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响应面法优化海洋枯草芽孢杆菌HS-A38增殖发酵培养基 被引量:10
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作者 张欢 丛丽娜 +2 位作者 侯英敏 王丹 谢三群 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2012年第1期19-23,共5页
在摇瓶培养条件下,优化提高海洋枯草芽孢杆菌菌体浓度的发酵培养基组分。采用Plackett-Burman法确定了影响菌体浓度的显著性因子,即葡萄糖和ZnSO4;通过最陡爬坡实验逼近这两个重要因子的最大响应稳定区域,采用中心组合实验确定显著性因... 在摇瓶培养条件下,优化提高海洋枯草芽孢杆菌菌体浓度的发酵培养基组分。采用Plackett-Burman法确定了影响菌体浓度的显著性因子,即葡萄糖和ZnSO4;通过最陡爬坡实验逼近这两个重要因子的最大响应稳定区域,采用中心组合实验确定显著性因子的最佳水平,并用Design expert 7.13软件进行回归分析。优化后培养基的组成为:葡萄糖8.49g/L,豆粕粉12.0g/L,尿素0.625g/L,酵母膏4.0g/L,K2HPO44.0g/L,ZnSO40.053g/L。优化后的活菌浓度达到1.64×109 cfu/mL,与优化前菌体浓度(7.22×108 cfu/mL)相比,提高了1倍多。通过统计优化培养基组分可有效提高海洋枯草芽孢杆菌HS-A38的发酵液菌体浓度。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 响应面法 活菌数 优化
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Desulfurization of dibenzothiophene(DBT) by a novel strain Lysinibacillus sphaericus DMT-7 isolated from diesel contaminated soil 被引量:8
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作者 Ashutosh Bahuguna Madhuri K.Lily +2 位作者 Ashok Munjal Ravindra N.Singh Koushalya Dangwal 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2011年第6期975-982,共8页
A new bacterial strain DMT-7 capable of selectively desulfurizing dibenzothiophene(DBT) was isolated from diesel contaminated soil.The DMT-7 was characterized and identified as Lysinibacillus sphaericus DMT-7(NCBI ... A new bacterial strain DMT-7 capable of selectively desulfurizing dibenzothiophene(DBT) was isolated from diesel contaminated soil.The DMT-7 was characterized and identified as Lysinibacillus sphaericus DMT-7(NCBI GenBank Accession No.GQ496620) using 16S rDNA gene sequence analysis.The desulfurized product of DBT,2-hydroxybiphenyl(2HBP),was identified and confirmed by high performance liquid chromatography analysis and gas chromatography-mass spectroscopy analysis respectively.The desulfurization kinetics revealed that DMT-7 started desulfurization of DBT into 2HBP after the lag phase of 24 hr,exponentially increasing the accumulation of 2HBP up to 15 days leading to approximately 60% desulfurization of the DBT.However,further growth resulted into DBT degradation.The induced culture of DMT-7 showed shorter lag phase of 6 hr and early onset of stationary phase within 10 days for desulfurization as compared to that of non-induced culture clearly indicating the inducibility of the desulfurization pathway of DMT-7.In addition,Lysinibacillus sphaericus DMT-7 also possess the ability to utilize broad range of substrates as sole source of sulfur such as benzothiophene,3,4-benzo DBT,4,6-dimethyl DBT,and 4,6-dibutyl DBT.Therefore,Lysinibacillus sphaericus DMT-7 could serve as model system for efficient biodesulfurization of diesel and petrol. 展开更多
