脐血单个核细胞的分离及冻存 被引量：8

1

作者 兰炯采 刘忠 +3 位作者 甘茂州 陈强 张印则 孟庆宝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期351-354,共4页

研究脐血采集后的放置、单个核细胞的分离、冻存等的影响因素。方法为血液采集后,离心分离单个核细胞,进行冷冻保存及复苏后洗涤。结果优选为采集后4℃或室温放置24小时内,羟乙基淀粉2次离心法分离单个核细胞,50％二甲亚砜加自身血浆为... 研究脐血采集后的放置、单个核细胞的分离、冻存等的影响因素。方法为血液采集后,离心分离单个核细胞,进行冷冻保存及复苏后洗涤。结果优选为采集后4℃或室温放置24小时内,羟乙基淀粉2次离心法分离单个核细胞,50％二甲亚砜加自身血浆为保护剂冻存、复苏后洗涤等程序。结论:本研究的优化方法可有效地保存脐血单个核细胞。 展开更多

关键词 脐血 单个核细胞 细胞分离 冷冻保存 造血干/祖细胞移植

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脐血造血干/祖细胞的密度分离实验研究 被引量：5

2

作者 许文荣 胡嘉波 +5 位作者 朱伟 曹红翠 顾可梁 邱国强 谢晓宝 刘国卿 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期73-76,共4页

目的为建立脐血造血细胞库，减少脐血储存空间，探讨脐血造血干／祖细胞的密度分离效果。方法选用五种不同比密的 Ｆｉｃｏｌｌ分离液（１．０８４、１．０７７、１．０７２、１．０６４、１．０５４ ｇ／Ｌ）分离脐血细胞，采用流式细... 目的为建立脐血造血细胞库，减少脐血储存空间，探讨脐血造血干／祖细胞的密度分离效果。方法选用五种不同比密的 Ｆｉｃｏｌｌ分离液（１．０８４、１．０７７、１．０７２、１．０６４、１．０５４ ｇ／Ｌ）分离脐血细胞，采用流式细胞技术（ＦＣＭ）和全自动血细胞分析仪分析了４１例脐血造血干／祖细胞和有核细胞（ＮＣ）的回收率并作了对比研究。结果１．０６４ｇ／Ｌ Ｆｉｃｏｌｌ分离脐血有核细胞回收率３．６％，淋巴细胞去除率为８６．６％２所分离的单个核细胞（ＭＮＣ）中ＣＤ３４＋细胞平均纯度为１０．３％，最高可高达４６．６％；所分离的细胞体外易形成 ＣＦＵ－ＧＭ及ＢＦＵ－Ｅ。结论不同比密分离脐血造血干／祖细胞具有不同影响。其中 １．０６４ ｇ／Ｌ Ｆｉｃｏｌｌ分离脐血造血干／祖细胞是一种方便、实用、有效的方法。所分离的细胞体外有较强的增殖能力。 展开更多

关键词 脐血 密度分离 造血干细胞 祖细胞

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羟乙基淀粉沉降法分离脐血过程的深入分析及条件优化 被引量：7

3

作者 迟占有 姜华 +2 位作者 蔡海波 谭文松 戴干策 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2004年第2期71-74,共4页

目的　进一步提高HES(羟乙基淀粉 )沉降法分离脐血单个核细胞的收率。方法　对比和分析对该沉降过程完成后上下层的白细胞数 ,并考察HES浓度、HES与脐血体积比、沉降距离对该过程白细胞收率的影响。结果　沉降过程存在因红细胞团向下沉... 目的　进一步提高HES(羟乙基淀粉 )沉降法分离脐血单个核细胞的收率。方法　对比和分析对该沉降过程完成后上下层的白细胞数 ,并考察HES浓度、HES与脐血体积比、沉降距离对该过程白细胞收率的影响。结果　沉降过程存在因红细胞团向下沉降而推动白细胞向上运动的对流现象 ,该现象受到细胞占悬浮液总体积的比例和红细胞下降速度的影响 ,增加沉降距离能增加对流的作用距离 ,有利于提高白细胞的收率 ,提高HES与脐血的体积比也有利于提高白细胞收率。悬浮液中HES浓度 <0 .6 %时 ,细胞不能有效沉降 ,>3%时 ,会引起白细胞在红细胞中的夹带而影响收率。用 3%HES以 2∶1与脐血混合 ,在沉降距离为 2 5cm的沉降管中沉降 4 0min ,分离后白细胞收率达 94 .3%。结论　采用 3%HES溶液 ,并提高HES与脐血的体积比和增加沉降距离 。 展开更多

