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恩诺沙星单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:38
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作者 蔡勤仁 曾振灵 +2 位作者 杨桂香 陈杖榴 方炳虎 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1060-1064,共5页
碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48∶1。用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株... 碳二亚胺法合成了2种恩诺沙星(enrofloxacin,ENFX)人工抗原ENFX-BSA和ENFX-OVA,用紫外扫描和分析载体蛋白的氨基酸组成等方法对人工抗原进行鉴定,ENFX与BSA的结合比约为48∶1。用ENFX-BSA免疫BALB/C小鼠,采用显微克隆技术最终筛选出2株特异性分泌细胞2C5和5D5并获取腹水,纯化后腹水效价分别为1∶3200和1∶6400。2C5和5D5均属IgG2a型抗体。单抗5D5间接竞争ELISA(Ci-ELISA)的工作浓度为1∶1000,ENFX的抑制曲线在0.13~10 000 ng·ml-1之间线性关系良好(r =-0.9782),检测限(LOD)为0.13 ng·ml-1,ENFX的IC50为21.67 ng·ml-1。单抗对氟喹诺酮类药物有很高的选择性,与环丙沙星、麻保沙星、沙拉沙星、达氟沙星的交叉反应率分别为110.84%、27.40%、71.05%和37.41%,而与头孢氨苄、氯霉素、磺胺间甲氧嘧啶等没有交叉反应。 展开更多
关键词 恩诺沙星 单克隆抗体 制备 鉴定 碳二亚胺法 人工抗原 杂交瘤技术 兽药残留 免疫检测
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广州地区1136例过敏患儿常见过敏原分布及尘螨交叉反应分析 被引量:44
2
作者 皮蕾 刘海英 +4 位作者 刘云锋 关启鸿 张白杜 郭彩娇 曾华松 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期51-54,共4页
目的观察广州市过敏性疾病患儿的过敏原分布及屋尘螨、粉尘螨过敏的交叉反应情况,为临床诊疗提供依据。方法采用MAST过敏原检测系统对1 136名过敏性疾病患儿(婴幼儿组278例、学龄前组455例、学龄组403例)进行35种特异性过敏原IgE检测,... 目的观察广州市过敏性疾病患儿的过敏原分布及屋尘螨、粉尘螨过敏的交叉反应情况,为临床诊疗提供依据。方法采用MAST过敏原检测系统对1 136名过敏性疾病患儿(婴幼儿组278例、学龄前组455例、学龄组403例)进行35种特异性过敏原IgE检测,统计过敏原阳性率,同时分析尘螨过敏的交叉反应情况,分组间阳性率差异比较采用χ2检验。结果 1 136例过敏儿童前三位的过敏原分别是尘螨(68.13%)、家尘(49.03%)和牛奶(36.18%)。婴幼儿组前三位的过敏原分别为牛奶(70.14%)、芝士(47.84%)和全蛋(36.69%);学龄前期组前三位的过敏原分别为尘螨(80.13%)、家尘(68.35%)和牛奶(38.90%);学龄期组前三位过敏原分别为尘螨(75.93%)、家尘(40.45%)和猫毛狗毛(25.81%)。774例尘螨过敏患儿中,685例(88.50%)对粉尘螨和屋尘螨均呈阳性反应,9.56%仅对粉尘螨过敏,1.94%仅对屋尘螨过敏,各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论广州地区过敏患儿过敏原分布较以往有一定的变化,且与国内其他地区亦存在差别。相当比例的过敏患儿对粉尘螨和屋尘螨同时阳性,仅少数患儿对其中一种过敏。 展开更多
关键词 儿童 过敏性疾病 过敏原 尘螨 交叉反应
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尘螨过敏原的交叉反应性 被引量:21
3
作者 孙劲旅 陈军 张宏誉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期695-699,共5页
尘螨是最主要的室内过敏原之一,随着社会生活的现代化,人们对室内居住环境的要求越来越高,由于环境因素而引起的一些过敏性疾病越来越受到人们的关注。本文主要综述了近几年来尘螨过敏原与其他多种螨类、软体动物(蜗牛)和甲壳类动物(虾... 尘螨是最主要的室内过敏原之一,随着社会生活的现代化,人们对室内居住环境的要求越来越高,由于环境因素而引起的一些过敏性疾病越来越受到人们的关注。本文主要综述了近几年来尘螨过敏原与其他多种螨类、软体动物(蜗牛)和甲壳类动物(虾)以及昆虫(蟑螂、衣鱼、摇蚊、石蚕蛾)等过敏原之间的交叉反应性,对临床过敏性疾病的诊断具有参考价值。 展开更多
关键词 尘螨 过敏反应 过敏原 交叉反应性
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海南变态反应性疾病患儿对屋尘螨/粉尘螨和仓储螨的特异性IgE 被引量:20
4
作者 陈实 郑轶武 +5 位作者 王灵 陈冰 林小珍 Birgitte Gjesing 钟南山 Michael D.Spangfort 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2010年第3期191-195,共5页
