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地塞米松提高TRAIL基因修饰的脐带间充质干细胞对急性B淋巴细胞白血病细胞的杀伤作用及机制研究 被引量：2
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作者 王立华 李欣 +5 位作者 徐立强 苗丽 米一 张晨亮 刘拥军 刘广洋 《药物评价研究》 CAS 2021年第8期1653-1659,共7页
目的构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因修饰的脐带间充质干细胞(TRAIL-MSCs),并检测其联合地塞米松(DEX)对急性B淋巴细胞白血病(Nalm-6)细胞的影响。方法通过慢病毒载体将SPD-TRAIL基因转染UC-MSCs构建TRAIL-MSCs,使其能够... 目的构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因修饰的脐带间充质干细胞(TRAIL-MSCs),并检测其联合地塞米松(DEX)对急性B淋巴细胞白血病(Nalm-6)细胞的影响。方法通过慢病毒载体将SPD-TRAIL基因转染UC-MSCs构建TRAIL-MSCs,使其能够表达十二聚体TRAIL蛋白(d TRAIL)。通过CCK-8法、流式细胞术、显微镜光镜下观察细胞形态及密度检测UC-MSCs、TRAIL-MSCs、DEX(25μmol/L)、DEX(25μmol/L)+UC-MSCs组和DEX(25μmol/L)+TRAIL-MSCs对Nalm-6细胞增殖、凋亡的影响;通过实时荧光定量PCR及Western blotting法检测各组Nalm-6细胞表面DR4、DR5 mRNA和蛋白表达。结果成功构建了能够稳定表达dTRAIL蛋白的TRAIL-MSCs工作库细胞。与对照组比较,UC-MSCs、TRAIL-MSCs显著抑制Nalm-6细胞增殖(P<0.01),但抑制率均在30%以下,DEX抑制率约为43%,而DEX联合TRAIL-MSCs抑制率达85%,与TRAIL-MSCs和DEX组比较差异显著(P<0.01)。显微镜下观察结果显示,不同处理方式对肿瘤细胞Nalm-6均有一定的杀伤作用,其中以DEX与TRAIL-MSCs联合用药组的杀伤作用最明显。TRAIL-MSCs可以促进Nalm-6细胞凋亡,凋亡率达10%,DEX组凋亡率达到15%,与对照组比较有显著差异(P<0.05、0.01);而DEX+TRAIL-MSCs组凋亡率达36%,与DEX和TRAIL-MSCs组比较有显著差异(P<0.01)。与对照组比较,TRAIL-MSCs组DR4、DR5 mRNA表达量显著降低(P<0.01);DEX可以促进DR4、DR5 mRNA表达,与对照组比较差异显著(P<0.01);DEX+TRAIL-MSCs组较DEX组DR4、DR5 mRNA表达均显著降低(P<0.01);各组蛋白检测结果与mRNA结果基本一致。结论DEX可以显著提高TRAIL-MSCs对Nalm-6细胞的杀伤作用,或将成为一种颇具潜力的血液肿瘤治疗新手段;其机制与DEX显著提高DR4、DR5表达,增强Nalm-6细胞对TRAIL蛋白的敏感性相关。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 急性B淋巴细胞白血病 联合治疗 死亡受体4/5
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