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牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
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作者 曹世诺 于龙政 +3 位作者 薛书江 周末 刘廷 张守发 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1136-1139,共4页
应用PCR方法扩增了牛瑟氏泰勒虫吉林株P33表面蛋白基因片段,并将扩增产物与pMD18-T载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建P33重组pGEX-4T-3表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、免疫印记分析。结果显示... 应用PCR方法扩增了牛瑟氏泰勒虫吉林株P33表面蛋白基因片段,并将扩增产物与pMD18-T载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建P33重组pGEX-4T-3表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、免疫印记分析。结果显示,获得P33基因完整开放阅读框长868 bp,编码292个氨基酸,与中国株同源性为99.1%;表达的融合蛋白相对分子质量为59 000,能被牛瑟氏泰勒虫阳性血清识别,表明该融合蛋白具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 牛瑟氏泰勒虫 P33表面蛋白基因 克隆 表达
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