关键词 脐血 羟乙基淀粉 沉降 分离 白细胞 收率

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第三产程中放脐血促进胎盘剥离娩出的临床观察 被引量：6

4

作者 杨明艳 周南征 《中国实用护理杂志》 2006年第2期28-29,共2页

目的探讨第三产程中放脐血促进胎盘剥离娩出的临床效果。方法分娩出胎儿后10min，胎盘未剥离的初产妇372例，随机分2组，对照组脐静脉注入的生理盐水20ml内加入缩宫素，研究组先松开脐带上止血钳，放脐带血10-20ml，分别观察2组10～20mi... 目的探讨第三产程中放脐血促进胎盘剥离娩出的临床效果。方法分娩出胎儿后10min，胎盘未剥离的初产妇372例，随机分2组，对照组脐静脉注入的生理盐水20ml内加入缩宫素，研究组先松开脐带上止血钳，放脐带血10-20ml，分别观察2组10～20min，～30min,30min以后胎盘剥离情况和产后出血情况。结果研究组10-20min，-30min胎盘娩出数高于对照组，产后出血例数也低于对照组。结论对产后10min胎盘无剥离者采用松止血钳放脐血10～20ml，能促进胎盘剥离，并减少产后出血，值得推广。 展开更多

关键词 产后出血 第三产程 脐血 胎盘剥离

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三种不同方法分离脐血造血干细胞的效果比较 被引量：5

5

作者 王颖超 殷楚云 +3 位作者 冯磊 赵小明 王晓晖 徐彦磊 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期766-768,794,共4页

目的探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究。方法取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液(Ficoll)密... 目的探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究。方法取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液(Ficoll)密度梯度离心法、免疫磁珠(MACS)法处理。比较3种方法分离后的单个核细胞(MNCs)回收率、锥虫蓝拒染率及CD34细胞阳性率;将以上3种方法所得细胞用完全培养基培养,不同时间点计数细胞,绘制生长曲线,并观察原代细胞的生长情况及其形态特征;并采用半固体琼脂培养法,计数其粒-巨噬细胞集落形成单位数。结果 HES法得到的MNCs回收率高于Ficoll密度梯度离心法和MACS法(Pa<0.05);锥虫蓝拒染率三者比较差异无统计学意义(P>0.05);MACS法所得细胞CD34阳性率明显高于另2种方法(Pa<0.05),并且其所得细胞生长状态好,集落数最多;HES法和Ficoll法所得细胞,部分呈贴壁生长,与贴壁细胞共培养的细胞生长状态好;Ficoll密度梯度离心法得到细胞生长状态最差,集落数最少。结论 HES法可作为一种首选常规分离脐血造血干细胞的方法;MACS法分离得到造血干细胞纯度高,适于实验及临床研究。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 分离 间充质干细胞

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影响脐血造血细胞体外培养与检测的因素 被引量：3

6

作者 张孝兵 蔡海波 +1 位作者 谭文松 俞俊棠 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期32-35,共4页

考察了分离方法、血浆（血清）、渗透压、细胞因子的保存等因素对脐血造血细胞体外培养和检测的影响。结果表明，用明胶沉降加密度梯度离心分离两步法分离比传统方法能分离到更多的单个核细胞；混合脐血血浆比胎牛血清更能支持造血细胞... 考察了分离方法、血浆（血清）、渗透压、细胞因子的保存等因素对脐血造血细胞体外培养和检测的影响。结果表明，用明胶沉降加密度梯度离心分离两步法分离比传统方法能分离到更多的单个核细胞；混合脐血血浆比胎牛血清更能支持造血细胞的生长；高渗透压对集落形成有一定影响，而低渗透压对集落形成更为有害；在３７°Ｃ下保存细胞因子，其生物活性下降最快，－３０°Ｃ冷冻保藏较好地保持其活性，解冻次数对生物活性影响不显著。 展开更多