关键词 BIODESULFURIZATION colony forming units .dibenzothiophene high performance liquid chromatography Lysinibacillus sphaericus DMT-7
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产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及病毒滴度影响因素 被引量:5
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作者 张惠中 范清宇 杨安钢 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第4期313-315,共3页
目的 探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度 (以 cfu表示 )的影响因素 .方法 用逆转录病毒载体 p SL XCMV,以磷酸钙共沉淀法转染 PA317包装细胞 ,挑选抗性集落 (PA317/ p SL XCMV)扩大培养后 ,进行 PA317/p SL XCMV细胞... 目的 探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度 (以 cfu表示 )的影响因素 .方法 用逆转录病毒载体 p SL XCMV,以磷酸钙共沉淀法转染 PA317包装细胞 ,挑选抗性集落 (PA317/ p SL XCMV)扩大培养后 ,进行 PA317/p SL XCMV细胞接种密度、培养温度 (37℃ ,32℃ )、纯化方法等对其培养上清中重组病毒 cfu影响的比较性研究 .结果 包装细胞的密度是影响 cfu滴度的关键因素 ;降低培养温度需延长培养时间方可提高 cfu滴度 ;对比离心纯化与过滤纯化 ,并未发现两者之间的差异 .结论 该实验结果为应用逆转录病毒载体进行的 ex 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 包装细胞 集落形成单位 病毒滴度 基因治疗
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4种抗原定量方法观察牛支原体培养特征 被引量:8
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作者 王展慧 赵萍 +5 位作者 陈胜利 郝华芳 秦明明 王绍伟 刘永生 储岳峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2634-2639,共6页
为探索在疫苗研制过程中牛支原体抗原收获时间及抗原定量替代方法,将牛支原体08M株接种于含10%马血清的Thiaucourt’s培养基,在110h内同时监测其颜色变化单位(color change units,CCU)、菌落形成单位(colony forming units,CFU)、... 为探索在疫苗研制过程中牛支原体抗原收获时间及抗原定量替代方法,将牛支原体08M株接种于含10%马血清的Thiaucourt’s培养基,在110h内同时监测其颜色变化单位(color change units,CCU)、菌落形成单位(colony forming units,CFU)、菌体蛋白浓度和核酸含量的变化,绘制相应曲线。活菌计数结果(CCU和CFU)显示,牛支原体生长可分为明显的4期,10h进入对数期,30h进入稳定期,活菌数最高可达1.0×108 CCU/mL和7.7×107 CFU/mL,75h进入衰亡期;蛋白浓度从15h开始迅速增长,至35h蛋白浓度最高,为72.06μg/mL,此后维持在58.38~70.65μg/mL;核酸含量从15h开始增长,至25h后Ct值维持在15.32~17.84。结果表明,牛支原体蛋白含量在稳定期初期与活菌数具有良好的相关性。因此,在牛支原体灭活疫苗生产中,稳定期初期是最佳抗原收获时间,可用蛋白浓度法代替活菌计数法进行抗原定量。 展开更多
关键词 牛支原体 抗原定量 颜色变化单位 菌落形成单位 蛋白浓度 核酸含量
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基于浊度、菌落总数和余氯的管网水质评价模型 被引量:2
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作者 张静 游晓旭 +4 位作者 陆瑞 张晓岚 柴文 顾军农 李玉仙 《中国给水排水》 CSCD 北大核心 2024年第1期51-55,共5页
