MiR-215和RUNX1在视网膜母细胞瘤中的表达水平及临床意义 被引量：5

1

作者 符小林 李谟汉 符密 《中国医师杂志》 CAS 2018年第9期1310-1315,共6页

目的探讨miR-215和RUNXI在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达水平及临床意义,并研究视网膜母细胞瘤细胞系PMC-RB中miR-215对RUNX1的调控作用。方法应用qRT-PCR检测RB患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤组织、人RB细胞系FMC-RB及人正常视网膜血管内皮细... 目的探讨miR-215和RUNXI在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达水平及临床意义,并研究视网膜母细胞瘤细胞系PMC-RB中miR-215对RUNX1的调控作用。方法应用qRT-PCR检测RB患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤组织、人RB细胞系FMC-RB及人正常视网膜血管内皮细胞系ATCC中miR-215及RUNX1的表达水平。用miR-215模拟物(miR-215-mimic)、miR-NC、si-RUNX1和si-NC分别转染FMC-RB细胞系,分别测定细胞增殖、迁移及侵袭能力,并检测miR-215对RUNXI的调控作用。结果 RB肿瘤组织中miR-215表达水平显著低于癌旁非肿瘤组织,RUNX1 mRNA表达水平高于癌旁非肿瘤组织(P<0.05)。miR-215在PMC-RB细胞中的表达水平低于ATCC中表达水平,而RUNX1 mRNA的表达水平高于ATCC中表达水平(P<0. 05)。RB肿瘤组织中miR-215和RUNX1的表达水平与视神经浸润、肿瘤组织分化程度、淋巴结转移等临床病理特征有关(P <0. 05)。miR-215-mimic组细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著低于miR-NC组(P <0. 05)。在转染3,非翻译区(3'UTR)-Wt的细胞中,miR-215-mimic组荧光素酶活性低于miR-NC组(P<0. 05);转染miR-215-mimic细胞中RUNX1蛋白表达水平低于转染miR-NC的细胞(P <0. 05)。si-RUNX1组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于si-NC组(P <0.05)。在RB肿瘤组织中miR-215表达水平与RUNX1 mRNA表达水平呈负相关。结论在RB的发生发展过程中,miR-215表达的下调可通过靶向RUNX1来促进肿瘤的恶性进展,miR-215可作为RB诊断的生物学标志物及治疗靶点。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 微RNAS 核心结合因子 α2亚基 细胞系 肿瘤

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RUNX1基因突变在髓系肿瘤中的研究新进展 被引量：1

2

作者 李青芸 卢绪章 +2 位作者 晁红颖 陈梅玉 刘洁 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2022年第1期24-28,共5页

RUNX1基因突变在骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓细胞白血病(AML)等多种血液肿瘤中发生率较高,并且提示患者预后不良。近年研究结果显示,RUNX1突变在髓系肿瘤的发生、发展中起重要作用,是其第Ⅱ类致病基因。笔者通过RUNX1蛋白结构与功... RUNX1基因突变在骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓细胞白血病(AML)等多种血液肿瘤中发生率较高,并且提示患者预后不良。近年研究结果显示,RUNX1突变在髓系肿瘤的发生、发展中起重要作用,是其第Ⅱ类致病基因。笔者通过RUNX1蛋白结构与功能、不同髓系肿瘤中RUNX1突变的发生情况、RUNX1突变的致病机制、伴RUNX1突变的不同髓系肿瘤患者的临床特点及治疗策略等方面,对RUNX1突变在髓系肿瘤中的临床及相关分子学研究的新进展进行阐述。 展开更多

关键词 核心结合因子α1亚基 核心结合因子α2亚基 突变 骨髓增生异常综合征 白血病 髓样 急性 RUNX1基因

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miR-370-3p对抑郁症大鼠抑郁样行为和神经元损伤的影响 被引量：3

3

作者 刘金泉 张继红 +2 位作者 刘春云 纪宁 孙永胜 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期41-46,52,共7页

