组织学检测观察瓣叶表面BMSCs覆盖情况。结果:采用预涂Fn和FnCTD64后的去细胞猪主动脉瓣叶,预涂Fn组的细胞计数为(9.085±0.622)×104,MTT的吸光值为0.537±0.022;预涂FnCTD64组的细胞计数为(9.111±0.607)×104,MTT的吸光值为0.540±0.025;预涂BSA组的细胞计数为(4.593±0.464)×104,MTT的吸光值为0.360±0.018;对照组的细胞计数为(4.460±0.441)×104,MTT的吸光值为0.353±0.019;前两组明显高于后两组(P<0.01)。预涂Fn组和FnCTD64组无显著性差异。瓣叶经H-E染色,可见预涂Fn和FnCTD64组细胞覆盖情况优于预涂BSA组和对照组。结论:Fn和FnCTD64能明显增加BMSCs在去细胞猪主动脉瓣叶表面的黏附和增殖。 展开更多
关键词 去细胞猪主动脉瓣叶 重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域 骨髓基质干细胞 细胞黏附
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