关键词 造血干细胞 脐血 细胞培养 体外培养 CFU

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脐带血造血干细胞的分离和冷冻保存研究 被引量：2

7

作者 韩俊领 赵英新 +3 位作者 武文杰 伍盛举 杨俊晔 邱录贵 《生物医学工程与临床》 CAS 2005年第5期301-304,共4页

目的探讨为临床移植有效地分离和冷冻保存无关供者脐带血中的造血干细胞的方法。方法将由普通或改进的两种不同采集袋采集的脐带血,用两步离心法分离、浓缩脐带血中的有核细胞,用BioArchive System(生物档案系统)或常规的程控降温系统... 目的探讨为临床移植有效地分离和冷冻保存无关供者脐带血中的造血干细胞的方法。方法将由普通或改进的两种不同采集袋采集的脐带血,用两步离心法分离、浓缩脐带血中的有核细胞,用BioArchive System(生物档案系统)或常规的程控降温系统将之冷冻,保存在-196℃液氮中。用流式细胞术和细胞培养法检测脐带血中的CD34+细胞和造血祖细胞含量。结果脐带血用改进的采集袋分离后,有核细胞和红细胞的回收率分别为86.4%±4.6%和44.2%±9.6%,而普通采集袋的回收率为78.4%±7.9%和49.8%±11.7%;将富含有核细胞悬液的体积浓缩到20 ml时,有核细胞和红细胞的回收率分别为74.62±9.3%和34.9%±19.1%,浓缩体积为32 ml回收率为86.4%±4.6%和45.1%±7.8%/但两者的CD34+细胞和造血祖细胞的回收率无统计学意义;冷冻脐带血融化后有核细胞、CD34+细胞和CFU-C回收率分别为84.2%±10.1%、96.0%±21.8%和115.1%±23.3%。苔盼蓝拒染率93.8%±4.4%。结论改进的采集袋能够明显提高有核细胞回收率。采用两步离心法和两种冻存方法能够有效地富集和冻存脐带血中的造血干细胞。 展开更多

关键词 脐带血 造血干细胞 分离 冷冻保存

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改良顶底法在脐带血有核细胞分离中的优化 被引量：2

8

作者 吴春燕 张杰 +3 位作者 谢顺忌 邱谧 陈强 赖真阳 《中国输血杂志》 CAS 2022年第7期755-758,共4页

目的 探索使用改良顶底法分离脐带血有核细胞,减少分离过程中白膜层的位移扰动,提高分离效果。方法 在顶底法的基础上,采用两块透明板材,中间使用螺丝连接,离心时将血袋夹在中间,离心完成后带装置整体取出放入分浆夹中进行分离,优化分... 目的 探索使用改良顶底法分离脐带血有核细胞,减少分离过程中白膜层的位移扰动,提高分离效果。方法 在顶底法的基础上,采用两块透明板材,中间使用螺丝连接,离心时将血袋夹在中间,离心完成后带装置整体取出放入分浆夹中进行分离,优化分离参数,形成改良顶底法,并与传统富浆法进行平行比较。结果 改良顶底法使用夹板可以有效避免离心后白膜层位移,较好地解决了液面扰动问题。改良顶底法只需一次离心,与富浆法比较,离心分离时间由(29.12±2.79)min降至(14.91±2.12)min(P<0.05)。改良顶底法的TNC回收率为(89.04±5.19)%,虽较富浆法有小幅提升,但无统计学差异(P>0.05)。改良顶底法RBC去除率为(55.56±22.57)%,HCT为(0.48±0.09)L/L,较富浆法均有统计学差异(P<0.05),在中、低体积段中的差异更大。结论 改良顶底法对顶底法进行了优化,提高了脐带血分离效率和质量。 展开更多