管网对水厂出厂水细微的水质变化具有较高的敏感度,因此以管网水质作为水厂处理工艺或参数调整的重要参考指标,有利于实现水厂工艺精细化管理,也有利于提高龙头水水质安全性。在38808个管网水质数据的基础上,建立了3个基于浊度-菌落总数... 管网对水厂出厂水细微的水质变化具有较高的敏感度,因此以管网水质作为水厂处理工艺或参数调整的重要参考指标,有利于实现水厂工艺精细化管理,也有利于提高龙头水水质安全性。在38808个管网水质数据的基础上,建立了3个基于浊度-菌落总数-余氯消耗量的管网水质评价模型,可分别应用于3种场景。在实例分析中,对比了2019年7月—9月和10月—12月的管网水质变化,二者的score分别为1546和1501,说明10月—12月的水质轻微变差,但变化不显著。模型3通过对浊度进行修正,消除了浊度季节性变化对管网水质评价的影响,使评价周期选取更为灵活;同时也建立起了管网水质和水厂工艺及参数调整的联系,有利于推动厂网联动。 展开更多
关键词 供水管网 水质评价 浊度 菌落总数 余氯 厂网联动
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人纤维母细胞条件培养液对CFU-GM生长的影响 被引量:7
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作者 王承龙 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 1995年第5期409-411,共3页
采用单个集落、亚融合和全融合的人类纤维母细胞条件培养液(HF-CM)对人骨髓细胞CFU-GM生长的影响进行了研究。结果表明,加入同样浓度的HF-CM时,亚融合纤维母细胞条件培养液所刺激的CFU-GM产率明显高于全融合... 采用单个集落、亚融合和全融合的人类纤维母细胞条件培养液(HF-CM)对人骨髓细胞CFU-GM生长的影响进行了研究。结果表明,加入同样浓度的HF-CM时,亚融合纤维母细胞条件培养液所刺激的CFU-GM产率明显高于全融合及单个集落HF-CM所刺激的CFU-GM产率(P<0.05);在加入不同浓度的亚融合HF-CM时,以10%亚融合HF-CM对CFU-GM产率表现出最大的刺激活性。 展开更多
关键词 骨髓 纤维母细胞 集落刺激因子
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AMD3100对apoE^-/-小鼠骨髓源性内皮祖细胞增殖、迁移和黏附的影响 被引量:3
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作者 王佐 周晓峰 +3 位作者 王仁 童中艺 姜志胜 王贵学 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期807-813,共7页
探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小... 探讨AMD3100对apoE-/-小鼠骨髓内皮祖细胞的动员作用及其增殖、迁移和黏附的影响.12只8周龄雄性apoE-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/(kg·2d))和对照组(PBS0.1ml/2d),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,差速贴壁法结合微孔法分离培养小鼠骨髓细胞,免疫荧光鉴定CD133/VEGFR-2双阳性细胞为内皮祖细胞;MTT比色法、Transwell、黏附试验分别检测细胞的增殖、迁移和黏附能力;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位,观察次级集落单位的大小及细胞密度,检测各组内皮祖细胞的克隆形成能力;RT-PCR和Westernblot检测内皮祖细胞上CXCR4mRNA和蛋白质表达水平.与对照组比较,AMD3100组骨髓源性内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力均显著低于对照组,其CXCR4mRNA和蛋白质表达均显著低于对照组.结果表明:持续注射AMD3100可抑制骨髓源内皮祖细胞的增殖、迁移、黏附和克隆形成能力,并下调CXCR4的表达. 展开更多
关键词 AMD3100 内皮祖细胞 微孔法 克隆形成单位 增殖 迁移 黏附
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响应面法优化胶质芽孢杆菌GM1增殖发酵培养基 被引量:5
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作者 李东华 杨博 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期206-209,共4页
在摇瓶培养条件下,优化提高胶质芽孢杆菌GM1菌体浓度的发酵培养基组分。在单因素的基础上选择糖蜜、复合氮源(硫酸氨与豆粕)以及初始pH为自变量,芽孢杆菌数为响应值,根据Box-Behnken实验设计原理以及Design Expert 8.0软件进行回归分析... 在摇瓶培养条件下,优化提高胶质芽孢杆菌GM1菌体浓度的发酵培养基组分。在单因素的基础上选择糖蜜、复合氮源(硫酸氨与豆粕)以及初始pH为自变量,芽孢杆菌数为响应值,根据Box-Behnken实验设计原理以及Design Expert 8.0软件进行回归分析,确定了胶质芽孢杆菌GM1发酵培养基的最佳组成为:糖蜜3.2%、复合氮源0.4%,pH为8.0,在此条件下最大理论数值为3.03×108CFU.mL-1。经过3次平行实验验证,实际活菌体数为3.09×108CFU.mL-1,该实验值与预测值拟合较好。优化后的活菌浓度与优化前菌体浓度相比提高了40%,由此可知,响应面分析法优化微生物发酵条件是一种十分有效的方法。 展开更多