目的探究miR-370-3p对抑郁症大鼠的抑郁样行为和神经元损伤的影响。方法采用在线预测软件TargetScan3.1分析miR-370-3p和RUNX1的靶向关系,并通过双荧光素酶报告实验验证其靶向关系,构建过表达miR-370-3p、RUNX1的293T细胞株,采用qPCR和W... 目的探究miR-370-3p对抑郁症大鼠的抑郁样行为和神经元损伤的影响。方法采用在线预测软件TargetScan3.1分析miR-370-3p和RUNX1的靶向关系,并通过双荧光素酶报告实验验证其靶向关系,构建过表达miR-370-3p、RUNX1的293T细胞株,采用qPCR和Western blotting分别检测细胞中miR-370-3p及RUNX1 mRNA和蛋白的表达。将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、NC agomiR、miR-370-3p agomiR、Ad-RUNX1组和miR-370-3p+RUNX1组,每组10只。采用慢性不可预见性温和刺激方法构建抑郁症大鼠模型。对各组大鼠进行旷场实验、糖水偏好实验、高架十字迷宫实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁行为,采用HE染色观察大鼠海马病理变化。结果与模型组相比,miR-370-3p agomiR组大鼠下丘脑细胞损伤明显减轻,miR-370-3p表达、旷场实验中总移动距离、蔗糖偏好度、进入开放臂及闭合臂次数明显增加,而强迫游泳实验不动时间明显减少(均P<0.05)。miR-370-3p和RUNX1存在靶向关系,与Ad-RUNX1组比较,miR-370-3p+RUNX1组293T培养细胞中RUNX1 mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05);与Ad-RUNX1组比较,miR-370-3p+RUNX1组大鼠旷场实验总移动距离、蔗糖偏好度、进入开放臂及闭合臂次数明显增加,强迫游泳实验不动时间明显降低,下丘脑细胞损伤明显减轻(均P<0.05)。结论miR-370-3p可显著改善抑郁症大鼠抑郁样行为,减轻其神经元损伤,可能与其靶向抑制RUNX1的表达有关。 展开更多

关键词 miR-370-3p 抑郁症 RUNX1 核心结合因子α2亚基 神经元损伤

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Runx3基因CpG岛甲基化与胃癌发生的关系 被引量：10

4

作者 唐国华 孙少卫 贺修胜 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期314-319,共6页

目的通过研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响，探讨甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法与焦磷酸测序（PS）法对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本，以MSP法和Ps法同时检测其R... 目的通过研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响，探讨甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法与焦磷酸测序（PS）法对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本，以MSP法和Ps法同时检测其Runx3启动子的甲基化程度。结果与正常胃黏膜相比，胃癌组织Runx3的甲基化程度差异有显著性意义（MSP法：67．3％比40．0％，P=0．002；PS法：76．0％比30．0％，P〈0．01）。MSP法显示Runx3甲基化只与肿瘤大小相关（P〈0．05）。而Ps法分析显示进展期胃癌的Runx3甲基化率高于早期胃癌（P〈0．05）；且其甲基化状态与肿瘤的大小（P=0．004）、Lauren分型（P=0．043）、浸润的深度（P〈0．01）、淋巴结转移（P=0．021）及肿瘤TNM临床分期（P=0．045）等临床病理特征之间存在相关性。结论Runx3启动子甲基化与胃癌临床病理特征包括肿瘤大小、Lauren分型、浸润的深度、淋巴结转移以及肿瘤TNM临床分期密切相关；与MSP法相比，Ps法敏感性更高，且检测结果与临床病理学结果之间有显著相关性，对于胃癌的早期诊断和治疗有着重要意义。 展开更多

关键词 胃肿瘤 DNA甲基化 核心结合因子仪3亚基

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体外冲击波对早中期股骨头坏死患者骨髓间质干细胞生物学特性的影响 被引量：10

5

作者 翟磊 孙楠 +5 位作者 王景贵 孙圣凯 赵喆 王明新 姜川 邢更彦 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-91,共8页

