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木瓜蛋白酶交联聚体的制备及性质 被引量：13
1
作者 王梦凡 齐崴 +1 位作者 苏荣欣 何志敏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1774-1779,共6页
采用交联酶聚体(CLEAs)技术制得了木瓜蛋白酶CLEAs,优化了制备条件.以纯乙醇为蛋白沉淀剂,质量分数40%戊二醛为交联剂,于4℃下对酶沉淀聚体交联16h;所得木瓜蛋白酶CLEAs的最适pH为6.0(游离酶最适pH=7.0),最适温度范围由游离酶的80℃拓宽... 采用交联酶聚体(CLEAs)技术制得了木瓜蛋白酶CLEAs,优化了制备条件.以纯乙醇为蛋白沉淀剂,质量分数40%戊二醛为交联剂,于4℃下对酶沉淀聚体交联16h;所得木瓜蛋白酶CLEAs的最适pH为6.0(游离酶最适pH=7.0),最适温度范围由游离酶的80℃拓宽为50～80℃,热稳定性和溶液稳定性亦明显提高;微观形貌分析证明木瓜蛋白酶CLEAs优良的催化效能及稳定性来自于CLEAs单元所具有的高比表面积及单元内部多点共价固定的结合方式. 展开更多
关键词 交联酶聚体 固定化 木瓜蛋白酶 稳定性 形貌 集簇
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有机磷降解酶的固定化及其工业化应用初探 被引量：6
2
作者 郭军 姜广 +3 位作者 初晓宇 田健 张伟 伍宁丰 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期39-42,共4页
采用一种新型的酶固定化方法，在大孔微球中对有机磷降解酶（OPHC2）固定化，制备固相载体化的交联酶聚集体固定化酶。对具有实际应用意义的参数：热稳定性、牢固度和连续反应批次进行了重点研究。结果表明，有机磷降解酶固定化酶的半... 采用一种新型的酶固定化方法，在大孔微球中对有机磷降解酶（OPHC2）固定化，制备固相载体化的交联酶聚集体固定化酶。对具有实际应用意义的参数：热稳定性、牢固度和连续反应批次进行了重点研究。结果表明，有机磷降解酶固定化酶的半衰期在70℃时比游离酶提高了2．1倍。固定化酶分别在37℃的摇床中经14h高速振荡，以及在pH8、37℃条件下循环反应49个批次降解甲基对硫磷后，均未发现固定化酶酶活力下降。在37℃，有机磷降解酶固定化酶柱以每小时3倍柱床体积的速率对甲基对硫磷农药乳油的稀释液（甲基对硫磷含量为216mg／L）进行降解处理，系统连续工作156h，甲基对硫磷的降解率保持在98．4％～99．9％。 展开更多
关键词 有机磷降解酶 固定化 交联酶聚集体 大孔微球
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交联酶聚集体与仿生硅化技术结合制备固定化脂肪酶 被引量：5
3
作者 姜艳军 王旗 +2 位作者 王温琴 周丽亚 高静 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第5期857-862,共6页
将交联酶聚集体(CLEAs)与仿生硅化技术相结合,制备了交联脂肪酶Candidasp.99-125杂化生物催化剂.以京尼平为交联剂,在最佳条件下制得的脂肪酶CLEAs的酶活达771U/g,回收率达75%;保护剂聚乙烯亚胺(PEI)与Candidasp.99-125脂肪酶共沉淀制备... 将交联酶聚集体(CLEAs)与仿生硅化技术相结合,制备了交联脂肪酶Candidasp.99-125杂化生物催化剂.以京尼平为交联剂,在最佳条件下制得的脂肪酶CLEAs的酶活达771U/g,回收率达75%;保护剂聚乙烯亚胺(PEI)与Candidasp.99-125脂肪酶共沉淀制备P/CLEAs,其酶活达897U/g,回收率约88%;利用PEI的诱导作用,在P/CLEAs表面形成氧化硅涂层,制得的脂肪酶CLEAs(Coated-CLEAs)显示出良好的稳定性,特别是其抗蛋白酶水解能力、有机溶剂耐受能力、重复使用性能等方面明显提高. 展开更多
关键词 交联酶聚集体 仿生硅化 假丝酵母脂肪酶Candida sp. 99-125 京尼平 固定化酶
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交联青霉素G酰化酶聚集体制备及其催化特性研究 被引量：1
4
作者 程仕伟 王玉芳 +1 位作者 步长平 张桂春 《食品与药品》 CAS 2012年第2期77-81,共5页