关键词 胶质芽孢杆菌 响应面法 菌体密度 优化
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短波紫外线处理对葡萄干表面微生物的影响 被引量:4
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作者 陈存坤 董成虎 +3 位作者 纪海鹏 李春媛 于晋泽 王文生 《农产品加工(下)》 2015年第9期9-11,14,共4页
主要用4个不同强度(170,375,550,610μW/cm2)的短波紫外线对4种葡萄干(黑加仑、无核白、红提干和黄提干)进行照射处理,时间10 min。分别在细菌、霉菌培养基上培养48 h后,观察菌落数。结果表明,除了T1处理过黑加仑霉菌数相对CK减少不明显... 主要用4个不同强度(170,375,550,610μW/cm2)的短波紫外线对4种葡萄干(黑加仑、无核白、红提干和黄提干)进行照射处理,时间10 min。分别在细菌、霉菌培养基上培养48 h后,观察菌落数。结果表明,除了T1处理过黑加仑霉菌数相对CK减少不明显(p>0.05)外,所有处理过的4种葡萄干中霉菌、细菌数相对CK都有显著性(p<0.01)的降低。紫外线处理效果较好,可应用于葡萄干的保鲜。 展开更多
关键词 紫外线 葡萄干 菌落数
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手术室层流通风系统与感染率关联性问题的研究进展 被引量:4
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作者 刘建新 苏磊 +2 位作者 韩伟 邢家伟 王博 《中国医疗设备》 2016年第12期80-81,103,共3页
本文对手术层流通风系统与感染率之间的相关性进行综述。自20世纪80年代开始,层流通风系统被广泛应用于手术室,研究者普遍认为,采用层流通风系统可减少空气中传染性微生物的数量,大大降低了术后伤口感染率。但也有研究表明,层流通风系... 本文对手术层流通风系统与感染率之间的相关性进行综述。自20世纪80年代开始,层流通风系统被广泛应用于手术室,研究者普遍认为,采用层流通风系统可减少空气中传染性微生物的数量,大大降低了术后伤口感染率。但也有研究表明,层流通风系统并非降低手术感染率的绝对因素。本文对相关研究进行总结,认为手术室在降低手术室颗粒物等方面具有显著作用,但空气洁净程度与感染率之间的关联性仍需进一步研究。 展开更多
关键词 层流通风系统 感染率 抗生素 菌落形成单位 腹部切口
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慢性肾炎患者T淋巴细胞集落形成的变化 被引量:3
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作者 吴轰 卿之驹 +4 位作者 王慧 刘瑞洪 刘伏友 罗琼 蒋云生 《湖南医科大学学报》 CSCD 1989年第4期389-391,共3页
测得正常人外周血T淋巴细胞集落形成数(TL—CFU) 通常为2414±199/5×10~5个细胞,而慢性肾炎重度肾功能不全者为860±165、中度为989±361、轻度为1086±212,无肾功能损害者为1693±516。TL—CFU值与肾功能损... 测得正常人外周血T淋巴细胞集落形成数(TL—CFU) 通常为2414±199/5×10~5个细胞,而慢性肾炎重度肾功能不全者为860±165、中度为989±361、轻度为1086±212,无肾功能损害者为1693±516。TL—CFU值与肾功能损害程度呈正相关(r=0.74)。其原因可能为肾功能不全时体内的内源性白细胞介素Ⅱ及T淋巴细胞集落提高因子(TLCEF) 产生减少,而使TL—CFU形成受损。 展开更多
关键词 肾炎 T细胞 集落形成
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胚胎干细胞微环境增强人角膜缘干细胞的干性和抑制凋亡的机制 被引量:3
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作者 刘志平 沙翔垠 +3 位作者 王智崇 李朝阳 刘颖 周瑾 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期389-399,共11页
背景 成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞(ESCs)微环境能增强人角膜缘干细胞(LSCs)的干性,其作用机制是研究热点. 目的 探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细... 背景 成体干细胞的命运与其生存的微环境密切相关.研究表明,胚胎干细胞(ESCs)微环境能增强人角膜缘干细胞(LSCs)的干性,其作用机制是研究热点. 目的 探讨干细胞微环境增强LSCs的干性及其抑制细胞凋亡的分子机制.方法将129小鼠ES细胞株(E14细胞)分别用CnT-20培养液和CnT-20+体积分数20% ES(ESC-CM)培养液进行培养和传代.