目的 观察体外冲击波（extracorporeal shock wave，ESW）对早中期股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）患者骨髓间质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）成骨及成脂相关基因表达的影响。方法 取ONFH患者自愿捐... 目的 观察体外冲击波（extracorporeal shock wave，ESW）对早中期股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）患者骨髓间质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）成骨及成脂相关基因表达的影响。方法 取ONFH患者自愿捐赠的骨髓，体外分离并传代培养MSCs。将R代MSCs分为A组（干预组）和B组（对照组）；细胞计数试剂盒检测P3代MSCs不同时间点增殖差异；酶细胞化学和茜素红染色检测如代MSCs碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）含量和P-代MSCs胞外基质矿化程度的差异；RT-PCR检测不同时间点骨钙素（osteocalcin，OC）、核心结合因子αl（core-binding factoralphal，Cbfαl）、过氧化物酶体增殖物激活受体1（peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPARγ）表达量的差异。结果A组各时间点（不含第1天）细胞增殖速度均明显强于B组；ALP含量（不含第3天）A组总体水平明显高于B组；茜素红染色示A组矿化结节数为（6．0±1．0）个／视野，B组始终为阴性；Cbfαl在成骨分化的整个过程中均持续表达，A组在各时间点（不含第3天）均明显强于B组；A组OC在各时间点（不含第3、6天）均明显强于B组；PPARy在成骨分化的整个过程中均持续表达，A组在各时间点（不舍第3天）均明显弱于B组．结论适当强度的ESW能够促进MSCs增殖，诱导MSCs向成骨细胞方向分化并抑制MSCs向成脂细胞方向分化是其治疗ONFH的有效机制。 展开更多

关键词 高能量冲击波 股骨头坏死 核心结合因子α1亚基 骨钙素

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RUNX3在结直肠癌中的表达与作用及其与TGF-β/SMAD4信号通路的关系 被引量：2

6

作者 贾光辉 丁一冰 +1 位作者 赵永强 高增润 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1064-1070,共7页

背景与目的:转化生长因子β(TGF-β)/SMAD4信号传导通路在结直肠癌发生与发展中起了重要作用。runt相关转录因子3(RUNX3)在结直肠癌组织中的表达水平显著降低,且可能发挥抑癌作用。但RUNX3的作用与TGF-β/SMAD4通路的关系尚未见报道。因... 背景与目的:转化生长因子β(TGF-β)/SMAD4信号传导通路在结直肠癌发生与发展中起了重要作用。runt相关转录因子3(RUNX3)在结直肠癌组织中的表达水平显著降低,且可能发挥抑癌作用。但RUNX3的作用与TGF-β/SMAD4通路的关系尚未见报道。因此,本研究旨在探讨RUNX3与SMAD4在结肠癌中的表达及作用,以及两者的关系。方法:收集98例结直肠癌组织和癌旁正常组织标本,分别用Western blot检测RUNX3和SMAD4蛋白的水平,qRT-PCR检测SMAD4 mRNA的水平,并分析两者表达的相关性。将人结直肠癌细胞SW480分别转染RUNX3过表达载体(RUNX3组)、SMAD4过表达载体(SMAD4组)、RUNX3+SMAD4过表达载体(RUNX3+SMAD4组),以转染阴性对照质粒的SW480细胞为对照组,分别用Western blot与qRT-PCR检测各组细胞RUNX3与SMAD4表达的变化;用CCK-8实验与Transwell实验分析各组细胞的增殖与侵袭能力的差异。结果:结直肠癌组织中的RUNX3蛋白表达量明显低于癌旁正常组织,而SMAD4的mRNA与蛋白表达水平均明显高于癌旁正常组织(均P<0.05);结直肠癌组织中RUNX3蛋白表达与SMAD4 mRNA和蛋白表达均呈负相关(r=0.511,P=0.004;r=0.487,P=0.009)。与对照组比较,RUNX3组的RUNX3蛋白水平均明显升高,但SMAD4 mRNA和蛋白水平明显降低(均P<0.05);SMAD4组的RUNX3蛋白水平无明显变化(P>0.05),但SMAD4 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(均P<0.05);RUNX3+SMAD4组的RUNX3蛋白水平均明显升高(P<0.05),SMAD4 mRNA和蛋白水平变化不明显(均P>0.05)。RUNX3组细胞增殖与侵袭能力均明显低于对照组(均P<0.05),SMAD4组的细胞增殖和侵袭能力均明显高于对照组(均P<0.05),RUNX3+SMAD4组的细胞增殖和侵袭能力介于RUNX3组与SMAD4组之间,与对照组比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:RUNX3在结肠癌组织中表达降低,上调RUNX3的表达对结肠癌细胞的恶性生物学行为有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β/SMAD4通路的活性有关。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 核心结合因子α3亚基 SMAD4蛋白质 细胞增殖 肿瘤浸润