目的探讨海南变态反应性疾病患儿对尘螨和仓储螨的特异性IgE水平。方法对海南变态反应性疾病患儿进行13种常见变应原皮肤点刺和7种螨的体外特异性IgE检测。结果 121例患儿中对屋尘螨和粉尘螨的皮肤点刺阳性率为100%,而对热带无爪螨的阳... 目的探讨海南变态反应性疾病患儿对尘螨和仓储螨的特异性IgE水平。方法对海南变态反应性疾病患儿进行13种常见变应原皮肤点刺和7种螨的体外特异性IgE检测。结果 121例患儿中对屋尘螨和粉尘螨的皮肤点刺阳性率为100%,而对热带无爪螨的阳性率为85.8%。7种螨的体外特异性IgE依次为屋尘螨99.2%、粉尘螨95.0%、热带无爪螨87.6%、家嗜甜螨79.7%、害嗜鳞螨67.8%、腐食酪螨59.5%和粗脚粉螨52.9%。对仓储螨过敏的患儿同时都对屋尘螨和热带无爪螨过敏,并且IgE水平更高。除热带无爪螨外,其他仓储螨的特异性IgE有很好的相关性。结论除屋尘螨和粉尘螨外,热带无爪螨也是海南地区的重要致敏原,其他仓储螨亦有可能引起慢性变态反应性疾病。 展开更多
关键词 屋尘螨 粉尘螨 热带螨 仓储螨 特异性IGE 交叉反应
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Allergen micro-array detection of specific IgE-reactivity in Chinese allergy patients 被引量:16
5
作者 ZHENG Yi-wu LI Jing +8 位作者 LAI Xu-xin ZHAO De-yu LIU Xiao-fan LIN Xiao-ping Birgitte Gjesing Paola Palazzo Adriano Mari ZHONG Nan-shan Michael D Spangfort 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2011年第24期4350-4354,共5页
Background Allergen micro-arrays are powerful tools for screening of serum IgE-reactivity. In this study allergen micro-arrays were used to identify dominating IgE-binding allergens and cross-reactivity patterns among... Background Allergen micro-arrays are powerful tools for screening of serum IgE-reactivity. In this study allergen micro-arrays were used to identify dominating IgE-binding allergens and cross-reactivity patterns among selected Chinese allergy patients. Methods The study was conducted using patient sera from the cities of Guangzhou, Nanjing, Chengdu and Shenyang. In total 100 sera with Dermatophagoides pteronyssinus (Der p) specific IgE-levels higher than 50 kU/L were selected for testing against 103 individual allergens. Results Among 100 selected patients, 95% showed IgE-reactivity towards house-dust mite allergens Dermatophagoides farinae (Der f) 1, Der f 2 and Der p 2 and 94% were IgE positive against Der p 1, and 60% of sera contained IgE reacting against allergen Euroglyphus maynei (Eur m) 2. IgE against cat allergen, Felisdomesticus (Fel d) 1, was seen in 20%. Only 2% showed specific IgE-reactivity to Der p 10, a panallergen belonging to the tropomyosin family. Serum IgE-reactivity towards other allergens was in general low. IgE-reactivity against pollen allergens showed geographic differences. Conclusions This study clearly confirms that group 1 and group 2 are major allergens of house dust mites. These selected house-dust mite allergy patients are close to being mono-sensitized. Der p 10 is not an important allergen for cross-reactivity. Specific IgE-sensitization towards pollen allergens is low in southern China compared to other regions. The prevalence of food and stinging insect allergens known to give rise to IgE-mediated cross-reactivity is 2% or less. 展开更多
关键词 specific immunoglobulin E MICRO-ARRAY Dermatophagoides pteronyssinus Dermatophagoides farinae cross-reactivity