关键词 脐带血分离 改良顶底法 有核细胞回收率 红细胞去除率

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人脐带血造血干细胞的分离和体外扩增 被引量：3

9

作者 刘云霞 许倩 +5 位作者 马晔 徐大为 孙立新 王庆林 周晓春 颜勇 《湖南师范大学学报（医学版）》 2004年第1期28-32,共5页

目的 :通过对人新鲜脐带血造血干细胞的体外分离 ,探讨不同细胞生长因子的体外培养体系对CD34+ 细胞的扩增作用。方法 :用SCF、FL、GM CSF、IL 3、IL 6、G CSF、TPO组合成不同的实验组 ,对脐血中分离的CD34+ 细胞进行 2 1d的体外培养 ,... 目的 :通过对人新鲜脐带血造血干细胞的体外分离 ,探讨不同细胞生长因子的体外培养体系对CD34+ 细胞的扩增作用。方法 :用SCF、FL、GM CSF、IL 3、IL 6、G CSF、TPO组合成不同的实验组 ,对脐血中分离的CD34+ 细胞进行 2 1d的体外培养 ,扩增后经流式细胞仪分析 ,从而求得细胞培养较好的细胞因子组合。结果 :不同细胞因子组细胞培养孔CD34+ 细胞比例在培养 7d时已经开始上升 ,10d时继续上升 ,到 14d达高峰 ,继续培养 18d ,CD34+ 细胞比例逐渐下降 ,但仍高于培养前水平 ,培养 2 1d ,CD34+ 持续下降。总细胞数在第一周即扩增 35 .32倍 ,10～ 14d总细胞数扩增 331.7倍 ,2 1d总细胞数扩增 4 2 2 .2倍 ,SCF +IL 3+IL 6 +TPO +FL细胞因子组合对总细胞扩增最多 ,SCF +IL 3+IL 6 +GM CSF +G CSF对总细胞扩增略少 ,其次是SCF +TPO +FL细胞因子组合 ,最少为SCF +IL 3+IL 6 +GM CSF细胞因子组合 ,细胞涂片染色观察 ,体外培养 14d ,细胞胞体小 ,胞浆量少 ,胞核体积大 ,规则 ,为早期造血干细胞。结论 :体外HSC培养 ,细胞因子对细胞的增殖有明显的作用 。 展开更多

关键词 脐血 分离扩增 细胞培养 CD34+细胞 细胞因子 流式细胞术

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脐血造血干细胞分离方法的实验研究 被引量：1

10

作者 刘献志 刘紫辉 杨波 《医药论坛杂志》 2007年第5期52-54,共3页

目的优化脐血造血干细胞/祖细胞的分离方法。方法脐血按体积比1∶5与含有树脂海绵筛(筛孔直径约12μm)的6%羟乙基淀粉混合,静置60min,提取界面有核细胞。倒置显微镜下计数有核细胞数,集落培养记数CFU-GM数,流式细胞仪检测CD34+细胞数,... 目的优化脐血造血干细胞/祖细胞的分离方法。方法脐血按体积比1∶5与含有树脂海绵筛(筛孔直径约12μm)的6%羟乙基淀粉混合,静置60min,提取界面有核细胞。倒置显微镜下计数有核细胞数,集落培养记数CFU-GM数,流式细胞仪检测CD34+细胞数,并与按照标准的羟乙基淀粉沉淀法和淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离的脐血相对照。结果采用本实验方法分离脐血获得的有核细胞数、CFU-GM数和CD34+细胞数分别为(96.82±25.78)×105/ml,(66.70±12.47)×105,(1.33±0.57)×105/ml,明显高于由羟乙基淀粉沉淀法(70.72±20.93)×105/ml,(28.79±10.25)×105,(1.01±0.36)×105/ml和淋巴细胞分离液密度梯度离心法(25.33±7.27)×105/ml,(20.13±7.55)×105,(0.34±0.01)×105/ml分离的脐血(P<0.05)。结论本实验方法可由脐血中分离出大量的造血干/祖细胞,是一种分离脐血造血干/祖细胞的理想方法。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 细胞分离

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脐血造血干细胞分离方法的比较 被引量：2

11

作者 鲍建芳 林敏 +3 位作者 杨仁儿 夏大静 沈建根 邵传森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第3期114-116,共3页

目的：探讨分离脐血造血干细胞的最佳方法。方法：采用Ｆｉｃｏｌ分层法、３％明胶自然沉降法及６％羟乙基淀粉自然沉降法。结果：３％明胶自然沉降法所获有核细胞（ＮＣ）密度高达９４．６０（±２３．８０）×１０５／ｍｌ，... 目的：探讨分离脐血造血干细胞的最佳方法。方法：采用Ｆｉｃｏｌ分层法、３％明胶自然沉降法及６％羟乙基淀粉自然沉降法。结果：３％明胶自然沉降法所获有核细胞（ＮＣ）密度高达９４．６０（±２３．８０）×１０５／ｍｌ，ＣＦＵＧＭ数为６４．３０（±１２．１８）／１０５ＮＣ，ＣＤ３４＋细胞数为１．２１（±０．３７）×１０５／ｍｌ，均较其它两种方法为高（Ｐ＜０．０５）。结论：３％明胶自然沉降法是一种较理想的分离脐血造血干细胞的方法。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 细胞分离 CD34 肝素