采用新鲜供体人角膜缘组织块培养法,分别用CnT-20培养液和ESC-CM培养液培养和传代LSCs,细胞经固定后于光学显微镜下观察细胞克隆形态并计算克隆形成率(CFE).ESC-CM培养组细胞分别转染端粒酶逆转录酶(TERT) siRNA(19-25nt siRNA)或siRNA(sc37007),流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡、线粒体膜电位的改变;采用免疫荧光技术和流式细胞技术检测siRNA转染前后细胞中端粒酶的表达和活性氧簇(ROS)的产生情况;采用RT-PCR、免疫荧光技术和Western blot法检测细胞中干细胞标志物p63、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、整合素β1(integrin β1)和细胞分化标志物细胞角蛋白3(CK3) mRNA及其蛋白的表达;采用Western blot法检测细胞中黏着斑激酶(FAK)、Akt和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)及其磷酸化蛋白以及p21蛋白的改变. 结果 ESC-CM培养组LSCs可传至第8代,CFE为(7.6±0.6)%,CnT-20培养组传至第6代,CFE为(5.6±0.6)%,差异有统计学意义(t=4.454,P=0.011);ESC-CM培养组第2、3、4、5、6代LSCs的凋亡百分比均明显低于CnT-20培养组,差异均有统计学意义(均P<0.05);siRNA-F转染细胞的凋亡率为(7.7±1.3)%,明显低于siRNA-TERT转染细胞的(32.3±3.1)%,差异有统计学意义(t=-12.588,P=0.000).ESC-CM培养组与CnT-20培养组的原代LSCs 中干细胞标志物mRNA及其蛋白、TERT蛋白的相对表达量差异均无统计学意义(均P>0.05),但ESC-CM培养组CK3 mRNA及其蛋白的相对表达量� 展开更多
关键词 胚胎干细胞 微环境 端粒酶 角膜缘干细胞 信号通路 凋亡 克隆形成单位
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球孢白僵菌分离培养基的筛选及应用 被引量:3
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作者 王韬远 徐文静 +4 位作者 张正坤 王义生 赵宇 王金刚 李启云 《中国农学通报》 CSCD 2013年第9期134-138,共5页
为获得理想的白僵菌分离培养基,以PPDA培养基作为基础培养基,通过观察白僵菌和杂菌在不同抑菌剂和不同抑菌剂浓度的菌落数,筛选出白僵菌生长良好,杂菌被尽可能抑制的培养基配比。结果表明,在PPDA培养基中添加70mg/L的多果定,125mg/L头... 为获得理想的白僵菌分离培养基,以PPDA培养基作为基础培养基,通过观察白僵菌和杂菌在不同抑菌剂和不同抑菌剂浓度的菌落数,筛选出白僵菌生长良好,杂菌被尽可能抑制的培养基配比。结果表明,在PPDA培养基中添加70mg/L的多果定,125mg/L头孢霉素和138mg/L硫酸卡那霉素为最适筛选培养基。用筛选出的培养基检测白僵菌悬乳剂和颗粒剂在田间施药后30天内的含菌量变化,发现在空气中孢子含量,白僵菌悬乳剂比颗粒剂含量更持久,证明本研究获得的筛选培养基具有实际的应用价值。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 选择分离筛选培养基 菌落数
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IFN-γ和IL-10作为药物抗结核活性评价指标的可行性考察 被引量:3
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作者 赵伟杰 郑梅琴 +3 位作者 王彬 付雷 李芃 赵志刚 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期759-763,共5页
目的探讨细胞因子是否可以作为一项指标评价药物对小鼠结核模型的疗效。方法 75只BALB/c小鼠雾化感染建立小鼠结核模型,分为13组,药物治疗2月以后,取血并做全肺活菌(CFU)计数;ELISA法检测血清中的γ-干扰素(IFN-γ)和白介素10(IL-10)的... 目的探讨细胞因子是否可以作为一项指标评价药物对小鼠结核模型的疗效。方法 75只BALB/c小鼠雾化感染建立小鼠结核模型,分为13组,药物治疗2月以后,取血并做全肺活菌(CFU)计数;ELISA法检测血清中的γ-干扰素(IFN-γ)和白介素10(IL-10)的浓度;以全肺活菌计数作为药物对小鼠结核活性的标准,检验血中的γ-干扰素和白介素10的含量及二者的比值与小鼠肺中全肺活菌的相关性并进行线性回归。结果①全肺活菌计数:除左氧氟沙星(Lfx)和对氨基水杨酸(PAS)组以外,其余各治疗组与空白对照组相比均有统计学差异;各治疗组与阳性对照组(利福平+异烟肼+吡嗪酰胺,RHZ)相比均有统计学差异。②γ-干扰素:除左氧氟沙星、对氨基水杨酸组以外的各治疗组与空白对照组均有统计学差异;各治疗组与阳性对照组相比没有统计学差异。③白介素10:各治疗组与空白对照组、各治疗组之间均没有统计学差异。④γ-干扰素/白介素10:氯法齐明、利奈唑胺+丙硫异烟胺、利奈唑胺+氯法齐明、利奈唑胺+阿米卡星、利福平+异烟肼+吡嗪酰胺组与空白对照组相比有统计学差异,各治疗组之间均没有统计学差异。⑤γ-干扰素、白介素10、γ-干扰素/白介素10与全肺活菌呈正相关,确定因子r2分别为0.688、0.237、0.582。结论外周血中γ-干扰素的含量可以用来判断治疗方案是否有效,但不适宜作为生物标记物来预测体内结核菌的数量。 展开更多
关键词 结核 活菌计数 Γ-干扰素 白介素-10
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比较称重法和比浊法对分枝杆菌活菌计数和药敏的差异 被引量:2