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Cross-reactivity between aeroallergens and food allergens 被引量:12
6
作者 Florin-Dan Popescu 《World Journal of Methodology》 2015年第2期31-50,共20页
In patients with respiratory allergy,cross-reactivity between aeroallergens and foods may induce food allergy,symptoms ranging from oral allergy syndrome to severe anaphylaxis.Clinical entities due to Ig E sensitizati... In patients with respiratory allergy,cross-reactivity between aeroallergens and foods may induce food allergy,symptoms ranging from oral allergy syndrome to severe anaphylaxis.Clinical entities due to Ig E sensitization to cross-reactive aeroallergen and food allergen components are described for many sources of plant origin(pollen-food syndromes and associations,such as birch-apple,cypress-peach and celery-mugwortspice syndromes,and mugwort-peach,mugwortchamomile,mugwort-mustard,ragweed-melon-banana,goosefoot-melon associations),fungal origin(Alternariaspinach syndrome),and invertebrate,mammalian or avian origin(mite-shrimp,cat-pork,and bird-egg syndromes).Clinical cases of allergic reactions to ingestion of food products containing pollen grains of specific plants,in patients with respiratory allergy to Asteraceae pollen,especially mugwort and ragweed,are also mentioned,for honey,royal jelly and bee polen dietary supplements,along with allergic reactions to foods contaminated with mites or fungi in patients with respiratory allergy to these aeroallergens.Medical history and diagnosis approach may be guided by the knowledge about the diverse cross-reacting allergens involved,and by the understanding of these clinical entities which may vary significantly or may be overlapping.The association between primary Ig E sensitization with respiratory symptoms to inhaled allergens and food allergy due to cross-reactive allergen components is important to assess in allergy practice.The use of molecular-based diagnosis improves the understanding of clinically relevant Ig E sensitization to cross-reactive allergen components from aeroallergen sources and foods. 展开更多
关键词 cross-reactivity SYNDROMES and associations AEROALLERGENS FOOD allergens
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虾类和蟹类过敏原的交叉反应性研究 被引量:11
7
作者 毛露甜 黄婉慧 +2 位作者 吴小明 范红英 张在军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期748-751,共4页