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脐血干细胞的分离方法比较 被引量：1

12

作者 黄韬 李波 林浩铭 《华西医学》 CAS 2007年第2期345-347,共3页

目的为合理选择脐血干细胞的分离方法提供参考。方法采用改良HES(羟乙基淀粉)沉降分离法和Ficoll分离法分离脐血干细胞,比较两种方法分离前后的有核细胞数、分离后的CD34+细胞数、分离后的有核细胞回收率及台盼蓝拒染率。结果改良HES沉... 目的为合理选择脐血干细胞的分离方法提供参考。方法采用改良HES(羟乙基淀粉)沉降分离法和Ficoll分离法分离脐血干细胞,比较两种方法分离前后的有核细胞数、分离后的CD34+细胞数、分离后的有核细胞回收率及台盼蓝拒染率。结果改良HES沉降分离法和Ficoll分离法分离前的脐血量、有核细胞浓度和细胞数差异无统计学意义(P>0.05);分离后改良HES法有核细胞数、CD34+细胞数、有核细胞回收率高于Ficoll分离法(P<0.05),而显示有核细胞活力的台盼蓝拒染率两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良HES分离法的有核细胞回收率高,分离速度快、污染机会小、终体积小,是脐血干细胞分离较好的方法。 展开更多

关键词 脐血 有核细胞 干细胞 分离

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脐血干/祖细胞分离、冷冻和复苏技术

13

作者 陈俊达 蔡海波 +1 位作者 谭文松 俞俊棠 《安徽机电学院学报》 1999年第2期12-15,共4页

胎儿脐血作为富含ＣＤ３４＋细胞等造血干／祖细胞一个新来源，具有细胞增殖速度快，来源充足，收集安全等特点；脐血移植同样具有安全性好，效率高，费用低等优点。随着脐血干细胞移植临床应用的成功，欧美许多发达国家已经着手建立大... 胎儿脐血作为富含ＣＤ３４＋细胞等造血干／祖细胞一个新来源，具有细胞增殖速度快，来源充足，收集安全等特点；脐血移植同样具有安全性好，效率高，费用低等优点。随着脐血干细胞移植临床应用的成功，欧美许多发达国家已经着手建立大规模脐血库以满足临床需求。建立脐血库技术上要求改善细胞冷冻保护剂组成，控制降温速率和细胞复苏方法，以获得理想的脐血干／祖细胞收率。同时由于脐血库液氮保存设备费用昂贵，需要预先分离脐血单个核细胞以减少样本冻存体积，以满足建库实际需求。 展开更多

关键词 脐血 造血干细胞 分离 冷冻 脐血库

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脐血采分过程中微生物污染的调查

14

作者 胡燕芬 饶美琼 +2 位作者 邹翠贤 朱美玲 欧阳玲 《陕西医学检验》 2002年第1期16-17,共2页

目的　探讨不同脐血采分过程中微生物污染率。方法　脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP) ;6 6份脐血同时按密闭式和开放式两种操作方式进行脐血造血细胞分离处理 ;采用全新型BACTEC90 5 0细菌培养系统对分离前、后脐血进行细菌和真... 目的　探讨不同脐血采分过程中微生物污染率。方法　脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP) ;6 6份脐血同时按密闭式和开放式两种操作方式进行脐血造血细胞分离处理 ;采用全新型BACTEC90 5 0细菌培养系统对分离前、后脐血进行细菌和真菌培养。结果　脐血采集后细菌和真菌污染率分别为 3 .0 %、1 .5 % ;密闭式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到 6 .0 %、3 .0 % ;开放式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到 7.5 %和 3 .0 %。结论　脐血采分过程是导致脐血细胞微生物污染的重要原因 ,操作过程中必须严格执行消毒、隔离、灭菌技术和操作员管理制度以尽量降低污染率。 展开更多