目的考察交联青霉素G酰化酶聚集体催化特性,探讨其应用潜力。方法以硫酸铵为沉淀剂获得青霉素G酰化酶蛋白沉淀,戊二醛交联沉淀的蛋白质制备交联酶聚集体,在此基础上研究交联酶聚集体的催化特性。结果交联粪产碱杆菌来源青霉素G酰化酶聚... 目的考察交联青霉素G酰化酶聚集体催化特性,探讨其应用潜力。方法以硫酸铵为沉淀剂获得青霉素G酰化酶蛋白沉淀,戊二醛交联沉淀的蛋白质制备交联酶聚集体,在此基础上研究交联酶聚集体的催化特性。结果交联粪产碱杆菌来源青霉素G酰化酶聚集体的最适反应温度55℃,最适pH 9.0,其酸碱和热稳定性均优于游离酶,重复使用13批次几乎无酶活性丢失,反应20批次后仍有50.9%的活性。结论交联酶聚集体的稳定性较游离酶好,具有一定的工业应用前景。 展开更多
关键词 青霉素G酰化酶 交联酶聚集体 催化特性 固定化酶
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双交联剂体系氨基酰化酶交联聚体的制备
5
作者 余舜雷 赵林 +2 位作者 董涛 谭欣 刘长光 《化学工业与工程》 CAS 2013年第3期38-43,共6页
采用酶交联聚集体技术(CLEAs)制备氨基酰化酶(EC 3.5.1.14)交联聚集体,优化了制备条件。90%(体积比)乙醇为沉淀剂,戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)作为混合交联剂,以酶、戊二醛和EGDE的质量比为1.00∶0.75∶2.00,在30℃下交联12 h。... 采用酶交联聚集体技术(CLEAs)制备氨基酰化酶(EC 3.5.1.14)交联聚集体,优化了制备条件。90%(体积比)乙醇为沉淀剂,戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)作为混合交联剂,以酶、戊二醛和EGDE的质量比为1.00∶0.75∶2.00,在30℃下交联12 h。制备所得氨基酰化酶CLEA酶活保留率为63.42%。氨基酰化酶经固定化后热稳定性得到增强,热失活过程由自由酶的一阶指数失活模型变为二阶指数失活模型,分子间亚基的结合力得到显著加强。自由酶在37℃下保存24 h后几乎损失了所有活力,而氨基酰化酶CLEA则保留了43%的酶活力,在57℃下保存24 h后仍有32%的酶活力保留。此外,氨基酰化酶CLEA重复使用性能得到明显提升,在重复水解底物10次后仍保留了72%的酶活力。 展开更多
关键词 酶交联聚集体 氨基酰化酶 酶活力
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交联肌酸激酶聚集体催化合成磷酸肌酸
6
作者 徐红梅 何从林 +2 位作者 熊文娟 韦燕禅 夏仕文 《化学与生物工程》 CAS 2014年第5期13-16,共4页
从兔肌中分离纯化出肌酸激酶,经乙醇沉淀得到肌酸激酶聚集体,再以氧化葡聚糖为交联剂制备交联肌酸激酶聚集体,沉淀率为90%,相对酶活性为58%。交联肌酸激酶聚集体的pH稳定性和热稳定性显著高于游离酶。以交联肌酸激酶聚集体在碱性条件下... 从兔肌中分离纯化出肌酸激酶,经乙醇沉淀得到肌酸激酶聚集体,再以氧化葡聚糖为交联剂制备交联肌酸激酶聚集体,沉淀率为90%,相对酶活性为58%。交联肌酸激酶聚集体的pH稳定性和热稳定性显著高于游离酶。以交联肌酸激酶聚集体在碱性条件下催化肌酸和ATP合成磷酸肌酸,转化率(以ATP计)为74%,且可以使用12批次。 展开更多
关键词 肌酸激酶 交联酶聚集体 磷酸肌酸 氧化葡聚糖
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青霉素酰化酶交联酶聚体的制备及热失活动力学 被引量：4
7
作者 慕洋洋 甄倩楠 +3 位作者 王梦凡 齐崴 苏荣欣 何志敏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1212-1218,共7页
以0.53 g/mL硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其CLEAs的热稳定性和热失活动力学模型发... 以0.53 g/mL硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其CLEAs的热稳定性和热失活动力学模型发现,游离青霉素酰化酶制成CLEAs后,其热失活动力学模型由一步失活转变为连串失活,失活反应活化能由248.8 kJ/mol增加至549.2 kJ/mol,对CLEAs热稳定性大幅提高的原因进行了解释.CLEAs重复利用7次后,酶活保留56%以上,具有良好的重复利用性. 展开更多
关键词 交联酶聚体 青霉素酰化酶 固定化 稳定性 热失活动力学
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