目的:分析虾类和蟹类过敏原交叉反应性,探讨其在食物过敏症的预防、诊断和治疗中的意义。方法:采用SDS-PAGE分析虾蟹的蛋白组分,Western blot分析其过敏原组分,Western blot和ELISA抑制试验研究虾类和蟹类的过敏原交叉反应性。结果:虾... 目的:分析虾类和蟹类过敏原交叉反应性,探讨其在食物过敏症的预防、诊断和治疗中的意义。方法:采用SDS-PAGE分析虾蟹的蛋白组分,Western blot分析其过敏原组分,Western blot和ELISA抑制试验研究虾类和蟹类的过敏原交叉反应性。结果:虾类、蟹类过敏原蛋白组分相似性与其种属关系相关,相对分子量(Mr)在20 000、36 000、38 000、44 000、68 000、75 000、85 000处具有相同条带;Mr为36 000的蛋白是虾的主要过敏原,Mr为36 000、66 000、85 000的蛋白是蟹的主要过敏原;青蟹蛋白和日本沼虾蛋白对其余虾蟹过敏原有抑制作用,并且随着抑制物浓度增加抑制效应增强。结论:虾类和蟹类过敏原有相似性,其中Mr在36 000处相互之间存在较强的交叉反应。 展开更多
关键词 虾类 蟹类 过敏原 交叉反应
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山羊乳与牛乳配方乳粉的致敏性比较 被引量:11
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作者 姜玉池 赵怡晴 +3 位作者 谢奎 陈成 车会莲 韩诗雯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第7期96-104,共9页
山羊乳是一类营养丰富且易于消化的乳品,因其营养成分与牛乳相近而受到广泛关注。本研究通过蛋白质潜在致敏性树状评估策略(生物信息学、消化稳定性、血清学研究、动物模型)对山羊乳配方乳粉的致敏性进行评价,并研究山羊乳配方乳粉与牛... 山羊乳是一类营养丰富且易于消化的乳品,因其营养成分与牛乳相近而受到广泛关注。本研究通过蛋白质潜在致敏性树状评估策略(生物信息学、消化稳定性、血清学研究、动物模型)对山羊乳配方乳粉的致敏性进行评价,并研究山羊乳配方乳粉与牛乳过敏患者血清中免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)E之间存在的交叉反应性。结果表明,山羊乳配方乳粉的167种蛋白质中,β-乳球蛋白和α-乳清蛋白含量显著低于牛乳配方乳粉(P<0.05),山羊乳配方乳粉在模拟胃液中更易消化,且与过敏患者血清的结合能力弱于牛乳配方乳粉,动物模型结果表明山羊乳配方乳粉致敏小鼠体温下降幅度、临床过敏症状评分、血清中特异性IgE和IgG1抗体水平、血浆中组胺水平、血管渗透性及组织炎症程度等均显著低于牛乳配方乳粉组致敏小鼠(P<0.05),交叉反应性结果表明山羊乳配方乳粉能与牛乳过敏患者血清结合,但结合能力明显低于牛乳配方乳粉。结论:与牛乳配方乳粉相比,山羊乳配方乳粉的致敏性较弱,可作为牛乳的替代品,降低牛乳过敏性疾病的发病风险。 展开更多
关键词 山羊乳配方乳粉 牛乳配方乳粉 致敏性树状评估策略 交叉反应性
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Preparation of high-affinity rabbit monoclonal antibodies for ciprofloxacin and development of an indirect competitive ELISA for residues in milk 被引量:11
9
作者 Bin HUANG Yun YIN +6 位作者 Lei LU Hai DING Lin WANG Ting YU Jia-jin ZHU Xiao-dong ZHENG Yan-zhen ZHANG 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2010年第10期812-818,共7页
A convenient competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for ciprofloxacin(CPFX) was developed by using rabbit monoclonal antibodies(RabMAbs) against a hapten-protein conjugate of CPFX-bovine serum albumin(BS... A convenient competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for ciprofloxacin(CPFX) was developed by using rabbit monoclonal antibodies(RabMAbs) against a hapten-protein conjugate of CPFX-bovine serum albumin(BSA).The indirect competitive ELISA of CPFX had a concentration at 50% inhibition(IC50) of 1.47 ng/ml and a limit of detection(LOD) of 0.095 ng/ml.The mAb exhibited some cross-reactivity,however,not so high with enrofloxacin(28.8%),ofloxacin(13.1%),norfloxacin(11.0%),fleroxacin(22.6%),and pefloxacin(20.4%).And it showed almost no cross-reactivity with other antibiotics or sulfonamides evaluated in this study.The competitive ELISA kit developed here could be used as a screening tool to detect and control illegal addition of CPFX in food products.This kit had been applied to milk detection and the recovery rates from samples spiked by CPFX were in a range of 63.02%-84.60%,with coefficients of variation of less than 12.2%. 展开更多