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作者 黎友伦 陈保文 +2 位作者 沈小兵 彭丽 王国治 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期88-90,131,共4页
目的:比较用称重法和比浊法对分枝杆菌活菌计数、对结核分枝杆菌(M TB)绝对浓度法和比例法药物敏感性(药敏)结果的差异。方法:用称重法和比浊法制作非结核分枝杆菌(NTM)28株、M TB42株菌悬液,10倍梯度稀释,10-4m g/m l、10-5/m g/m l、1... 目的:比较用称重法和比浊法对分枝杆菌活菌计数、对结核分枝杆菌(M TB)绝对浓度法和比例法药物敏感性(药敏)结果的差异。方法:用称重法和比浊法制作非结核分枝杆菌(NTM)28株、M TB42株菌悬液,10倍梯度稀释,10-4m g/m l、10-5/m g/m l、10-6m g/m l菌悬液0.1m l接种于改良L-J培养基上作活菌计数,10-2m g/m l菌悬液0.1m l接种于含药改良L-J培养基上作绝对浓度法药敏,10-3m g/m l、10-5m g/m l菌悬液0.1m l接种于含药改良L-J培养基上作比例法药敏。结果:两种方法NTM活菌计数比较有显著性差异(P<0.05),活菌计数值在2×107~8×108CFU/m l;两种方法M TB活菌计数值比较无显著性差异(P>0.05),在5×106~5×107CFU/m l。M TB称重法和比浊法菌悬液绝对浓度法药敏一致率异烟肼、利福平分别达95.2%、97.6%,与比例法比较符合率异烟肼、利福平分别达95.2%、92.8%。结论:分枝杆菌不同菌株两种方法活菌计数值有较大差异,药敏结果一致性好。 展开更多
关键词 分枝杆菌 活菌计数 药敏试验
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人正常骨髓CD34^+造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力 被引量:2
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作者 奚永志 孔繁华 +4 位作者 张双喜 金荔 陈兴国 唐佩弦 魏文 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期253-255,共3页
根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进... 根据阳性选择策略,采用CIMS-100免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓CD34+造血细胞,然后将其在含Epo+GM-CSF+IL-3+IL-6+SCF(简EGIS)组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增4周,定期进行单个核细胞计数、BFU-E及CFU-Mix的培养。经FACS鉴定所富集的CD34+造血细胞纯度平均>90%。人正常骨髓CD34+造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞,最高可扩增1770倍。与HPP-CFC和CFU-GM相反,BFU-E和CFU-Mix扩增量较低,最高仅为2.36和2.4倍,且仅在第1周出现,随后迅速减少至停止。 展开更多
关键词 CD34 造血细胞 体外扩增 造血祖细胞
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母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血的影响 被引量:2
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作者 吴韶清 谢闺娥 +5 位作者 吴洁莹 陈劲松 陆琰 李焱 汤雪薇 廖灿 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第30期5901-5906,5913,共7页
目的:探讨母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血(high-quality cord blood units,HQCBUs)的影响。方法:用logistical回归模型回顾性分析广州脐血库(Guangzhou Cord Blood Bank,GZCBB)库存的4613例脐血的母亲、新生儿和收集相关因素,... 目的:探讨母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血(high-quality cord blood units,HQCBUs)的影响。方法:用logistical回归模型回顾性分析广州脐血库(Guangzhou Cord Blood Bank,GZCBB)库存的4613例脐血的母亲、新生儿和收集相关因素,所有脐血均严格按照操作规程进行供者选择、采集、运送、处理、检测和冻存。结果:影响HQCBUs的因素包括分娩时顺产、孕周大于37周、新生儿为女性、较重的体重(>3500 g)、脐血体积大(>80 m L)、运送耗时短(<12 hr)。α-地贫携带者对处理后细胞数(postprocessing total nucleated cell count,p-TNCC)>1.25×109和CD34+细胞数>6.01×106有影响,而羊水粪染和母亲分娩年龄小于25岁分别对p-TNCC>1.25×109和细胞集落形成单位(colony forming units,CFUs)>23.24×105有影响。结论:我们鉴定出影响HQCBUs的因素,为GZCBB更新脐血采集标准、优化处理程序提供参考依据,有助于提高HQCBUs的数量和比例及有效利用脐血库的资源。 展开更多