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大鼠颌骨来源骨髓间充质干细胞中Cbfα1/p56亚型的表达 被引量：2

7

作者 周建华 许艳彬 +3 位作者 邱建忠 陈正岗 江宏兵 王莉莉 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第23期3622-3626,共5页

背景:与来源于中胚层间充质的躯干四肢骨不同,颌骨来源于颅神经嵴外胚间充质,具有独特的膜内成骨机制。核心结合因子Cbfα1是骨分化的关键性转录因子,但其p56亚型在颌骨组织中的作用尚不明确。目的:研究Cbfα1/p56亚型在大鼠颌骨来源骨... 背景:与来源于中胚层间充质的躯干四肢骨不同,颌骨来源于颅神经嵴外胚间充质,具有独特的膜内成骨机制。核心结合因子Cbfα1是骨分化的关键性转录因子,但其p56亚型在颌骨组织中的作用尚不明确。目的:研究Cbfα1/p56亚型在大鼠颌骨来源骨髓间充质干细胞中的表达及意义。方法:原代培养大鼠颌骨和髂骨来源的骨髓间充质干细胞,采用ELISA法检测骨髓间充质干细胞中的碱性磷酸酶活性,荧光定量PCR法检测骨髓间充质干细胞中Cbfα1/p56和p57亚型的mRNA相对表达量。结果与结论:成功培养出大鼠颌骨和髂骨来源的骨髓间充质干细胞,颌骨来源骨髓间充质干细胞的增殖能力及碱性磷酸酶活性明显高于髂骨;在培养第6天,颌骨来源骨髓间充质干细胞的Cbfα1/p56亚型mRNA相对表达量高于髂骨来源骨髓间充质干细胞(P<0.05),而Cbfα1/p57亚型在各培养时间点的mRNA相对表达量两组间差异均无显著性意义(P>0.05)。结果提示Cbfα1/p56亚型对颌骨来源骨髓间充质干细胞的早期成骨分化具有重要意义。 展开更多

关键词 干细胞 骨髓干细胞 核心结合因子Α1 亚型 p56 P57 骨髓间充质干细胞 成骨分化 颌骨 髂骨

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miR-130a、RUNX3在食管鳞癌中表达的相关性及其临床意义