关键词 CIPROFLOXACIN Competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) Rabbit monoclonal antibody RESIDUES cross-reactivity
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基于表位预测的花生过敏原Ara h6免疫交叉反应性研究 被引量:9
10
作者 朱盼 陈红兵 +2 位作者 胡纯秋 李欣 罗春萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第17期318-322,共5页
为了探讨花生过敏原Arah6与其他同源蛋白之间的交叉反应,通过各种生物信息数据库(Genbank,DiscoTope)以及网络工具及软件(BLAST,NPS@和Protean,Clustalx,PyMOL),开展基于表位预测的Arah6交叉免疫反应性研究。结果表明:肽段AA10~15、45... 为了探讨花生过敏原Arah6与其他同源蛋白之间的交叉反应,通过各种生物信息数据库(Genbank,DiscoTope)以及网络工具及软件(BLAST,NPS@和Protean,Clustalx,PyMOL),开展基于表位预测的Arah6交叉免疫反应性研究。结果表明:肽段AA10~15、45~48、53~60、116~118区域可能是Arah6的线性表位优势区域;Arah6的构象型表位优势区有4个,它们存在的区域为AA1~13、35~51、53~59、89~105;基于线性表位预测的15种蛋白质与Arah6可能具有交叉反应性,其中4种(Arai6,conglutin,Arad6和conglutin8)发生交叉反应的概率为100%;基于构象型表位预测的17种蛋白质与Arah6可能具有交叉反应性,其中4种(Arai6,conglutin,Arad6和conglutin8)发生交叉反应的概率为100%。本结果对进一步了解Arah6的过敏性以及指导开展食品中Arah6的免疫学检测具有重要作用。 展开更多
关键词 Arah6 花生过敏 表位 交叉反应 预测
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五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的中和作用 被引量:8
11
作者 符民桂 植飞 +1 位作者 管锦霞 余清声 《广州医学院学报》 1995年第4期1-4,共4页
本文通过琼脂免疫扩散及动物实验,对我国现有五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的交叉免疫反应、体外中和作用以及体内保护作用进行了研究,结果表明:(1)抗眼镜和抗银环蛇毒血清对眼镜王蛇毒均有中和作用,但作用较弱,其中和效价为60μg... 本文通过琼脂免疫扩散及动物实验,对我国现有五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的交叉免疫反应、体外中和作用以及体内保护作用进行了研究,结果表明:(1)抗眼镜和抗银环蛇毒血清对眼镜王蛇毒均有中和作用,但作用较弱,其中和效价为60μg/ml;(2)抗眼镜蛇毒血清和抗银环蛇毒血清联合应用时,其中和效价是它们单独应用的11倍,约660μg/ml;(3)抗金环蛇毒血清、抗蝮蛇毒血清及抗五步蛇毒血清虽与眼镜王蛇毒有弱的沉淀线,但却无中和作用。 展开更多
关键词 抗蛇毒血清 眼镜王蛇毒 交叉免疫反应 中和作用
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荔枝果实中profilin的表达纯化及其与桦树花粉Bet v 2的交叉反应性研究 被引量:9
12
作者 张红云 宋娟娟 +1 位作者 刘志刚 康敏雄 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期541-544,共4页
目的表达和纯化荔枝果实profilin,并对其免疫学活性及交叉反应性进行研究。方法采用RT-PCR获得整个荔枝profilin的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白... 目的表达和纯化荔枝果实profilin,并对其免疫学活性及交叉反应性进行研究。方法采用RT-PCR获得整个荔枝profilin的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western-blot检测其IgE结合活性,并通过ELISA抑制实验对其与桦树花粉profilin的交叉反应性进行研究。结果成功的构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量的表达了荔枝profilin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示15个荔枝过敏患者中有5个存在重组profilin的特异性IgE抗体。ELISA抑制实验发现它们之间存在很高的交叉反应性。结论成功的表达了荔枝profilin,经纯化后具有很好的免疫学活性,为进一步的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 荔枝 PROFILIN 基因表达 纯化 交叉反应性
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苹果过敏原Mal d 4蛋白抗原表位预测及交叉反应分析 被引量:9
13