关键词 脐血采集 微生物污染 分离 细菌 真菌 血库

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脐血中造血细胞的分离与祖细胞培养

15

作者 黄子洲 沈晓慧 +2 位作者 叶德富 吴维珍 邓炜 《福建医科大学学报》 1997年第4期368-371,共4页

目的通过脐血粒单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）培养，探讨其临床应用前景与价值。方法琼脂半固体培养法，比较脐血、骨髓、外周血ＣＦＵ－ＧＭ，比较脐血４℃保存２，４，６天后，ＣＦＵ－ＧＭ回收率。结果脐血ＣＦＵ－ＧＭ的平均产率... 目的通过脐血粒单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）培养，探讨其临床应用前景与价值。方法琼脂半固体培养法，比较脐血、骨髓、外周血ＣＦＵ－ＧＭ，比较脐血４℃保存２，４，６天后，ＣＦＵ－ＧＭ回收率。结果脐血ＣＦＵ－ＧＭ的平均产率接近骨髓，明显高于成人外周血。脐血４℃保存，ＣＦＵ－ＧＭ回收率２天为８５．５％，４天为３５．１％，６天为１０．１％。结论脐血中富含造血干／祖细胞，为造血细胞移植提供新的来源。脐血输注应尽量采用新鲜脐血，采血后２４ｈ内输注，也可７２ｈ内输注。 展开更多

关键词 脐血 造血细胞 分离 祖细胞 培养

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密度梯度离心法分离脐血干细胞:分离介质的筛选 被引量：7

16

作者 郭继强 刘爱兵 +1 位作者 王东平 王黎明 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第23期4189-4195,共7页

背景:应用脐血分离干细胞的目的是获得以干细胞为主要群体的单个核细胞群,密度梯度离心法是最简单有效的方法之一。密度梯度离心法使用的分离介质以聚蔗糖泛影葡胺最为常用,但哪种浓度获得干细胞最多,目前尚未深入研究。目的:探讨密度... 背景:应用脐血分离干细胞的目的是获得以干细胞为主要群体的单个核细胞群,密度梯度离心法是最简单有效的方法之一。密度梯度离心法使用的分离介质以聚蔗糖泛影葡胺最为常用,但哪种浓度获得干细胞最多,目前尚未深入研究。目的:探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的最佳浓度,建立临床级干细胞分离应用方案。方法:采用两步法分离脐血流程,先用羟乙基淀粉沉淀脐血红细胞,再使用质量浓度分别为(1.0730±0.0001),(1.0750±0.0001),(1.0770±0.0001)g/mL的分离液,分离沉淀脐血红细胞后的上清液,得到单个核细胞,分别计数细胞获得率及细胞存活率。采用流式细胞仪测定单个核细胞表面标志物,将各亚组分绘制成直方图或散点图,分析所得脐血单个核细胞中所含单个核细胞亚组分的比例和绝对数量。结果与结论:应用质量浓度(1.0730±0.0001)g/mL的分离液可得到最大比例间充质干细胞群,是分离间充质干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度(1.0750±0.0001)g/mL的分离液可得到较高比例的造血干细胞群,是分离造血干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度(1.0770±0.0001)g/mL的分离液得到细胞总数最高,但获得的间充质干细胞、造血干细胞比例最低。采用两步法分离干细胞流程,建立严格的实验室条件和标准,可获得密度梯度离心法分离人脐血干细胞的最佳分离方案。 展开更多

关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 人脐血 密度梯度 离心法 单个核细胞 间充质干细胞 造血干细胞 分 离液 密度 流式细胞术 操作流程