8

作者 姚红军 胡静 袁灿亮 《医学临床研究》 CAS 2022年第8期1165-1169,共5页

【目的】探讨miR-130a、重组人Runt相关转录因子3(RUNX3)在食管鳞癌中表达的相关性及其临床意义。【方法】本院接受手术治疗的84例食管鳞癌患者,取患者手术时癌组织为研究对象,相应的癌旁组织为对照。采用qRT-PCR检测组织中miR-130a表... 【目的】探讨miR-130a、重组人Runt相关转录因子3(RUNX3)在食管鳞癌中表达的相关性及其临床意义。【方法】本院接受手术治疗的84例食管鳞癌患者,取患者手术时癌组织为研究对象,相应的癌旁组织为对照。采用qRT-PCR检测组织中miR-130a表达水平;采用Westernblot法及免疫组化法检测组织中RUNX3蛋白表达。对所有患者进行随访,探讨miR-130a与RUNX3表达对食管鳞癌患者预后的影响。【结果】与癌旁组织相比,食管鳞癌组织中miR-130a表达水平较高(P<0.05),RUNX3蛋白表达水平较低(P<0.05)。食管鳞癌组织中miR-130a与RUNX3蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。miR-130a和RUNX3蛋白表达水平与T分期、组织分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-130a高表达患者中位生存时间显著短于miR-130a低表达患者(P<0.05);RUNX3低表达患者中位生存时间显著短于RUNX3高表达患者(P<0.05)。多因素Cox分析表明,T分期T3~T4期、有淋巴转移、miR-130a高表达、RUNX3低表达是食管鳞癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。【结论】食管鳞癌癌组织中miR-130a表达水平上调、RUNX3蛋白表达水平下调,二者与食管鳞癌患者预后不良密切相关,且miR-130a高表达、RUNX3低表达的食管鳞癌患者发生预后不良的风险较大。 展开更多

关键词 癌 鳞状细胞 食管肿瘤 微RNAS 核心结合因子α3亚基

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RUNX3基因在肝细胞癌中的表达及其意义

9

作者 潘其重 陆日坚 +1 位作者 梁增文 覃江 《中国医师进修杂志》 2008年第8期17-19,共3页

目的探讨RUNX3基因及其蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达规律及其临床意义。方法采用免疫组织化学sP法、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）等方法检测23例HCC患者肝癌组织和相应癌旁肝组织中RUNX3基因及其蛋白的表达情况。结果肝癌组织中RU... 目的探讨RUNX3基因及其蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达规律及其临床意义。方法采用免疫组织化学sP法、反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）等方法检测23例HCC患者肝癌组织和相应癌旁肝组织中RUNX3基因及其蛋白的表达情况。结果肝癌组织中RUNX3基因及其蛋白的表达明显降低，阳性率分别为26．1％（6／23）和17．4％（4／23），明显低于癌旁肝组织的表达阳性率的91．3％（21/23）和87．0％（20／23），差异均有统计学意义（P均〈0．01）。结论RUNX3基因及其蛋白在肝癌组织中表达明显下调，提示RUNX3功能失活可能与HCC的发生和发展密切相关。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 核心结合因子 α3亚基

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淫羊藿苷促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：39

10

作者 鲍远 黄俊明 +5 位作者 靖兴志 李兴艳 董永辉 张津铭 郭风劲 陈安民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第24期3501-3507,共7页

背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷... 背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷作用于骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR检测runx2、ocn和osx基因的表达情况,以及通过茜素红染色检测成骨细胞分泌的钙结节数量。用淫羊藿苷喂养大鼠(2 mg/d)5周后,进行Micro CT扫描并分析胫骨上段骨结构。结果与结论:(1)无论是否存在成骨诱导培养条件,淫羊藿苷均能促进成骨分化相关基因的表达;(2)在成骨诱导培养时,淫羊藿苷能明显增加钙结节沉积;(3)动物实验表明淫羊藿苷能显著促进骨小梁的生成。 展开更多

关键词 淫羊藿属 骨髓 间质干细胞 骨钙素 核心结合因子α1亚基 组织工程 组织构建 骨细胞 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化 runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 国家自然科学基金

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补肾活血汤水提物调控Cbfal/RUNX2基因沉默骨髓间充质干细胞SP7/Osterix及碱性磷酸酶的表达 被引量：12

11

作者 程英雄 罗毅文 +5 位作者 王斌 吴志方 沈玮 罗辉 孙世栋 黄文强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第13期1987-1992,共6页