作者 夏宏林 何颖 +1 位作者 邹泽红 陶爱林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期57-61,共5页
目的:预测苹果过敏原Mal d 4蛋白B细胞和T细胞抗原表位,探讨Mal d 4蛋白与其同源蛋白之间的交叉反应性。方法:以苹果过敏原Mal d 4蛋白的氨基酸序列为基础,采用生物信息软件HNN预测二级结构;运用DNAStar和Bcepred软件预测其B细胞抗原表... 目的:预测苹果过敏原Mal d 4蛋白B细胞和T细胞抗原表位,探讨Mal d 4蛋白与其同源蛋白之间的交叉反应性。方法:以苹果过敏原Mal d 4蛋白的氨基酸序列为基础,采用生物信息软件HNN预测二级结构;运用DNAStar和Bcepred软件预测其B细胞抗原表位,用NetMHCⅡ、NetMHCⅡpan、Syfpeithi及Propred软件综合预测T细胞抗原表位;采用Clustal X1.83、Swiss-Model软件比对同源序列和模拟空间构象。结果:该蛋白二级结构以无规则卷曲为主。B/T细胞共同抗原表位的区域为53~61、85~93。苹果Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃、草莓中的前纤维蛋白氨基酸序列同源性达88%以上,空间构象相似。结论:苹果过敏原Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃和草莓的前纤维蛋白之间可能存在交叉反应,其优势抗原表位区域可能为53~61、85~93,是后续过敏原改造的重点,为继续深入开展苹果过敏原基础性研究提供理论依据。 展开更多
关键词 苹果过敏原 MAL d 4 抗原表位 交叉反应 预测
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豚草花粉在夏秋季花粉症中的致敏特点分析 被引量:8
14
作者 王晓艳 丁佳琪 +3 位作者 陈艳蕾 郭淼颖 王洪田 王学艳 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2020年第4期180-183,共4页
目的通过对夏秋季节花粉症的研究了解豚草花粉的致敏特点.方法对2017年8~9月夏秋季节就诊的典型花粉症患者纳入研究,均进行艾蒿、豚草、藜草sIgE水平检测.同时,采用蛋白芯片法进行蒿属及豚草部分组分蛋白检测.结果126例花粉症患者被纳... 目的通过对夏秋季节花粉症的研究了解豚草花粉的致敏特点.方法对2017年8~9月夏秋季节就诊的典型花粉症患者纳入研究,均进行艾蒿、豚草、藜草sIgE水平检测.同时,采用蛋白芯片法进行蒿属及豚草部分组分蛋白检测.结果126例花粉症患者被纳入本研究.艾蒿sIgE浓度显著高于豚草和藜科(P<0.01).仅有1.6%患者为豚草花粉单一过敏,豚草花粉与艾蒿花粉共同致敏率为65.8%,与藜科花粉的共同致敏率为45.2%,44.4%的患者对3种花粉同时过敏.在豚草和艾蒿sIgE同时阳性的8例患者中,组分检测显示Amb a 1均为阴性,其他组分的阳性率依次为Art an 2(87.5%),Art an 1(75%),Art an 3(62.5%).结论组分蛋白检测结果初步证实,豚草花粉致敏实际上可能为蒿属花粉引起的交叉过敏反应. 展开更多
关键词 花粉 鼻炎 变应性 季节性 变应原 豚草 杂草花粉 特异性免疫球蛋白E 过敏原组分蛋白 交叉过敏反应
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重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备 被引量:6
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作者 徐丽慧 洪岸 +1 位作者 何贤辉 汪炬 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期186-189,共4页
目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(E.coli)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫... 目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(E.coli)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在E.coli中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95%以上的重组hbFGF,以该重组蛋白免疫兔子,在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1∶512000。免疫印迹分析显示该抗血清与E.coli中表达的重组hbFGF和标准hbFGF均有特异性反应,但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应,经E.coli菌体蛋白吸附的抗血清,与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清,经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子 可溶性表达 抗血清 交叉反应性
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Visual Detection of Vibrio parahaemolyticus using Combined CRISPR/Cas12a and Recombinase Polymerase Amplification 被引量:7
16