关键词 高质量脐血 脐血库 集落形成单位
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Observation on Culture Characteristics of Mycoplasma bovis with Four Different Antigen Quantification Methods
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作者 Wang Zhanhui Zhao Ping +5 位作者 Chen Shengli Hao Huafang Qin Mingming Wang Shaowei Liu Yongsheng Chu Yuefeng 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第4期219-222,共4页
[Objective] The paper was to explore the antigen harvest time of Mycoplasrna bovis and the antigen quantification alternative method. [Method] M. bovis 08M strain was inoculated in the Thiaueourt's medium containing ... [Objective] The paper was to explore the antigen harvest time of Mycoplasrna bovis and the antigen quantification alternative method. [Method] M. bovis 08M strain was inoculated in the Thiaueourt's medium containing 10% horse serum. Four growth curves were plotted by simultaneously measuring color change units (CCU), colony forming units (CFU), protein concentration and nucleic acid levels within 110 h. [ Result] The growth of M. bovis was divided into four phases: the longarithmie phase appeared after being cultured for 10 h; the stationary phase appeared at 30 h with the highest number of viable cells up to 1. 0× 108 CCU/mL and 7.7 × 107 CCU/mL, respectively; and the decline phase started at 75 h. The protein concentration afM. bov/s increased rapidly from 15 to 35 h, reached 72.06 μg/mL at 35 h, then maintained at 53.38 - 70.65 μg/mL. The nucleic acid levels of M. bov/s increased rapidly from 15 h, and the cycle threshold (Ct) values were maintained between 15, 32 and 17.84 after 25 h. [ Conclusion] There was a good correlation between the protein concentration and variable count of M. bov/s at the early stationary phase, which was the best time period to harvest antigen. The protein concentration determination could be an alternative method to quantify antigen content of M. bovis when preparing inactivated M. boviz vaccine. Key words Mycoplasma boyis; Antigen quantification; Color change units; Colony forming units; Protein concentration; Nucleic acid content 展开更多
关键词 Mycoplasma bovis Antigen quantification Color change units colony forming units Protein concentration Nucleic acid content