背景:补肾活血汤可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化,探究分子机制利于推向临床。目的:探讨补肾活血汤水提物对Cbfal/RUNX2基因沉默的骨髓间充质干细胞Osterix、碱性磷酸酶表达的影响。方法:骨髓贴壁筛选法分离和培养大鼠骨髓间充质干细... 背景:补肾活血汤可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化,探究分子机制利于推向临床。目的:探讨补肾活血汤水提物对Cbfal/RUNX2基因沉默的骨髓间充质干细胞Osterix、碱性磷酸酶表达的影响。方法:骨髓贴壁筛选法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,Cbfal/RUNX2基因沉默慢病毒转染骨髓间充质干细胞。取第3代骨髓间充质干细胞(空白对照组)、慢病毒沉默骨髓间充质干细胞(沉默组)和阴性病毒载体预处理骨髓间充质干细胞(阴性对照组),以及上述3组骨髓间充质干细胞加入100 mg/L补肾活血汤水提物干预3 d后,检测RUNX2、Osterix蛋白和mRNA表达以及碱性磷酸酶活性。结果与结论:(1)Cbfal/RUNX2基因沉默慢病毒转染效率达约90%;(2)与空白对照组和阴性对照组比较,沉默组骨髓间充质干细胞RUNX2和Osterix的蛋白及mRNA表达均下降,碱性磷酸酶活性也明显下降,差异有显著性意义(P<0.01);(3)补肾活血汤水提物干预后,沉默组骨髓间充质干细胞RUNX2、Osterix的表达和碱性磷酸酶活性明显增加,差异有显著性意义(P<0.01);(4)结果表明,补肾活血汤水提物可以促进骨髓间充质干细胞的RUNX2、Osterix表达,亦增加了碱性磷酸酶活性,从而促进骨髓间充质干细胞成骨分化。 展开更多

关键词 补肾活血汤 成骨 骨髓间充质干细胞 RUNX2 OSTERIX 基因沉默 碱性磷酸酶 干细胞

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Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化相关基因表达的影响 被引量：9

12

作者 周大凯 李慧宁 +1 位作者 马珊珊 程田 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1444-1449,共6页

背景:Runx2在成骨分化的信号途径中起核心作用,在诱导干细胞成骨分化及促进骨愈合方面具有重要的研究意义。目的:观察Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化的影响。方法:(1)扩增Runx2基因,利用腺病毒载体构建Runx2重组腺病毒(pA d... 背景:Runx2在成骨分化的信号途径中起核心作用,在诱导干细胞成骨分化及促进骨愈合方面具有重要的研究意义。目的:观察Runx2基因高表达对脐血间充质干细胞成骨分化的影响。方法:(1)扩增Runx2基因,利用腺病毒载体构建Runx2重组腺病毒(pA d-Runx2),检测病毒滴度后用重组腺病毒感染脐血间充质干细胞,并于荧光显微镜下观察荧光表达变化;(2)感染后1,3,7,14 d采用实时荧光定量PCR及Western blot检测脐血间充质干细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP的mRNA和蛋白表达。结果与结论:(1)成功制备pA d-Runx2重组腺病毒,病毒滴度为1.7×10^(10)pfu/L;(2)Runx2重组腺病毒感染脐血间充质干细胞后细胞形态呈成骨样细胞改变,对照组细胞无明显变化;(3)感染组细胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP mRNA和蛋白的表达量随感染时间的增加均有不同程度的上调;(4)结果表明,高表达Runx2基因腺病毒感染脐血间充质干细胞,能够上调BMP-2、OCN、ALP基因的表达,从而促进脐血间充质干细胞的成骨分化。 展开更多

关键词 脐血干细胞移植 核心结合因子α1亚基 腺病毒科 组织工程 干细胞 脐带脐血干细胞 脐血间充质干细胞 腺病毒载体 Runx2基因 成骨分化 国家自然科学基金

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人脱落乳牙干细胞骨向分化相关分子Runx2的动态表达 被引量：6

13

作者 王立媛 刘大勇 贾智 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第15期2345-2350,共6页