作者 JIANG Han Ji TAN Rong +8 位作者 JIN Min YIN Jing GAO Zhi Xian LI Hai Bei SHI Dan Yang ZHOU Shu Qing CHEN Tian Jiao YANG Dong LI Jun Wen 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2022年第6期518-527,共10页
Objective To establish an ultra-sensitive,ultra-fast,visible detection method for Vibrio parahaemolyticus(VP).Methods We established a new method for detecting the tdh and trh genes of VP using clustered regularly int... Objective To establish an ultra-sensitive,ultra-fast,visible detection method for Vibrio parahaemolyticus(VP).Methods We established a new method for detecting the tdh and trh genes of VP using clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 12a(CRISPR/Cas12a)combined with recombinase polymerase amplification and visual detection(CRISPR/Cas12a-VD).Results CRISPR/Cas12a-VD accurately detected target DNA at concentrations as low as 10^(-18)M(single molecule detection)within 30 min without cross-reactivity against other bacteria.When detecting pure cultures of VP,the consistency of results reached 100%compared with real-time PCR.The method accurately analysed pure cultures and spiked shrimp samples at concentrations as low as 10^(2)CFU/g.Conclusion The novel CRISPR/Cas12a-VD method for detecting VP performed better than traditional detection methods,such as real-time PCR,and has great potential for preventing the spread of pathogens. 展开更多
关键词 Vibrio parahaemolyticus CRISPR/Cas12a-VD Isothermal amplification Recombinase polymerase amplification Visual detection cross-reactivity
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弧菌外膜蛋白OmpU的免疫交叉反应性和交叉保护性 被引量:7
17
作者 伦镜盛 张设熙 +4 位作者 董亚萍 谢少凤 麦亨 梅颖怡 胡忠 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期867-879,共13页
【目的】通过对弧菌外膜蛋白Omp U的克隆、表达以及免疫学特性分析,明确外膜蛋白Omp U是否为弧菌的共同抗原,并具有免疫交叉反应性和交叉保护性。【方法】对弧菌外膜蛋白omp U基因进行克隆和生物信息学分析。分别制备副溶血弧菌、溶藻... 【目的】通过对弧菌外膜蛋白Omp U的克隆、表达以及免疫学特性分析,明确外膜蛋白Omp U是否为弧菌的共同抗原,并具有免疫交叉反应性和交叉保护性。【方法】对弧菌外膜蛋白omp U基因进行克隆和生物信息学分析。分别制备副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、拟态弧菌和霍乱弧菌的Omp U重组蛋白抗血清,对Omp U的免疫交叉反应特性以及抗原表位定位情况进行比较分析。以霍乱弧菌的Omp U重组蛋白免疫小鼠后,再以多种弧菌进行攻毒,分析其交叉免疫保护作用。【结果】外膜蛋白Omp U在弧菌种内和种间相似性分别为73.0%–100%和58.6%–89.0%,并至少存在9个保守的B细胞抗原表位。Omp U重组蛋白抗血清在弧菌种内和种间均产生显著的免疫交叉反应,识别弧菌中分子量35–40 k Da的同源蛋白。副溶血弧菌ATCC17802、创伤弧菌ATCC27562和拟态弧菌ATCC33653来源的Omp U重组蛋白抗体能识别供试菌株,提示这些菌株的Omp U抗原表位定位于细胞表面。Omp U重组蛋白对免疫后的小鼠具有交叉免疫保护作用,攻毒实验后小鼠相对存活率(RPS)为43.0%–100%。【结论】上述结果表明,外膜蛋白Omp U是弧菌中一种保守的共同抗原,具有免疫交叉保护性,可以作为弧菌广谱疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 弧菌 外膜蛋白 OMP U 交叉反应性 交叉保护性
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Human T-cell immunity against the emerging and re-emerging viruses 被引量:6