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改良脐带血分离方法的质控样管复苏回顾研究

17

作者 吴春燕 陈阳 +3 位作者 李星洁 王自波 陈强 赖真阳 《临床输血与检验》 CAS 2023年第2期239-242,共4页

目的对比改良脐带血分离方法(改良方法)与传统富浆法(传统方法)对于脐带血造血干细胞质量的影响。方法根据不同体积段改良传统脐带血分离方法,对近年来复苏的脐带血质控样管进行回顾研究,对比方法改良前后一年,两种制备方法获得产品的... 目的对比改良脐带血分离方法(改良方法)与传统富浆法(传统方法)对于脐带血造血干细胞质量的影响。方法根据不同体积段改良传统脐带血分离方法,对近年来复苏的脐带血质控样管进行回顾研究,对比方法改良前后一年,两种制备方法获得产品的各项质量参数。结果使用改良方法后,分离后体积由传统方法的(25.68±2.03)mL下降至(22.53±4.24)mL(P<0.05)。红细胞(RBC)去除率由(75.87±11.84)%上升至(82.94±8.68)%(P<0.001)。复苏的质控样管在总有核细胞(TNC)回收、CD34^(+)细胞回收、CD34^(+)细胞活率等方面两组间无统计学差异。集落形成能力检测中,改良方法组的粒单核细胞系集落形成单位(CFU-GM)回收率为(60.00±32.52)%,较传统方法组的(46.97±28.12)%有提高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论改良脐带血分离方法提高了RBC去除率,减小了冻存体积,复苏脐带血干细胞具有更好的CFU-GM形成能力。 展开更多

关键词 脐带血 改良脐带血分离法 质控样管复苏

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释放胎盘中脐带血对缩短第三产程的临床观察 被引量：5

18

作者 缑玉洁 王长菊 +1 位作者 刘艳玲 朱俊玲 《护士进修杂志》 北大核心 2011年第23期2206-2207,共2页

产后出血是分娩期严重并发症，其发病率占分娩总数的2％～3％，由于分娩时出血量的收集和测量存在一定的困难，估计的出血量偏少，实际产后出血发病率更高。产后出血主要原因是子宫收缩乏力，子宫胎盘附着处血窦不能迅速闭合而导致。

关键词 产后出血 第三产程 脐带血 胎盘剥离

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脐带血采集中微生物污染原因分析 被引量：5

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作者 李金全 韩峻领 李新 《口岸卫生控制》 2009年第1期21-22,共2页

目的探讨脐带血污染的检测周期并分析采分过程中脐带血微生物污染的影响因素。方法采用3D240全自动细菌培养系统对1000份脐带血进行采集后和分离后28d的培养并对阳性瓶镜检。结果1000份脐带血中,31份培养阳性全部在10d内报警,阳性率为3.... 目的探讨脐带血污染的检测周期并分析采分过程中脐带血微生物污染的影响因素。方法采用3D240全自动细菌培养系统对1000份脐带血进行采集后和分离后28d的培养并对阳性瓶镜检。结果1000份脐带血中,31份培养阳性全部在10d内报警,阳性率为3.1%,其中30份采集污染,1份分离污染;自然分娩和脐血量50g以下阳性率明显高于总体阳性率。结论培养周期不应小于10d,采集过程是导致污染的重要原因,污染率与生产方式、采集量等相关。 展开更多

关键词 脐带血 污染率 采集 分离 自然分娩 剖宫产 第三产程

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人脐血源基质细胞分离培养条件的优化 被引量：2

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作者 张诚 陈幸华 +4 位作者 高蕾 张曦 孔佩艳 彭贤贵 王庆余 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期243-245,252,共4页

目的探索人脐血源基质细胞（hUCBOSCs）的分离扩增条件,并观察其生物学特性。方法取产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况,瑞氏染色观察细胞... 目的探索人脐血源基质细胞（hUCBOSCs）的分离扩增条件,并观察其生物学特性。方法取产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况,瑞氏染色观察细胞形态特征,并采用细胞化学和免疫细胞化学方法对获得的细胞进行鉴定。结果明胶沉淀法优于其他分离方法,首次换液时间为第4天、改良Dexter培养体系培养效果最好。原代培养9-14d（平均12.1d）时贴壁细胞开始形成集落,15-21d（平均19.4d）时集落数量最多,培养28d贴壁细胞铺满培养皿底,细胞类型以“成纤维样”细胞、“巨噬样”细胞、“小圆”类细胞为主。细胞化学染色显示非特异性酯酶（NSE）染色阳性率100%,糖原染色（PAS）阳性率为100%,碱性磷酸酶（ALP）染色阳性率26%,过氧化物酶（POX）染色阴性;免疫细胞化学染色显示CD31阳性率96%,CD68阳性率95%,Fn阳性率94%,CD45阴性。结论在体外可以成功培养人脐血源基质细胞,为进一步的基础及临床研究提供了基础。 展开更多

关键词 胎血 人脐血源基质细胞 细胞分离 细胞培养

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