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诃子、甘草与制草乌合用调控心脏代谢酶CYP2J3减毒机制 被引量：2
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作者 李晗 宋玲 +5 位作者 高云航 陈腾飞 侯红平 彭博 叶祖光 张广平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期88-95,共8页
目的:基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法:在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组(0.25 g·kg^(-1)),诃子组(0.25 g·kg^(-1)),甘草组(0.... 目的:基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法:在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组(0.25 g·kg^(-1)),诃子组(0.25 g·kg^(-1)),甘草组(0.25 g·kg^(-1))和诃子+甘草+制草乌合用组(0.25 g·kg^(-1)+0.25 g·kg^(-1)+0.25 g·kg^(-1),以制草乌为标准),给药8 d后测定大鼠肌酸激酶(CK)与乳酸脱氢酶(LDH),观察大鼠心脏组织的病理学改变,并选择实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞色素P2J3(CYP2J3) mRNA和蛋白表达水平的变化;在体外实验方面,设空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组与乌头碱+鞣花酸+甘草苷合用组,利用高内涵分析技术检测其对细胞数目、DNA含量、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)的影响,同时检测CYP2J3 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:体内实验中,与空白组比较,制草乌组大鼠血清中CK、LDH水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),合用组CK、LDH活性降低;同时病理染色结果显示诃子和甘草可减轻制草乌导致的心脏损伤;Real-time PCR结果显示,与空白组比较,制草乌可下调CYP2J3 mRNA转录水平(P<0.05),与诃子、甘草合用后可上调该亚型的表达(P<0.01);蛋白翻译水平与mRNA转录水平基本一致。体外实验中,高内涵分析结果显示,与空白组比较,乌头碱组的细胞数量、DNA含量与MMP的荧光值显著降低(P<0.01),合用组的细胞数量、DNA含量与MMP的荧光值也明显降低(P<0.05,P<0.01),但其相应荧光值均高于乌头碱组;与空白组比较,乌头碱下调CYP2J3 mRNA转录水平(P<0.05),合用组能够逆转乌头碱下调CYP2J3 mRNA的能力(P<0.05)。结论:诃子、甘草与制草乌合用减毒机制主要是鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用后,上调了CYP2J3表达,促进花生四烯酸(AA)代谢生成环氧二十碳三烯酸(EETs),进而降低心脏损伤的作用,且� 展开更多
关键词 制草乌 诃子 甘草 细胞色素p450(cyp450) 细胞色素p2j3(cyp2j3)
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