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作者 Min Zhao Hangjie Zhang +2 位作者 Kefang Liu George F.Gao William J.Liu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第12期1307-1316,共10页
Over the past decade, we have seen an alarming number of high-profile outbreaks of newly emerging and re-emerging viruses.Recent outbreaks of avian influenza viruses, Middle East respiratory syndrome coronaviruses, Zi... Over the past decade, we have seen an alarming number of high-profile outbreaks of newly emerging and re-emerging viruses.Recent outbreaks of avian influenza viruses, Middle East respiratory syndrome coronaviruses, Zika virus and Ebola virus present great threats to global health. Considering the pivotal role of host T-cell immunity in the alleviation of symptoms and the clearance of viruses in patients, there are three issues to be primarily concerned about T-cell immunity when a new virus emerges: first, does the population possess pre-existing T-cells against the new virus through previous infections of genetically relevant viruses; second, does a proper immune response arise in the patients to provide protection through an immunopathogenic effect; lastly, how long can the virus-specific immune memory persist. Herein, we summarize the current updates on the characteristics of human T-cell immunological responses against recently emerged or re-emerged viruses, and emphasize the necessity for timely investigation on the T-cell features of these viral diseases, which may provide beneficial recommendations for clinical diagnosis and vaccine development. 展开更多
关键词 emerging viruses avian influenza H7N9 MERS-CoV Zika EBOLA human immunity T-CELL cross-reactivity
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花生交叉过敏反应的研究进展 被引量:7
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作者 罗春萍 高金燕 +1 位作者 胡纯秋 陈红兵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期384-388,共5页
花生过敏严重影响了过敏人群的生活质量,而在过敏反应中花生的交叉过敏现象非常普遍。本文综述了花生过敏的物质基础、交叉过敏的机理及花生相关的交叉过敏反应研究情况,为花生过敏的进一步研究提供参考。
关键词 花生 花生过敏原 交叉过敏反应
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食物过敏原水牛乳β-乳球蛋白的交叉反应研究 被引量:7
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作者 李欣 文学方 +1 位作者 武涌 陈红兵 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期149-150,153,共3页
β-乳球蛋白是乳清中一种主要蛋白质,而且是乳中主要过敏原之一。本研究探讨β-乳球蛋白与其它蛋白的免疫交叉反应性。采用间接ELISA法和免疫印迹的方法,利用β-乳球蛋白和相应的多克隆抗体,检测其交叉反应。结果表明,β-乳球蛋白不仅... β-乳球蛋白是乳清中一种主要蛋白质,而且是乳中主要过敏原之一。本研究探讨β-乳球蛋白与其它蛋白的免疫交叉反应性。采用间接ELISA法和免疫印迹的方法,利用β-乳球蛋白和相应的多克隆抗体,检测其交叉反应。结果表明,β-乳球蛋白不仅与水牛乳中其它蛋白有交叉反应,与其他乳源的β-乳球蛋白也有交叉反应。β-乳球蛋白的交叉反应较强,也是导致乳类食物过敏的主要原因之一。 展开更多
关键词 过敏 Β-乳球蛋白 交叉反应
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