背景:Runx2被认为是成骨基因表达的主要调节因子,是一种向成骨细胞分化的不可或缺的转移因子,在成骨细胞发育、分化、调控、骨钙化形成及骨修复过程中起着极其重要的作用。目的:观察人脱落乳牙干细胞生物学特征,探讨乳牙干细胞骨向分化... 背景:Runx2被认为是成骨基因表达的主要调节因子,是一种向成骨细胞分化的不可或缺的转移因子,在成骨细胞发育、分化、调控、骨钙化形成及骨修复过程中起着极其重要的作用。目的:观察人脱落乳牙干细胞生物学特征,探讨乳牙干细胞骨向分化潜能,以及不同时间点成骨相关转录因子Runx2的动态表达规律。方法:体外分离、培养人脱落乳牙干细胞。流式细胞仪检测乳牙干细胞表面标志。体外脂向诱导分化4周后进行油红O染色,检测脂滴形成情况;矿化诱导21 d进行茜素红染色,检测矿化结节形成情况。于成骨诱导的不同时间点,用RT-PCR技术检测Runx2的动态表达。结果与结论:通过酶消化法和有限稀释法获得了乳牙干细胞,流式细胞仪检测显示CD146和STRO-1均有不同程度的表达。成脂诱导油红O染色可见橙红色阳性颗粒。矿化诱导茜素红染色呈阳性。RT-PCR技术检测Runx2在成骨诱导第0天已有表达,0-6 d成明显增强趋势,6-12 d显著下降,12-18 d表达再次上升,以后相对平稳。结果表明乳牙干细胞可体外分离、培养,表达间充质干细胞表面标志,具有成脂和成骨向分化能力。Runx2在乳牙干细胞成骨分化各阶段均有表达,早期和晚期表达上升,中期表达有下降趋势。 展开更多

关键词 组织构建 骨组织工程 人脱落乳牙干细胞 RUNX2 骨向分化 动态表达

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血清Runx2 mRNA表达与尿毒症患者动脉血管钙化的关系研究 被引量：1

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作者 胡春燕 刘兰 +2 位作者 张东雪 张园 朱荣芳 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第11期1193-1197,共5页

目的探讨血清Runt相关转录因子2(Runx^(2))mRNA表达与尿毒症患者动脉血管钙化的关系。方法选取行自体动静脉内瘘成形术及切除重造术的尿毒症患者78例并收集患者的血管组织、血清样本及临床资料。根据硝酸银染色结果进行钙化评分,并将患... 目的探讨血清Runt相关转录因子2(Runx^(2))mRNA表达与尿毒症患者动脉血管钙化的关系。方法选取行自体动静脉内瘘成形术及切除重造术的尿毒症患者78例并收集患者的血管组织、血清样本及临床资料。根据硝酸银染色结果进行钙化评分,并将患者分为钙化组(n=23)和未钙化组(n=55)。采用免疫组化法检测血管组织的Runx^(2)表达水平,实时荧光定量PCR检测血清Runx^(2) mRNA表达水平。比较2组患者临床各指标的变化,通过线性回归分析各指标对血管钙化的影响因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清Runx^(2) mRNA表达水平对血管钙化的预测能力。结果硝酸银染色结果显示,与未钙化组比较,钙化组黑色沉积显著增多;免疫组化结果显示,钙化组Runx^(2)评分显著增高(P<0.01)。与未钙化组比较,钙化组年龄、透析龄、血清Runx^(2) mRNA表达水平、血磷、全段甲状旁腺素(iPTH)均显著增高,血白蛋白和血钙显著降低(P<0.05)。Spearman相关分析显示,血清Runx^(2) m RNA水平、年龄、透析龄、血磷、i PTH、Runx^(2)评分与钙化评分呈正相关,血白蛋白和血钙与钙化评分呈负相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,血清Runx^(2) mRNA表达水平升高、高透析龄、低血钙是尿毒症患者动脉血管钙化的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清Runx^(2) mRNA、透析龄和血钙三者联合诊断预测血管钙化的曲线下面积(AUC)为0.934。结论血清Runx^(2) mRNA表达是尿毒症患者动脉血管钙化的独立危险因素,可能成为诊断预测尿毒症患者动脉血管钙化的生物标志物。 展开更多

关键词 尿毒症 肾透析 血管钙化 核心结合因子α1亚基 Runt相关转录因子2 血钙 透析龄

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