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AMD3100促进载脂蛋白E^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成 被引量:2
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作者 周晓峰 王佐 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第6期445-448,共4页
目的探讨AMD3100对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响及其可能机制。方法12只8周龄雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/kg,隔天注射)和对照组(PBS 0.1mL,隔天注射),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,获取组织标本... 目的探讨AMD3100对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响及其可能机制。方法12只8周龄雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/kg,隔天注射)和对照组(PBS 0.1mL,隔天注射),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,获取组织标本和骨髓细胞,石蜡切片HE染色检测小鼠主动脉根部动脉粥样硬化病变;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位和观察次级集落单位的大小与细胞密度检测内皮祖细胞的克隆形成能力;逆转录聚合酶链反应和Western blotting检测内皮祖细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达。结果AMD3100组小鼠主动脉窦横切面粥样斑块面积与管腔面积之比与对照组比较增加了38.8%(37.2%±3.6%比26.8%±2.5%,P<0.05);AMD3100组小鼠骨髓源内皮祖细胞的克隆形成能力显著低于对照组(初级内皮祖细胞集落单位个数为9.67±2.16比21.83±2.64,次级内皮祖细胞集落单位个数为1.67±0.31比4.11±0.65,P<0.01);AMD3100组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均显著低于对照组(P<0.01)。结论AMD3100促进载脂蛋白E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成,可能与抑制骨髓源内皮祖细胞的克隆形成并下调CXCR4表达相关。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 AMD3100 动脉粥样硬化 内皮祖细胞 CXCR4 克隆形成单住
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巨细胞病毒感染对淋巴系祖细胞增殖的影响及其干预措施 被引量:1
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作者 李宏颖 刘文君 +2 位作者 郭渠莲 邓正华 林江 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期587-588,614,共3页
目的探讨人类巨细胞病毒(HCMV)对淋巴系祖细胞(CFU-TL)体外增殖的影响、作用机制及其干预措施。方法本实验共分为空白对照组、灭活对照组、HCMV感染组、更昔洛韦(GCV)干预组、黄芪注射液(AMI)干预组5组。采用甲基纤维素半固体培养CFU-T... 目的探讨人类巨细胞病毒(HCMV)对淋巴系祖细胞(CFU-TL)体外增殖的影响、作用机制及其干预措施。方法本实验共分为空白对照组、灭活对照组、HCMV感染组、更昔洛韦(GCV)干预组、黄芪注射液(AMI)干预组5组。采用甲基纤维素半固体培养CFU-TL集落,不同浓度HCMV-AD169 持续攻击CFU-TL,用AMI、GCV粉剂干预,观察CFU-TL集落形成;用四甲基偶氮唑盐法测HCMV对宿主细胞增殖活性的影响;用PCR检测CFU-TL集落细胞内HCMV-AD169DNA。结果 1.与空白对照组及灭活对照组比较,各病毒感染组CFU-TL集落产率明显减少、维持时间明显缩短(P均<0.01),抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;2.HCMV感染48、72、96、120 h对宿主细胞增殖活性的影响与对照组比较均有显著差异(F分别为11.412, 18.058,13.259,56.360 P均<0.01)。3.PCR检测到HCMV感染组CFU-TL集落细胞内HCMV-AD169DNA。4.与HCMV感染组比较,HCMV+AMI组、HCMV+GCV组CFU-TL集落产生率明显增加,集落维持时间均显著延长(P均<0.01)。结论 HCMV在体外能抑制CFU-TL集落的增殖和分化;HCMV感染患儿免疫功能低下可能与HCMV直接抑制CFU-TL有关;GCV、 AMI在体外能有效干预HCMV感染所致的CFU-TL增殖抑制的发生。 展开更多
关键词 人类巨细胞病毒 集落形成单位 淋巴细胞 黄芪 更昔洛韦 巨细胞病毒感染 细胞增殖
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